何海堅(jiān)+陳浩華+何裕堅(jiān)+張宏濤

摘 要：該文建立了測(cè)定琥膠肥酸銅的ICP法與高效液相色譜法及其比較。ICP法：以iCAP6200型等離子體發(fā)射光譜儀進(jìn)行測(cè)定，得出在濃度為0.020 0～2.00 mg/L范圍內(nèi)，峰面積與其濃度具有良好的線性關(guān)系（相關(guān)系數(shù)為0.999 6）；在0.020 0 mg/L濃度下，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.67%；在2.00 mg/L濃度下，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.472%，回收率為82.7%～90.3%。高效液相色譜法：以Waters Alliance e2695高效液相色譜儀進(jìn)行測(cè)定，得出在濃度為2.00～20.0 mg/L范圍內(nèi)，峰面積與其濃度具有良好的線性關(guān)系（相關(guān)系數(shù)為0.998 1）；在2.00 mg/L濃度下，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.95%；在20.0 mg/L濃度下，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.02%，回收率為85.3%～92.2%。結(jié)果表明，兩種分析方法均滿足琥膠肥酸銅原藥及其制劑的濃度測(cè)定。通過(guò)比較得出ICP法檢出限與定量限較低、靈敏度較高、檢測(cè)時(shí)間短、效率高，但是儀器運(yùn)轉(zhuǎn)費(fèi)用高。高效液相色譜法重復(fù)性較好、儀器運(yùn)轉(zhuǎn)費(fèi)用較低，但法檢出限與定量限較高，可根據(jù)測(cè)定的濃度而選擇合適的方法。

關(guān)鍵詞：琥膠肥酸銅 ICP 高效液相色譜 分析方法

中圖分類號(hào)：O657 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-098X（2017）04（c）-0108-02

琥膠肥酸銅Copper（Succinic+Glutaric+Adipic）是一種混合物，包括有丁二酸銅、戊二酸銅、己二酸銅，分子式：[（CH2）17（COO）2]nCu。

作為保護(hù)性殺菌劑，它具有低毒、高效、安全等優(yōu)點(diǎn)，在防治水稻、果樹等作物的細(xì)菌和真菌病害方面效果顯著，廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)[1]。其作用機(jī)理是銅離子與病原菌細(xì)胞膜表面上的K+、H+等交換，導(dǎo)致蛋白質(zhì)凝固；同時(shí)銅離子可進(jìn)入病原菌細(xì)胞內(nèi)與某些酶結(jié)合，影響酶活性[2]。

目前，琥膠肥酸銅多種分析方法的比較還未建立，該文采用ICP法與高效液相色譜法分別進(jìn)行測(cè)定，均適用于琥膠肥酸銅原藥及其制劑的分析。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 高效液相色譜分析法

1.1.1 材料與試劑

水：超純水；磷酸二氫鉀：分析純（生產(chǎn)商）；磷酸：色譜純（CNW）；乙腈：色譜純（CNW）；丁二酸：標(biāo)準(zhǔn)值為99.5%；戊二酸：標(biāo)準(zhǔn)值為99%；己二酸：標(biāo)準(zhǔn)值為99%；30%琥膠肥酸銅可濕性粉劑試樣。

1.1.2 儀器與設(shè)備

電子天平：梅特勒-托利多XP205。

高效液相色譜儀：Waters Alliance e2695。

二極管陣列檢測(cè)器：2998PDA Detector。

超聲波清洗器：天津奧特賽恩斯AS20500A。

親水PTFE針式過(guò)濾器：濾膜孔徑為0.22 μm。

1.1.3 液相色譜操作條件

色譜柱：XBridge C18；規(guī)格：4.6 mm×150 mm；粒徑：5.0 μm；流動(dòng)相：0.1 mol/L磷酸二氫鉀水溶液（磷酸調(diào)pH=2.1）∶乙腈=90∶10（V∶V）；流速：1.000 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm；柱溫：35.0 ℃；進(jìn)樣體積：20μL；保留時(shí)間：丁二酸4.1 min，戊二酸5.9 min，己二酸12.3 min。

1.1.4 實(shí)驗(yàn)溶液配制

分別準(zhǔn)確稱取0.05 g（精確至0.001 g）丁二酸、戊二酸、己二酸標(biāo)樣于同一25 mL容量瓶中，加入20 mL流動(dòng)相溶解，在超聲波中振動(dòng)10 min后冷卻至室溫，用流動(dòng)相定容至刻度，搖勻備用。

準(zhǔn)確稱取30 %琥膠肥酸銅可濕性粉劑試樣0.15 g于25 mL容量瓶中，加入流動(dòng)相20 mL，在超聲波中振動(dòng)10 min后冷卻至室溫，用流動(dòng)相定容至刻度，搖勻備用。

1.2 ICP法

1.2.1 材料與試劑

硝酸：優(yōu)級(jí)純（生產(chǎn)商）；琥膠肥酸銅原藥（標(biāo)準(zhǔn)值：79.5%，佛山市盈輝作物科學(xué)有限公司）；30%琥膠肥酸銅可濕性粉劑。

1.2.2 儀器與設(shè)備

電子天平：梅特勒-托利多XP205。

iCAP6200型等離子體發(fā)射光譜儀：Thermo。

親水PTFE針式過(guò)濾器：濾膜孔徑為0.22 μm。

1.2.3 等離子體發(fā)射光譜儀操作條件

檢測(cè)離子：銅離子；檢測(cè)波長(zhǎng)：224.700{450}，324.754{104}，327.346{103}；最適波長(zhǎng)：324.754{104}；樣品沖洗時(shí)間：30s；等離子體觀測(cè)：水平；樣品泵：沖洗泵速-45 rpm，分析泵速-45 rpm；光源：RF功率1 150 W；輔助氣流量：0.5 L/min。

1.2.4 實(shí)驗(yàn)溶液配制

稱取琥膠肥酸銅原藥0.01 g（精確至0.000 1 g），置于25 mL容量瓶中，用2%硝酸溶解并定容至標(biāo)線，搖勻，備用。

稱取30%琥膠肥酸銅可濕性粉劑試樣0.01 g（精確至0.000 1 g），置25 mL容量瓶中，用2%硝酸定容至標(biāo)線，搖勻，備用。

2 結(jié)果與討論

2.1 高效液相色譜分析法

2.1.1 分析方法的線性相關(guān)測(cè)定

配制琥膠肥酸銅濃度均為2.00 mg/L、5.00 mg/L、10.0 mg/L、15.0 mg/L、20.0 mg/L的一系列標(biāo)樣溶液，在上述操作條件下進(jìn)行測(cè)定，以標(biāo)樣溶液濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積的值為縱坐標(biāo)，建立坐標(biāo)系進(jìn)行線性分析，琥膠肥酸銅的線性方程：Y=676.0235X-53.4288，相關(guān)系數(shù)r：0.998 1（見圖1）。

2.1.2 分析方法的精密度試驗(yàn)

對(duì)濃度為2.00 mg/L的標(biāo)樣進(jìn)行6次重復(fù)測(cè)定，在2.00 mg/L濃度下，琥膠肥酸銅的標(biāo)準(zhǔn)偏差為30.049 2，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.95%。

對(duì)濃度為20.0 mg/L的標(biāo)樣進(jìn)行6次重復(fù)測(cè)定，在20.0 mg/L濃度下，琥膠肥酸銅的標(biāo)準(zhǔn)偏差為138.265，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.02%。

2.1.3 分析方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn)

于空白樣品中分別加入不同濃度的琥膠肥酸銅標(biāo)準(zhǔn)品，在上述方法和操作條件進(jìn)行重復(fù)5次測(cè)定，測(cè)得琥膠肥酸銅回收率為85.3%～92.2%。

2.2 ICP法

2.2.1 分析方法的線性相關(guān)測(cè)定

配制琥膠肥酸銅濃度為0.020 0 mg/L、0.050 0 mg/L、0.100 mg/L、0.500 mg/L、1.00 mg/L、2.00 mg/L的一系列標(biāo)樣溶液，在上述操作條件下進(jìn)行測(cè)定，以標(biāo)樣溶液濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積的值為縱坐標(biāo)，建立坐標(biāo)系進(jìn)行線性分析，琥膠肥酸銅的線性方程：Y=5915X+189.7，相關(guān)系數(shù)r：0.999 6（見圖2）。

2.2.2 分析方法的精密度試驗(yàn)

對(duì)濃度為0.020 0 mg/L的標(biāo)樣進(jìn)行6次重復(fù)測(cè)定，在0.020 0 mg/L濃度下，琥膠肥酸銅的標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.33，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.67%。

對(duì)濃度為2.00 mg/L的標(biāo)樣進(jìn)行6次重復(fù)測(cè)定，在2.00 mg/L濃度下，琥膠肥酸銅的標(biāo)準(zhǔn)偏差為55.5，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.472%。

2.2.3 分析方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn)

于空白樣品中分別加入不同濃度的琥膠肥酸銅標(biāo)準(zhǔn)品，在上述方法和操作條件進(jìn)行重復(fù)5次測(cè)定，測(cè)得琥膠肥酸銅回收率為82.7%～90.3%。

2.2.4 ICP法與高效液相色譜法的比較

分別用ICP法和高效液相色譜法檢測(cè)分析琥膠肥酸銅的含量，并進(jìn)行線性相關(guān)、精密度、準(zhǔn)確度試驗(yàn)。結(jié)果證明，兩種方法的線性相關(guān)系數(shù)、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差、回收率均可用于琥膠肥酸銅原藥及其制劑的分析。

此外，ICP法的檢出限：0.004 50 mg/L，定量限：0.015 0 mg/L；高效液相色譜法的檢出限：0.600 mg/L，定量限：2.00 mg/L。證明ICP法的定量限與檢出限均明顯低于高效液相色譜法，靈敏度較高。

高效液相色譜法的出峰時(shí)間超過(guò)12 min，明顯大于ICP法，證明ICP法分析速度快，檢測(cè)效率較高。

但是，ICP法在工作時(shí)需要消耗大量Ar氣，導(dǎo)致運(yùn)轉(zhuǎn)費(fèi)用高，而高效液相色譜法重復(fù)性較好，儀器運(yùn)轉(zhuǎn)費(fèi)用較低。

3 結(jié)語(yǔ)

該文采用了優(yōu)化的ICP條件和高效液相色譜條件，建立了能有效檢測(cè)琥膠肥酸銅的ICP法和高效液相色譜法。綜上所述，ICP法的檢出限與定量限較低、靈敏度較高、檢測(cè)效率較高，有限節(jié)約時(shí)間，但是對(duì)儀器的損耗大；高效液相色譜法，重復(fù)性較好、儀器運(yùn)轉(zhuǎn)費(fèi)用較低，但檢出限與定量限較高。兩種分析方法各有優(yōu)劣，在日常工作中，可根據(jù)實(shí)際情況選擇分析方法。

參考文獻(xiàn)

[1] 陳國(guó)雄，林興歲，黎薇薇，等.琥珀酸銅的高效液相色譜分析[J].廣東化工，2007，34（8）：88-90.

[2] 毛潤(rùn)乾，彭月珍，王海峰，等.琥膠肥酸銅·霜脲氰防治荔枝霜霉病試驗(yàn)[J].廣西園藝，2007（1）：35-37.