顧青峰

小細胞肺癌患者血清趨化因子的表達及對術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的影響

顧青峰

目的檢測小細胞肺癌 (SCLC)患者血清巨噬細胞炎癥蛋白3α (MIP-3α)水平，并分析在術(shù)后早期復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移中的意義，探討不同因素對患者術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的影響。方法選擇本院2013年9月—2015年2月收治的SCLC患者100例，為觀察組，選擇同期體檢健康人員20例作為對照組。觀察組患者根據(jù)術(shù)后是否轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)，未發(fā)生轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)56例，為觀察組1，轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)44例，為觀察組2。檢測對照組及觀察組患者術(shù)前及術(shù)后30d，90d，180d血清MIP-3α水平。記錄術(shù)中指標，分析相關(guān)因素對患者復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移的影響。結(jié)果觀察組術(shù)前血清MIP-3α為(98.65±9.30)pg/mL，高于對照組(23.74±6.85)pg/mL，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。觀察組術(shù)后血清MIP-3α均低于術(shù)前，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。觀察組2術(shù)后180d血清MIP-3α為(69.47±7.82)pg/mL，高于觀察組1(61.08±8.14)pg/mL，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。觀察組2術(shù)后MIP-3α高水平發(fā)生率為65.91%(29/44)，高于觀察組1患者術(shù)后21.43%(12/56)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論MIP-3α在SCLC患者血清中的濃度顯著增加，術(shù)后呈現(xiàn)下降趨勢，與術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，可作為患者術(shù)后早期復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移檢測指標。

巨噬細胞炎癥蛋白3α；小細胞肺癌；復(fù)發(fā)；影響因素

小細胞肺癌(Small cell lung cancer,SCLC)約占所有肺癌的10%-25%，其中手術(shù)是臨床治療SCLC的重要方法之一，復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移是手術(shù)治療失敗的最常見危險因素[1]。近年來有研究[2]認為，升高的炎癥細胞因子是多種癌癥的復(fù)發(fā)危險因素。巨噬細胞炎癥蛋白3α (Macrophage Inflammatory Protein-3, MIP-3α)，也叫做CCL20，是已知唯一與CC趨化因子受體6(CCR6)相互作用的細胞因子[3]。有報道[4]MIP-3α在結(jié)腸癌、胰腺癌、前列腺癌、鼻咽癌以及肝癌中呈現(xiàn)高表達，認為MIP-3α與腫瘤的進展和轉(zhuǎn)移相關(guān)。目前尚無血清MIP-3α水平與小細胞肺癌患者術(shù)后預(yù)后相關(guān)性的研究，本研究旨在檢測SCLC患者血清MIP-3α水平，并分析在術(shù)后早期復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移中的意義，探討不同因素對患者術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的影響。

資料與方法

一、一般資料

選擇本院2013年9月—2015年2月收治的SCLC患者100例，為觀察組，所有患者均經(jīng)病理組織學(xué)確診，行胸腔鏡下肺癌根治術(shù)。選擇同期體檢健康人員20例作為對照組。觀察組患者男性55例，女性45例，年齡(59.47±8.30)歲(40歲-73歲)，燕麥細胞型39例、中間細胞型33例和混合細胞型28例；對照組男性13例，女性7例，年齡(59.64±8.95)歲(42歲-71歲)，兩組研究對象性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，觀察組患者根據(jù)術(shù)后是否轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)，未發(fā)生轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)患者56例，為觀察組1，轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)44例，為觀察組2。排除病例為其他組織惡性腫瘤，嚴重炎癥反應(yīng)。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會通過，并取得患者知情同意，隨訪至術(shù)后兩年。

二、 方法和指標

1 手術(shù)步驟：所有患者采用雙腔氣管插管和單肺通氣，常規(guī)全身麻醉。采用胸腔鏡手術(shù)步驟，分別在腋中線第7或第8肋間，腋前線第4或第5肋間，以及肩胛下線第8或第9肋間做切口。標準模式肺癌根治步驟，以標本袋收集樣本。不切斷肌肉(背闊肌及前鋸肌)和肋骨[5]。術(shù)中記錄出血量(QOH)及手術(shù)時間(TOP)，術(shù)后隨訪兩年。

2 主要指標：收集患者術(shù)前及術(shù)后30，90，180天清晨血標本。同樣收集健康人血標本。3000g 離心10min分離血清，-80°C儲存。采用酶聯(lián)免疫吸附試法測定血清MIP-3α水平，按照試劑盒說明書操作。

同時收集臨床相關(guān)指標以及術(shù)中指標，分析年齡、性別、輔助性化療、血清MIP-3α水平、QOH以及TOP等，與小細胞肺癌早期復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。

3 試劑與儀器：全自動酶標分析儀Microlab Star (Hamilton Bonaduz);人巨噬細胞炎癥蛋白-3α酶聯(lián)免疫吸附試劑盒(RayBiotech) KA-100型臺式離心機(上海安亭科學(xué)儀器廠)。

三、統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件, 計量資料采用t檢驗，計數(shù)資料比較用χ2檢驗，并進行比例風(fēng)險回歸，P<0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

一、對照組和觀察組術(shù)前血清MIP-3α結(jié)果比較

觀察組術(shù)前血清MIP-3α為(98.65±9.30)pg/mL，高于對照組(23.74±6.85)pg/mL，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

二、觀察組患者基本臨床資料、手術(shù)狀況及化療結(jié)果比較

兩組研究對象基本臨床資料、手術(shù)狀況及化療比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，P>0.05。(見表1)。

三、觀察組患者術(shù)前和術(shù)后不同時間血清MIP-3α結(jié)果比較

兩組術(shù)后血清MIP-3α均低于術(shù)前，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。觀察組2術(shù)后180d血清MIP-3α為(69.47±7.82)pg/mL，高于觀察組1(61.08±8.14)pg/mL，且兩組均高于術(shù)后30d和90d，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

取術(shù)后180d患者MIP-3α中位數(shù)，將患者分為MIP-3α高水平和低水平，觀察組2術(shù)后MIP-3α高水平為65.91%(29/44)，高于觀察組1患者術(shù)后21.43%(12/56)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.05。(見表2)。

四、術(shù)后患者轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)相關(guān)影響因素COX 回歸分析結(jié)果

將性別、年齡、TOP、QOH、化療及MIP-3α作為自變量，并分別賦值，術(shù)后患者轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)為因變量，進行COX 回歸分析，術(shù)后患者轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)與MIP-3α相關(guān)，P<0.05。(見表3)。

表2 觀察組患者術(shù)前和術(shù)后不同時間血清MIP-3α結(jié)果比較

△與觀察組1比較，▲與術(shù)前比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

表3 術(shù)后患者轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)相關(guān)影響因素COX 回歸分析結(jié)果

討 論

手術(shù)治療SCLC的重要方法，初始治療效果常較好，但腫瘤容易復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移、預(yù)后，也是SCLC患者死亡的主要原因。近年來研究[6]發(fā)現(xiàn)趨化因子參與了腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。趨化因子也稱化學(xué)趨化性細胞因子，主要由組織細胞和炎性細胞產(chǎn)生，根據(jù)N末端保守的半胱氨酸的排列方式分為 CXC、CC、C和CX3C四類亞族。MIP-3α是近年來發(fā)現(xiàn)的CC 趨化因子家族的新成員，由CCL20基因編碼，相對分子質(zhì)量為 9000。主要表達于肺臟、肝臟、淋巴結(jié)、外周血細胞及多種腫瘤細胞[7]。MIP-3α生理條件下表達較低，在炎癥性疾病中，對炎癥細胞有激活、趨化和遷移作用。MIP-3α與 Th17 表面高表達的CCR6結(jié)合成趨化軸，向抗原出現(xiàn)的組織部位定向遷移，誘導(dǎo)白細胞移動到炎性反應(yīng)部位，并發(fā)揮炎癥放大作用，經(jīng)強烈的促炎信號誘發(fā)其表達升高，加重炎癥反應(yīng)程度[8-9]。本次研究結(jié)果顯示，SCLC患者血清MIP-3α顯著高于正常人群。近年來研究[10]發(fā)現(xiàn)，MIP-3α不僅與局部炎性細胞浸潤有關(guān)，還與許多惡性腫瘤進展、血管生成、轉(zhuǎn)移或侵襲能力及預(yù)后密切相關(guān)。機體免疫系統(tǒng)對腫瘤細胞免疫監(jiān)視失控導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。在免疫系統(tǒng)中，樹突狀細胞是人體免疫系統(tǒng)內(nèi)功能最強的抗原提呈細胞，MIP-3α的配體 CCR6 主要分布于未成熟樹突狀細胞、效應(yīng)T細胞、記憶B和T細胞，通過MIP-3α與 CCR6的結(jié)合及時啟動免疫應(yīng)答以清除病原體，在介導(dǎo)肝癌、胰腺癌等多種類型癌癥中促進腫瘤的增殖、侵襲、播散及轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要作用[11-12]。

有研究[13]報道SCLC術(shù)后一年復(fù)發(fā)率為50%。本次研究結(jié)果顯示，患者性別、年齡、TOP、QOH、化療對患者術(shù)后復(fù)發(fā)無相關(guān)性，需要進一步增加樣本量進行研究。但患者術(shù)后血清MIP-3α呈現(xiàn)下降趨勢，術(shù)后復(fù)發(fā)患者血清MIP-3α明顯升高，且呈現(xiàn)高表達(P<0.05)。MIP-3α一方面刺激機體發(fā)生適當(dāng)?shù)拿庖叻磻?yīng)，參與免疫抑癌反應(yīng)，另一方面介導(dǎo)病理學(xué)組織損傷，促進了腫瘤的侵襲、 轉(zhuǎn)移。有研究認為，MIP-3α通過MIP-3α/CCR6軸，經(jīng)不同的跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，參與了致癌、血管形成以及浸潤，增加了SCLC的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，影響了肺癌患者的預(yù)后[14-15]。

綜上所述，MIP-3α在SCLC患者血清中的濃度顯著增加，術(shù)后呈現(xiàn)下降趨勢，與術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，可作為患者術(shù)后早期復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移檢測指標。

[1] Kwon MC,Berns A.Tumor heterogeneity-induced signaling regulates SCLC metastasis[J].Cell Cycle,2015,14(21):3347-3348.

[2] 李偉，宋云，葉艾竹，等.趨化因子 CCL22 和 CCL20 協(xié)同皮膚抗原誘導(dǎo)的調(diào)節(jié)性 T 淋巴細胞對皮膚移植的影響[J].中國免疫學(xué)雜志，2016，32(9):1315-1318.

[3] Gladkov O,Ramlau R,Serwatowski P,et al.Cyclophosphamide and tucotuzumab (huKS-IL2) following first-line chemotherapy in responding patients with extensive-disease small-cell lung cancer[J].Anticancer Drugs,2015,26(10):1061-1068.

[4] Genestreti G,Tiseo M,Kenmotsu H,et al.Outcomes of Platinum-Sensitive Small-Cell Lung Cancer Patients Treated With Platinum/Etoposide Rechallenge:A Multi-Institutional Retrospective Analysis[J].Clin Lung Cancer,2015,16(6):e223-e228.

[5] Alaaeddine N,Antoniou J,Moussa M,et al.The chemokine CCL20 induces proinflammatory and matrix degradative responses in cartilage[J].Inflamm Res,2015,64(9):721-731.

[6] Jafarzadeh A,Bagherzadeh S,Ebrahimi HA,et al.Higher circulating levels of chemokine CCL20 in patients with multiple sclerosis: evaluation of the influences of chemokine gene polymorphism, gender, treatment and disease pattern[J].J Mol Neurosci,2014,53(3):500-505.

[7] da Silva Antunes R,Madge L,Soroosh P,et al.The TNF Family Molecules LIGHT and Lymphotoxin αβ Induce a Distinct Steroid-Resistant Inflammatory Phenotype in Human Lung Epithelial Cells[J].J Immunol,2015,195(5):2429-2441.

[8] 李永菊，胡燕，朱順飛，等.CCR6與免疫細胞關(guān)聯(lián)性研究進展[J].現(xiàn)代免疫學(xué)，2014,34(4)：336-339.

[9] 顧延會，符丹丹，饒習(xí)敏，等.CCL20 及其受體 CCR6 在 COPD 氣道內(nèi)及外周血的變化及意義[J].遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2016，39(3)：266-269.

[10] 李靖，譚曉華，何淼，等.病毒巨噬細胞炎癥蛋白-Ⅱ?qū)d脂蛋白 B mRNA 編輯酶催化樣蛋白 3G和正常 T 細胞表達分泌的調(diào)節(jié)活化蛋白表達的影響[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展，2014，14(21)：4005-4008.

[11] 王皓穎.趨化因子對腫瘤細胞生物學(xué)行為的影響[J].醫(yī)學(xué)綜述，2014，20(17):3128-3130.

[12] 符丹丹，歐陽瑤，薛令合.慢性阻塞性肺疾病患者誘導(dǎo)痰內(nèi)樹突狀細胞及趨化因子受體 6水平與 FEV1% 的相關(guān)性[J].中國老年學(xué)雜志，2014，34(21):5978-5980．

[13] 王云飛，李嘉，杜小祥，等.CCL20 及其受體 CCR6在非小細胞肺癌組織的表達及意義[J].中國藥物與臨床，2014，14(6)：743-744.

[14] Lejmi E,Perriraz N,Clément S,et al.Inflammatory Chemokines MIP-1δ and MIP-3α Are Involved in the Migration of Multipotent Mesenchymal Stromal Cells Induced by Hepatoma Cells[J].Stem Cells Dev,2015,24(10):1223-1235.

[15] 張霄鵬，胡志娟，孟愛宏，等.趨化因子 CCL20 及其受體 CCR6 在肺腺癌組織中的表達及與復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的關(guān)系研究[J].中國全科醫(yī)學(xué)，2016，19(25)：3065-3068，3073.

Expressionofserumchemokinesforpatientswithsmallcellcarcinomaanditseffectonpostoperativerecurrenceormetastasis

GUQing-feng

HebeiYixianHospital,Baoding,Hebei074200,China

ObjectiveTo measure the levels of macrophage inflammatory protein-3 (MIP-3α) in patients with small cell lung cancer (SCLC), and to analyze the significance of early postoperative recurrence and metastasis by exploring the influence of different factors on the postoperative recurrence or metastasis.Methods100 SCLC patients in our hospital from September 2013 to February 2015 were selected as the observation group and 20 healthy subjects were selected as the control group. According to their postoperative metastasis or recurrence in the observation group, 56 patients without metastasis or recurrence were as the observation group 1, and 44 patients with metastasis or recurrence were as the observation group 2. The levels of serum MIP-3α were measured in the control group and the observation group before and 30d, 90d and 180d after operation. The intraoperative parameters were recorded and the related factors were analyzed for the effect of recurrence and metastasis.ResultsThe serum MIP-3α of the observation group before operation was (98.65±9.30) pg/m, which was higher than that of the control group (23.74±6.85) pg/mL (P<0.05). The serum levels of MIP-3α of the observation group were lower than those before operation (P<0.05). The serum MIP-3α of the observation group 2 was (69.47±7.82) pg/mL180 days after operation, which was higher than that of the observation group 1 (61.08±8.14) pg/mL (P<0.05). The incidence of higher MIP-3α in the observation group 2 was 65.91% (29/44), which was higher than that in the observation group 1 21.43% (12/56) (P<0.05).ConclusionThe concentration of MIP-3α increases significantly in patients with SCLC, and it decreases after operation and positively correlates with postoperative recurrence or metastasis. It could be used as an index for early recurrence and metastasis.

macrophage inflammatory protein-3; small cell lung cancer; recurrence; influencing factors

2017-04-06]

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.11.037

074200 河北 易縣，易縣醫(yī)院 外一科