呂新年 （山東省昌樂(lè)縣畜牧獸醫(yī)局 262400）

雞傳染性支氣管炎病毒感染鑒定

呂新年 （山東省昌樂(lè)縣畜牧獸醫(yī)局 262400）

傳染性支氣管炎是雞的一種急性、高度傳染性的呼吸道疾病，已呈世界性分布，對(duì)養(yǎng)雞業(yè)的危害極大。在山東諸城地區(qū)一羅斯308種雞場(chǎng)，種雞出現(xiàn)輸卵管囊腫，產(chǎn)蛋下降10%，畸形蛋增多。筆者使用特異性引物對(duì)白血病、流感病毒、新城疫病毒和傳染性支氣管炎病毒進(jìn)行診斷。結(jié)果成功擴(kuò)增到傳染性支氣管炎病毒S1片段。

1 材料和方法

1.1 材料 山東諸城送檢羅斯308種雞，日齡280日齡，剖檢發(fā)現(xiàn)輸卵管囊腫，腎臟腫大，呈現(xiàn)花斑腎。整體雞群出現(xiàn)產(chǎn)蛋下降約10%，出現(xiàn)薄殼蛋、軟殼蛋，畸形蛋增多。

1.2 方法 針對(duì)癥狀，設(shè)計(jì)針對(duì)白血病病毒(ALV)env基因、流感病毒(AIV)HA基因、新城疫病毒(NDV)F基因和傳染性支氣管炎病毒(IBV)S1基因特異性引物。分別擴(kuò)增片段長(zhǎng)度為1000、580、800和1000bp片段?；厥漳康钠螠y(cè)序進(jìn)行進(jìn)一步驗(yàn)證。

2 結(jié)果

使用PCR特異性引物擴(kuò)增后，結(jié)果如附圖，IBV成功擴(kuò)增出1000bp左右條帶，將PCR產(chǎn)物送測(cè)序后，結(jié)果與IBV參考株核苷酸同源性高達(dá)98%。

附圖 PCR檢測(cè)結(jié)果M為5000bp Marker

3 討論

（1）傳染性支氣管炎病毒(IBV）屬于nidovirales病毒目，冠狀病毒科，冠狀病毒屬的病毒。IBV是單鏈正股RNA病毒，病毒粒子有4個(gè)結(jié)構(gòu)：核衣殼蛋白(N)、膜糖蛋白(M)、小包膜蛋白(E)和糖基化線圖蛋白(S)。（2）IBV主要侵害雞的呼吸系統(tǒng)、泌尿生殖系統(tǒng)和消化系統(tǒng)，呈現(xiàn)氣管啰音、咳嗽、打噴嚏、產(chǎn)蛋下降或停產(chǎn)、蛋品質(zhì)低劣如產(chǎn)薄殼蛋和畸形蛋，蛋殼顏色變淡；并殼引起腎炎、尿結(jié)石甚至死亡，病毒在消化道持續(xù)存在，并伴隨糞便長(zhǎng)期排毒。]本文對(duì)山東諸城一種雞場(chǎng)產(chǎn)蛋下降雞群檢測(cè)和病毒鑒定，為防控雞群傳染性支氣管炎病毒提供依據(jù)。（3）雖然我國(guó)當(dāng)前通過(guò)接種疫苗免疫方式防控IB，但是每年我國(guó)多地都有IB的發(fā)生，造成較大的損失，IBVS基因的變異主要發(fā)生在S1基因上，該區(qū)域發(fā)同源性為98%，加大對(duì)病毒變異的檢測(cè)，有利于更好的檢測(cè)病毒的變異，以更換疫苗毒株，為IBV防控提供更有效的依據(jù).

S858.31

B

1007-1733(2017)04-0075-01

2016–12–16）