田建華

(山西省林業(yè)科學(xué)研究院,山西 太原 030012)

山西省主產(chǎn)地槐米蘆丁含量分析

田建華

(山西省林業(yè)科學(xué)研究院,山西 太原 030012)

采用高效液相色譜法，對山西省運(yùn)城鹽湖、河津、稷山、萬榮、夏縣5地所采集的槐米進(jìn)行蘆丁含量的測定與分析。結(jié)果表明：山西省不同產(chǎn)地的槐米蘆丁含量相差較大，在13.09%～24.59%之間。運(yùn)城鹽湖所產(chǎn)槐米的蘆丁含量較高，而夏縣所產(chǎn)槐米的蘆丁含量相對較低；雙季槐米蘆丁含量略低于單季槐米蘆丁含量；米槐小枝條蘆丁含量為20.50%，與槐米中平均蘆丁含量相差無幾。經(jīng)蒸曬處理的槐米蘆丁含量最高，可達(dá)到23.77%；其次是烘曬處理槐米蘆丁的含量，為22.16%；自然曬干方式下槐米蘆丁含量較低。

山西省；不同產(chǎn)地；槐米；蘆??；高效液相色譜法

槐米為豆科植物槐(SophorajaponicaL.)的干燥花蕾，始載于《日華子本草》，現(xiàn)被列入國家衛(wèi)生部第一批藥食同源名錄中，有涼血止血、清肝瀉火等功效。槐米中含有蘆丁(蕓香苷)、槲皮素等黃酮類成分，其主要活性成分為蘆丁，具有維持及恢復(fù)毛細(xì)管的正常彈性，增強(qiáng)抵抗力，防止血細(xì)胞凝聚等多方面的生理特性，同時(shí)還具有抗炎、抗病毒、抗氧化等藥理作用。

山西省是中國槐米的主產(chǎn)地之一，栽植歷史較長，保有面積較大，早在20世紀(jì)60年代就開始有槐米生產(chǎn)活動出現(xiàn)。近年來，由于市場需求不斷擴(kuò)大，出現(xiàn)了大規(guī)模的種植，有的還進(jìn)行了品種的選育和改良，取得了一定的經(jīng)濟(jì)效益。由于槐米的蘆丁含量受品種和環(huán)境等因素影響，各地槐米品質(zhì)差距較大，參差不齊。為了合理評價(jià)槐米品質(zhì)，為槐米優(yōu)良品種選育提供參考依據(jù)，筆者對不同產(chǎn)地槐米蘆丁的含量進(jìn)行了分析測定。

1 試驗(yàn)材料

1.1 材料

于2015年至2016年的7月、9月，在山西省種植面積較大的槐米主要產(chǎn)地運(yùn)城鹽湖、河津、稷山、萬榮、夏縣5地，采集生長正常的植株上的槐米作為分析材料。

1.2 儀器與試劑

采用的儀器：Agilent 1260高效液相色譜儀(美國Agilent公司)，KQ-100型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)，電子分析天平(制造商)。

試劑：蘆丁對照品(批號：100080-200707，購自中國藥品生物制品檢定所)，甲醇為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。

2 方法與方法學(xué)考察

2.1 方法

依據(jù)《中國藥典》(2015年版，一部)槐花項(xiàng)下蘆丁的高效液相色譜法測定。

2.2 色譜條件

ZORBAX SB-C18色譜柱(5 μm，4.6 mm×150.0 mm)，以甲醇-1%冰醋酸水溶液(32∶68)為流動相，檢測波長257 nm，柱溫30 ℃，體積流量1.0 mL/min，進(jìn)樣量10 μL.在此色譜條件下，供試品及對照品色譜分離度良好，蘆丁與其它組分能達(dá)到基線分離。

2.3 對照品溶液的制備

精密稱取蘆丁對照品0.005 2 g，加MeOH(分析純)溶解，定容至50 mL，制成每1 mL含0.094 1 mg蘆丁的對照品溶液。

2.4 供試品溶液的制備

取槐米適量，置稱量瓶中，在60 ℃干燥箱中干燥2 h，至手捻即碎。放于研缽中研碎，準(zhǔn)確稱量槐米約0.100 0 g,置于小燒杯中，加MeOH(分析純)溶液溶解，定容至50 mL.超聲處理(250 W，25 kHz)30 min，冷卻至室溫，用MeOH溶液補(bǔ)足至刻度，搖勻，濾斗過濾。用移液管吸取濾液2 mL，定容至10 mL，用針式微孔濾膜過濾后即得供試樣品溶液。

2.5 線性關(guān)系考察

分別精密吸取蘆丁對照品溶液(0.094 1 mg/mL)2 μL，4 μL，6 μL，8 μL，10μL，測定峰面積積分值。以蘆丁對照品溶液進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)(X)，以峰面積積分值為縱坐標(biāo)(Y)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程Y=8 659 331X+12 773.57，r=0.999 9.結(jié)果表明，蘆丁含量在0.018 8 mg/mL～0.094 1 mg/mL范圍內(nèi)線性良好。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn)

精密稱取同一樣品6份，按供試品溶液的制備方法，制成供試液，平行測定6次，記錄峰面積值，計(jì)算蘆丁含量，結(jié)果RSD值為0.81%，表明本方法重復(fù)性良好。

2.7 精密度試驗(yàn)

供試品溶液按上述色譜條件測定，連續(xù)進(jìn)樣6次，每次10 μL，記錄峰面積值。計(jì)算RSD=1.16%，說明本儀器精密度良好。

2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密吸取同一供試樣品溶液10 μL，分別于0 h，2 h，4 h，6 h，8 h，10 h，12 h時(shí)進(jìn)樣，記錄峰面積，計(jì)算RSD=1.27%，說明樣品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。2.9 加標(biāo)回收率試驗(yàn)

精密稱取6份已知蘆丁含量的槐米約0.1 g，分別加入一定量蘆丁對照品溶液，按供試品溶液的制備方法制備成供試液，分別進(jìn)樣，測得其蘆丁含量并計(jì)算加標(biāo)回收率。計(jì)算得出平均加標(biāo)回收率為99.52%，RSD值為1.40%.

2.10 結(jié)果計(jì)算

供試品中蘆丁含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)X計(jì)，數(shù)值以百分?jǐn)?shù)表示，公式如下：

式中：X——供試品中蘆丁的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；

Ax——供試品溶液中蘆丁的峰面積；

As——對照品溶液中蘆丁的峰面積；

V——供試品溶液的體積，mL;

C——對照品溶液中蘆丁的濃度，mg/mL;

M——供試品質(zhì)量，mg.

3 結(jié)果與討論

3.1 山西省不同產(chǎn)地槐米樣品中蘆丁含量

山西省不同產(chǎn)地槐米蘆丁含量測定結(jié)果見表1.

表1 山西省不同產(chǎn)地槐米蘆丁含量測定結(jié)果

由表1得知，山西省不同產(chǎn)地槐米蘆丁含量相差較大，在13.09%～22.53%之間。運(yùn)城鹽湖所產(chǎn)槐米的蘆丁含量較高，而夏縣所產(chǎn)槐米的蘆丁含量相對較低，低于2015年版《中國藥典》中規(guī)定的槐米蘆丁含量不得少于15.0%的要求。這可能是由于夏縣的槐米樣品采于平川地區(qū)。米槐的適生范圍廣，能在多種立地條件下生長，在濕潤、肥沃、深厚、排水良好的沙質(zhì)土壤中生長最佳，而在低洼積水處生長不良，甚至?xí)l(fā)生落葉死亡。

3.2 同一產(chǎn)地不同品種槐米樣品中蘆丁含量

運(yùn)城鹽湖單季槐米和雙季槐米中蘆丁含量的測定結(jié)果見表2.

表2 運(yùn)城鹽湖單季槐米和雙季槐米蘆丁含量測定結(jié)果

由表2得知，雙季槐米蘆丁含量略低于單季槐米蘆丁含量。

3.3 米槐不同部位樣品中蘆丁含量

運(yùn)城鹽湖產(chǎn)地米槐不同部位蘆丁含量測定結(jié)果見表3.

表3 米槐不同部位蘆丁含量測定結(jié)果

由表3得知，米槐小枝條蘆丁含量為20.50%，與之前測的運(yùn)城鹽湖產(chǎn)地槐米中蘆丁平均含量相差無幾，遠(yuǎn)高于槐花及花柄中蘆丁的含量。所以，從原料來源和價(jià)格因素考慮，可充分采用米槐小枝條。

3.4 不同殺青方式下樣品中蘆丁含量

萬榮縣3種殺青方式處理后的槐米樣品蘆丁含量測定結(jié)果見表4.

表4 3種殺青方式槐米蘆丁含量測定結(jié)果

由表4可以看出，不同殺青方式下槐米蘆丁含量有差別。蒸曬處理的槐米蘆丁含量最高，可達(dá)23.77%.其次是烘曬處理，槐米蘆丁含量為22.16%.自然曬干方式下蘆丁含量較低，為21.10%.

4 討論

1) 不同的地域、土壤、日照、水肥等環(huán)境條件，及不同的采收時(shí)期、殺青工藝等都會對槐米蘆丁含量產(chǎn)生一定的影響。因此，需對影響槐米蘆丁含量的關(guān)鍵因素做更深一步的研究。

2) 通過各地實(shí)際調(diào)查和試驗(yàn)分析，筆者認(rèn)為今后在合理開發(fā)利用槐米和優(yōu)良品種選育過程中，不應(yīng)只考慮槐米蘆丁的含量，應(yīng)同時(shí)結(jié)合產(chǎn)量，計(jì)算經(jīng)濟(jì)效益。

[1] 國家藥典委員會.中國藥典(第一部)[M].中國醫(yī)藥科技出版社,2015:354-355.

[2] 李 慧,王明明.槐米中蘆丁的提取結(jié)晶與含量測定[J].陜西中醫(yī)，2011,32(10)：1 412-1 414.

[3] 李振志,朱 華,謝 鋒,等.不同產(chǎn)地槐米蘆丁的含量測定[J].世界中醫(yī)藥,2013,8(8):952-954.

Content Analysis on Rutin in Flos Sophorae from the Main Producing Area of Shanxi Province

Tian Jianhua

(ShanxiAcademyofForestSciences,Taiyuan030012,China)

The rutin content of Flos Sophorae which were collected from Yanhu, Hejin, Jishan, Wanrong and Xiaxian in Yuncheng city of Shanxi province were measured and analyzed by the high performance liquid chromatography. Results showed that difference in the rutin content of Flos Sophorae from different proucing area was large which was between 13.09% and 24.59%. The rutin content of Flos Sophorae from Yanhu was higher while that from Xiaxian was lower. The rutin content of double cropping Flos Sophorae was lower than that of single cropping Flos Sophorae. The rutin content in the young branches ofSophorajaponicawas 20.50%, which was similar to the rutin content of Flos Sophorae. The rutin content of Flos Sophorae after steam drying was the highest(23.77%) which followed by that after bake drying(22.16%), while the rutin content of Flos Sophorae after natural drying was lower.

Different proucing area; Different producing area; Flos Sophorae; Rutin; High performance liquid chromatography

2017-02-27

山西省林科院院基金項(xiàng)目“影響槐米蘆丁含量的關(guān)鍵因子研究”

田建華(1978— )，女，山西原平人，2001年畢業(yè)于南京林業(yè)大學(xué)，工程師。

S792.26

A

1007-726X(2017)02- 0026- 03