游 猛,張秋亞,王曉昌,馬曉妍
(西安建筑科技大學(xué)環(huán)境與市政工程學(xué)院/ 國家城市非傳統(tǒng)水資源開發(fā)利用國際科技合作基地/ 西北水資源與環(huán)境生態(tài)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/ 陜西省污水處理與資源化工程技術(shù)研究中心/ 陜西省環(huán)境工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,陜西 西安 710055)
A2/O工藝處理污水中雌激素活性和典型雌激素水平變化
游 猛,張秋亞,王曉昌,馬曉妍①
(西安建筑科技大學(xué)環(huán)境與市政工程學(xué)院/ 國家城市非傳統(tǒng)水資源開發(fā)利用國際科技合作基地/ 西北水資源與環(huán)境生態(tài)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/ 陜西省污水處理與資源化工程技術(shù)研究中心/ 陜西省環(huán)境工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,陜西 西安 710055)
針對水環(huán)境中內(nèi)分泌干擾物低濃度、難去除和高危害的特點(diǎn),為全面了解污水處理過程中雌激素水平和效應(yīng)的變化情況,采用HPLC-UV-FLD分析了污水中4種固醇類雌激素的濃度水平,采用重組酵母菌雌激素篩檢法(YES)評價(jià)了城市污水處理流程(A2/O)中污水的雌激素活性,同時(shí)采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測污水處理過程中雌二醇(E2)的濃度水平。結(jié)果表明,出水中雌酮(E1)質(zhì)量濃度最高,為87.97 ng·L-1,雌二醇(E2)質(zhì)量濃度最低,為5.50 ng·L-1,固醇類雌激素水平去除率為88.83%~95.69%。A2/O系統(tǒng)對雌激素活性的去除率為73.33%,但出水仍具有一定的雌激素活性,雌激素當(dāng)量EEQ為1.92 ng·L-1。ELSIA檢測得雌二醇(E2)質(zhì)量濃度為10.01~82.82 ng·L-1,去除率為88.23%,與YES法檢測結(jié)果具有一致性。ELISA檢測可以成為體外檢測的一個重要補(bǔ)充。
A2/O工藝;雌激素;雌激素活性;酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA);去除率
環(huán)境雌激素(environmental estrogens,EEs)指具有雌激素活性或者抗雄激素效應(yīng),能夠模擬或者干擾天然雌激素正常生理和生化作用的一類化合物。近年來,激素類藥物被廣泛用于人類日常生活和養(yǎng)殖業(yè)中,造成排放到環(huán)境中的雌激素種類日益增多[1]。固醇類是環(huán)境中常見的雌激素物質(zhì),如雌酮(E1)、雌二醇(E2)、雌三醇(E3) 和17α-乙炔基雌二醇(EE2)。AERNI等[2]研究指出污水廠出水中E1、E2和EE2質(zhì)量濃度分別為51、6和2 ng·L-1。WANG等[3]在一些地表水中檢測到E1和E2質(zhì)量濃度分別高達(dá)7.4和55.8 ng·L-1。由于雌激素物質(zhì)的難降解性和穩(wěn)定性,污水處理廠出水成為水環(huán)境中雌激素的重要來源之一[4]。
化學(xué)方法檢測到的單一雌激素濃度不能揭示其對水環(huán)境的實(shí)際生態(tài)風(fēng)險(xiǎn),而生物效應(yīng)評價(jià)彌補(bǔ)了這方面的不足。檢測雌激素活性的體外方法包括重組酵母菌法(YES)、細(xì)胞增殖法和酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)等。其中重組酵母菌法是傳統(tǒng)的評價(jià)水環(huán)境雌激素效應(yīng)的方法[5],酶聯(lián)免疫吸附法則是基于抗原-抗體的特異性反應(yīng)原理,主要用來檢測細(xì)胞和血液中雌激素含量。A2/O工藝因其工藝成熟、便于管理、對有機(jī)物去除效果好以及出水水質(zhì)穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于污水處理。筆者分別采用化學(xué)分析、重組酵母菌法和酶聯(lián)免疫法對A2/O工藝處理前后水樣的典型固醇類雌激素水平和雌激素活性進(jìn)行全面研究,并對3者進(jìn)行比較,以期為水環(huán)境的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評價(jià)提供依據(jù)。
1.1 化學(xué)試劑
E1、E2、E3、EE2以及鄰硝基酚β-D-半乳糖苷(o-Nitrophenylβ-D-galactopyranoside,ONPG)為超級純,購自Sigma-Aldrich公司;無氨基酵母氮堿、DO和SD溶液所用的氨基酸均為超級純,購于Difco公司;HPLC級二甲基亞砜(DMSO)、甲醇和乙酸乙酯購自天津科密歐公司;試驗(yàn)用水均為超純水。
1.2 水樣的采集與預(yù)處理
污水來源于以A2/O為主要處理工藝的西安市某污水廠各處理單元的進(jìn)出水。選取細(xì)格柵出水(S1)、曝氣沉砂池出水(S2)、初沉池出水(S3)、好氧池出水(S4)、二沉池出水(S5)和加氯消毒出水(S6)6個取樣點(diǎn),污水處理工藝流程及取樣點(diǎn)如圖 1 所示。水樣取回后,立即進(jìn)行如下預(yù)處理:各水樣用玻璃纖維膜(0.45 μm,Millipore,GF/B)進(jìn)行過濾,1 L濾液用固相萃取小柱(Oasis HLB 6 mL/ 200 mg Cartridge,Waters)進(jìn)行濃縮富集。具體操作如下:依次經(jīng)10 mL乙酸乙酯、10 mL甲醇和10 mL超純水通過固相萃取小柱進(jìn)行潤濕活化,中間不允許填料抽干。使水樣連續(xù)通過固相小柱,調(diào)節(jié)真空泵的真空度,使流速保持在5~10 mL·min-1。水樣全部過濾完后再用10 mL純水洗滌,繼續(xù)真空抽氣干燥15 min,將固相小柱放在離心機(jī)中離心15 min,轉(zhuǎn)速為3 500 r·min-1,離心半徑為81 mm。最后用10 mL乙酸乙酯洗脫柱子,收集洗脫液,用高純氮?dú)獯蹈?得到萃取物。對于化學(xué)檢測,萃取物用1 mL甲醇進(jìn)行溶解;雌激素活性檢測時(shí),萃取物用500 μL DMSO溶解并進(jìn)行梯度稀釋;酶聯(lián)免疫法分析時(shí),萃取物用φ=1%的DMSO溶解,最終濃縮倍數(shù)為100倍。
圖1 污水廠處理工藝流程圖及取樣點(diǎn)Fig.1 Technological flowchart of the sewage treatment plant and sampling sites
1.3 分析方法
1.3.1 化學(xué)分析法
雌激素E1、E2、E3和EE2采用高效液相色譜儀(日本分光LC-2000)測定。HPLC色譜柱為Agilent 5 TC-C18 (250 mm×4.6 mm);流動相為乙腈和水,兩者體積比例為60∶40,流動相流速設(shè)為1 mL·min-1,柱溫為30 ℃。檢測器為紫外(MD-2010)和熒光檢測器(FP-2020)聯(lián)用;紫外檢測器波長為280 nm,熒光檢測器吸收波長和發(fā)射波長分別為227和315 nm;進(jìn)樣體積為100 μL,每個物質(zhì)的出峰時(shí)間如圖2所示。
圖2 高效液相檢測方法的出峰時(shí)間Fig.2 Times of peaking in HPLC
1.3.2 重組酵母菌法
雌激素活性采用中國科學(xué)院生態(tài)環(huán)境中心建立的酵母雙雜交雌激素活性評價(jià)方法[6]。將酵母菌置于SD培養(yǎng)基中,在30 ℃、130 r·min-1條件下培養(yǎng)36 h。用SD培養(yǎng)液稀釋至600 nm處吸光度為0.75左右,吸取菌液995 μL于1.5 mL滅菌離心管中,加入5 μL樣品,混勻。每個樣品設(shè)6個梯度。將200 μL混合菌液轉(zhuǎn)移到96孔板中,每個濃度設(shè)置3個平行,在30 ℃、800 r·min-1條件下暴露2 h。測定菌懸液在600 nm處的吸光度值,隨后每孔棄去150 μL,加入120 μL測試緩沖液和20 μL氯仿,以1 200 r·min-1振蕩破壁15 min,加入40 μL ONPG,于30 ℃、800 r·min-1條件下培養(yǎng)顯色60 min。顯色結(jié)束后,每孔加入100 μL 1 mol·L-1碳酸鈉溶液,終止反應(yīng)。吸取200 μL上清液至新96孔板中,測定420 nm處吸光度。同時(shí),以DMSO作為陰性對照,以E2作為陽性對照。
β-半乳糖苷酶活性(U)和雌激素當(dāng)量(EEQ,QEE)計(jì)算公式為
(1)
(2)
式(1)~(2)中,t為從加入ONPG到溶液顯色時(shí)的反應(yīng)時(shí)間,取值60 min;V為菌液體積,取值0.2 mL;A600和A420分別為菌液在600和420 nm處的光密度值;A420′為空白對照在420 nm處的光密度值;D為稀釋因子,取值6.6。ρ(EC50,E2)為雌二醇的半數(shù)有效濃度(EC50),取值18.33 ng·L-1;ρ(EC50,樣品)為實(shí)際樣品的EC50值,ng·L-1。
1.3.3 酶聯(lián)免疫吸附法
E2測定根據(jù)試劑盒說明書(Estradiol,DRG)進(jìn)行操作,簡述如下:將標(biāo)準(zhǔn)品和濃縮樣品分別用新的取樣吸頭取25 μL加入到相應(yīng)的微孔中。在每個微孔中加入200 μL酶聯(lián)物,充分混勻10 s,室溫孵育2 h,快速棄去微孔內(nèi)反應(yīng)物,每孔用400 μL洗滌液洗板3次,在吸水紙上拍干。在每個微孔中加入100 μL底物液,室溫孵育15 min,隨后加50 μL終止液到每個檢測孔中終止酶反應(yīng)。10 min后,測450 nm處吸光度。
1.4 數(shù)據(jù)分析
重組酵母菌的雌激素活性采用Origin 軟件由最小二乘法計(jì)算得出。應(yīng)用GraphPad?Prism 5軟件中的單因素方差分析對當(dāng)量進(jìn)行差異顯著性分析。
2.1 雌激素濃度水平分析
由表1可知,E1、E2、E3和EE2的回收率分別為62%~65%、70%~85%、67%~81%以及69%~94%。GUEDES-ALONSO等[7]曾報(bào)道固醇類雌激素的回收率為31%~119%,筆者的研究結(jié)果與其具有一致性,說明該化學(xué)檢測方法具有可行性。
表1 不同濃度目標(biāo)雌激素的回收率Table 1 Recovery rate of target EDCs relative to concentration %
污水經(jīng)以A2/O處理工藝為主的常規(guī)活性污泥處理之后,COD去除率為94%,總氮去除率為77%,總磷去除率為80%,出水達(dá)到我國GB 18918—2002《城鎮(zhèn)污水處理廠污染物排放標(biāo)準(zhǔn)》中的一級B類標(biāo)準(zhǔn),污水處理廠運(yùn)行良好。由圖3可知,污水處理前后都存在一定濃度的雌激素。進(jìn)水中雌激素質(zhì)量濃度達(dá)上百ng·L-1甚至μg·L-1級別。進(jìn)水中E3質(zhì)量濃度為1 531.33 ng·L-1,是濃度最高的雌激素,其次是E1、EE2和E2,質(zhì)量濃度分別為962.24、698.81和447.64 ng·L-1。經(jīng)過二級生物處理之后,雌激素得到明顯去除,出水E1、E2、E3和EE2質(zhì)量濃度分別為87.96、5.50、75.32和30.63 ng·L-1。英國污水處理廠出水E1、E2和EE2質(zhì)量濃度分別為1~80、1~50和0.2~7.0 ng·L-1[8],筆者的檢測結(jié)果與其相當(dāng)。
采樣次數(shù)n=6。圖3 各取樣點(diǎn)E1、E2、E3和EE2濃度Fig.3 Concentrations of E1, E2, E3 and EE2 in wastewater sampled at each sampling point
雌激素的物理化學(xué)特性對其在污水處理過程中的去除和歸趨有重要作用。例如,典型固醇類雌激素具有較低的亨利常數(shù)(Hc),并且與正辛醇/水分配系數(shù)(Kow)的比值Hc/Kow低于10-9,因此揮發(fā)作用對雌激素在整個污水處理工藝的去除效果甚為微弱[9],筆者試驗(yàn)中曝氣沉砂池對雌激素的去除率低于10%。在初沉池中,E1、EE2和E3的去除率分別為29.72%、16.37%和18.21%,而E2幾乎沒有變化。這些微弱的削減作用可能是由于雌激素被吸附到固體顆粒上,隨著顆粒的沉降而被去除。在厭氧/缺氧/好氧階段,好氧池出水中E1、E2、E3和EE2的去除率分別高達(dá)88.83%、95.69%、95.21%和93.09%。一些研究表明嚴(yán)格的厭氧/缺氧/好氧環(huán)境構(gòu)建了良好的脫氮除磷菌群結(jié)構(gòu),這種特性的污泥更有利于雌激素的吸附,且硝化過程可促進(jìn)雌激素的降解[10]。二沉池工藝未能明顯去除4種雌激素,加氯消毒過程使60.30%的E2得到去除,而其他雌激素的去除效果并不明顯。因此,在污水處理廠中,生物降解和污泥吸附對雌激素的去除起著至關(guān)重要的作用,而物理處理作用的效果并不顯著。
在生物處理過程中,E1的去除率低于其他類固醇雌激素。這可能是由于E2在微生物的降解過程中產(chǎn)生了E1,影響了E1的去除效果[11]。另一方面,物質(zhì)的去除效果和其物化特性有一定的關(guān)系。例如,物質(zhì)的lgKow值決定了其與污泥的吸附能力,在2.5~4.0之間時(shí)表現(xiàn)出中度吸附能力;>4.0時(shí),表現(xiàn)出高吸附能力[13]。E1、E2、E3和EE2的lgKow范圍為2.81~4.15[12]。由此可知,固醇類雌激素易被好氧污泥吸附,因而在好氧池中的去除率較高。另一方面,E2在厭氧、缺氧和好氧條件下均可以被微生物降解,而EE2只有在好氧條件下才能得到有效去除[13],且由EE2的lgKow值(4.15)可知其去除機(jī)制主要為污泥吸附[11],故EE2的去除率要低于E2。盡管典型固醇類雌激素能夠得到一定的去除,但由于水環(huán)境中存在一些類雌激素物質(zhì)(如雙酚A),影響上述4種固醇類物質(zhì)的綜合生物效應(yīng),因此,有必要進(jìn)行生物毒性檢測以進(jìn)一步明確污水的毒性效應(yīng)。
2.2 雌激素活性分析
圖4顯示了重組酵母菌法檢測中各取樣點(diǎn)污水β-半乳糖苷酶活性變化,以及以E2為當(dāng)量表示的雌激素活性。
圖4 各采樣點(diǎn)β-半乳糖苷酶活性和雌激素活性Fig.4 Activity of β-galactosidase and its estrogenic effects in wastewater sampled at each sampling point
由圖4可知,當(dāng)水樣濃縮倍數(shù)為1 000時(shí),曝氣沉砂池出水β-半乳糖苷酶活性高于格柵出水,這是由于在曝氣沉砂池污水中顆粒物表面附著的雌激素物質(zhì)被剝離而溶于水所致。進(jìn)水的雌激素活性EEQ為7.09 ng·L-1,經(jīng)曝氣沉砂池和初沉池預(yù)處理后污水的EEQ分別為6.14和5.72 ng·L-1,以上樣品的雌激素活性并沒有顯著性差異(F=0.843,P=0.511 2)。經(jīng)A2/O生物處理之后,污水的EEQ為1.89 ng·L-1,經(jīng)二沉池和加氯消毒之后最終出水的EEQ分別為1.97和1.92 ng·L-1。這與前人研究結(jié)果(0.031.6 ng·L-1)[14-15]具有一致性。二級處理之后的水樣EEQ與進(jìn)水相比具有顯著性差異(F=35.06,P=0.002 5)。
由圖4可知,曝氣沉砂池和初沉池對雌激素活性的去除率分別為13.41%和33.44%,雌激素活性未見顯著降低,好氧池中EEQ去除率為73.33%。由于氨氧化菌控制著雌激素的硝化過程[16],例如E1和E2硝化產(chǎn)物的雌激素活性相對較低[17]。好氧池中氨氮去除率達(dá)94%,這有可能導(dǎo)致雌激素活性的去除。此外,對好氧池污泥EEQ的測定結(jié)果顯示,其EEQ為1.9 ng·g-1,這說明污泥吸附對雌激素活性具有一定的去除作用??傮w而言,隨著雌激素的降解或者吸附,雌激素活性明顯降低。然而經(jīng)過二沉池之后,出水EEQ有微弱上升,這可能是由于沉降過程中污泥上含有的雌激素活性物質(zhì)重新溶解所致[11]。與之類似,經(jīng)過加氯消毒之后,污水廠出水EEQ并沒有降低。該結(jié)論和ZENG等[18]的研究結(jié)果具有一致性,即加氯消毒對二級出水雌激素活性沒有持續(xù)的去除作用。在消毒過程中產(chǎn)生的中間產(chǎn)物含有雌激素活性,從而導(dǎo)致出水EEQ較穩(wěn)定。例如E1、E2和EE2的消毒副產(chǎn)物具有相當(dāng)?shù)拇萍に鼗钚訹19]。當(dāng)水環(huán)境的EEQ大于1 ng·L-1時(shí),會對水生生物產(chǎn)生一定的危害[20]。因此,盡管雌激素去除率較高(>90%),但是污水廠出水仍會對受納水體的水生生物產(chǎn)生潛在危害。
2.3 酶聯(lián)免疫試驗(yàn)
以E2濃度對數(shù)lgC和吸光率對數(shù)lg (B/B0)作標(biāo)準(zhǔn)曲線圖,所得結(jié)果如圖5所示,該方法對E2的檢測限為10.6 pg·mL-1。由圖6可見,用酶聯(lián)免疫法檢測到進(jìn)水E2質(zhì)量濃度為82.82 ng·L-1,與MANICKUM等[21]報(bào)道的E2質(zhì)量濃度(119 ng·L-1)相近。經(jīng)過曝氣沉砂池和初沉池之后,E2質(zhì)量濃度分別降低為76.80和69.65 ng·L-1。經(jīng)過厭氧/缺氧/好氧處理之后,E2質(zhì)量濃度降低為9.26 ng·L-1。經(jīng)三級處理二沉池和加氯消毒之后,最終出水E2質(zhì)量濃度為10.14 ng·L-1,與好氧池出水相比,雌激素活性的降低并不顯著 (F=4.61,P=0.121 7),這與用重組酵母菌法檢測雌激素活性的結(jié)果具有一致性。E2經(jīng)過曝氣沉砂池和初沉池后沒有得到明顯去除(去除率低于14%),而經(jīng)過厭氧/缺氧/好氧階段之后,E2的去除率約為88.83%,該值與用重組酵母菌法檢測雌激素活性的去除率相當(dāng)。此外,酶聯(lián)免疫法檢測到污泥中E2質(zhì)量濃度為12.2 ng·g-1,這進(jìn)一步說明污泥對雌激素具有一定的吸附作用。經(jīng)過二沉池和加氯消毒之后,污水廠出水E2濃度并沒有降低。
C—E2質(zhì)量濃度;B/B0—吸光率。圖5 ELISA檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.5 Standard curve of ELISA test
試驗(yàn)初期利用酶聯(lián)免疫法得出的E2濃度比用化學(xué)分析得到的E2濃度低,但是兩者之間差距隨著處理工藝流程的進(jìn)行而減小,利用酶聯(lián)免疫法檢測得到最終出水中E2質(zhì)量濃度為10.01 ng·L-1,高于化學(xué)分析出水中E2濃度。CAMILLE等[22]研究也得出利用酶聯(lián)免疫法檢測的水體目標(biāo)物濃度水平比化學(xué)檢測值高。環(huán)境水樣品中存在著和E2結(jié)構(gòu)非常相似的其他雌激素(如E1和EE2)。這些物質(zhì)可以與微孔板上包被的E2抗體發(fā)生交叉反應(yīng),使得酶聯(lián)免疫法檢測結(jié)果偏高[23]。另外,酶聯(lián)免疫法檢測所得E2值與重組酵母菌法所得EEQ相比,其值偏高1個數(shù)量級,但兩者的趨勢具有一致性。環(huán)境水樣中的各種化學(xué)物質(zhì)可能存在拮抗作用[19],一些具有抗雌激素作用的物質(zhì)會使重組酵母菌法檢測值降低。酶聯(lián)免疫法與傳統(tǒng)的化學(xué)分析及重組酵母菌法相比具有一定的優(yōu)勢,例如操作簡單、節(jié)約時(shí)間和成本以及樣品量少等。總之,酶聯(lián)免疫法可成為化學(xué)檢測和重組酵母菌檢測的一個重要補(bǔ)充,為及時(shí)采取污染控制措施提供技術(shù)保證。
圖6 水樣中E2濃度和去除率Fig.6 Concentration of E2 in the wastewater and its removal rate
(1)曝氣沉砂池和初沉池對4種固醇類雌激素具有微弱的去除作用,而A2/O生物處理對雌激素的去除具有明顯效果,去除率高達(dá)90%,對目標(biāo)雌激素的去除效果由高到低依次為E2、E3、EE2和E1。
(2)采用重組酵母菌法研究污水處理廠中雌激素的活性水平發(fā)現(xiàn),二級生物處理能很好地降低污水廠雌激素活性,去除率高達(dá)73.33%。盡管雌激素濃度得到了一定程度的去除,但出水仍具有一定的雌激素生物效應(yīng)。
(3)酶聯(lián)免疫法分析發(fā)現(xiàn),A2/O對E2的去除率為88.23%,與化學(xué)分析和重組酵母菌法檢測結(jié)果一致。
(4)酶聯(lián)免疫法具有操作簡單、節(jié)約時(shí)間和成本等優(yōu)點(diǎn),可應(yīng)用于城市污水雌激素快速篩選和診斷。
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(責(zé)任編輯:許 素)
Activity of Estrogen and Contents of Typical Estrogenic Compounds in A2/O Treated Wastewater.
YOUMeng,ZHANGQiu-ya,WANGXiao-chang,MAXiao-yan
(School of Environmental and Municipal Engineering, Xi′an University of Architecture and Technology/ International Science & Technology Cooperation Center for Urban Alternative Water Resources Development/ Key Laboratory of Northwest Water Resource, Environment and Ecology, Ministry of Education/ Engineering Technology Research Center for Wastewater Treatment and Reuse, Shaanxi Province/ Key Laboratory of Environmental Engineering, Shaanxi Province, Xi′an 710055, China)
As endocrine disrupting chemicals in the water environment is low in concentration, difficult to remove and highly hazardous, it is essential to get a full grasp of how estrogen in wastewater varies with the process of treatment in activity and concentration. To that end, samples of wastewater were collected from an urban wastewater treatment installation for analysis of concentrations and activities of 4 kinds of steroid estrogens, using the high performance liquid chromatography-UV detector-fluorescence detector (HPLC-UV-FLD) and the yeast estrogen screen (YES) method, separately. Moreover, enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was performed to determine concentrations of E2 in the wastewater under treatment. Results show that among the four kinds of estrogens detected in the effluent, E1 was the highest in concentration, reaching 87.97 ng·L-1and E2, the lowest being 5.50 ng·L-1, which indicates that the steroid estrogen removal rate varied in the range of 88.83%-95.69%. The A2/O system was found to be able to lower activity of the estrogens by 73.33%. However, the estrogens in the effluent were still quite active with EEQ being 1.92 ng·L-1. ELISA reveals that the concentration of E2 in the effluent varied in the range of 10.01-82.82 ng·L-1, which indicates that the removal rate of E2 was 88.23%. Obviously ELISA and YES are quite consistent in determination. Therefore, it could be concluded that ELISA could be a workable supplement to in vitro assays of estrogens.
A2/O process; estrogens; estrogenicity; ELISA; removal rate
2016-07-28
城區(qū)水污染控制和水環(huán)境功能提升技術(shù)研究項(xiàng)目(2014ZX07305-002-01);國家自然科學(xué)基金(51508449);中國博士后科學(xué)基金面上項(xiàng)目(2015M572531)
① 通信作者E-mail:maxiaoyan@xauat.edu.cn
X592
A
1673-4831(2017)06-0571-06
10.11934/j.issn.1673-4831.2017.06.012
游猛(1991—),男,湖北黃石人,碩士生,主要研究方向?yàn)槲鬯霸偕锒拘缘念A(yù)測與評價(jià)。E-mail: 1150755126@qq.com