組織微陣列技術(shù)研究腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因在鼻咽癌中的臨床意義

河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院（471003）劉勤

1 研究資料與方法

1.1 研究資料 選取2015年12月～2016年12月我院收治的156例患者作為此次研究對(duì)象，其中鼻咽癌、癌旁鼻咽上皮及鼻炎慢性炎性黏膜上皮分別為74例、40例及42例。

1.2 方法 組織微陣列切片在經(jīng)過脫蠟、水化后，放置在過氧化氫中30分鐘，過氧化氫的濃度在3%左右，主要是為了阻斷內(nèi)源性過氧化物酶。把組織微陣列切片放在檸檬酸鹽緩沖劑中，為0.1mol/L，對(duì)微波抗原進(jìn)行修復(fù)，修復(fù)的時(shí)間為20分鐘，使用胰蛋白酶對(duì)酶消化抗原進(jìn)行修復(fù)，胰蛋白酶的濃度在0.1%左右，在37℃中消化25分鐘，正常山羊或兔血清應(yīng)在室溫進(jìn)行封閉，封閉的時(shí)間為半個(gè)小時(shí)。然后使用AEC染色，利用顯微鏡對(duì)染色的強(qiáng)度進(jìn)行控制，使用蘇木精進(jìn)行復(fù)染，再取水性封片劑和相應(yīng)規(guī)格蓋玻片進(jìn)行封片，根據(jù)各抗體的陽性對(duì)照片作為陽性對(duì)照的依據(jù)，根據(jù)PBS作為一抗陰性對(duì)照依據(jù)。

1.3 觀察指標(biāo) 根據(jù)蛋白質(zhì)表達(dá)評(píng)分[1]對(duì)陽性強(qiáng)度和陽性細(xì)胞數(shù)進(jìn)行綜合的評(píng)分。陽性染色強(qiáng)度：0分：細(xì)胞沒有染色；1分：細(xì)胞呈淺紅色，弱陽性；2分：細(xì)胞呈紅色，沒有背景染色，或細(xì)胞呈深紅色，有淺紅色背景，為中等陽性；3分：細(xì)胞呈深紅色，沒有背景著色，為強(qiáng)陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué) 以結(jié)果P＜0.05作為有顯著性差異標(biāo)準(zhǔn)，X2檢驗(yàn)計(jì)數(shù)資料，采用SPSS19.0軟件對(duì)上述數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。

2 結(jié)果

模型基質(zhì)金屬蛋白酶-1和模型細(xì)胞骨架連結(jié)蛋白埃滋蛋白在鼻咽癌組織中的陽性表達(dá)明顯高于鼻咽炎性上皮；鼻咽癌組織中轉(zhuǎn)移抑制因子和金屬蛋白酶組織抑制因子-2蛋白的陽性表達(dá)明顯低于其在癌旁鼻炎上皮組織和鼻咽炎性黏膜上皮中的表達(dá)，數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。癌旁鼻炎上皮及慢性炎性鼻炎上皮組織中模型基質(zhì)金屬蛋白酶-1和模型細(xì)胞骨架連結(jié)蛋白埃滋蛋白的陽性表達(dá)相比；模型基質(zhì)金屬蛋白酶-2和細(xì)胞粘附因子蛋白在鼻咽癌、癌旁鼻炎上皮和慢性炎性鼻炎上皮組織中的表達(dá)比較，數(shù)據(jù)差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。詳見附表。

附表 轉(zhuǎn)移相關(guān)基因在鼻咽癌組織微陣列中的蛋白質(zhì)表達(dá)[n(%)]

3 討論

此次研究根據(jù)已經(jīng)制作的鼻咽癌組織微陣列，免疫組化法對(duì)模型基質(zhì)金屬蛋白酶-1、模型基質(zhì)金屬蛋白酶-2、模型細(xì)胞骨架連結(jié)蛋白埃滋蛋白、轉(zhuǎn)移抑制基因、細(xì)胞粘附因子及金屬蛋白酶組織抑制因子-2在鼻咽癌組織微陣列中的蛋白表達(dá)進(jìn)行檢測，經(jīng)過檢測后發(fā)現(xiàn)，模型基質(zhì)金屬蛋白酶-1及模型基質(zhì)金屬蛋白酶-2及模型細(xì)胞骨架連結(jié)蛋白埃滋蛋白表達(dá)與鼻咽癌臨床進(jìn)展和鼻咽癌發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈現(xiàn)出正相關(guān)，說明模型基質(zhì)金屬蛋白酶-1及模型基質(zhì)金屬蛋白酶-2及模型細(xì)胞骨架連結(jié)蛋白埃滋蛋白在鼻咽癌侵襲及轉(zhuǎn)移的過程中起到了重要的作用，模型基質(zhì)金屬蛋白酶-1和轉(zhuǎn)移抑制因子可以作為鼻咽癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的預(yù)測指標(biāo)?？偠灾?，多個(gè)腫瘤轉(zhuǎn)移基因的蛋白質(zhì)表達(dá)在鼻咽癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和進(jìn)展的過程中起到了重要的作用，模型基質(zhì)金屬蛋白酶-1可以作為臨床預(yù)測鼻咽癌淋巴轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志。