頂果木組培芽苗生根培養(yǎng)基的優(yōu)化探究

曾建英

摘 要 頂果木為中國特有種，屬國家重點(diǎn)保護(hù)植物。為促進(jìn)頂果木的推廣種植，優(yōu)化頂果木組培芽苗的生根培養(yǎng)基，探討了外植體材料的采集與消毒、芽的誘導(dǎo)分化、繼代增殖培養(yǎng)及組培苗的生根培養(yǎng)等方面對頂果木生根成活的影響及其最優(yōu)組合，旨在為建立頂果木優(yōu)良無性系繁殖體系打下良好的基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞 頂果木；組織培養(yǎng)；生根培養(yǎng)基；優(yōu)化

中圖分類號：S792.99 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2017.03.060

頂果木又名頂果樹，不同的地方有不同的叫法，別名有毛榔、白椿等，頂果木屬于蘇木科高大落葉喬木，其外形高大通直，木材能夠久藏，可制家具和裝修用料；樹頂和枝丫含有豐富的木纖維素，可用作纖維板和紙張的制作材料；頂果樹開花鮮艷，可以用作行道樹裝飾街景作為風(fēng)景樹。近年來，頂果樹作為珍貴樹種，受到越來越多的人的重視和了解，社會對頂果樹的需求量也逐漸增加，但由于頂果樹稀少，已被國家列為三級保護(hù)樹種，頂果樹的種子育苗數(shù)量也逐漸受到限制。為了解決頂果樹稀少這一問題，發(fā)展頂果樹的繁殖培養(yǎng)技術(shù)是主要途徑。

1 材料與方法

1.1 材料

研究材料為頂果木的幼嫩葉芽，選取頂果木的幼苗進(jìn)行萌芽促生。任意選取頂果木的一段枝干，并截取30 cm，將截取出來的頂果木枝干上的葉芽作為外植體培養(yǎng)物。

1.2 方法

1.2.1 外植體采集方式

任意剪取頂果木上一段枝干，將枝干上葉片剪除，留取枝干上新生萌芽，清洗干凈后剪取新生萌芽約1.5～2.0 cm作為外植體，采集60棵外植體，并將外植體放置在干凈器皿上等待消毒。

1.2.2 頂果木外植體消毒

外植體的消毒方式主要選用3種，將60棵外植體均分3組，分別按照以下方式消毒：（1）將過氧化氫稀釋成含量為10%的消毒水，消毒外植體8 min；（2）將酒精稀釋成含量為70%的消毒水，用來消毒外植體10 s，隨后再用第一種消毒方式消毒5 min；（3）采用含量0.1%的氯化汞稀釋液，添加2、3滴混合液消毒外植體6 min。60棵外植體消毒完畢之后再采用無菌清水清洗3到5次，并采用濾紙吸干外植體上附著水滴。最后將60棵外植體接種在1/2 MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA誘導(dǎo)培養(yǎng)基中。

1.2.3 外植體誘導(dǎo)分化

60棵（三組）外植體分別經(jīng)過3種消毒方式后接種在培養(yǎng)基上，并將外植體均分2份，分別采[1]用全光照或暗培養(yǎng)的培養(yǎng)方式進(jìn)行頂果樹幼芽誘導(dǎo)分化。其中，暗培養(yǎng)誘導(dǎo)分化先進(jìn)行7 d的暗培養(yǎng)，隨后進(jìn)行全光培養(yǎng)。3組外植體均培養(yǎng)30 d，隨后觀察記錄外植體的生長情況。頂果樹外植體材料經(jīng)過消毒和芽誘導(dǎo)分化后的結(jié)果見表1。

1.2.4 外植體增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)

1.2.4.1 外植體增殖培養(yǎng)方式

將誘導(dǎo)成功的外植體分別接種在三種培養(yǎng)基上（6-BA、KT、NAA三種培養(yǎng)基）[2]，培養(yǎng)溫度和光照條件分別設(shè)置為25～30 ℃和8～10h/d。

1.2.4.2 外植體生根培養(yǎng)方式

增殖外植體苗芽后進(jìn)行生根培養(yǎng)，共選用三種生根培養(yǎng)基（NAA、IBA、6-BA）。

外植體的增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)均采用正交設(shè)計方法，兩種培養(yǎng)方式因子與水平見表2。

2 結(jié)果與分析

2.1 外植體消毒與誘導(dǎo)分化統(tǒng)計結(jié)果

由本次試驗可知，在3種消毒方式對比中，以第二種消毒方式最佳，即：先70%酒精消毒10 s，再用10%的過氧化氫消毒5 min；3種光照培養(yǎng)方式中以暗培養(yǎng)+全光培養(yǎng)的誘導(dǎo)方式最好。經(jīng)統(tǒng)計，外植體平均消毒成功率和平均誘導(dǎo)成功率分別為80.0%和55.2%。

2.2 頂果樹芽的繼代增殖培養(yǎng)統(tǒng)計結(jié)果

外植體繼代增殖培養(yǎng)40 d后試驗結(jié)果見表3。由表3可知：在4種試驗因子中，序號2和序號4的因子增殖系數(shù)極差最大，分別為0.8和0.7，由此可知，序號2和序號4是重要因子。結(jié)合正交試驗，可以得出4種較好的組合水平。分別為：A組合（MS+0.3mg/L 6-BA+0.5mg/L KT+0.2mg/L NAA）；B組合（MS+0.3mg/L 6-BA+0.5mg/L KT+0.4mg/L NAA）；C組合（MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L KT+0.2mg/L NAA）；D組合（MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L KT+0.4mg/L NAA）。

按以上4種組合配制培養(yǎng)基又做了一次輔助試驗，結(jié)果表明A、B、C、D組合對應(yīng)繁殖系數(shù)為3.2、3.6、2.8和2.4。由此可知，A組合的增殖效果較好。

2.3 組培苗的生根培養(yǎng)統(tǒng)計結(jié)果

外植體增殖之后進(jìn)行生根試驗培養(yǎng)基培養(yǎng)[3]，外植體生根培養(yǎng)30d后進(jìn)行正交試驗，正交試驗結(jié)果見表4。由表4可知，在1-4序號中，第4序號極差較大，表明這一因子是外植體的主要調(diào)節(jié)因子。結(jié)合正交試驗，可以得知四種較好的正交組合，分別為：E組合（1/2MS+0.5mg/L NAA+0.5mg/L IBA+0.1mg/L 6-BA）；F組合（1/2MS+0.5mg/L NAA+0.5mg/L IBA+0.3mg/L 6-BA）；G組合（1/2MS+0.5mg/L NAA+1.0mg/L IBA+0.1mg/L 6-BA）；H組合（1/2MS+0.5mg/L NAA+1.0mg/L IBA+0.3mg/L 6-BA）。

以上E、F、G、H四種組合的生根培養(yǎng)基生根概率分別為0.62%、0.82%、0.65%、0.58%，由此可知，F(xiàn)組合的生根率最佳。

3 結(jié)論

當(dāng)前我國在推廣頂果樹種植中，培育良種和育苗是急需解決的問題。為了保障頂果樹的育苗數(shù)量和生長質(zhì)量，本文進(jìn)行了培養(yǎng)試驗，將頂果樹的葉芽作為外植體，總結(jié)一種頂果樹的組織培養(yǎng)繁殖技術(shù)。試驗結(jié)果表明，在外植體3種消毒方式對比中，以第二種消毒方式最佳，即70%酒精+10%的過氧化氫消毒方式；在3種誘導(dǎo)分化對比中，以暗培養(yǎng)7 d+全光培養(yǎng)的方式最佳；在繼代增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)試驗中，兩者的最佳培養(yǎng)基組合分別為A組合和F組合，兩者的增殖系數(shù)和生根率可達(dá)到3.6和82%。

參考文獻(xiàn)

[1]黎素平，朱昌叁，廖英漢，等.頂果木扦插繁殖技術(shù)研究[J].林業(yè)實用技術(shù)，2011（10）：25-27.

[2]黎素平，郭耆，朱昌叁.頂果木高產(chǎn)栽培技術(shù)[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2011（14）：229-230.

[3]徐位力，許潮漩，林榮華.頂果木組培增殖培養(yǎng)基的優(yōu)化[J].廣東林業(yè)科技.2014，30（4）：58-61.

（責(zé)任編輯：趙中正）