VEGF、VEGFR-1和MMP-9對良惡性胸腔積液的診斷價值

趙斌斌 李云霞 扁長萍 朱運奎

VEGF、VEGFR-1和MMP-9對良惡性胸腔積液的診斷價值

趙斌斌 李云霞 扁長萍 朱運奎

目的 探討血管內皮生長因子(VEGF)、受體VEGFR-1和基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)表達在良、惡性胸腔積液鑒別診斷中的價值。方法 采用ELISA 法，檢測35例惡性胸腔積液、33 例良性胸腔積液患者胸腔積液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9 表達水平，并進行相關性比較分析。結果 惡性胸腔積液組中VEGF、VEGFR-1表達均明顯高于良性胸腔積液，MMP-9表達明顯低于良性胸腔積液，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。惡性胸腔積液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9表達水平呈正相關。VEGF，VEGFR-1和MMP-9與惡性胸腔積液的病理類型無相關性。結論 胸腔積液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9表達可以作為良性和惡性胸腔積液鑒別診斷的標志物。

胸腔積液;惡性/良性;血管內皮生長因子;血管內皮生長因子受體-1；基質金屬蛋白酶-9

The Diagnostic Value of VEGF,VEGFR-1 and MMP-9 in Malignant/benign

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:690～692)

胸腔積液常見病因有結核性胸膜炎和惡性胸腔積液[1]。目前由于診斷技術的不足仍有部分胸腔積液患者病因不能確診。血管內皮生長因子(VEGF)與其受體VEGFR結合，促進腫瘤血管增殖，對胸腔積液的形成起著重要的作用[2]?；|金屬蛋白酶(MMPs)能夠通過降解細胞基質及基膜，增加血管壁通透性，參與惡性胸腔積液的形成[3]。目前已經證實肺癌患者VEGF及MMP-9水平顯著升高[4]。在臨床工作中，胸腔積液較組織標本取材容易，創(chuàng)傷小，研究價值較大。故本研究的目的是檢測胸腔積液VEGF，VEGFR-1和MMP-9的水平，以探討其在良惡性胸腔積液鑒別診斷中的作用。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選擇平涼市人民醫(yī)院2011年12月至2014年12月住院初診胸腔積液患者共68例，未經任何治療。

1.2 分組

患者入院超聲定位后胸腔穿刺送胸腔積液行常規(guī)檢驗。首先根據(jù)Light等提出的標準區(qū)分為滲出液組及漏出液組。滲出液中胸腔積液蛋白質/血清蛋白質比值大于0.5；胸液乳酸脫氫酶/血清乳酸脫氫酶比值大于0.6；胸液乳酸脫氫酶>血清乳酸脫氫酶正常上限的2/3。再對滲出液組的患者依據(jù)組織病理、細胞免疫學、影像學等資料分為為結核性胸膜炎組、惡性胸腔積液組及肺炎旁積液組。結核性胸腔積液診斷依據(jù)結核相關檢查或診斷性抗結核治療有效而確診。惡性胸腔積液診斷依據(jù)胸腔積液脫落細胞或者病灶組織的病理學檢查確診。

1.3 標本的采集與保存

患者入院治療前結合超聲定位穿刺抽液進行常規(guī)、生化、免疫學及脫落細胞學檢查。另取10 ml高速離心取上清液2 ml置管保存。

1.4 VEGF，VEGFR-1和MMP-9的測定

4 ℃解凍胸腔積液標本后，ELISA試劑盒(R&D公司生產)對胸腔積液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9蛋白測定。

1.5 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 16.0軟件對數(shù)據(jù)資料進行統(tǒng)計學處理，計量資料組間差異采用成組t檢驗,比較采用配對t檢驗，相關性分析使用線性回歸，P<0.05時差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 胸腔積液患者基本情況及病因比較

胸腔積液病因：惡性胸腔積液的病因中非小細胞肺癌21例、小細胞肺癌3例、間質瘤1例、其他(乳腺淋巴瘤、腎臟癌、消化器官腫瘤等)10例；良性胸腔積液的病因中結核性胸膜炎25例、其他(肺炎、心衰等)8例。依據(jù)標準入選患者共68例，根據(jù)分組標準分為惡性胸腔積液組和良性胸腔胸腔組。惡性胸腔積液組35例，其中男性患者19例，女性患者16例，平均年齡(63.26±14)歲，吸煙史(31.35±14.60)年。良性胸腔積液組33例，其中男性患者11例，女性患者12例，平均年齡(57.48±21)歲，吸煙史(28.64±35.20)年。惡性胸腔積液組和良性胸腔積液組在年齡、性別及吸煙史因素比較，P>0.05，無統(tǒng)計學意義。

2.2 良、惡性胸腔積液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9表達的比較

惡性胸腔積液組胸腔積液中VEGF、VEGFR-1表達均明顯高于良性胸腔積液(P<0.05)，惡性胸腔積液組胸腔積液中MMP-9表達均明顯低于良性胸腔積液(P<0.05)，見表1。

表1 良、惡性胸腔積液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9表達

2.3 良、惡性胸腔積液中VEGF、VEGFR-1與MMP-9相關性分析

相關性分析顯示,惡性胸腔積液中VEGF和VEGFR-1，VEGFR-1和MMP-9，VEGF和MMP-9蛋白表達呈正相關(γ=0.51,γ=0.46,γ=0.58，P<0.05)。良性胸腔積液中VEGF、VEGFR-1和MMP-9蛋白間表達均無相關性(P>0.05)。

2.4 惡性胸腔積液組中不同腫瘤類型VEGF、VEGFR-1和MMP-9表達

VEGF、VEGFR-1與MMP-9蛋白在不同腫瘤類型中表達，差異無統(tǒng)計學意義，P>0.05，見表2。

表2 惡性胸腔積液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9表達的比較

3 討論

腫瘤發(fā)生浸潤和轉移的必要條件是血管形成，VEGF可以和血管內皮細胞表面的2種膜受體VEGFR-1和VEGFR-2結合，組成血管生成的信號轉導系統(tǒng)[5-6]，是目前發(fā)現(xiàn)的最重要的促血管生長因子。血管通透性增加，血漿蛋白外滲是胸腔積液形成的主要機制之一。VEGF與受體結合激活酪氨酸激酶活性，誘發(fā)受體酪氨酸殘基自身磷酸化，引起下游信號轉導，增加毛細血管的通透性，提供胸腔積液形成的微環(huán)境[7]。以往許多研究一樣，我們的實驗中VEGF在惡性胸腔積液中表達明顯升高，可以作為診斷惡性胸腔積液的一個腫瘤指標[8-9]。VEGFR-1是惡性胸腔積患者的獨立的預后因子[10]，但其在鑒別良惡性胸腔積液的價值仍不明確。我們的研究惡性胸腔積液中VEGFR-1的表達明顯高于良性胸腔積液，提示胸腔積液中VEGFR-1的水平可以作為鑒別良、惡性胸腔積液的有用的分子標記物。

MMP-9除了降解細胞外基質外，還可增大細胞間質空隙，提供腫瘤血管形成空間，促進腫瘤血管形成。我們實驗中MMP-9在良性胸腔積液中的表達明顯增高，與Alfonso的結果不同[11]，原因可能與國內良性胸腔積液中結核性胸膜炎發(fā)病率較高，而Alfonso實驗中的良性胸腔積液中以肺炎旁積液等為主有關。最后，我們通過相關性分析發(fā)現(xiàn)，VEGF和VEGFR-1，VEGF和MMP-9，VEGFR-1和MMP-9表達呈正相關，提示其在胸腔積液形成過程中有協(xié)同作用。

[1] Liam CK，Lim KH，Wong CM.Causes of pleural exudates in a region with a high incidence of tuberculosis〔J〕.Respirology，2000，5(1):33-38.

[2] Yeh HH，Lai WW，Chen HH，et al.Autocrine IL-6-induced Stat3 activation contributes to the pathogenesis of lung adenocarcinoma and malignant pleural effusion〔J〕.Oncogene，2006，25(31):4300-4309.

[3] Oikonomidi S，Kostikas K，Kalomenidis I，et al.Matrix metalloproteinase levels in the differentiation of parapneumonic pleural effusions〔J〕.Respiration，2010，80(4):285-291.

[4] 李 杰.MMP-9和VEGF的表達對非小細胞肺癌預后價值的評估〔J〕.中國現(xiàn)代醫(yī)生,2012,50(16):58-60.

[5] Byrne AM,Bouchier-Hayes DJ,Harmey JH.Angiogenic and cell survival functions of vascular endothelial growth factor(VEGF)〔J〕.J Cell Mol Med,2005,9(4):777-794.

[6] Takahashi H,Shibuya M.The vascular endothelial growth factor(VEGF)/VEGF receptor system and its role under physiological and pathological conditions〔J〕.Clin Sci(Lond),2005,109(3):227-241.

[7] Matsumori Y，Yano S，Goto H，et al.ZD6474，an inhibitor of vascular endothelial growth factor receptor tyrosine kinase，inhibits growth of experimental lung metastasis and production of malignant pleural effusions in a non-small cell lung cancer model〔J〕.Oncol Res,2006，16(1):15-26.

[8] Fiorelli A，Vicidomini G，Di Domenico M，et al.Vascular - endothelial growth factor in pleural fluid for differential diagnosis of benign and malignant origin and its clinical applications〔J〕.Interact Cardiovasc Thorac Surg，2011，12(3):420-424.

[9] Zhou WB，Bai M，Jin Y.Diagnostic value of vascular endothelial growth factor and endostatin in malignant pleural effusions〔J〕.Int J Tuberc Lung Dis，2009，13(3):381-386.

[10] Hooper CE,Elvers KT,Welsh GI,et al.Maskelld VEGF a- nd sVEGFR-1 in malignant pleural effusions:Association with survival and pleurodesis outcomes〔J〕.Lung Cancer，2012,77(2):443-449.

[11] Alfonso F，F(xiàn)loriana M，Morena F，et al.The value of matrix metalloproteinase-9 and vascular endothelial growth factor receptor 1 pathway in diagnosing indeterminate pleural effusion〔J〕.Interactive Cardio Vascular Thoracic Surgery，2013,16(3):263-269.

(編輯：甘 艷)

Pleural Effusion

ZHAOBinbin,LIYunxia,BIANChangping,etal.

PingliangPeople’sHospital,Pingliang,744000

Objective To investigate the value of vascular endothelial growth factor(VEGF)，its soluble receptor VEGFR-1 and matrix metalloproteinase-9(MMP-9)in differentiating benign from malignant pleural effusion.Methods Using ELISA，the levels of VEGF，VEGFR-1and MMP-9 in pleural effusion in 35 patients with malignant pleural effusion and 33 with benign pleural effusion were detected and compared.Results The VEGF,VEGFR-1 levels in malignant pleural fluid were markedly higher than those in benign pleural effusion，the MMP-9 levels in malignant pleural fluid were markedly lower than those in benign pleural effusion with a significant difference among VEGF，VEGFR-1 and MMP-9(P<0.05).In the pleural fluids,the values VEGF,VEGFR-1 and MMP-9 were significantly related to each other(P<0.05).There was no significant association among VEGF，VEGFR-1 and MMP-9 in patients with pathological type.Conclusion The measurement of VEGF,VEGFR-1 and MMP-9 levels in the pleural effusion could be useful.

Pleura effusion;Malignant/benign;Vascular endothelial growth factor(VEGF);Vascular endothelial grow factor receptor-1(VEGFR-1);Matrix metalloproteinase-9(MMP-9)

744000 甘肅省平涼市人民醫(yī)院(趙斌斌，李云霞，扁長萍)；730000 解放軍蘭州軍區(qū)總醫(yī)院(朱運奎)

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.04.051

R734.2

A

1001-5930(2017)04-0690-03

2016-06-08

2016-11-04)