富盈昕,劉春瑩,郭美娟,趙 耀,金鳳燮,魚紅閃

(大連工業(yè)大學生物工程學院,遼寧大連 116034)

酶轉化在淫羊藿苷提取中的應用

富盈昕,劉春瑩,郭美娟,趙 耀,金鳳燮,魚紅閃*

(大連工業(yè)大學生物工程學院,遼寧大連 116034)

目前生產(chǎn)淫羊藿苷的過程中,其副產(chǎn)物朝藿定A、B、C等黃酮未被利用好。篩選出了將淫羊藿苷廢渣中朝藿定A、B、C等黃酮轉化成淫羊藿苷的A.sp.y39菌酶,將其應用于以淫羊藿提取物為原料制備淫羊藿苷的工藝。將150 g西安岳達淫羊藿提取物,溶解于60%乙醇、經(jīng)D-280脫色柱脫色、結晶得到30.5 g淫羊藿苷;其廢渣朝藿定A、B、C混合黃酮,經(jīng)A.sp.y39菌酶轉化,又得到16.6 g淫羊藿苷。共得到純度90%以上的淫羊藿苷47.1 g;淫羊藿苷的提取率由傳統(tǒng)的20.3%提高到31.4%;相比于傳統(tǒng)方法,淫羊藿苷的提取率提高了50%以上。本文為節(jié)約淫羊藿資源提供了依據(jù)。

淫羊藿提取物,淫羊藿黃酮苷酶,淫羊藿苷,朝藿定A、B、C

淫羊藿為小檗科(Berberidaceae)淫羊藿屬(EpimediumL.)多年生草本植物,在我國分布的種類有40余種。中國藥典(2010年版)規(guī)定,淫羊藿(EpimediumbrevicornumMaxim)、箭葉淫羊藿(EpimediumsagittatumMaxim)、柔毛淫羊藿(EpimediumpubescensMaxim)、朝鮮淫羊藿(EpimediumkoreanumNakai)四種淫羊藿地上部分,可用于中草藥。淫羊藿具有補腎陽、強筋骨、祛風濕等功效[1],其主要有效成分是淫羊藿黃酮,現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)70余種淫羊藿黃酮,淫羊藿中80%～90%以上的黃酮為淫羊藿苷(Icariin)、朝藿定A(Epimedin A)、朝藿定B(Epimedin B)、朝藿定C(Epimedin C);其中50%以上為淫羊藿苷,其他40%左右的黃酮為朝藿定A、B和C[2]。淫羊藿中主要黃酮的結構如圖1所示。

圖1 主要淫羊藿黃酮的結構Fig.1 Common epimedium flavonoids

表1 常見的淫羊藿黃酮Table 1 Common epimedium flavonoids

國內(nèi)淫羊藿提取物的質(zhì)量,以淫羊藿苷含量來表示[3-4]。淫羊藿苷具有防抑郁[5]、抗腫瘤[6]、抗氧化和增強機體免疫力[7]等功能,也具有抗皮膚老化、抗皺紋、美白等功能[8]。只有一個糖基的淫羊藿次苷或戊糖基苷元的活性則更高[9]。

目前雖可利用大孔樹脂吸附法或制備色譜分離法等對少量黃酮進行分離[10-14],但該操作復雜、產(chǎn)業(yè)化成本高;淫羊藿苷的提取方法較多[15]。也有利用酶轉化淫羊藿苷制備淫羊藿次苷、苷元的報道[16-17],但生物轉化制備淫羊藿苷的研究報道很少。

市銷的淫羊藿提取物中除了淫羊藿苷之外,還含有朝藿定A、B和C黃酮;為了提高從市銷的淫羊藿提取物提取淫羊藿苷的提取率,本文首先篩選了產(chǎn)淫羊藿黃酮苷酶微生物，利用其酶,以市銷的淫羊藿提取物為原料,分離提取淫羊藿苷,并利用酶轉化法將廢渣中的朝藿定A、B和C(主要成分)轉化為淫羊藿苷,提高淫羊藿苷的提取率,為節(jié)約淫羊藿資源提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

菌種Aspergillussp.y39、Aspergillussp.y90、Aspergillussp.y48 由本實驗室從大曲中分離得到;淫羊藿苷、朝藿定A、B、C標準品 南京廣潤生物制品有限公司;淫羊藿提取物(淫羊藿苷質(zhì)量分數(shù)為20%) 北京珅奧基醫(yī)藥科技有限公司、吉林省宏久生物科技股份有限公司、西安岳達植物科技有限公司產(chǎn)品;蘆丁 南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司產(chǎn)品;G60 F254薄層層析板 德國Merck公司;D-280大孔樹脂、硅膠(300～400目) 天津南開大學試劑廠;乙腈(色譜級) 美國天地(TEDIA)公司;甲醇等其他試劑 均為分析純(純度大于99.5%),天津科密歐化學試劑開發(fā)中心。

Waters 2695高效液相色譜分析儀、Waters 2996紫外檢測器 美國Waters公司;色譜柱Kromasil C18柱(5 μm,φ250 mm×4.6 mm) 大連中匯達科學儀器有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 廢渣淫羊藿混合黃酮制備 將淫羊藿提取物溶解于10倍重量體積的60%乙醇溶液中,上樣至與溶液等體積的D-280大孔脫色樹脂柱,反復吸附3～4次;再用約12倍柱體積60%乙醇溶液洗脫,減壓濃縮、待大量淫羊藿苷沉淀析出,真空抽濾沉淀,用50%冰凍乙醇溶液洗滌2次,干燥,得到第一批淫羊藿苷。

其母液減壓濃縮,溶解于適量的50%乙醇溶液,靜置1 d后有淡黃色淫羊藿苷沉淀析出;真空抽濾,再用50%冰凍乙醇溶液洗滌,干燥,得到第二批淫羊藿苷。

其母液再經(jīng)D-280大孔樹脂柱脫色、減壓濃縮、干燥,得到廢渣淫羊藿混合黃酮,用于轉化制備淫羊藿苷。

1.2.2 淫羊藿黃酮苷酶菌種的篩選 酶液的制備[18]:分別將A.sp.y39、A.sp.y90、A.sp.y48菌株,在含有0.3%淫羊藿混合黃酮和0.01%蘆丁的4%麥汁培養(yǎng)基中,30 ℃下?lián)u床培養(yǎng)6～7 d,離心除菌、加入3倍體積甲醇,過夜、沉淀酶蛋白,離心收集酶蛋白沉淀,溶解于1/10培養(yǎng)液體積的0.02 mol/L、pH5.0醋酸緩沖液,離心(7000 r/min,8 min)除渣,得到均有淫羊藿黃酮苷酶活力的三種酶液。

三種酶液分別與淫羊藿混合黃酮反應:3 mL各酶液與等體積的7%質(zhì)量濃度的淫羊藿混合黃酮溶液(用0.02 mol/L、pH5.0的醋酸緩沖液配制)混合,在45 ℃下?lián)u床反應,分別在3、6、9、12 h取樣,以薄層層析法(TLC法)檢測反應進行程度,確定淫羊藿混合黃酮轉化為淫羊藿苷的最佳產(chǎn)酶菌種。

1.2.3 酶轉化廢渣制備淫羊藿苷 將廢渣淫羊藿混合黃酮用0.02 mol/L、pH5.0醋酸緩沖液配制成7%質(zhì)量濃度的底物溶液,與等體積酶液混合,45 ℃下攪拌反應,在反應3、6、9、12 h時取樣,用TLC法檢測反應程度;若反應完全,加入3倍體積甲醇(純度大于99.5%),靜置過夜、離心(7000 r/min,8 min)收集上清,經(jīng)D-280樹脂脫色、減壓濃縮、干燥,得到淫羊藿苷含量高的反應物。將反應物溶解于其重量3倍的50%乙醇,靜置1 d后有淡黃色淫羊藿苷沉淀析出,真空抽濾、用50%冰凍乙醇溶液洗滌、干燥,得到酶轉化的淫羊藿苷。

1.2.4 淫羊藿黃酮的檢測 用薄層層析(TLC)法和高效液相色譜(HPLC)法檢測淫羊藿黃酮。

TLC法:用毛細管吸取樣品溶液,點樣于TLC板上,每個點相距0.4 cm,依照樣品濃度確定點樣次數(shù);在展開劑V(乙酸乙酯)∶V(丁酮)∶V(甲醇)∶V(水)=8∶7∶1∶1中展開、吹干,254 nm紫外線下觀察。TLC板中各淫羊藿黃酮含量比例,用Bandscan軟件(Glyko Inc.,1998)分析[19]。

HPLC法:稱取標準品各2 mg,淫羊藿提取物、酶反應產(chǎn)物等樣品各4 mg,分別溶于10 mL的50%乙醇中,制成0.2 mg/mL標準品溶液、0.4 mg/mL樣品溶液,經(jīng)0.45 μm膜過濾,待用。流動相,乙腈(A)-水(B):0～8 min,17% A～27% A;8～32 min,27% A,32～60 min,27% A～85% A;60～70 min,85% A,70～80 min,85% A～90% A;進樣量,10 μL;柱溫,35 ℃;體積流量,1.0 mL/min;檢測波長,273 nm。

2 結果與討論

2.1 市銷的淫羊藿提取物原料的分析

用HPLC法對三種市銷淫羊藿提取物(淫羊藿苷含量均為20%)進行檢測,結果如圖2所示。

圖2 市銷的淫羊藿提取物的HPLC圖Fig.2 The HPLC of epimedium extract注:1,朝藿定A;2,朝藿定B;3,朝藿定C;4,淫羊藿苷。

圖2中各淫羊藿黃酮的峰面積比例,可視為質(zhì)量分數(shù)的含量比例。北京珅奧基公司淫羊藿提取物中,朝藿定A、B、C和淫羊藿苷的質(zhì)量分數(shù)比約為6∶11∶25∶58;西安岳達公司淫羊藿提取物中上述四種物質(zhì)的質(zhì)量分數(shù)比約為5∶19∶19∶57;吉林宏久公司淫羊藿提取物中上述四種物質(zhì)質(zhì)量分數(shù)比則為6∶8∶25∶61。

由此可見,市銷的淫羊藿提取物中,淫羊藿苷和朝藿定A、B、C的含量比例約為60∶40,除了含有20%的淫羊藿苷,還含13%～14%左右的朝藿定A、B、C。

2.2 產(chǎn)淫羊藿黃酮苷酶的微生物篩選

為了充分利用上述淫羊藿黃酮,研究廢渣生物轉化,分別對A.sp.y39、A.sp.y90、A.sp.y48三種菌株所產(chǎn)的酶進行研究。結果表明,三種菌所產(chǎn)的酶均能水解淫羊藿黃酮,最佳產(chǎn)酶條件均為30 ℃下?lián)u床培養(yǎng)6～7 d。

預實驗結果表明西安岳達公司淫羊藿提取物酶反應效果好,所以將三種菌所產(chǎn)的酶液分別與西安岳達公司淫羊藿混合黃酮反應,在3、6、9、12 h取樣,進行TLC檢測,結果如圖3所示。用Bandscan軟件對圖3 TLC板中淫羊藿黃酮的含量比例進行分析,其結果(取三次實驗平均值)如表1所示。

圖3 不同菌所產(chǎn)的酶對朝藿定混合黃酮的轉化Fig.3 Conversion of epimediun flavonoids of second mother solution in different enzyme-reaction time注:1,淫羊藿苷元標準品;2,淫羊藿苷標準品;3,朝藿定A標準品;4,朝藿定B標準品;5,朝藿定C標準品，6:淫羊藿次苷I、II標準品，Y:淫羊藿提取物原料；S,淫羊藿苷分離后的母液黃酮；母液黃酮反應時間:a、b、c、d依次為3、6、9、12 h。

表1 不同菌酶、不同反應時間下各淫羊藿黃酮含量(%)Table 1 The epimedium flavonoids content in different enzyme-reaction time(%)

從圖3和表1可以看出,A.sp.y39菌酶與淫羊藿混合黃酮反應6 h,朝藿定A、B、C明顯減少,淫羊藿苷明顯增加;反應9 h和12 h,淫羊藿苷質(zhì)量含量分數(shù)從原料的56.5%,提高到85%～86%,而朝藿定A、B、C含量降低。說明,A.sp.y39菌酶能水解朝藿定A的末端3-O-葡萄糖基、朝藿定B的末端3-O-木糖基、朝藿定C的末端3-O-鼠李糖基,轉化為淫羊藿苷。因此,該酶適合于從朝藿定A、B、C制備淫羊藿苷。

A.sp.y90菌酶與混合黃酮反應3 h,有淫羊藿次苷生成;反應12 h,主要產(chǎn)物為淫羊藿次苷,其含量比例達48%,產(chǎn)物淫羊藿苷含量比例只有21%。說明,A.sp.y90菌酶不僅水解朝藿定A、B、C的末端3-O-糖基,得到淫羊藿苷,還進一步水解一個淫羊藿苷糖基,得到淫羊藿次苷。因此,該酶適合于從朝藿定A、B、C制備淫羊藿次苷。

A.sp.y48菌酶與混合黃酮反應12 h,主要產(chǎn)物是淫羊藿苷元和淫羊藿次苷,其含量比例分別為43%和31%。說明,A.sp.y48菌酶不僅能水解朝藿定A、B、C的末端3-O-糖基,得到淫羊藿苷,還進一步水解一個淫羊藿苷糖基,得到淫羊藿次苷,再水解一個淫羊藿次苷糖基,得到淫羊藿苷元。因此,該酶適合于從朝藿定A、B、C制備淫羊藿苷元和淫羊藿次苷。

綜上,從朝藿定A、B、C轉化制備淫羊藿苷的最佳產(chǎn)酶菌種為A.sp.y39,應用于如下實驗。

2.3 從淫羊藿提取物分離淫羊藿苷及其廢渣

利用D-280大孔樹脂分離法、結晶法,以各公司提供的淫羊藿提取物為原料,制備淫羊藿苷,并得到主要含朝藿定A、B、C的廢渣。

分別從北京珅奧基公司淫羊藿提取物、吉林宏久公司、西安岳達公司淫羊藿提取物中,分離淫羊藿苷,其母液經(jīng)脫色、濃縮、干燥,可得廢渣,結果如表2所示。

表2 淫羊藿苷及其廢渣含量及淫羊藿苷得率Table 2 Content of icariin and its waste offscum and the yield of icariin

從表2可知,從100 g北京珅奧基公司淫羊藿提取物中得到20.5 g淫羊藿苷(純度90%以上),得率為20.5%;其母液經(jīng)脫色、濃縮、干燥得到30.8 g廢渣,其中含朝藿定A、B、C及其他黃酮類物質(zhì)。從100 g吉林宏久公司淫羊藿提取物,得到20.3 g淫羊藿苷(純度90%以上),得率為20.3%;從母液得到28.9 g廢渣,其中含朝藿定A、B、C及其他黃酮類物質(zhì)。從150 g西安岳達公司淫羊藿提取物,得到30.5 g淫羊藿苷(純度90%以上),得率為20.3%;從母液得到52 g廢渣,其中含朝藿定A、B、C及其他黃酮類物質(zhì)。

由此可見,從各市銷的淫羊藿提取物(淫羊藿苷含量20%)中,均可以分離得20%左右的淫羊藿苷;其母液廢渣經(jīng)脫色干燥,可得到約30%重量得率的廢渣。進一步研究酶轉化上述廢渣,制備淫羊藿苷。

2.4 分離淫羊藿苷及其廢渣酶轉化制備淫羊藿苷的批量實驗

預實驗結果表明西安岳達公司淫羊藿提取物酶反應效果好,因此以下采用西安岳達公司的提取物為原料進行實驗研究。將150 g西安岳達公司淫羊藿提取物,溶解在1500 mL的60%乙醇溶液中,上樣于等體積D-280大孔脫色樹脂柱,反復吸附3～4次,用12倍柱體積60%乙醇溶液洗脫,洗脫液減壓濃縮、沉淀真空抽濾,再用50%冰乙醇洗沉淀、干燥,得到第一批淫羊藿苷20.8 g;經(jīng)HPLC檢測(圖略),純度90%以上。

其母液(第一次)再經(jīng)D-280大孔樹脂吸附脫色、減壓濃縮、干燥,得到母液總黃酮73 g;經(jīng)HPLC檢測,淫羊藿苷和朝藿定A、B、C含量比例為6.65∶21.2∶24.8∶47.4。

由此可知,第一次淫羊藿苷結晶過程中,淫羊藿苷含量(HPLC峰面積比)從原料的56.5%,下降到47.4%。但母液總黃酮中還含有大量的淫羊藿苷,需進行第二次結晶分離。向其母液總黃酮中,加入240 mL的50%乙醇,使朝藿定A、B、C溶解,靜置1 d后將沉淀真空抽濾,再用50%冰凍乙醇溶液洗2次,干燥,得到第二批淫羊藿苷9.7 g,經(jīng)HPLC檢測,純度90%以上。

其母液(第二次)再經(jīng)D-280大孔樹脂吸附脫色、減壓濃縮、干燥,得到廢渣52 g,經(jīng)HPLC檢測,朝藿定A、B、C和淫羊藿苷質(zhì)量分數(shù)比為10.5∶18.9∶44.2∶26.4。從淫羊藿提取物分離淫羊藿苷過程中,母液中黃酮組成的變化,如表3所示。

表3 淫羊藿黃酮的組成比例(%)Table 3 The epimedium flavonoid composition radio(%)

從表3可知,淫羊藿苷提取過程中,淫羊藿苷含量從原料中的56.5%降為26.4%,不能再結晶獲得淫羊藿苷。其廢渣母液中朝藿定A、B、C和淫羊藿苷質(zhì)量分數(shù)比為10.5∶18.9∶44.2∶26.4,即朝藿定A、B、C含量比例約為74%。

因此,利用酶轉化法,將廢渣母液中朝藿定A、B、C定向轉化為淫羊藿苷,提高其得率。52 g的上述第二次結晶后的母液廢渣,酶轉化9 h時,其80%以上的朝藿定轉化為淫羊藿苷。再經(jīng)D-280大孔樹脂分離、結晶,得到酶轉化的淫羊藿苷16.6 g,經(jīng)HPLC檢測(圖4),其純度達90%以上。

由此,從150 g西安岳達公司的淫羊藿提取物經(jīng)D-280樹脂柱脫色分離、2次結晶,得到含量90%以上的淫羊藿苷30.5 g,原料重量得率為20.3%,還得到52 g廢渣;經(jīng)酶轉化、分離得到含量90%以上的淫羊藿苷16.6 g,重量得率為11.1%;三次共得到純度90%以上的淫羊藿苷47.1 g,淫羊藿苷的得率由20.3%提高到31.4%。

圖4 淫羊藿苷產(chǎn)品HPLC圖譜Fig.4 HPLC chromatogram of Icariin product

3 結論

市銷的淫羊藿提取物中,除了含20%淫羊藿苷外,還含有13%～14%左右的朝藿定A、B、C,為了利用這部分資源,研究了A.sp.y39、A.sp.y90、A.sp.y48三種菌所產(chǎn)酶對朝藿定A、B、C的水解作用,確定最佳產(chǎn)酶菌種為A.sp.y39。

以150 g市銷的西安岳達公司淫羊藿提取物(淫羊藿苷含量20%)為原料,經(jīng)脫色、兩次結晶,得到淫羊藿苷30.5 g(得率為20.3%)及主要含朝藿定A、B、C的廢渣52 g;利用A. sp.y39菌所產(chǎn)酶,將廢渣中的朝藿定A、B、C轉化成淫羊藿苷16.6 g(得率為11.1%),淫羊藿苷的得率由傳統(tǒng)方法的20.3%提高到31.4%;相比于傳統(tǒng)方法,淫羊藿苷的提取率提高了50%以上。本文為淫羊藿黃酮資源有效的利用提供了依據(jù)。

[1]國家藥典委員會中國藥典[S]. 北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:306.

[2]金鳳燮主著. 天然產(chǎn)物生物轉化[M]. 北京:化學工業(yè)出版社,2008:258-272.

[3]Xu Y Q,Li Z Z,Yuan L,et al. Variation of Epimedins A-C and Icariin in Ten Representative Populations of Epimedium brevicornu Maxim,and Implications for Utilization[J]. Chem Biodivers,2013,10(4):711-721.

[4]郭青,吳曉燕,寧青,等. 淫羊藿莖葉中5種黃酮類成分分析及質(zhì)量評價[J]. 中草藥,2011,42(10):2028-2032.

[5]陳洋,黃建華,寧友,等. 淫羊藿苷藥理作用的分子機制研究進展[J]. 中西醫(yī)結合學報,2011(11):1179-1184.

[6]許碧連,吳鐵,王暉,等. 淫羊藿總黃酮藥理作用的研究現(xiàn)狀[J]. 中國臨床藥理學與治療學,2003,8(1):115-117.

[7]王昌林,李星,王粵新. 淫羊藿及其有效成分的藥理研究概況[J]. 中國中藥雜志,1998,23(3):55-57.

[8]樸俊星,盧浩植,金德姬,等. 一種含有淫羊藿苷的水解產(chǎn)物的化妝品組合物:韓國,200680044755.5[P]. 2012-02-22.

[9]Raja Indran,Inthrani,Zhang S J,et al. Selective Estrogen Receptor Modulator Effects of Epimedium Extracts on Breast Cancer and Uterine Growth in Nude Mice[J]. Planta Medica,2014,80(1):22-28.

[10]周國保,張文清. 淫羊藿總黃酮微波提取工藝研究[J]. 江西化工,2013(3):46-49.

[11]劉明霞. 淫羊藿總黃酮的提取方法研究[J]. 按摩與康復醫(yī)學,2011,2(7):50.

[12]馬軼,孟憲生,包永睿,等. 大孔吸附樹脂對淫羊藿中總黃酮及淫羊藿苷吸附純化的研究[J]. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥,2009,5(9):48-51.

[13]朱靖博,李丹鳳,邱煥杰,等. HPLC/ESI-MS分析淫羊藿黃酮苷類化合物[J]. 大連工業(yè)大學學報,2009,28(5):321-325.

[14]Zhang H F,Yang T S,Li Z Z,et al. Simultaneous extraction of epimedin A,B,C and icariin from Herba Epimedii by ultrasonic technique[J]. Ultrason Sonochem,2008,15(4):376-385.

[15]龍庚,陳亮,趙威,等. 淫羊藿苷的提取工藝研究進展[J]. 江蘇調(diào)味副食品,2016(3):17-19.

[16]賈東升,賈曉斌,薛景,等. 蝸牛酶轉化淫羊藿苷制備淫羊藿苷元的研究[J].中國中藥雜志,2010,35(7):857-860.

[17]彭靜,馬益華,陳彥,等. 微乳化-凝膠法制備微球固定化蝸牛酶并生物轉化淫羊藿苷研究[J]. 中草藥,2015,46(22):3326-3332.

[18]匡瑩,魚紅閃. 淫羊藿苷糖苷酶產(chǎn)生菌的篩選及其酶反應條件[J]. 大連輕工業(yè)學院學報,2006,2:89-92.

[19]Wang D M,Yu H S,Song J G,et al. Enzyme kinetics of ginsenosidase type IV hydrolyzing 6-O-multi-glycosides of protopanaxatriol type ginsenosides[J]. Process Biochem,2012,47(1):133-138.

Bioconversion utilization of waste-residue from icarrin extraction

FU Ying-xin,LIU Chun-ying,GUO Mei-juan,ZHAO Yao,JIN Feng-xie,YU Hong-shan*

(College of Biotechnology,Dalian Polytechnic University,Dalian 116034,China)

In current domestic situation,the by-products containing with flavonoids such as epimedin A,B,C was not being used during the icarrin production from epimedium extract. In this paper,the enzyme fromA.sp.y 39 strain was filtered for transformating epimedin A,B,C in waste offscum of epimedium extract. The 150 g of the market epimedium extract was dissolved in 60% ethyl alcohol for decoloring by D-280 macroporous resin,and then 30.5 g of icariin was obtained from above discolored epimedium extract by crystallization method. Then,16.6 g of icariin was obtained from the waste offscum containing epimedin A,B and C by the enzyme fromA.sp.y39 strain. Finally,47.1 g of icariin(the purity was over 90%)was obtained from 150 g of epimedium extract by above enzyme transformation methods,the yield of icariin was rised from 20.3% to 31.4%. Compared with the traditional method,the extraction rate of icariin was increased by more than 50%,which provided the basis for saving epimedium resources.

eptimedium extract;epimedium flavonoids;icariin;epimendin A,B,C

2016-09-19

富盈昕(1990-)，女，在讀碩士研究生，研究方向：天然產(chǎn)物生物轉化，E-mail：735974001@qq.com。

*通訊作者:魚紅閃(1968-)，男，博士，教授，研究方向：天然產(chǎn)物生物轉化，E-mail：hongshan@dlpu.edu.cn。

“重大新藥創(chuàng)新”科技重大專項(2012ZX09503001-003)；國家高端外國專家項目(GDT20152100019)資助。

TS255.1

A

1002-0306(2017)08-0167-06

10.13386/j.issn1002-0306.2017.08.024