李祥林 (山東省龍口市下丁家鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)工作站 65719)
姜榮忱 (山東省蓬萊市畜牧獸醫(yī)工作站)
王 進 孫 勇 (山東省龍口市畜牧獸醫(yī)工作站)
水貂出血性肺炎的診斷與治療
李祥林 (山東省龍口市下丁家鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)工作站 65719)
姜榮忱 (山東省蓬萊市畜牧獸醫(yī)工作站)
王 進 孫 勇 (山東省龍口市畜牧獸醫(yī)工作站)
水貂出血性肺炎是由綠膿桿菌引起的一種人畜共患病。對山東省煙臺市某養(yǎng)殖戶送檢的病貂進行剖檢,根據(jù)臨床癥狀、病理變化、細菌的分離及生化實驗鑒定確診為水貂出血性肺炎。
水貂出血性肺炎(水貂綠膿桿菌病),是由綠膿桿菌引起的毛皮動物的一種急性傳染病。以肺出血、肺水腫、呼吸困難及部分水貂突然死亡,并從口鼻中流出血樣泡沫等為特征[1],嚴重威脅養(yǎng)貂業(yè)。1953年,Knox首次在丹麥報道了該病[2],1982年,Gessord首次從病貂體內(nèi)分離出該病菌[3]。該病在瑞典、芬蘭、美國、日本、法國等國均有報道[4]。近年來我國養(yǎng)貂業(yè)發(fā)展迅速, 其飼養(yǎng)規(guī)模、數(shù)量及密度均不斷增加,但由于飼養(yǎng)管理水平相對滯后,造成了該病的流行,給養(yǎng)殖戶造成較大的經(jīng)濟損失。2015年9月煙臺某養(yǎng)殖場發(fā)生一種以肺臟出血為典型特征的疾病,經(jīng)綜合診斷,確診為綠膿桿菌引起的水貂出血性肺炎,現(xiàn)將情況報告如下:
該養(yǎng)殖場共養(yǎng)殖水貂10萬余只,具有較好的衛(wèi)生防疫制度,分窩后未注射犬瘟熱和細小病毒性腸炎疫苗。2015年9月2日,突然死亡10多只,以后幾天死亡數(shù)量逐漸增多,公貂比母貂發(fā)病率高。曾采取頭孢氨芐和恩諾沙星等治療措施,未見明顯效果。因誤診延誤了治療時間,逐漸發(fā)展到1d死亡70余只,經(jīng)過10余天的治療,至病情完全控制時,共計死亡水貂1000余只。
發(fā)病急促,有些水貂毫無癥狀,突然死亡。病貂體溫升高,食欲廢絕,精神高度沉郁,呼吸困難,腹式呼吸,有的呈犬坐式呼吸,并伴有異常的叫聲。有的咳血或鼻孔出血,大部分發(fā)病后1~3d死亡。
病變主要集中于肺部,多呈彌漫性出血或充血,整個肺葉呈紅色肝樣實變,切開有血樣液體流出,病變較輕部位常見灰白色小結節(jié),嚴重呈大理石樣外觀,投入水中下沉;氣管內(nèi)有大量血樣泡沫;胸腺布滿大小不等的出血斑點;心肌弛緩,冠狀溝周圍有出血點;脾臟腫大2~3倍,呈桃紅色,有出血點。胃和小腸前段內(nèi)有血樣物;腎臟有針尖大出血點。
4.1 細菌分離培養(yǎng) 無菌取病死水貂的肺臟、肝臟、脾臟等作為被檢病料。從被檢病料中分離細菌,劃線接種于普通瓊脂平板、綿羊血瓊脂平板,37℃恒溫培養(yǎng)24h后觀察。挑取典型菌落進行純培養(yǎng)并對其進行革蘭氏染色,顯微鏡下觀察細菌形態(tài)特征。
4.2 生化試驗 挑取待檢菌株單菌落接種葡萄糖、蔗糖、乳糖、甘露醇等微量發(fā)酵管進行生化項目測定。接種后的發(fā)酵管置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18~24h,統(tǒng)計生化試驗結果。
4.3 動物試驗 選用8只健康小鼠做動物試驗,分為2組,每組4只。1組腹腔接種分離細菌24h的肉湯培養(yǎng)物,0.1ml/只。另1組腹腔接種滅菌生理鹽水作為陰性對照組,0.1ml/只。接種后,每天觀察小鼠的行為表現(xiàn)以及死亡情況。
4.4 藥敏試驗 藥敏試驗所選的藥物分別是阿卡米星、恩諾沙星、復方新諾明、強力霉素、四環(huán)素、環(huán)丙沙星、新霉素、多粘菌素B、慶大霉素、左氧氟沙星、磺胺二甲氧嘧啶、頭孢噻肟、替米考星。待檢的綠膿桿菌均勻的涂抹在普通營養(yǎng)瓊脂平板表面,然后再將藥敏片鋪于其上,37℃培養(yǎng)24h后測量各種抗菌藥物的抑菌環(huán)直徑。
5.1 分離培養(yǎng)結果及細菌形態(tài)觀察 分離菌在普通瓊脂平板上均生長良好,形成光滑、稍隆起或扁平、邊緣呈波狀的墨綠色中等大小菌落,整個培養(yǎng)基被染成綠色,且培養(yǎng)基有獨特的香味;在綿羊血瓊脂培養(yǎng)基上形成溶血環(huán),灰色,不規(guī)則。革蘭氏染色后鏡檢可見數(shù)量不一的紅色、單個、成雙或呈短鏈狀排列的中等大小無芽孢桿菌。鏡檢為革蘭氏陰性小桿菌。
5.2 生化試驗 分離菌能分解葡萄糖、伯膠糖、單奶糖、甘露醇產(chǎn)酸不產(chǎn)氣;不分解麥芽糖、菊糖、棉籽糖、甘露醇、乳糖及蔗糖,能液化明膠;分解尿素,不形成吲哚,氧化酶試驗陽性,可利用枸櫞酸鹽;不產(chǎn)生H2S,MR試驗和VP試驗均為陰性。
5.3 動物試驗 將該分離菌培養(yǎng)物接種小白鼠后,小白鼠在24h內(nèi)全部死亡,伴隨精神沉郁、體溫升高等癥狀。用病死鼠的肺臟和肝臟涂片、鏡檢,可見大量革蘭氏陰性桿菌,經(jīng)鑒定為綠膿桿菌,而對照組小鼠全部正常。
5.4 藥敏試驗 對該分離菌進行藥敏試驗,抑菌圈的大小比對結果表明該菌對環(huán)丙沙星、新霉素、多粘菌素B、慶大霉素高度敏感;對強力霉素、頭孢噻肟、恩諾沙星中度敏感;對其他藥物不敏感。
該病爆發(fā)后,5%的熱火堿水對全場進行噴灑消毒,每天清洗水槽和食槽,加強飼養(yǎng)管理,提高貂群的抗病力。根據(jù)藥敏試驗結果選用高度敏感藥物環(huán)丙沙星全群飲水,同時配合用杜仲葉提取物、電解多維、膽汁酸等進行輔助治療,2次/d。治療3d后,死亡現(xiàn)象得到控制,7d后貂群恢復正常。
近年來,水貂出血性肺炎發(fā)生頻率逐年上升,已成為水貂養(yǎng)殖業(yè)的大病,給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的損失。同時,水貂出血性肺炎臨床流行現(xiàn)狀也出現(xiàn)了新趨勢,發(fā)病區(qū)域由沿海地區(qū)向內(nèi)地蔓延;發(fā)病高峰期變長,以往集中在8、9月份,現(xiàn)在6月初即有綠膿桿菌導致的出血性肺炎發(fā)生,7~10月都是該病發(fā)病高峰期。本病常爆發(fā)流行,死亡率較高。通過臨床癥狀、剖檢癥狀、細菌的分離培養(yǎng)、生化試驗和動物致病試驗,證實此養(yǎng)殖場水貂發(fā)病是由綠膿桿菌感染所致。根據(jù)病因必須采取相應的防治措施。(1)炎熱的夏季,水貂開始換毛,生長迅速,抵抗力降低,致使體內(nèi)的條件致病菌大量繁殖,自身抵抗力減弱,最終引起感染和死亡。因此夏季對水貂應加強管理,做好通風、降溫、防暑的工作;(2)水貂屬于肉食性動物,食料主要以雜魚、雞架等動物下腳料為主,來源復雜,質(zhì)量不易統(tǒng)一,容易腐敗變質(zhì),由腐敗飼料引起的水貂發(fā)病情況已有報道[5]。因此,貂場飼喂新鮮飼料尤其重要。(3)綠膿桿菌引起的出血性肺炎發(fā)病急、死亡迅速,發(fā)現(xiàn)發(fā)病時往往來不及投藥治療,所以采取預防加治療的方式,可以有效減少發(fā)病概率和經(jīng)濟損失。由于在臨床生產(chǎn)中抗生素的不合理使用,綠膿桿菌已對大部分抗生素產(chǎn)生了耐藥性,故一旦發(fā)現(xiàn)疫情后,需充分利用臨床診斷和實驗室檢驗,通過藥敏試驗選擇合理的敏感抗生素進行投喂,可有效控制病情,減少損失,配合中藥標本兼治,有利于貂群早日恢復健康。
[1] 程悅寧, 易立, 司方方等. 我國毛皮動物主要傳染病防控現(xiàn)狀及防控建議[J]. 經(jīng)濟動物學報, 2013, 17(1): 49-54.
[2] 牛鐘相, 李雅琳. 動物綠膿桿菌病研究進展[J]. 動物醫(yī)學進展, 2003, 24(1): 16-18.
[3] 芮萍, 馬增軍, 賀英等. 貂源銅綠假單胞菌對常用抗菌藥物的耐藥性檢測[J]. 畜牧與獸醫(yī), 2013, 45(9): 61-63.
[4] 馮永軍, 徐修禮, 孫怡群等. 綠膿桿菌血清學分型的觀察分析[J].齊魯醫(yī)學檢驗, 2003, 14(5): 28-29.
[5] 白雪, 柴秀麗, 閆喜軍. 水貂綠膿桿菌分離株的生物學特性和血清型分析[J]. 畜牧與獸醫(yī), 2011, 43: 31-35.
S858.92
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1007-1733(2017)01-0036-02
2016–09–12)