免疫印跡法檢測(cè)門(mén)診消化不良患者幽門(mén)螺桿菌感染及其分型

北京懷柔醫(yī)院（101400）梁文燕

幽門(mén)螺桿菌感染一直被認(rèn)為是慢性胃炎、消化性潰瘍、胃癌的主要致病因素，是世界上感染率最高的細(xì)菌[1]。人們對(duì)幽門(mén)螺桿菌的感染心生恐懼，紛紛要求根除Hp，近年來(lái)隨著抗菌藥物的廣泛使用，抗生素的不良反應(yīng)越發(fā)嚴(yán)重，抗Hp治療的效果也不斷降低。門(mén)診經(jīng)常遇到表現(xiàn)為消化不良的患者，主動(dòng)或是被動(dòng)來(lái)檢查Hp，要求治療，那么這些Hp陽(yáng)性患者該不該一概而論的全部治療呢？現(xiàn)已有研究表明，并非所有Hp感染都會(huì)引發(fā)疾病，Hp感染時(shí)20%～30%沒(méi)癥狀，50%以上感染者能引起慢性炎癥發(fā)生，可能會(huì)有有消化不良的表現(xiàn)[2]。本研究旨在探討經(jīng)13C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)幽門(mén)螺桿菌（H.pylori）為陽(yáng)性消化不良者，針對(duì)這部分患者再進(jìn)行免疫印跡法分型檢測(cè)，觀察分析其結(jié)果。

1 資料和方法

1.1 一般資料 入選標(biāo)準(zhǔn)：2015年9月～2016年12月本院收治的312患者例因消化不良表現(xiàn)為上腹部不適或疼痛、胃脹、燒心、噯氣等癥狀，經(jīng)行13C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)Hp陽(yáng)性的患者，男性156例，女性146例，年齡14～44歲為青年組，平均（28.6±14.2）歲，74例；45～59歲為中年組，平均（51.3±7.2）歲，123例；60歲以上為老年組，平均（67.4±6.6）歲，105例，所有患者抽靜脈血2ml，離心取10μL血清檢測(cè)。

1.2 儀器及試劑 Hp抗體分型檢測(cè)（免疫印跡法）（深圳市伯特勞生物制品有限公司提供）。

1.3 研究方法 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作：將10μL血清與緩沖液同時(shí)加至孵育槽中與印跡膜孵育30分鐘，再次洗凈后加入顯色劑反應(yīng)5～10分鐘后，與Hp標(biāo)準(zhǔn)區(qū)帶比較，檢測(cè)細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白（CagA、空泡毒素A(VacA)、尿素酶A(UreA)、尿素酶B(UreB)）的結(jié)果。

1.4 Hp感染判斷標(biāo)準(zhǔn) 采用我國(guó)衛(wèi)生部發(fā)布的Hp感染標(biāo)準(zhǔn)對(duì)結(jié)果進(jìn)行判斷：①HpⅠ型：結(jié)果顯示CagA和（或）VacA抗體陽(yáng)性，尿素酶抗體A、B均為陽(yáng)性；②HpⅡ型：結(jié)果僅有尿素酶抗體A、B呈陽(yáng)性，而CagA和VacA抗體呈現(xiàn)陰性；③Hp陰性：CagA、VacA、UreA、UreB抗體均表現(xiàn)為陰性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，采用χ2檢驗(yàn)和多組之間兩兩比較的χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Hp感染分型與性別關(guān)系 312例再行Hp抗體分型檢測(cè)（免疫印跡法）分型檢測(cè)302例，Ⅰ型235例，男性為121例，陽(yáng)性率77.6%，女性114例，陽(yáng)性率78.%，應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行卡方分析，卡方值為0.1121，P＞0.05，表明在Hp抗體分型檢測(cè)（免疫印跡法）分型檢測(cè)，Ⅰ型、Ⅱ型陽(yáng)性率在男女間并不存在差異，見(jiàn)附表1。

2.2 312例患者行Hp抗體分型檢測(cè)（免疫印跡法）分型，檢測(cè)出陽(yáng)性結(jié)果302例，陽(yáng)性率96.7%，其中Ⅰ型235例，占總陽(yáng)性77.8%（235/302)；Ⅱ型67例，占總陽(yáng)性22.2%（67/302），HP陰性10例，Ⅰ型陽(yáng)性率高于Ⅱ型，具體見(jiàn)附表2。

2.3 幽門(mén)螺桿菌兩型分布的特征 按年齡分布分3組。年齡14～44歲為青年組，陽(yáng)性74例，陽(yáng)性率53.4%（40/74）；45～59歲為中年組，陽(yáng)性123例，陽(yáng)性率80.5%（99/123）；60歲以上為老年組陽(yáng)性105例，陽(yáng)性率91.8%（96/105）；應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行多組間的兩兩比較，并行χ2檢驗(yàn)，經(jīng)計(jì)算青年組和中年組的χ2值為101.66，P<0.0125，青年組和老年組的χ2值為191.05，P<0.0125，中年組和老年組的χ2值為56.65，P<0.0125有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，老年感染率最高，以Ⅰ型為主，見(jiàn)附表3。

附表1 Hp抗體分型檢測(cè)及性別關(guān)系

附表2 Hp抗體分型檢測(cè)及臨床分型

附表3 Hpylori感染和年齡的關(guān)系

3 討論

我國(guó)是幽門(mén)螺桿菌高發(fā)國(guó)家，世界衛(wèi)生組織（WHO）已將其列為胃癌的頭號(hào)致癌因子，臨床上一般將其分為兩類(lèi)[3]：即Ⅰ型和Ⅱ型。Ⅰ型可產(chǎn)細(xì)胞毒素Hp菌株，其中細(xì)胞毒（Cag A）蛋白，空泡毒素（Vac A）蛋白毒力較強(qiáng)。這類(lèi)菌株能使上皮細(xì)胞出現(xiàn)空泡、變形和損害，易引起潰瘍和誘發(fā)癌變。Ⅱ型是不產(chǎn)生細(xì)胞毒素的Hp，即CagA 和VacA 陰性菌株，這類(lèi)菌株毒性較小，感染后一般只是引起慢性淺表性胃炎而無(wú)臨床癥狀[4]，因此檢測(cè)HP分型對(duì)指導(dǎo)Hp感染的治療具有非常重要的意義。本研究顯示，Ⅰ型感染在男女間并不存在差異，老年患者感染率最高，13C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)陽(yáng)性患者接受分型檢測(cè)其陽(yáng)性率為96.7%，兩種檢測(cè)方式一致性較高，在檢測(cè)有無(wú)Hp感染方面二者均可，Hp分型檢測(cè)更加對(duì)臨床工作有指導(dǎo)意義。若為Ⅰ型感染，主張積極給予抗HP治療，若為Ⅱ型感染，可不予治療，隨訪觀察。這樣就可以避免見(jiàn)Hp就殺，廣泛應(yīng)用抗生素的現(xiàn)象發(fā)生。臨床上用來(lái)診斷感染的方法很多，如胃組織做快速尿酶測(cè)定，組織切片染色，細(xì)菌培養(yǎng)。13C呼氣試驗(yàn)等，但這些結(jié)果易受試劑質(zhì)量，標(biāo)本量，反應(yīng)時(shí)間，環(huán)境溫度，用藥情況的影響，還需采用侵入性、創(chuàng)傷性的手段來(lái)采集樣本，給患者帶來(lái)一定的痛苦和心理負(fù)擔(dān)；而免疫印跡法為無(wú)創(chuàng)傷性診斷檢測(cè)方法，還具有敏感性高、特異性強(qiáng)、方法簡(jiǎn)單、時(shí)間短等特點(diǎn)，免疫印跡法檢測(cè)門(mén)診消化不良患者HP感染及其分型簡(jiǎn)便易行，同時(shí)對(duì)抗HP治療有很好的指導(dǎo)作用。