蔣 明，張志強(qiáng)，文 華，楊長庚，吳 凡，劉 偉，田 娟，周夢馨

(1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院長江水產(chǎn)研究所 魚類營養(yǎng)與飼料研究室，武漢 430223；2.上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命科學(xué)院，上海201306)

肌醇對胭脂魚生長、體成分和部分血清生化指標(biāo)的影響

蔣 明1，張志強(qiáng)2，文 華1，楊長庚1，吳 凡1，劉 偉1，田 娟1，周夢馨2

(1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院長江水產(chǎn)研究所 魚類營養(yǎng)與飼料研究室，武漢 430223；2.上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命科學(xué)院，上海201306)

以酪蛋白、明膠和魚粉為蛋白源配制6組實(shí)驗(yàn)飼料，分別在飼料中添加0、75、150、300、600和1 200 mg/kg的肌醇，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)，連續(xù)投喂初始體質(zhì)量(10.01±0.24)g的胭脂魚(Myxocyprinusasiaticus)幼魚8周,考察飼料中添加不同水平的肌醇對胭脂魚幼魚生長性能、全魚以及肌肉營養(yǎng)成分和部分血清生化指標(biāo)的影響，以確定胭脂魚幼魚飼料中肌醇的適宜添加量。結(jié)果顯示：隨著飼料中肌醇含量增加，胭脂魚幼魚增重率、成活率和特定生長率呈先上升后穩(wěn)定的趨勢，均在300 mg/kg組時(shí)達(dá)到穩(wěn)定；飼料肌醇對全魚體成分無顯著性影響，肌肉脂肪含量在300 mg/kg組時(shí)顯著低于未添加組；飼料中肌醇對血清總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇和血清甘油三酯均有顯著性影響；飼料中肌醇(<150 mg/kg)不足時(shí)，血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活性顯著高于其它實(shí)驗(yàn)組。以特定生長率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，經(jīng)折線回歸分析，飼料中補(bǔ)充310.3 mg/kg的肌醇時(shí)，胭脂魚幼魚獲得最大生長。

胭脂魚(Myxocyprinusasiaticus)；肌醇；生長性能；體成分；生化指標(biāo)

肌醇(Myo-inositol)是一種具有生物活性的環(huán)己六醇，主要以磷脂酰肌醇的形式存在于生物膜上，參與蛋白質(zhì)合成、脂肪代謝和調(diào)控系列細(xì)胞生理過程，是一種重要的水溶性維生素[1]。飼料中缺乏肌醇會(huì)導(dǎo)致魚類出現(xiàn)食欲不振、貧血、生長不良、鰭條糜爛、皮膚變黑、脂質(zhì)代謝異常等一種或多種缺乏癥[1]；但亦有研究報(bào)道雜交條紋鱸 (Moronechrusops×M.saxatilis)[2]和尼羅羅非魚(Oreochromisniloticus)[3]均不需要外源性添加肌醇來維持其正常的生長和生理功能。當(dāng)前的報(bào)道顯示不同的養(yǎng)殖品種對肌醇的需要量存在較大的差異，如草魚(Ctenopharyngodonidella)飼料肌醇最適肌醇添加量166～214 mg/kg[4]，鯉(Cyprinuscarpio)為440 mg/kg[5]，大西洋鮭[6](Salmonsalar)為200 mg/kg，黑鯛(Sparusmarcocephalus)為2 000 mg/kg[7]。

胭脂魚(Myxocyprinusasiaticus)是我國特有的名貴經(jīng)濟(jì)魚類，當(dāng)前養(yǎng)殖量約1萬噸。目前胭脂魚營養(yǎng)與飼料方面的研究主要集中在其開口餌料、蛋白質(zhì)、氨基酸[8,9]等方面，維生素方面的研究僅見胭脂魚對維生素C需要量的報(bào)道[10]。鑒于不同養(yǎng)殖魚類的飼料中存在需不需要添加肌醇和添加多少的問題，因此本研究在飼料中添加不同水平的肌醇，通過養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)，測定其對胭脂魚生長指標(biāo)、全魚和肌肉營養(yǎng)成分和部分血清生化指標(biāo)的影響，以判定胭脂魚幼魚正常生長時(shí)，飼料中是否需要額外添加肌醇及其適宜的添加量。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)飼料

以酪蛋白、明膠、白魚粉和糊精等為飼料原料，實(shí)驗(yàn)飼料中的肌醇添加量分別為0(對照組)、75、150、300、600和1 200 mg/kg，添加的肌醇純度為99%(Sigma I5125)。飼料原料(除玉米油和豆油)經(jīng)粉碎過0.20 mm孔徑分樣篩，按表1配比混合均勻，少量的組分采用逐級(jí)擴(kuò)大法混合。各干性飼料原料混勻后，加玉米油和豆油，繼續(xù)充分混合至無油性顆粒，再加約20%的水揉勻，然后用絞肉機(jī)制成直徑2.00 mm的條狀飼料，常溫避光用電風(fēng)扇吹干至水分<10%，破碎成長約0.5 mm的顆粒飼料，過0.90 mm孔徑分樣篩，篩去粉末及細(xì)小顆粒飼料，將篩上飼料置于-20 ℃冰柜中冷藏備用?；A(chǔ)飼料組成及營養(yǎng)指標(biāo)見表1。

1.2 實(shí)驗(yàn)魚和飼養(yǎng)管理

實(shí)驗(yàn)用胭脂魚幼魚為重慶市萬州水產(chǎn)研究所胭脂魚繁殖場提供的子二代胭脂魚，實(shí)驗(yàn)魚運(yùn)回消毒后暫養(yǎng)2周，暫養(yǎng)期間投喂對照組飼料，使其適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境及實(shí)驗(yàn)飼料。正式實(shí)驗(yàn)開始前，實(shí)驗(yàn)魚禁食24 h后，挑選規(guī)格一致、體格健壯和采食活躍的幼魚360尾，其平均初始質(zhì)量為(10.01±0.24)g。將實(shí)驗(yàn)魚隨機(jī)分為6組，每組設(shè)有3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)放養(yǎng)30尾魚，飼養(yǎng)于長江水產(chǎn)研究所室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)(RAS)中，分別投喂6組實(shí)驗(yàn)飼料，每日表觀飽食投喂3次(8：00，12:00和16:00各一次)。RAS系統(tǒng)中含18個(gè)體積為500 L的養(yǎng)殖桶中(有效水體積為400 L)和水處理及增氧設(shè)施。每日8點(diǎn)對過濾沙缸進(jìn)行反沖洗，同時(shí)清除養(yǎng)殖桶內(nèi)糞便，每日換水量約占總體積1/5(加注曝氣后的城市自來水)。養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)持續(xù)8 周，每日記錄水溫、實(shí)驗(yàn)魚攝食及死亡情況，實(shí)驗(yàn)期間水溫為25～28 ℃，pH 6.5～7.0，溶解氧>5 mg/L，氨氮濃度<0.05 mg/L。

表1 基礎(chǔ)飼料的組成及營養(yǎng)成分Tab.1 Composition of the basal experimental diets %,dry matter

注：1.維生素預(yù)混料提供每1 000 g飼料中：維生素A，2 000 IU；維生素B1，15 mg；維生素B2，20 mg；維生素B6，10 mg；維生素B12，0.02 mg；葉酸，10 mg；維生素C，400 mg；泛酸鈣，400 mg；生物素，1 mg；煙酰胺，120 mg；維生素E，250 mg；維生素D3，2 000 IU；維生素K3，10 mg.

2.無機(jī)鹽預(yù)混料提供每1 000 g飼料中：磷酸二氫鈣，16 g；磷酸氫二鉀，12 g；氯化鈉，4 g；無水硫酸鎂，2.4 g；碘酸鉀，4.8 mg；六水氯化鈷，40 mg；五水硫酸銅，40 mg；一水硫酸亞鐵，80 mg；一水硫酸鋅，120 mg；一水硫酸錳，80 mg.

1.3 樣品采集與測定方法

養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，將魚禁食24 h，稱量每桶實(shí)驗(yàn)魚的總質(zhì)量，同時(shí)計(jì)數(shù)胭脂魚尾數(shù)，計(jì)算終末體質(zhì)量、增重率、成活率和飼料系數(shù)。每個(gè)桶隨機(jī)取4尾魚測定全魚的營養(yǎng)成分，另取5條魚測定魚體形體指標(biāo)和血清生化指標(biāo)。具體的操作步驟如下：先測量魚體體長和體質(zhì)量，計(jì)算肥滿度，接著從尾部靜脈抽血，靜置2 h后在3 000 r/min離心15 min后吸取上層血清備用；在冰盤進(jìn)行解剖，分離內(nèi)臟，剝離肝臟，分別稱量體質(zhì)量，計(jì)算肝體比和臟體比；最后去背部兩側(cè)的肌肉，將所有采得的樣品存放于-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。增重率、特定生長率、飼料效率，成活率、肥滿度、肝體比和臟體比的計(jì)算公式與文獻(xiàn)[11]中所述相同。

全魚、肌肉及飼料的粗脂肪含量測定采用索氏抽提法(乙醚)；粗蛋白含量測定采用凱氏定氮法(GB/T5009.5-2003)；灰分含量測定采用550 ℃馬弗爐灰化法(GB/T5009.4-2003)；肌肉和全魚水分采用105 ℃恒溫干燥失重法測定；血清生化指標(biāo)采用CHEMIX-800全自動(dòng)生化分析儀分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

所有數(shù)據(jù)均以樣本平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差(mean±SD)表示，采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件中one-way ANOVA方差分析和Duncan氏均值多重比較對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，P<0.05即認(rèn)為有顯著差異；采用折線(Broken-line)模型確定胭脂魚飼料中肌醇的適宜添加量[12]。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料肌醇對胭脂魚幼魚生長性能和形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響

由表2可知，隨飼料肌醇添加水平的增加，胭脂魚幼魚的終末體質(zhì)量、增重率以及特定生長率呈現(xiàn)出先上升后穩(wěn)定的趨勢，300 mg/kg實(shí)驗(yàn)組魚的終末體質(zhì)量、增重率以及特定生長率顯著高于對照組；隨飼料肌醇添加水平的增加，胭脂魚幼魚的成活率呈現(xiàn)出先上升后穩(wěn)定的趨勢，0、75和150 mg/kg實(shí)驗(yàn)組的成活率顯著低于其它實(shí)驗(yàn)組，而其它各組之間的成活率無顯著差異；飼料系數(shù)隨飼料肌醇添加水平的增加而呈現(xiàn)先下降后穩(wěn)定的趨勢，300 mg/kg實(shí)驗(yàn)組飼料系數(shù)最低，為1.19。150 mg/kg實(shí)驗(yàn)組肝體比顯著高于600 mg/kg和1 200 mg/kg組；飼料肌醇添加水平對胭脂魚幼魚的肥滿度無顯著影響。300、600、1 200 mg/kg實(shí)驗(yàn)組的臟體比和0、75 mg/kg實(shí)驗(yàn)組之間存在顯著差異。對肌醇添加水平與胭脂魚特定生長率進(jìn)行折線回歸分析得出飼料中肌醇添加量為310.3 mg/kg(圖1)，胭脂魚幼魚獲得最佳生長性能。

表2 飼料肌醇對胭脂魚幼魚生長性能和形體指標(biāo)的影響Tab.2 Effects of dietary myo-inositol levels on growth performance and body index of juvenile Chinese sucker,M.asiaticus

注：同行數(shù)據(jù)后有一個(gè)相同小寫字母者或無上標(biāo)表示差異不顯著(P>0.05，Duncan’s法)。

2.2 飼料肌醇對胭脂魚幼魚全魚和肌肉常規(guī)組成的影響

由表3可知，飼料中的肌醇添加水平對胭脂魚幼魚全魚水分、粗蛋白、粗脂肪以及灰分含量均無顯著影響。飼料中肌醇添加水平對胭脂魚幼魚肌肉水分和粗蛋白亦無顯著影響，但肌肉粗脂肪含量受飼料肌醇添加水平影響，其中300 mg/kg實(shí)驗(yàn)組粗脂肪含量顯著低于對照組。

表3 飼料肌醇對胭脂魚幼魚全魚和肌肉常規(guī)組成的影響Tab.3 Effect of dietary myo-inositol levels on the whole body and muscle composition of juvenile Chinese sucker,M.asiaticus

注：同行數(shù)據(jù)后有一個(gè)相同小寫字母者或無上標(biāo)表示差異不顯著(P>0.05，Duncan’s法)。

圖1 胭脂魚幼魚特定生長率與飼料中肌醇的折線回歸分析Fig.1 Broken-line analysis between specific growth rate of juvenile Chinese sucker,M.asiaticus and dietary myo-inositol levels

2.3 飼料肌醇對胭脂魚幼魚血清生化指標(biāo)的影響

表4顯示了飼料中不同添加水平的肌醇對胭脂魚幼魚血清生化指標(biāo)的影響。對照組的血清總膽固醇(TCHO)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的含量顯著低于150～600 mg/kg之間的3組；對照組的血清甘油三酯(TG)顯著高于其它各實(shí)驗(yàn)組；0和75 mg/kg 2組的血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)的活性顯著高于其它4組；飼料肌醇對高密度酯蛋白膽固醇(HDL-C)無顯著影響(P>0.05)。

3 討論

3.1 飼料肌醇對胭脂魚幼魚生長性能的影響

本實(shí)驗(yàn)中，對照組除出現(xiàn)增重率和成活率降低和飼料系數(shù)升高外，沒有觀察到肉眼可見的諸于表皮破損、體表出血以及鰭腐爛等在其它魚類上發(fā)現(xiàn)的肌醇缺乏癥狀。在一些魚類如雜交條紋鱸幼魚[2]、團(tuán)頭魴(Megalobramaamblycephala)[13]、斑點(diǎn)叉尾鮰(Ictaluruspunctacus)[14]以及亞洲黑鱸(Dicentracrchuslabrax)[15]等肌醇的營養(yǎng)研究實(shí)驗(yàn)中，也未觀察到肉眼可見的缺乏癥狀。這可能是幼魚自身能夠合成滿足其基礎(chǔ)生長代謝需要的肌醇，而不需要在飼料中額外添加肌醇[2,3]。此外，本實(shí)驗(yàn)中對照組飼料可能含有少量的肌醇，因此胭脂魚幼魚可能本身具有合成肌醇的能力或者是對照組飼料含有少量的肌醇能夠滿足其維持正常的生理代謝功能。

表4 飼料肌醇對胭脂魚幼魚部分血清生化指標(biāo)的影響Tab.4 Effect of dietary myo-inositol levels on some serum biochemical indexes of juvenile Chinese sucker,M.asiaticus

注：同行數(shù)據(jù)后凡有一個(gè)相同小寫字母者或無上標(biāo)表示差異不顯著(P>0.05，Duncan’s法)。

多數(shù)實(shí)驗(yàn)證明，魚類需要在飼料中補(bǔ)充適宜的肌醇來促進(jìn)魚類快速生長，并且由于魚類種類和規(guī)格的不同，其需要量也各有差異。如當(dāng)飼料中肌醇添加水平為400 mg/kg時(shí)，奧尼羅非魚(Oreochromisnilotics×O.aureus)[16]幼魚生長性能顯著增高；當(dāng)飼料中肌醇添加水平為300 mg/kg時(shí)，大西洋鮭[6]生長速度顯著加快；當(dāng)飼料中肌醇添加水平為550～900 mg/kg時(shí)，真鯛(Pagrosomusmajor)[17]增重率也顯著增高。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，300 mg/kg 肌醇實(shí)驗(yàn)組的增重率和特定增長率顯著高于對照組，表明飼料中添加適量的肌醇對胭脂魚幼魚的生長具有明顯的促進(jìn)作用。

本實(shí)驗(yàn)中，對照組的成活率要顯著低于實(shí)驗(yàn)組，類似的結(jié)果如在黑鯛[7]幼魚、卵形娼鰺(Trachinotusovatus)[18]和幼建鯉(CyprinuscarpiovarJian)[19]飼料中添加適宜的肌醇時(shí)，死亡率明顯降低，說明肌醇可提高魚類的成活率。

3.2 飼料肌醇含量對胭脂魚幼魚全魚和肌肉體成分的影響

本研究顯示，飼料中肌醇對全魚體成分無顯著性影響,這和草魚[4]、大西洋鮭[6]、哲羅鮭(Huchotaimen)[20]的研究結(jié)果基本吻合。然而，本研究中300 mg/kg實(shí)驗(yàn)組的肌肉中的脂肪含量顯著低于對照組，這與團(tuán)頭魴[13]和草魚[4]的研究結(jié)果相似。其原因可能是肌醇作為一種親脂性維生素,其在體內(nèi)與某些脂類的代謝過程相關(guān)，能夠促進(jìn)肌肉組織中的脂肪代謝,阻止脂肪在肌肉中過多沉積[21,22]。

3.3 飼料肌醇對胭脂魚幼魚部分血清生化指標(biāo)的影響

飼料肌醇對魚類的血清脂質(zhì)指標(biāo)有顯著影響。飼料中適量的肌醇能顯著提高草魚[4]、團(tuán)頭魴[13]和奧尼羅非魚(Oreochromisniloticus×O.aureus)[16]血清中的TCHO和LDL-C含量。在本實(shí)驗(yàn)中，飼料中添加適量的肌醇亦顯著提高了胭脂魚幼魚血清中TCHO和LDL-C。其原因可能是肌醇促進(jìn)了魚類肝臟中的脂肪分解，提高了肝臟中飽和脂肪酸含量，而飽和脂肪酸被認(rèn)為可升高TCHO，從而使肝臟TCHO水平增加[23]。LDC-L主要功能是轉(zhuǎn)運(yùn)體內(nèi)的TCHO，將肝臟內(nèi)的TCHO經(jīng)血液轉(zhuǎn)運(yùn)到各個(gè)組織進(jìn)行利用，因此肝臟TCHO水平的增加可能促使LDC-L加快對肝臟TCHO的轉(zhuǎn)運(yùn)，從而使血清中TCHO和LDC-L水平同時(shí)升高。本實(shí)驗(yàn)中，胭脂魚幼魚血清中TG水平隨著飼料肌醇含量的增加顯著降低，其原因可能是肌醇促進(jìn)胭脂魚幼魚體內(nèi)脂肪的分解，產(chǎn)生較多的n-3脂肪酸，它們阻礙TG滲入到肝的極低密度脂蛋白顆粒中，這導(dǎo)致分泌到血循環(huán)中的TG減少，從而降低了血清中TG的含量[24]。

近年來血清中轉(zhuǎn)氨酶活性常被用作評(píng)估水產(chǎn)動(dòng)物肝臟健康程度的重要生化指標(biāo)[25，26]，因?yàn)楫?dāng)肝細(xì)胞遭受破壞或細(xì)胞膜通透性增加時(shí)，AST和ALT滲入血液，致使血液中轉(zhuǎn)氨酶活性顯著升高[27]。在本實(shí)驗(yàn)中，飼料中缺乏肌醇時(shí)，胭脂魚幼魚血清中AST和ALT水平升高，可能是由于胭脂魚攝入肌醇不足時(shí)，導(dǎo)致肝臟脂肪代謝異常，從而引起肝細(xì)胞損傷，繼而引起血清中AST和ALT活性升高。

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(責(zé)任編輯：鄧 薇)

Effects of dietary myo-inositol on growth performance,body composition and some serum biochemical indexes of Chinese sucker,Myxocyprinusasiaticus

JIANG Ming1,ZHANG Zhi-qiang2,WEN Hua1,YANG Chang-geng1,WU Fan1,LIU Wei1,TIAN Juan1,ZHOU Meng-xin2

(1.FishNutritionandFeedDivision,YangtzeRiverFisheriesResearchInstitute,ChineseAcademyofFisherySciences,Wuhan,China430223；2.CollegeofFisheriesandLifeScience,ShanghaiOceanUniversity,Shanghai201306,China)

A growth trial was conducted to investigate the effects of dietary myo-inositol on growth performance,body composition and some serum biochemical indexes of Chinese sucker,Myxocyprinusasiaticus.Semi-purified diets supplemented with six levels of myo-inositol (0,75,150,300,600,and 1 200 mg/kg diet,respectively) were fed to triplicate groups of Chinese sucker (initial mean weight: 10.01±0.24 g ) for 8 weeks.The results showed that,weight gain rate,survival rate and special growth rate increased at first and then remained stable with the increasing dietary myo-inositol content,and all of them reached the maximum values at 300 mg/kg diet.The crude lipid in muscle at 300 mg/kg diet was lower than the control group，while there were no significant differences in whole body composition.Serum total cholesterol,low density lipoprotein cholesterol content,the triiglyceride,aspartate aminotransferase and alanine aminotransferase were all significantly influenced by dietary myo-inositol supplementation.Broken-line regression analysis based on SGR showed that juvenile Chinese sucker could obtain optimal growth when dietary myo-inositol supplementation was 310.3mg/kg diet.

juvenile Chinese sucker;myo-inositol;growth performance;body composition;serum biochemical indexes

2017-02-27；

2017-03-27

2012年公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)經(jīng)費(fèi) (201203086-06)

蔣 明(1979-)，副研究員，從事水產(chǎn)動(dòng)物營養(yǎng)與飼料研究。E-mail：jiangming@yfi.ac.cn

文 華。E-mail：wenhua.hb@163.com

S963.16

A

1000-6907-(2017)04-0063-06