Kif2a和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密度對乳腺癌的預(yù)后價值研究

錢金鋒，楊其昌，張曉娟，朱燕

（江蘇省南通市第一人民醫(yī)院 病理科，江蘇 南通 226001）

Kif2a和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密度對乳腺癌的預(yù)后價值研究

錢金鋒，楊其昌，張曉娟，朱燕

（江蘇省南通市第一人民醫(yī)院 病理科，江蘇 南通 226001）

目的 探討驅(qū)動蛋白家族成員2a（Kif2a）和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密度（ND）對乳腺癌的臨床病理學(xué)意義及預(yù)后評估。方法 采用免疫組織化學(xué)法檢測116例乳腺癌組織中Kif2a蛋白的表達(dá)，按ND分為ND=0組、ND≤40%組和ND＞40%組，分析Kif2a蛋白的表達(dá)、ND與乳腺癌患者的臨床病理因素（年齡、腫瘤部位、腫瘤大小、組織學(xué)類型、TNM分期）、內(nèi)分泌表型（雌激素受體、孕激素受體）、HER-2及預(yù)后的關(guān)系。采用Kaplan-Meier生存曲線分析，評價Kif2a蛋白表達(dá)、ND與乳腺癌患者的預(yù)后。結(jié)果 乳腺癌組織中Kif2a蛋白的表達(dá)、ND均與患者 TNM 分期及 HER-2的陽性表達(dá)呈正相關(guān)（rs=0.251、0.489、0.536和 0.245，P=0.007、0.000、0.000和0.008），與其他臨床病理因素?zé)o關(guān)（P＞0.05）。Kif2a的表達(dá)與 ND 呈正相關(guān)（rs＝0.484，P=0.000）。生存曲線分析結(jié)果顯示，Kif2a蛋白表達(dá)越強(qiáng)、ND越高，無瘤生存時間越短（P＜0.05）。結(jié)論 驅(qū)動蛋白Kif2a、ND可能是乳腺癌患者預(yù)后的獨立因素，其對判斷乳腺癌患者的預(yù)后具有一定價值。

乳腺癌；Kif2a；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密度；預(yù)后

Abstract:Objective To investigate the clinicopathological significance and prognosis of kinesin family member 2a (Kif2a)expression and lymph node metastasis density (ND)in breast cancer.Methods The expression of Kif2a protein in 116 cases of breast cancer was detected by immunohistochemistry.According to the results of ND the patients were divided into ND=0 group,ND≤40%group and ND＞40%group.Relations of of Kif2a expression and ND with the clinicopathological factors (age,tumor location,tumor size,histological type and TNM stage),endocrine phenotypes (ER,PR),HER-2 and prognosis in breast cancer patients were analysed.Kaplan-Meier survival curve was applied to evaluate the expression of Kif2a protein,ND and prognosis of the patients with breast cancer.Results Both Kif2a protein expression and ND were positively correlated with TNM stage and positive HER-2 expression in breast cancer(rs=0.251,0.489,0.536 and 0.245;P=0.007,0.000,0.000 and 0.008),but not correlated with other clinicopathological factors (P＞0.05).The expression of Kif2a was positively correlated with ND(rs=0.484,P=0.000).Survival curve analysis showed that the higher the expression of Kif2a protein,the higher the ND,the shorter the tumor-free survival time (P＜0.05).Conclusions Kif2a and ND may be independent prognostic factors in patients with breast cancer,and may have certain value in predicting the prognosis of patients with breast cancer.

Keywords:breast cancer;Kif2a;lymph node metastasis density;prognosis

世界衛(wèi)生組織報道，2012年全球女性新發(fā)乳腺癌約1676600例，死亡約521900例，位居各種癌癥的首位[1]。我國乳腺癌發(fā)病率有逐年上升的趨勢，乳腺癌發(fā)病的高峰年齡為45～60歲，并呈年輕化趨勢[2]。本文通過回顧性分析，探討驅(qū)動蛋白家族成員2a（kinesin family member 2a，Kif2a）的表達(dá)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密度（lymph node metastasis density，ND）[3]與乳腺癌患者臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 研究資料

選取2004年01月-2006年12月江蘇省南通市第一人民醫(yī)院病理科116例乳腺癌患者，術(shù)前未接受化療或放療，患者均為女性；年齡35～81歲，平均56歲。按照WHO乳腺癌分類：浸潤性導(dǎo)管癌101例，其他類型：包括浸潤性小葉癌7例，黏液腺癌5例，髓樣癌3例。TNM 分期：Ⅰ期15例，Ⅱ期67例，Ⅲ期27例，Ⅳ期7例。116例乳腺癌患者中，腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移52例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移64例。按照腫瘤的大小分為兩組：≤2 cm患者48例，＞2 cm患者68例。

1.2 方法

本研究所用的免疫組織化學(xué)試劑鼠抗人單克隆抗體Kif2a（ab55383）購自美國Abcam公司，工作濃度（1∶80）。免疫組織化學(xué)采用SP染色法。評分標(biāo)準(zhǔn)：光鏡下觀察，40倍物鏡鏡下隨機(jī)選?。?0個視野，每個視野＞200個細(xì)胞。根據(jù)細(xì)胞染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞數(shù)進(jìn)行半定量。染色強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)：無著色計0分，淺棕色計1分，中等度著色計2分，深棕色計3分。陽性細(xì)胞細(xì)胞數(shù)：無細(xì)胞陽性計0分，陽性細(xì)胞數(shù)1%～30%計1分，30%（不包含）～70%計2分，＞70%計3分。將2項分?jǐn)?shù)累計，0分為陰性（-），1～3分為陽性（+），4～6分為強(qiáng)陽性（++）。Kif2a是正常細(xì)胞分裂所必需的重要因子，在正常組織中也有表達(dá)。在乳腺癌組織中表達(dá)4～6分。分為低表達(dá)組≤4分，高表達(dá)組5～6分。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件，相關(guān)分析用Spearman法，Kaplan-Meier制做生存曲線，比較用Log-rankχ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 乳腺癌患者Kif2a的表達(dá)及N D情況

Kif2a在乳腺癌組織中的免疫組織化學(xué)法染色陽性細(xì)胞主要定位于細(xì)胞質(zhì)，細(xì)胞核少量表達(dá)[4]。116例乳腺癌患者中Kif2a低表達(dá)46例，高表達(dá)70例。116例乳腺癌患者中，腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移52例。按ND分為：ND=0組64例、ND≤40%組34例、ND＞40%組18例。見圖1。

2.2 乳腺癌患者Kif2a、N D與患者臨床病理特征的相關(guān)性

Kif2a與乳腺癌TNM分期、HER-2表達(dá)呈正相關(guān)（P＜0.05）。ND與乳腺癌TNM分期、HER-2表達(dá)呈正相關(guān)（P＜0.05）。而兩者與年齡、腫瘤部位、腫瘤大小、組織學(xué)類型及內(nèi)分泌表型[雌激素受體（estrogen receptor，ER）、孕激素受體（progesterone receptor，PR）]無關(guān)（P＞0.05）。見表 1。

2.3 乳腺癌患者Kif2a與N D的相關(guān)性

Kif2a在116例乳腺癌低表達(dá)組中淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生率為 13.0%（6/46），高表達(dá)組為 65.7%（46/70）。Kif2a的表達(dá)隨著乳腺癌ND的增加，而表達(dá)增強(qiáng)，表明Kif2a在乳腺癌中的表達(dá)水平與ND呈正相關(guān)（P＜0.05）。見表 2。

2.4 乳腺癌患者Kif2a、N D與預(yù)后的相關(guān)性

對所有患者出院即開始隨訪，術(shù)后3年內(nèi)隨訪1次/3個月，4～6年內(nèi)隨訪1次/6個月，6年后隨訪1次/年。隨訪結(jié)果終點為死亡，次要終點為復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。隨訪截止時間為2016年12月31日。本組患者隨訪32～143個月，平均103個月，隨訪98例，隨訪率為 84.5%（98/116），失訪率為 15.5%（18/116）。患者5年生存率為86.7%（85/98），10年生存率為68.4%（67/98）。采用Log-rankχ2檢驗和Kaplan-Meier生存曲線，分析乳腺癌患者Kif2a、ND與預(yù)后的關(guān)系，結(jié)果顯示，乳腺癌患者Kif2a低表達(dá)組5和10年的生存率分別為 93.5%（43/46）和 84.8%（39/46）；高表達(dá)組5和10年的生存率分別為85.7%（60/70）和64.3%（45/70），表明Kif2a表達(dá)越強(qiáng)，無瘤生存時間越短（χ2=5.154，P=0.023）（見圖 2）。ND=0 組、ND≤40%組及ND＞40%組5年總生存率分別為98.4%（63/64）、82.4%（28/34）和 66.7%（12/18），10 年總生存率分別為 89.1%（57/64）、67.6%（23/34）和22.2%（4/18），表明隨著ND的增加，無瘤生存時間越短（χ2=35.492，P=0.000）（見圖 3）。

表1 乳腺癌患者臨床病理特征與Kif2a、N D的關(guān)系 例

表2 乳腺癌患者Kif2a與N D的相關(guān)性 例

圖2 乳腺癌患者Kif2a表達(dá)對預(yù)后生存的影響

圖3 乳腺癌患者N D對預(yù)后生存的影響

3 討論

Kif2a是微管驅(qū)動蛋白Kinesin-13中的一個亞家族，其包括 Kif2a、Kif2b 及 Kif2c/MCAK 3[5]。驅(qū)動蛋白Kif2a具有微管解聚酶的功能，參加細(xì)胞的生長、發(fā)育，有絲分裂活動，染色體移動，細(xì)胞膜運輸，神經(jīng)細(xì)胞軸突的生長、延伸，以及其他過程[6]。驅(qū)動蛋白與腫瘤的密切關(guān)系也逐漸引起人們的注意。驅(qū)動蛋白在細(xì)胞的有絲分裂過程中過度表達(dá)，其行為使微管動力增加，加快并促進(jìn)細(xì)胞的有絲分裂和增殖。有研究表明，Kinesin-13家族中的其他成員Kif2b、Kif2c/MCAK 3與胃癌、乳腺癌有關(guān)[7]。但Kif2a與腫瘤的相關(guān)研究國內(nèi)外較少報道。本研究檢測Kif2a在116例乳腺癌患者癌組織中的表達(dá)情況。結(jié)果顯示，乳腺癌組織中Kif2a的表達(dá)與患者TNM分期、HER-2的陽性表達(dá)及ND呈正相關(guān)，與WANG[4]和ZHANG等[8]對Kif2a在惡性腫瘤中的研究相一致。Kif2a是細(xì)胞生長、發(fā)育，有絲分裂及細(xì)胞增殖所必須的因子，其表達(dá)的強(qiáng)度顯示細(xì)胞增殖的速度，所以其在不同細(xì)胞周期中呈不同程度的表達(dá)。Kif2a在有腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者和原發(fā)乳腺癌組織中表達(dá)升高，并且原發(fā)乳腺癌組織中高表達(dá)患者的5年生存率為85.7%（60/70），而低表達(dá)的生存率為 93.5%（43/46），高表達(dá)患者的5年生存率遠(yuǎn)低于低表達(dá)者。研究結(jié)果提示，高表達(dá)的腫瘤組織促進(jìn)腫瘤發(fā)生、轉(zhuǎn)移，發(fā)生轉(zhuǎn)移的患者，復(fù)發(fā)的可能大大提高，從而影響患者的生存質(zhì)量，從生物學(xué)角度上直接影響細(xì)胞的增殖，參與細(xì)胞有絲分裂。驅(qū)動蛋白Kif2a不僅與腫瘤細(xì)胞的有絲分裂、增殖密切相關(guān)，而且與腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，可以把其看作是一個癌基因。并且發(fā)現(xiàn)，隨著Kif2a陽性表達(dá)的增強(qiáng)，患者5和10年的無瘤生存時間越短。提示Kif2a基因可作為乳腺癌預(yù)后判斷的指標(biāo)，與患者的預(yù)后密切相關(guān)。因此，Kif2a有望成為乳腺癌早期診斷和預(yù)測乳腺癌預(yù)后的生物分子。

乳腺癌是一種系統(tǒng)性疾病，轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)是多種因素共同作用的結(jié)果，乳腺癌預(yù)后關(guān)系與各臨床病理特征的報道結(jié)果不盡相同[9-10]。研究證實，隨著腋窩淋巴結(jié)清掃數(shù)目的增加，腋窩淋巴結(jié)分期的準(zhǔn)確性越高，清掃的淋巴結(jié)數(shù)目越多，發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的機(jī)會越大[11]。本研究結(jié)果顯示，乳腺癌組織中ND與TNM分期、HER-2的陽性表達(dá)呈正相關(guān)，與其他臨床病理因素?zé)o關(guān)。并發(fā)現(xiàn)隨著ND的增加，患者無瘤生存時間越短。提示ND預(yù)示著患者的預(yù)后不良和低生存率，進(jìn)一步提示ND在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展過程中的重要作用，對臨床的治療和預(yù)后評估具有重要意義。本研究結(jié)果與YAMASHITA等[12]對382例胃癌樣本的研究報道結(jié)果一致，因此筆者推斷ND可作為乳腺癌預(yù)后的參考評估標(biāo)準(zhǔn)，ND＞40%提示預(yù)后不良。因此，乳腺癌患者的ND能夠預(yù)測癌的臨床分期，以及有效預(yù)測乳腺癌患者的預(yù)后。

綜上所述，驅(qū)動蛋白Kif2a、ND可能是乳腺癌患者預(yù)后的獨立因素，其對判斷乳腺癌患者的預(yù)后具有一定價值。

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（童穎丹 編輯）

Prognostic value of Kif2a and lymph node metastasis density in breast cancer

Jin-feng Qian,Qi-chang Yang,Xiao-juan Zhang,Yan Zhu
(Department of Pathology,the First People's Hospital of Nantong,Nantong,Jiangsu 226001,China)

R737.9

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2017.23.008

1005-8982（2017）23-0043-04

2016-02-02

朱燕，E-mail：zhuyan85129087@163.com；Tel：0513-85061087