李正陽，王玉波，劉佩杭，董建臻

(1 河北農(nóng)業(yè)大學 植物保護學院，河北 保定 071000；2 河北省農(nóng)林科學院 旱作農(nóng)業(yè)研究所，河北 衡水 053000)

5種設(shè)施常用農(nóng)藥對歐洲熊蜂的毒力及殘毒測定

李正陽1，王玉波2，劉佩杭1，董建臻1

(1 河北農(nóng)業(yè)大學 植物保護學院，河北 保定 071000；2 河北省農(nóng)林科學院 旱作農(nóng)業(yè)研究所，河北 衡水 053000)

為了合理保護和利用歐洲熊蜂，測定了5種設(shè)施常用藥劑對歐洲熊蜂的毒力及殘毒毒性，結(jié)果表明：噻蟲嗪對歐洲熊蜂的半致死量LD50值為0.061 μg/蜂,為高毒；氯蟲苯甲酰胺對其半致死量LD50值為8.507 μg/蜂，為中毒；藜蘆堿、印楝素和苯醚甲環(huán)銼對其半致死量LD50值分別為69.936 μg/蜂、109.141 μg/蜂和336.094 μg/蜂，均為低毒，其中苯醚甲環(huán)銼的毒性最低。殘毒試驗結(jié)果表明:天然植物源農(nóng)藥藜蘆堿、印楝素對熊蜂沒有殘留毒性；殺菌劑苯醚甲環(huán)銼對其有輕微毒性；殺蟲劑噻蟲嗪、氯蟲苯甲酰胺對其毒害比較明顯，其中噻蟲嗪在噴藥5 d后仍有輕微毒性。

歐洲熊蜂；農(nóng)藥；毒力；殘留毒性

熊蜂屬于膜翅目(Hymenoptera)蜜蜂總科(Apoidea)熊蜂屬(Bombus)昆蟲。目前，全世界熊蜂的種類大約有250種，中國約110種，是全世界熊蜂資源最豐富的國家[1]。熊蜂是一類多食性的社會性昆蟲，其進化程度處于高級社會性蜜蜂和原始性獨居蜂的中間階段，是多種蟲媒植物特別是豆科(Leguminosae)、茄科(Solanaceae)及一些瀕危植物的重要授粉者[2]。熊蜂授粉可減少設(shè)施農(nóng)作物抗生素、化學激素的使用，提高設(shè)施農(nóng)產(chǎn)品的安全性；熊蜂具有耐濕性強、趨光性差、信息交流不發(fā)達等特性，是設(shè)施農(nóng)業(yè)理想的授粉昆蟲[3]。歐洲熊蜂Bombusterrestris(Linnaeus, 1758)，主要分布于歐洲大陸，蜂群數(shù)量可達400頭，飼養(yǎng)成活率高，因而廣泛應(yīng)用于人工飼養(yǎng)。

以熊蜂作為設(shè)施農(nóng)業(yè)的授粉者，可以提高產(chǎn)量，改善果實品質(zhì)，減少畸形果率，縮短果實成熟期。目前，設(shè)施農(nóng)業(yè)的病蟲害防治仍以化學防治為主,作物在噴灑過農(nóng)藥后，受污染的花蜜、花粉很容易導(dǎo)致熊蜂中毒死亡[4]。且前人的研究也表明，不同設(shè)施農(nóng)業(yè)常用農(nóng)藥對不同種類熊蜂的毒力也存在差異[5]。因此，在設(shè)施農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中選擇高效低毒的農(nóng)藥對傳粉昆蟲的保護非常重要。為此，擬通過測定5種設(shè)施常用藥劑對歐洲熊蜂的毒力及殘毒，探明它們對歐洲熊蜂的毒力及殘毒影響，以便為熊蜂在溫室內(nèi)的保護利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試蜂種

歐洲熊蜂(Bombusterrestris)，由衡水旱作物沃蜂生物科技有限公司提供。

飼養(yǎng)溫度(25±1)℃，相對濕度(50%±10%)，于黑暗條件下采用糖水與花粉飼喂。飼養(yǎng)過程不接觸任何化學試劑，所用熊蜂為個體大小一致的健康成年工蜂。

1.2 供試藥劑

10%苯醚甲環(huán)銼微乳劑(中國農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所廊坊農(nóng)藥中試廠)，30%噻蟲嗪懸浮劑(中國農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所廊坊農(nóng)藥中試廠)，5%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑(美國杜邦公司)，0.3%印楝素乳油(成都綠金生物科技有限責任公司)，0.5%藜蘆堿可溶液劑(河北馥稷生物科技有限公司)。

1.3 毒力測定

依照《化學農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準則》( GB/T 31270.10-2014) 中的蜜蜂急性經(jīng)口毒性試驗進行[6]。

將各供試藥劑母液用 50%質(zhì)量濃度蔗糖水溶液稀釋，設(shè)置成等比的5個試驗濃度組，每組10只工蜂，并設(shè)不加藥劑的蔗糖水為空白對照。在飼喂器中加入100 μL各試驗濃度藥液。含藥蔗糖水消耗完后，將飼喂器取出，換不含藥液的蔗糖水進行飼喂。各處理均設(shè) 3 次重復(fù)，觀察記錄48 h后熊蜂死亡數(shù)。

1.4 殘毒試驗

參考于蓉、賈永華等的方法[7]，將殺蟲劑與殺菌劑分別按照田間常用濃度配制，按單位面積用量噴于鋪設(shè)吸水紙的塑料盒中，分別隔1 d、3 d、5 d將室內(nèi)飼養(yǎng)的熊蜂工蜂放入盒內(nèi)飼養(yǎng)，同時設(shè)空白對照。每個處理10頭，重復(fù)3次。按常規(guī)方法，飼喂50%糖水，每天除去死蜂并計數(shù)，計算累計死亡率。

1.5 數(shù)據(jù)處理

用SPSS19.0軟件和Excel軟件對所得數(shù)據(jù)進行分析計算，求出相應(yīng)的半致死量LD50與殘毒的累計死亡率。

2 結(jié)果與分析

2.1 5種農(nóng)藥對歐洲熊蜂室內(nèi)毒力測定

5種農(nóng)藥對歐洲熊蜂室內(nèi)毒力測定結(jié)果見表1。

表1 5種農(nóng)藥對歐洲熊蜂毒力測定結(jié)果Table 1 The toxicities of five insecticids to Bombus terrestris

由表1可見，噻蟲嗪48 h的半致死量LD50值為0.061 μg/蜂，毒力最高，其次為氯蟲苯甲酰胺，48 h的半致死量LD50值為8.507 μg/蜂；藜蘆堿、印楝素和苯醚甲環(huán)銼48 h的半致死量LD50值分別為69.936 μg/蜂、109.141 μg/蜂和336.094 μg/蜂。

錢學森于1990年就預(yù)言“將來的醫(yī)學一定是集中醫(yī)、西醫(yī)各民族醫(yī)學于一爐的新醫(yī)學”；“發(fā)展中醫(yī)只有這一條路，要用強大的現(xiàn)代科學技術(shù)體系，來使中醫(yī)從古代的自然哲學式的、思辨式的論述中解脫出來。要換裝，變成用現(xiàn)代科學語言表達的唯象中醫(yī)理論”。因此，捍衛(wèi)和發(fā)展中醫(yī)藥，應(yīng)本著“中醫(yī)為體，西為中用，中西并重，有機結(jié)合”的方針，應(yīng)用現(xiàn)代科技成果研究方法，從而進行有效“轉(zhuǎn)型換裝”地繼承發(fā)揚中醫(yī)藥，使之形成符合國情實際務(wù)實的構(gòu)建起“現(xiàn)代中醫(yī)藥理論體系”，乃是中醫(yī)藥發(fā)展的當務(wù)之急。

參照《化學農(nóng)藥環(huán)境安全評價實驗準則》(GB/T 31270.10-2014)中的《農(nóng)藥對蜜蜂毒性等級劃分》的劃分標準，蜜蜂急性經(jīng)口毒性分為4個等級：劇毒LD50≤0.001 μg/蜂，高毒0.001 μg/蜂11.0 μg/蜂。

試驗結(jié)果表明，噻蟲嗪對熊蜂的毒性為高毒；氯蟲苯甲酰胺為中毒；藜蘆堿、印楝素和苯醚甲環(huán)銼毒性均為低毒，對熊蜂的危害性較低，其中苯醚甲環(huán)銼對熊蜂毒性最低。

2.2 5種農(nóng)藥對歐洲熊蜂殘毒試驗

5種藥劑施用1 d、3 d、5 d處理后對熊蜂殘毒的試驗結(jié)果如圖1—圖4所示。

圖1 3種藥劑常規(guī)濃度使用1 d后對熊蜂殘毒影響

Fig.1 Residual toxicities of 3 insecticides with normal concentretion after 1 day

圖2 2種藥劑常規(guī)濃度使用3 d后對熊蜂殘毒影響

Fig.2 Residual toxicities of 2 insecticides with normal concentretion after 3 days

圖3 噻蟲嗪使用5 d后對熊蜂殘毒影響

Fig.3 Residual toxicities of thiamethoxam with normal concentretion after 5 days

圖4 5種藥劑不同處理對熊蜂的致死率

Fig.4 The lethality rate of 5 insecticide treatments on ofBombusterrestris

由圖1—圖3得出，在藥劑持效性方面，噻蟲嗪對熊蜂毒害最強，在噴藥1 d、3 d后接蜂對熊蜂致死率超過50%，在噴藥5 d后接蜂對熊蜂致死率為17%，仍有一定殘留毒性；其次為氯蟲苯甲酰胺，在噴藥1 d、3 d后對熊蜂有較強殘留毒性，在噴藥5 d后對熊蜂未顯出殘留毒性；苯醚甲環(huán)銼在噴藥1 d后對熊蜂有一定殘留毒性，在噴藥3 d后未顯出殘留毒性；藜蘆堿、印楝素在噴藥1 d后對熊蜂未顯出殘留毒性。

3 結(jié)論與討論

試驗結(jié)果表明，不同類型的藥劑對熊蜂的急性毒性及殘留毒性有較大的差別。

本研究中的2種殺蟲劑，噻蟲嗪作為第2代煙堿類殺蟲劑，對熊蜂毒力最高，表現(xiàn)為高毒；氯蟲苯甲酰胺作為新型內(nèi)吸殺蟲劑，對熊蜂毒力表現(xiàn)為中毒。印楝素與藜蘆堿為植物源農(nóng)藥。印楝素可抑制昆蟲體內(nèi)酶活性，干擾昆蟲生長發(fā)育；藜蘆堿具有觸殺和胃毒作用，通過抑制神經(jīng)致害蟲死亡。兩者對歐洲熊蜂的毒性均為低毒。苯醚甲環(huán)銼屬于內(nèi)吸性殺菌劑，雖然靶標是病原菌，但試驗結(jié)果表明它對熊蜂也有明顯的影響，其毒性表現(xiàn)為低毒。

在殘毒試驗的結(jié)果中，殺蟲劑的殘留毒性最強，殺菌劑有一定殘留毒性，植物源農(nóng)藥對熊蜂的殘毒毒性最小。

關(guān)于幾種藥劑對傳粉昆蟲毒害作用的比較前人有所研究。如吳若涵等的新煙堿殺蟲劑對意大利工蜂急性毒性接觸試驗表明噻蟲嗪對蜜蜂表現(xiàn)為高毒[8]。這與其對熊蜂的毒力表現(xiàn)一致。林濤等通過經(jīng)口毒性試驗表明氯蟲苯甲酰胺對蜜蜂毒性為低毒[9]。氯蟲苯甲酰胺是一種高效廣譜的藥劑，屬于微毒級，對施藥人員及田間常見益蟲安全，但對歐洲熊蜂毒力較高，應(yīng)注意在設(shè)施農(nóng)業(yè)中的使用。賈變桃等的殺菌劑對意大利蜜蜂急性經(jīng)口毒性試驗表明其對蜜蜂毒性表現(xiàn)為低毒[10]，表明殺菌劑對傳粉昆蟲具有一定的危害。對于印楝素、藜蘆堿2種植物源農(nóng)藥對傳粉昆蟲的危害前人研究較少。本試驗中它們對熊蜂的毒力同為低毒，其LD50值低于另外2種殺蟲劑，高于殺菌劑。在實際生產(chǎn)應(yīng)用中，應(yīng)注意植物源農(nóng)藥對傳粉昆蟲的毒害。

殘毒試驗的結(jié)果以及前人的研究表明，農(nóng)藥殘留對熊蜂有明顯的殺傷效果，無論噴灑殺蟲劑或是殺菌劑，都可能影響到熊蜂的傳粉行為[11]。

在選取的5種藥劑對熊蜂的急性經(jīng)口毒力試驗中，殺蟲劑對熊蜂的毒害作用最強，植物源農(nóng)藥次之，殺菌劑對熊蜂毒害作用最?。辉跉埗径拘栽囼炛?，殺蟲劑毒害持效性最長，殺菌劑次之，植物源農(nóng)藥最短。因此，在實際生產(chǎn)中，應(yīng)根據(jù)農(nóng)藥的種類、毒力、劑型等采取相應(yīng)措施，避免使熊蜂受到藥劑的毒害。

使用熊蜂輔助授粉時，盡量避免殺蟲劑的使用，使用低毒低殘留的農(nóng)藥，輔以對病蟲害的生物防治；盡量不使用殘效期長、殺蟲譜廣的藥劑；施藥盡量選在夜晚進行；使用對熊蜂危害較大的中高毒藥劑時，將蜂群提前收起于25℃條件下，根據(jù)安全期放置1～5 d不等，時間較長時，需提供糖水及花粉喂食蜂群，待安全期過后再將蜂群放回。

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[6]農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所，環(huán)境保護部南京環(huán)境科學研究所．GB/T31270-2014化學農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準則[S].北京：中國標準出版社，2015.

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(編輯 潘秀華)

Toxicity determination and residual of five pesticides onBombusterrestrisin greenhouse

LI Zhengyang1, WANG Yubo2, LIU Peihang1, DONG Jianzhen1

(1CollegeofPlantProtection，HebeiAgriculturalUniversity，Baoding071000，China;2DrylandFarmingInstitute,HebeiAcademyofAgricultureandForestrySciences,Hengshui053000,China)

For the rational utilization and protection ofBombusterrestris, 5 common pestcides’ toxicity and residual toxicity onBombusterrestriswere tested. The results showed that theLD50of thiamethoxam toBombusterrestriswas 0.061 μg/bee, which was high toxic;LD50of chlorantraniliprole was 8.507 μg/bee, which was medium toxic;LD50values of veratrine, matrine and difeno-conazole were 69.936 μg /bee, 109.141 μg/bee，and 336.094 μg/bee respectively, so they all showed low toxic. The residual toxicity test shows that botanical pesticides have no residual toxicyty toBombusterrestris; bactericidal agent was slightly toxic; and pesticides was highly toxic to bumblebee. There is still a slight toxicity of thiamethoxam in 5 days after spraying.

Bombusterrestris；pesticide；toxicity；residual toxicity

1007-4961(2017)01-0061-04

10.13320/j.cnki.hjfor.2017.0012

2016-11-03；

2016-11-07

河北省科技廳獎勵性后補助項目“設(shè)施蔬菜熊蜂授粉應(yīng)用技術(shù)研究”(15927522H); 河北農(nóng)科院財政項目“麗蚜小蜂工廠化生產(chǎn)與應(yīng)用”(F16C14008)。

李正陽(1992-)，男，河北保定人，在讀碩士研究生，主要從事害蟲生物防治研究。

董建臻(1959-)，男，河北博野人，教授，碩士生導(dǎo)師，主要從事害蟲生物防治和系統(tǒng)發(fā)育研究。

S 897.3;S 481

A