朱鑫
(遼寧師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,遼寧大連116081)
不同生長激素組合對馬鈴薯芽尖生長的影響
朱鑫
(遼寧師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,遼寧大連116081)
以馬鈴薯芽尖為試驗(yàn)材料,以芽尖長度、6-BA、NAA、GA這4個(gè)因素,開展四因素三水平正交試驗(yàn),分析馬鈴薯苗的高度和生長狀況,提出適合芽尖快速生長發(fā)育的培養(yǎng)基。結(jié)果表明,芽尖長度和6-BA的影響力分別位居第一和第二,是影響植物生長的關(guān)鍵因素,赤霉素的影響效果最小。根據(jù)馬鈴薯植物生長高度,選取最優(yōu)組合即:馬鈴薯苗0.6cm,6-BA含量1mg/L,NAA含量0.3mg/L,GA含量0.1mg/L。
生長激素;馬鈴薯;芽尖
馬鈴薯因營養(yǎng)豐富、美味、價(jià)廉而受到廣泛的關(guān)注,具有巨大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值,但在生產(chǎn)上容易受到病毒侵染而產(chǎn)生種性退化現(xiàn)象[1]。而組織培養(yǎng)技術(shù)在加快馬鈴薯苗的生長、繁殖和脫毒方面具有重要作用[2-4],其使得種苗快速生長,而且節(jié)約時(shí)間,降低成本[5,6]。在組織培養(yǎng)過程中,生長調(diào)節(jié)劑對植物生長有著十分重要的作用。針對此,本文采用正交試驗(yàn),添加不同劑量和種類的生長激素,篩選出適合芽尖快速生長發(fā)育的培養(yǎng)基。
1.1 試驗(yàn)材料
1.1.1 材料與試劑
馬鈴薯、6-BA、NAA、GA、蔗糖、瓊脂、70%酒精、95%酒精、0.1%升汞、磷酸緩沖液、辣椒、洋酸菜和金剛砂。
1.1.2 儀器
電磁爐、超凈工作臺、光照培養(yǎng)箱、研缽以及冰箱等。
1.2 試驗(yàn)方法
1.2.1 馬鈴薯芽尖培養(yǎng)
選取適宜的馬鈴薯,按照正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)的正交表L9(34)(見表1)配置添加不同激素的1/2MS培養(yǎng)基并標(biāo)記,并選取不同長度的馬鈴薯芽尖進(jìn)行消毒接種,培養(yǎng)條件為光照培養(yǎng)箱中25℃培養(yǎng),每天光照16h,每3d進(jìn)行一次觀察,記錄試驗(yàn)現(xiàn)象。
表1 正交實(shí)驗(yàn)因素表頭設(shè)計(jì)
1.2.2 檢測
使用汁液涂抹指示植物鑒定法,將馬鈴薯試管苗幼葉加等量水及0.1mol/L磷酸緩沖液(pH7.0)研磨成勻漿,在指示植物葉片上撒一層金剛砂,將勻漿涂到葉片上,5min后洗去葉片上勻漿和金剛砂,將接種后的指示植物置于溫室內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng),3周后觀察指示植物。
感染率計(jì)算如下:感染率=感染株數(shù)/成苗株數(shù)。
由圖1可知,當(dāng)赤霉素含量相對較少時(shí),即GA濃度0mg/L和0.1mg/L時(shí),該組合的植株比其他組生長高度都低,說明赤霉素能誘導(dǎo)矮化或發(fā)育遲緩的植物伸長生長,并且在馬鈴薯苗生長方面具有很大的影響。
圖1 植株生長高度
圖1和表2試驗(yàn)數(shù)據(jù)比較發(fā)現(xiàn),第7組中,6-BA的濃度是0.5mg/L,NAA的濃度是0.3mg/L,GA濃度是0.1mg/L,其中NAA的濃度是正交試驗(yàn)中含量較高的一組數(shù)據(jù),赤霉素也參與其中。第8組中,6-BA的濃度是1mg/L,NAA的濃度是0.1mg/L,GA的濃度是0.2mg/L。在這組數(shù)據(jù)中,促分化的激素增加,促伸長的生長素雖然含量減少,但相對赤霉素增加了。所以,生長素與赤霉素在一定程度上達(dá)到互補(bǔ)的效果,并且細(xì)胞分裂素的含量不宜過多,不利于植物生長繁殖。
表2 試管苗正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果
根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果及極差分析表明,芽尖長度和6-BA的影響力分別位居第一和第二,是影響植物生長的關(guān)鍵因素,赤霉素的影響效果最小。根據(jù)馬鈴薯植物生長高度,選取最優(yōu)組合,即馬鈴薯芽尖0.6cm,6-BA含量1mg/L,NAA含量0.3mg/L,GA含量0.1mg/L。
此外,采用ELISA法來進(jìn)行病毒檢測,對PVX、PVY和PLRV 3種病毒進(jìn)行比較,得出隨著芽尖長度的不斷加長,脫毒率不斷下降,芽尖長度對植物脫毒率有很大的影響。
目前,在馬鈴薯方面的研究有很多,并且馬鈴薯組織培養(yǎng)技術(shù)得到實(shí)際應(yīng)用。但是,應(yīng)對巨大的市場需求,對馬鈴薯方面的研究還要不斷深化,利用先進(jìn)的生物技術(shù)手段來解決現(xiàn)實(shí)中的難題。
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Effects of Different Growth Hormone Combinations on Shoot Tip Growth of Potato
Zhu Xin
(College of Life Science, Liaoning Normal University, Liaoning Dalian 116081)
Using potato bud tip as experimental materials, four factors and three levels orthogonal experiments were carried out on the basis of the factors of shoot tip length, 6-BA, NAA and GA, and the height and growth of potato seedlings were analyzed. The culture medium suitable for the rapid growth and development of shoot tip was put forward. The experimental results showed that the effect of shoot tip length and 6-BA was the first and second, which were the key factors affecting plant growth, the effect of gibberellin was minimal. According to the height of the potato plants, the best combination was selected: potato seedlings 0.6 cm, 6-BA content of 1 mg/L, NAA content of 0.3 mg/L, GA content of 0.1 mg/L.
Growth hormone; Potato; Shoot tip
S532;Q945
A
2096-0387(2017)01-0025-02
朱鑫(1991-),女,遼寧營口人,碩士,研究方向:生物技術(shù)。