常用中藥丹參種植最佳采收期的確定及研究

劉海紅

【摘要】本文通過(guò)作者學(xué)習(xí)和實(shí)習(xí)階段的理論知識(shí)和實(shí)際操作經(jīng)驗(yàn)的積累，針對(duì)常用中藥材丹參進(jìn)行了研究，通過(guò)深入探討丹參的資源分布、中醫(yī)功效功能主治、丹參的藥理作用、丹參化學(xué)成分的提取方法、丹參含量測(cè)定方法、丹參酮含量測(cè)定及曲線繪制、丹參種植技術(shù)等幾個(gè)方面闡述了丹參的有效成分研究方法，確定了最佳采收期，為丹參的標(biāo)準(zhǔn)化種植采收技術(shù)提供了直接數(shù)據(jù)參考。

【關(guān)鍵詞】中藥；丹參；中藥藥理；總丹參酮；HPLC；最佳采收期

丹參（Salvia miltiorrhiza bunge）是我國(guó)傳統(tǒng)常用中藥，在“神農(nóng)本草經(jīng)”里首次被記載列為上品；在“本草綱目”中李時(shí)珍把同物異名現(xiàn)象加以整理并且擴(kuò)充了其基本的中醫(yī)功效、中藥配伍及部分方劑；隨著中藥藥理學(xué)、天然藥物化學(xué)和生藥學(xué)的快速發(fā)展，在“中國(guó)藥典”（第一部）中已經(jīng)收載丹參的鑒定標(biāo)準(zhǔn)以及部分丹參制劑的質(zhì)量檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。

1丹參概述

1.1丹參的歷史沿革

1.1.1丹參的資源分布

丹參為唇形科鼠尾草屬植物丹參的干燥根和根莖，丹參及其1050種同屬植物遍布于全球溫帶地區(qū)，我國(guó)大部分地區(qū)河南、山東、陜西（或山西）、湖北、安徽、四川等省均有野生品，丹參的道地產(chǎn)區(qū)也隨著生態(tài)環(huán)境的變化及人類的醫(yī)藥生產(chǎn)活動(dòng)有所變化，“中國(guó)道地藥材”中將我國(guó)四川省列為丹參的道地產(chǎn)區(qū)，除此而外山東省、河南省、陜西省、內(nèi)蒙古自治區(qū)等地也多有栽培。

1.1.2丹參的中醫(yī)功效功能主治

《本草綱目》中李時(shí)珍把丹參描述為：五參五色配五臟，丹參入心，日赤參。其苦參，則右腎命門(mén)之藥也。時(shí)珍日：丹參色赤味苦，氣平而降，陰中之陽(yáng)也。入手少陰、厥陰之經(jīng)，心與包絡(luò)血分藥也。按：《婦人明理論》云：四物湯治婦人病，不問(wèn)產(chǎn)前、產(chǎn)后，經(jīng)水多少，皆可通用。惟一味丹參散，主治與之相同。蓋丹參能破宿血，補(bǔ)新血，安生胎，落死胎，止崩中帶下，調(diào)經(jīng)脈，其功大類當(dāng)歸、地黃、川芎、芍藥故也。

丹參作為活血調(diào)經(jīng)藥，其味苦、微辛；性微寒；心、脾、肝、腎血分之藥；具有活血祛瘀，養(yǎng)血安神，涼血消腫的功效；主治瘀血頭、胸、脅、腹疼痛，積聚，月經(jīng)不調(diào)，痛經(jīng)經(jīng)閉，產(chǎn)后瘀滯腹痛，關(guān)節(jié)痹痛，跌打瘀腫，溫病心煩，血虛心悸，瘡瘍腫毒，丹疹疥癬。

1.1.3丹參的藥理作用

丹參能擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、增加冠狀動(dòng)脈血液流量，改善心臟缺血、梗塞，調(diào)整心律改善心臟功能，擴(kuò)張外周血管改善微循環(huán)。

抗凝血、促進(jìn)血纖溶解、抑制血小板聚集，抑制血栓形成。

能降血脂，抑制家兔實(shí)驗(yàn)性冠狀動(dòng)脈大分支粥樣斑塊的形成。

可以抑制或減輕肝細(xì)胞變性、壞死及炎癥反應(yīng)，促進(jìn)肝細(xì)胞再生并有抗肝臟細(xì)胞纖維化作用。

能夠提高機(jī)體的耐缺氧能力。

促進(jìn)人體骨骼組織的自身修復(fù)，加速骨折愈合，縮短紅細(xì)胞及紅色素恢復(fù)期。

對(duì)多種細(xì)菌及結(jié)核桿菌有一定程度的抑制作用。

同時(shí)還具有抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)、增強(qiáng)免疫、降低血糖及抗腫瘤等作用。

1.2丹參的化學(xué)成分及有效成分

1.2.1丹參化學(xué)成分的提取方法

十九世紀(jì)中后期，在西方自然科學(xué)飛速發(fā)展尤其是化學(xué)和生物學(xué)的跨越式發(fā)展帶動(dòng)之下，藥學(xué)領(lǐng)域的天然藥物研究開(kāi)始迅速發(fā)展。日本正在經(jīng)歷明治維新改革，西方的天然藥物的研究思想和研究手段被積極運(yùn)用于藥材。二十世紀(jì)三四十年代，此種方法正式被我國(guó)中藥學(xué)者引入中國(guó)并產(chǎn)生了以中藥為主要研究對(duì)象的天然藥物化學(xué)和生藥學(xué)及其相關(guān)學(xué)科，這些研究理論及成果是中國(guó)藥典第一部的基礎(chǔ)和重要內(nèi)容。同樣，丹參的研究也是由最初的脂溶性成分研究逐步轉(zhuǎn)變?yōu)樗苄猿煞盅芯?，我?guó)工作者探討了許多丹參脂溶性化學(xué)成分和水溶性化學(xué)成分的提取方法，醇提法、超聲法、梯度滲漉法等，筆者比較推崇二氧化碳超臨界萃取法。由于丹參中的主要有效成分丹參酮對(duì)光不穩(wěn)定，丹酚酸受熱易分解，所以無(wú)需加熱的二氧化碳超臨界萃取法明顯優(yōu)于其他方法。

1.2.2丹參的化學(xué)成分

國(guó)內(nèi)外己報(bào)道丹參的化學(xué)成分有：丹參酮ⅡA、丹參酮Ⅰ、丹參酮ⅡB、羥基丹參酮ⅡA、次甲丹參酮、1.2-二氫丹參酮、丹參二醇A、準(zhǔn)丹參酮、3a.羥基丹參酮ⅡA、羥基次甲丹參酮、紫丹參甲素、紫丹參乙素、丙素、丁素、丹參醛、去氫丹參新酮、次甲丹參新酮、次甲二氫丹參酮、丹參內(nèi)酯、丹酚酸B等具有水溶性和脂溶性的物質(zhì)。相關(guān)丹參中藥藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)論表明：大部分藥理作用來(lái)自于丹參中的水溶性物質(zhì)，但是由于丹參脂溶性成分研究技術(shù)比較成熟，所以現(xiàn)階段我們?nèi)圆捎弥苄缘牡⑼虻暮縼?lái)作為丹參質(zhì)量主要評(píng)價(jià)物。

2丹參種植過(guò)程中根及根莖有效成分的含量表格制定

2.1丹參酮ⅡA的含量測(cè)定儀器與材料

TBE-300A高速逆流色譜儀（島津），配有聚四氟乙烯管（PTFE）分離柱；HX-1050型橫流泵（北京康博實(shí)驗(yàn)儀器有限公司），Water600高效液相色譜儀；樣品通過(guò)流動(dòng)注射泵進(jìn)樣，流速0.2ml/min，干燥器溫度350℃，干燥器流量9.0L/min；實(shí)驗(yàn)前儀器經(jīng)過(guò)校正。

丹參藥材采自內(nèi)蒙古通遼地區(qū)某公司經(jīng)過(guò)認(rèn)證的丹參規(guī)范化種植基地，經(jīng)內(nèi)蒙古通遼市藥品檢驗(yàn)所安文泉研究員鑒定為唇形科鼠尾草屬植物丹參的干燥根及根莖。石油醚、乙酸乙酯、氯仿等均為分析純，均來(lái)自北京化學(xué)試劑公司，HPLC分析用甲醇為色譜純（北京化學(xué)試劑公司），硅膠（200-300目）及硅膠板均采購(gòu)于北京哲成科技有限公司，實(shí)驗(yàn)用水為過(guò)濾蒸餾水。

2.2實(shí)驗(yàn)方法

2.2.1總丹參酮的提取

取丹參鮮藥材SKg，粉碎，過(guò)40目篩，依次用石油醚、甲醇過(guò)濾，甲醇滲漉液濃縮后得浸膏205.4g，將此浸膏分散于1L蒸餾水中，用等體積氯仿萃取3次，合并萃取液，濃縮得到氯仿萃取物63.1g。

2.2.2硅膠色譜柱分離

取氯仿萃取物50g經(jīng)硅膠色譜柱分離，洗脫液為氯仿，每100ml流出液收集為一個(gè)餾分，硅膠薄層色譜跟蹤，波曾色譜展開(kāi)劑為石油醚4：乙酸乙酯1，得到組分F1和F2，用于進(jìn)一步的高速逆流色譜分離。

2.2.3 HPLC預(yù)分離條件

經(jīng)過(guò)以上操作過(guò)程，借鑒相關(guān)文獻(xiàn)，考察了石油醚乙酸乙酯、石油醚丙酮、氯仿、氯仿 甲醇等多個(gè)硅膠住色譜洗脫條件，本實(shí)驗(yàn)采用氯仿洗脫，分離條件比較好，經(jīng)過(guò)HPLC分析計(jì)算峰面積以確定丹參酮ⅡA的含量。此外，可以用紫外分光光光度法測(cè)量總丹參酮的含量。

3丹參含量測(cè)定曲線繪制

3.1丹參酮含量最高既最佳采收期的確定

如表格所示，2014與2015年度丹參有效成分濃度最高是9月下旬和10月上旬，內(nèi)蒙古東部地區(qū)以及東北三省氣候條件和土壤條件比較類似，既我國(guó)東北地區(qū)每年的人工種植丹參最佳采收時(shí)間為每年的九月下旬至十月上旬，可以作為經(jīng)驗(yàn)性指導(dǎo)。

3.2丹參的種植

丹參藥材種植基地位于我國(guó)共北地區(qū)，可以進(jìn)行扦插繁殖，華北、江浙地區(qū)也采用此種方法。一般東北于6-7月，江、浙于4-5月，取丹參地上莖，剪成10-15厘米的小段，剪除下部葉片，上部葉片剪去1/2，隨剪隨插。在己作好的畦上，按行距20厘米，株距10厘米開(kāi)淺溝，然后將插條順溝斜插，插條埋土6厘米。扦插后要進(jìn)行澆水、遮蔭。待再生根長(zhǎng)至3厘米左右，即可移植于田間。也有的將劈下帶根的株條直接栽種，注意澆水，也能成活。

種子繁植育苗移植：東北地區(qū)于4月中旬，進(jìn)行條播，覆土0.3厘米，播后澆水，加蓋塑料薄膜，保持土壤濕潤(rùn)，約15天左右出苗；江浙地區(qū)于6月種子成熟時(shí)，采收后立即播種，復(fù)土以蓋上種子為度，播后蓋草保濕，10月移植于大田。直播：華北地區(qū)于4月中旬播種，條播或穴播。穴播行株距同分根法，每穴播種子5-10粒；條播溝深1厘米左右，覆土0.6-1厘米，畝播種量0.5公斤左右。如遇干旱。播前先澆透水再播種。播后半月出苗。苗高6厘米時(shí)進(jìn)行間苗定苗。

田間管理中的中耕除草。主要處理方法為分根繁殖地，因覆土稍厚，出苗慢。一般在4月幼苗開(kāi)始出土?xí)r，要進(jìn)行查苗，發(fā)現(xiàn)土板結(jié)或復(fù)土較厚，影響出苗時(shí)，要及時(shí)將穴的復(fù)土扒開(kāi)，促其出苗。生育期中耕除草3次，第1次于5月，苗高10-12厘米時(shí)進(jìn)行，第2次于6月進(jìn)行，第3次于8月進(jìn)行。施肥方法為生育期結(jié)合中耕除草，追肥2-3次，畝用腐熟糞肥1000-2000公斤，過(guò)磷酸鈣10-15公斤，或餅肥25-50公斤均可。排灌方法是兩季注意排水，防止水澇。出苗期及幼苗期如土壤干旱，及時(shí)灌水或澆水。出蕾期主要工作是摘蕾，除留做種子的植株外，必須分次摘除花蕾，以利根部生長(zhǎng)。

4結(jié)論

經(jīng)過(guò)研究，本次論文明確了丹參的來(lái)源、中醫(yī)功效、藥理作用，更為重要的是，通過(guò)實(shí)驗(yàn)手段明確測(cè)定出丹參成分含量的測(cè)定方法，確定我國(guó)東北地區(qū)人工栽培丹參最佳適宜采收期為每年的9月下旬至10月上旬。

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