李紅俠 方雪梅 劉江南 李 陽 張 穎 楊宜銀

（宿州學(xué)院生物與食品工程學(xué)院，安徽宿州234000）

硒是一種較稀有的重金屬元素，1973年世界衛(wèi)生組織（WHO）宣布，硒是人體必需的14 種微量元素之一[1]，同時(shí)是谷胱甘肽過氧化物酶的組成成分[2]，機(jī)體缺硒產(chǎn)生如肝病、大骨節(jié)病、癌癥、免疫功能低下等各種疾病。人體必需的這種硒元素，人們對它的認(rèn)識(shí)越來越深，近幾十年以來一直進(jìn)行與硒相關(guān)的疾病的研究，諸如心血管疾病，癌癥，帕金森病，心律失常等，一些克山病更是由于缺硒導(dǎo)致[3～4]。我國72%的地區(qū)缺硒，中國營養(yǎng)學(xué)會(huì)推薦日攝入硒量50～200 μg，而我國居民為26～32 μg，這就意味著我國居民膳食缺硒[5～8]。

隨著人們生活水平的提高，健康意識(shí)的增強(qiáng)，食用菌的攝入量逐漸增加，它不僅具有較高的營養(yǎng)價(jià)值，還能防癌、抗癌、增強(qiáng)人體免疫力，是其他食物所不能替代的，尤其食用菌中的多糖能消除自由基、抗病毒和抗腫瘤[9]?；覙浠ǎ℅rifola frondosa），又名多孔菌，蓮花菌，子實(shí)體中不僅含有較高的蛋白質(zhì)、膳食纖維，還富含多種有益的礦物質(zhì)（K、P、Fe、Zn、Ca、Se 等），多糖[10～11]，灰樹花多糖對腫瘤細(xì)胞的增長具有較強(qiáng)的抑制作用[12～13]。K、Mg、Zn 等礦質(zhì)元素在人生理活動(dòng)中起著重要作用[14～20]，食用菌具有較強(qiáng)的富硒能力，灰樹花硒含量高，具有較好的抵御癌腫瘤和抗愛滋病毒等作用?；覙浠ǜ晃难芯看蠖嗍窃诰z體或培養(yǎng)基層面[21-22]，灰樹花多糖的研究國內(nèi)外較多，而子實(shí)體噴硒對其礦質(zhì)元素及硒的影響報(bào)道較少。因此，通過子實(shí)體噴硒來改善食用菌硒含量及其他礦物質(zhì)的含量具有重要意義。

試驗(yàn)旨在探討噴施不同質(zhì)量濃度硒液（Na2SeO3）對灰樹花子實(shí)體中硒的富集及幾種主要礦質(zhì)元素和粗多糖含量的影響，以期找到較適宜的噴施量，提高灰樹花子實(shí)體中硒、礦質(zhì)元素和粗多糖的含量，為灰樹花在食品、醫(yī)藥以及硒在其他食用菌上應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料灰樹花菌種（菌種號:WS1號，安徽宿州市食用菌生產(chǎn)基地供應(yīng)），雜木屑，棉子殼，麩皮，玉米粉等市場購買。

1.2 試驗(yàn)方法將培養(yǎng)好的灰樹花原種，接種到栽培種培養(yǎng)基中（栽培種培養(yǎng)基的原料雜木屑，棉子殼，麩皮，玉米粉等，按照一定的比例混勻裝入聚丙烯栽培袋中，經(jīng)高壓滅菌），培養(yǎng)基含水量65%，pH6.0 左右，菌絲黑暗條件下培養(yǎng)（溫度23℃左右，相對濕度70%），35～45 d后，菌絲長滿袋，拿出等待出菇。待菇蕾長至珊瑚期，開始噴硒，硒以亞硒酸鈉計(jì)，硒的質(zhì)量濃度20，40，60，80，100，150 mg/L，每天1 次，向子實(shí)體上均勻噴至霧狀水滴，連續(xù)10 d，對照以噴去離子水。每個(gè)處理，重復(fù)3 次。數(shù)據(jù)用SPSS17.0軟件處理。

1.3 灰樹花子實(shí)體中礦質(zhì)元素的測定灰樹花子實(shí)體收獲后，于烘箱中烘至恒重，溫度40℃，用粉碎機(jī)打成粉末，過200 目篩，待用。每個(gè)樣品，分別準(zhǔn)確稱取0.5000 g，置于100 mL 的燒杯中，加消化液15～20 mL（消化液的組成高氯酸∶硝酸，體積比為1∶4，二者均為優(yōu)級純），于通風(fēng)櫥中小火緩緩加熱，有黃色濃煙產(chǎn)生，待反應(yīng)緩和后，拿出通風(fēng)櫥冷卻后，沿杯壁加入15～20 mL去離子水，繼續(xù)置于通風(fēng)櫥中緩慢加熱，待溶液變?yōu)闊o色，停止消化，冷卻后，加去離子水定容至100 mL。Se，K，Mg，Zn 用火焰原子吸收光譜法測定。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)回歸曲線由表1 可知，相關(guān)系數(shù)均在0.99以上。

1.5 灰樹花子實(shí)體中粗多糖的測定[23～26]取已處理好的子實(shí)體粉末，準(zhǔn)確稱取5 g→于2000 mL 超純水中，熱水90～95℃，超聲波，功率600 W，處理時(shí)間25 min→離心（5000 r/min，10 min）→將上清液真空濃縮至15 mL，用Sevage 試劑（氯仿∶正丁醇=5∶1）去蛋白2 次→3 倍無水乙醇沉淀→4℃冰箱12 h→離心（5000 r/min，10 min）→除去上清液→將沉淀收集，用無水乙醇洗滌3次→冷凍干燥得粗多糖。

2 結(jié)果與分析

2.1 灰樹花子實(shí)體噴硒對其K含量的影響從圖1可看出，灰樹花子實(shí)體噴不同質(zhì)量濃度的硒后，子實(shí)體中礦質(zhì)元素K 的含量均高于對照，與對照相比均達(dá)到了極顯著水平，通過LSD 比較各處理間也均達(dá)到極顯著差異，當(dāng)硒質(zhì)量濃度為20、80 mg/L 時(shí)，效果最好，分別高于對照10.9%和9.2%。

2.2 灰樹花子實(shí)體噴硒對其Se含量的影響由圖2可見，噴施不同質(zhì)量濃度硒，灰樹花子實(shí)體中Se 含量與對照相比，均達(dá)到極顯著差異，當(dāng)噴硒質(zhì)量濃度為60 mg/L時(shí)，子實(shí)體中Se含量最高，是對照的12倍，可見灰樹花具有較強(qiáng)的富硒能力。不同噴施硒濃度間，灰樹花子實(shí)體硒含量表現(xiàn)出極顯著差異。

2.3 灰樹花子實(shí)體噴硒對其Mg含量的影響從圖3可知，噴施不同質(zhì)量濃度的硒對灰樹花中Mg 含量與對照，均有極顯著差異，尤其是噴硒質(zhì)量濃度在20、80 mg/L 時(shí)，灰樹花子實(shí)體Mg 含量最高，分別高于對照28.94%和40.11%。40 mg/L 與100 mg/L 處理，子實(shí)體中Mg 含量沒達(dá)到顯著差異，其余各處理間Mg含量均達(dá)到極顯著差異。

2.4 灰樹花子實(shí)體噴硒對其Zn含量的影響由圖4可見，灰樹花子實(shí)體噴硒后，子實(shí)體礦質(zhì)元素Zn 含量與對照差異極顯著，各處理間的差異也極顯著。20、80 mg/L 處理，Zn 含量分別高于對照74.08%和150.82%，而當(dāng)硒濃度高于80 mg/L 后，子實(shí)體中Zn含量反而下降。

2.5 灰樹花子實(shí)體噴硒對其粗多糖含量的影響從表2可以看出，隨噴硒質(zhì)量濃度的上升，灰樹花子實(shí)體中粗多糖的含量也逐漸增加，但噴硒質(zhì)量濃度20、40 mg/L，粗多糖的含量雖增加，但沒達(dá)到顯著差異，噴硒質(zhì)量濃度60～150 mg/L，灰樹花子實(shí)體粗多糖的含量與對照，均達(dá)到極顯著差異，當(dāng)硒質(zhì)量濃度達(dá)到100 mg/L，灰樹花子實(shí)體粗多糖的含量達(dá)到最高，高于對照61.3%，當(dāng)噴硒質(zhì)量濃度高于100 mg/L，子實(shí)體粗多糖的含量不再增加。

表1 各元素回歸方程

圖1 灰樹花子實(shí)體噴硒對其K含量的影響

圖2 灰樹花子實(shí)體噴硒對其Se含量的影響

圖3 灰樹花子實(shí)體噴硒對其Mg含量的影響

圖4 灰樹花子實(shí)體噴硒對其Zn含量的影響

表2 噴不同質(zhì)量濃度的硒灰樹花子實(shí)體粗多糖含量

3 小 結(jié)

灰樹花子實(shí)體噴硒，可以較好的富集硒，這對發(fā)展富硒食用菌有著廣闊的前景，也為人們膳食補(bǔ)硒提供了條件。試驗(yàn)結(jié)果表明:過高質(zhì)量濃度硒不利于灰樹花子實(shí)體硒積累，其機(jī)理有待進(jìn)一步研究。噴硒，也改變了灰樹花子實(shí)體對礦質(zhì)元素（K、Zn、Mg）的吸收，它們的吸收有兩個(gè)高峰點(diǎn)，均是噴硒質(zhì)量濃度20 mg/L 和80 mg/L 時(shí)。噴施20 mg/L 對K 積累效果最好，而對Zn 和Mg 積累，都是噴硒80 mg/L最好。噴施100 mg/L硒，灰樹花子實(shí)體中粗多糖的含量達(dá)到最高。綜合試驗(yàn)結(jié)果噴硒質(zhì)量濃度在60～100 mg/L時(shí)較為適宜。