吳 婷，劉躍生，徐雅萍，邱寒峰，俞乾挺，翟漢平，嚴 羽

(1.桐鄉(xiāng)市動物疫病預防控制中心，浙江 桐鄉(xiāng) 314500； 2.嘉興職業(yè)技術(shù)學院，浙江 嘉興 314036；3.桐鄉(xiāng)市畜牧獸醫(yī)局，浙江 桐鄉(xiāng) 314500)

湖羊羊痘疫苗免疫抗體消長規(guī)律分析

吳 婷1，劉躍生2，徐雅萍1，邱寒峰3，俞乾挺3，翟漢平3，嚴 羽1

(1.桐鄉(xiāng)市動物疫病預防控制中心，浙江 桐鄉(xiāng) 314500； 2.嘉興職業(yè)技術(shù)學院，浙江 嘉興 314036；3.桐鄉(xiāng)市畜牧獸醫(yī)局，浙江 桐鄉(xiāng) 314500)

采用間接ELISA方法開展湖羊羊痘疫苗免疫效果監(jiān)測，研究羊痘疫苗免疫后其抗體的消長規(guī)律。結(jié)果表明：湖羊在羊痘疫苗免疫后的第7、14、28、61、210 天，羊痘病毒抗體水平合格率分別達到94.3%、97.1%、99.1%、85.7%、79.1%。羊痘疫苗注射后30 d內(nèi)抗體陽性率整體呈平穩(wěn)上升趨勢， 30～60 d緩慢下降，但依然保持較高水平；60～210 d 抗體陽性率平穩(wěn)持續(xù)下降，但抗體水平合格率仍保持在70%以上，達到國家規(guī)定的免疫合格標準。本研究為湖羊場制定合理的羊痘免疫程序提供了實驗依據(jù)。

桐鄉(xiāng)湖羊； 羊痘； 免疫； 抗體消長規(guī)律

羊痘是一種急性、熱性、接觸性傳染病，是由羊痘病毒感染所致，主要特征是在病羊皮膚和粘膜上形成特殊的痘疹。羊痘不僅具有很高的發(fā)病率和死亡率，常引起孕羊流產(chǎn)，而且致使多數(shù)病羊喪失生產(chǎn)力，對養(yǎng)羊業(yè)造成嚴重的經(jīng)濟損失[1]。羊痘傳播速度快，可發(fā)生于全年任何季節(jié)，但以春秋兩季多發(fā)，主要在冬末春初流行，常呈地方性流行或大流行[2]。羊痘屬于我國一類動物疫病，一旦發(fā)病應采取嚴格控制撲滅措施，疫病的預防應采取加強飼養(yǎng)管理和疫苗免疫為主的綜合性防控措施，盡量避免該病的發(fā)生[3]。桐鄉(xiāng)是湖羊養(yǎng)殖大市，2015年全年養(yǎng)殖量約21.25萬只。因此，切實做好湖羊羊痘防控工作，對于本地區(qū)湖羊養(yǎng)殖業(yè)持續(xù)健康發(fā)展具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗動物

在桐鄉(xiāng)市某規(guī)模湖羊養(yǎng)殖場選取170～200日齡、體重30～35 kg，未經(jīng)羊痘疫苗免疫且無臨床疾病癥狀的健康湖羊作為試驗動物。

1.1.2 疫苗來源

羊痘疫苗為遼寧益康生物股份有限公司生產(chǎn)的山羊痘活疫苗，批號：201601，免疫有效期為12個月。

1.1.3 試劑

羊痘間接ELISA抗體檢測試劑盒，批號：20160412119，購自中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所。

1.1.4 儀器

Eppendorf單、雙道可調(diào)移液器；中科PHW-165Q恒溫培養(yǎng)箱；美國伯樂MODEL680酶標儀。

1.2 方法

1.2.1 試驗地點

桐鄉(xiāng)市某規(guī)模湖羊養(yǎng)殖場，總存欄量為1 200 只，在3棟、5棟隨機選取未經(jīng)羊痘疫苗免疫且在相同環(huán)境下飼養(yǎng)的105 只健康湖羊。

1.2.2 免疫方法

山羊痘活疫苗按說明書要求，用生理鹽水稀釋為每頭份0.5 mL；采用尾根內(nèi)側(cè)皮內(nèi)注射的方法，免疫劑量為0.5 mL·只-1。注射時應當注意消毒，嚴格遵守操作規(guī)范。

1.2.3 臨床觀察及血樣采集

在注射山羊痘活疫苗前后各1 周內(nèi)，觀察實驗羊的臨床癥狀，如體溫、呼吸、采食、精神等方面均無不良反應。分別在免疫后的第7天、第14天、第28天、第61天、第210天經(jīng)頸靜脈采血，分離血清。其中，3棟采樣70 份，5棟采樣35 份。

1.2.4 實驗室檢測

采用間接ELISA檢測羊痘病毒抗體，按試劑盒使用說明書操作。判定標準：D450≥0.25，抗體陽性；D450≤0.2，抗體陰性；0.25>D450>0.20，判為陽性可疑，重復檢測一次，若D450≥0.23判定為陽性，D450<0.23則判為陰性。

2 結(jié)果與分析

湖羊羊痘疫苗免疫后抗體檢測結(jié)果見表1。試驗湖羊在羊痘疫苗注射后第7天已經(jīng)產(chǎn)生較高水平的抗體，抗體合格率達到94.3%；第14天、第28天抗體水平合格率分別為97.1%和99.1%，說明抗體水平整體呈平穩(wěn)向上態(tài)勢，并在第28天左右達到峰值；第61天抗體水平合格率為85.7%，抗體水平有所下降；第210天抗體水平合格率為79.1%，抗體效價水平明顯下降，但總體維持在國家規(guī)定的免疫合格率70%標準以上。

表1 免疫后不同時間羊痘抗體水平的變化

從表1中還可以看出，在免疫后第7天均產(chǎn)生了較高水平的抗體，在免疫后第14至28天抗體陽性率平穩(wěn)上升，且在第28天左右達到最高水平。在第30至60天抗體陽性率略有下降，但依然保持較高的水平。第61～10天，抗體陽性率繼續(xù)平穩(wěn)下降，但抗體水平合格率仍保持在70%以上。

3 討論

通過對湖羊免疫羊痘疫苗后不同階段抗體水平及消長規(guī)律的實驗研究，為改進桐鄉(xiāng)地區(qū)以往羊痘免疫工作中存在的不足，提供了科學依據(jù)。

羊痘是嚴重危害養(yǎng)羊業(yè)生產(chǎn)的重大動物傳染病[4]。在湖羊飼養(yǎng)過程中，定期接種疫苗，建立合理的免疫程序至關(guān)重要。根據(jù)農(nóng)業(yè)部動物疫病免疫監(jiān)測要求，加強對羊群羊痘的普查、抗體水平的監(jiān)測，及時分析疫苗免疫后抗體的消長規(guī)律，明確免疫間隔時間。一般安排在春季或秋季集中免疫，避免過度免疫或免疫不足，造成不必要的損失，以達到較好的免疫效果。

本試驗在桐鄉(xiāng)市某規(guī)模湖羊養(yǎng)殖場，通過持續(xù)抽樣監(jiān)測湖羊群免疫羊痘弱毒活疫苗后血清抗體的消長動態(tài)，表明羊痘疫苗抗體消長呈現(xiàn)規(guī)律性，免疫后第7天左右產(chǎn)生抗體，第14天左右逐步上升，到第28天左右達到高峰水平，群體免疫合格率可保持到210 d，這與該疫苗在山羊群的免疫抗體消長規(guī)律基本一致[5-6]。

羊痘疫苗的免疫應嚴格遵守疫苗接種操作要求，如羊痘疫苗一般選擇在羊只股內(nèi)側(cè)、尾根內(nèi)側(cè)下方進行注射，每只皮下注射0.5 mL。大多數(shù)情況下，羊只接種后4～5天就能夠產(chǎn)生主動免疫力[1]。

通過對湖羊羊痘疫苗免疫后抗體消長規(guī)律的研究，為浙江省有效預防和控制羊痘的發(fā)生，制定合理的湖羊羊痘免疫程序提供了科學的實驗依據(jù)。

[1] 吳麗娟.羊痘病的病因、癥狀和防控措施[J].現(xiàn)代畜牧科技，2016(10)：143.

[2] 康文玉，徐自忠，高洪，等. 羊痘的研究進展[J].畜牧獸醫(yī)雜志，2005，24(3)：18-20.

[3] 吳永忠，胡南. 山羊痘的診治[J].中國動物保健，2016(10)：63-64.

[4] 顏新敏，吳國華，李健，等. 羊痘在中國的流行現(xiàn)狀分析[J].中國農(nóng)學通報，2010，26(24)：6-9.

[5] 劉忠偉，周碧君，虞天德. 山羊痘免疫效果檢測[J].貴州農(nóng)業(yè)科學，2007，35(5)：82-84.

[6] 趙利平，魏學峰，高換河，等.山羊痘滅活疫苗免疫持續(xù)期試驗[J].中國獸藥雜志，2007，41(3)：18-20.

(責任編輯：盧福莊)

2017-02-15

吳 婷(1981—)，女，浙江嘉興人，助理獸醫(yī)師，本科，從事動物疫病預防控制技術(shù)工作， E-mail：405697210@qq.com。

10.16178/j.issn.0528-9017.20170449

S851.3

A

0528-9017(2017)04-0709-02

文獻著錄格式：吳婷，劉躍生，徐雅萍，等. 湖羊羊痘疫苗免疫抗體消長規(guī)律分析[J].浙江農(nóng)業(yè)科學，2017，58(4)：709-710.