李 莎
(河南省濟源市中醫(yī)院檢驗科,河南 濟源 459000)
乙肝病毒DNA熒光定量PCR檢測及其意義
李 莎
(河南省濟源市中醫(yī)院檢驗科,河南 濟源 459000)
目的探究乙肝病毒DNA熒光定量PCR檢測的結果及其意義。方法 選取我院2016年1月~2017年1月來我科檢查的肝病變患者1500例,對其進行乙肝病毒DNA熒光定量PCR檢測,同時針對100例健康者血液樣本實施相同檢查,觀察其病毒標記物情況并進行比較分析。結果 本次入選者均順利實施檢驗,大三陽患者的陽性率明顯較高,同時病毒拷貝數(shù)較高,健康者相關指標均明顯較低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論 乙肝病毒DNA熒光定量PCR檢測的特異性和靈敏性較高,能夠對患者疾病做出準確的判斷和分析,因此可以根據(jù)患者的乙肝病毒復制狀態(tài)對其實施治療,發(fā)揮臨床檢測的價值。
乙肝病毒DNA;熒光定量PCR檢測;肝病變
肝炎是臨床常見的傳染性疾病,因此對于肝炎的相關檢測也備受臨床關注,本次我們積極針對乙肝病毒DNA的熒光定量PCR檢測情況進行分析,目的在于總結臨床經(jīng)驗,現(xiàn)報告如下。
選取我院2016年1月~2017年1月來我科檢查的肝病變患者1500例,另外納入100例健康者血液樣本,均對其實施乙肝病毒DNA的熒光定量PCR檢測;研究開始前我們均對相關科室和工作人員說明了研究概況,其均表示已經(jīng)知曉本次研究概況且同意支持本次研究。
針對受檢者均進行乙肝病毒DNA的熒光定量PCR檢測,檢測所用設備為達安基因DA7600設備;首先收集100 uL血清,對其中的HBV-DNA進行提取,使用PCR的反應液加入到HBV模板中,然后將其混勻并置于毛細管中;此后設置陰性、空白管、陽性對照。各個反應管均放入Roche熒光定量檢測儀實施PCR擴增,在50攝氏度的條件下激活其UNG,然后在93攝氏度下預變性2 min,同時在93攝氏度5sec,在60攝氏度35sec,一共40個循環(huán)[1]。同時應注意模板的工作溫度范圍應該控制在30~99攝氏度,電源電壓控制在220±22 V。此后根據(jù)標準曲線,使用計算機對待測樣本中的HBV-DNA含量進行測定,并針對擴增產(chǎn)物實施瓊脂凝膠電泳,和陽性模板進行對照,如果其特異性條帶的位置和陽性模板相同則為陽性,觀察實驗結果。
觀察檢測情況,同時按照乙肝患者的病情將其分為小三陽(HBsAg+、HBeAb+、HBcAb+),大三陽(HBsHg+、HBeAg+、HBcAb+),HBsAb單獨陽性組,HBsAg單獨陽性組。然后按照類別對其陽性率進行統(tǒng)計,并對比組間的病毒拷貝數(shù)(Log值)。
采用SPSS 21.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行分析,計數(shù)資料用例數(shù)(n)、百分數(shù)(%)表示,采用x2檢驗;計量資料用“x± s表示,采用t檢驗;以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
本次入選者均順利實施檢驗,大三陽患者的陽性率明顯較高,同時病毒拷貝數(shù)較高,健康者相關指標均明顯較低,其詳細情況見下表1。
表1 乙肝病毒檢測的詳細情況(±s)
表1 乙肝病毒檢測的詳細情況(±s)
病毒拷貝數(shù)(Log值)大三陽 900 900 100.0 7.67±0.47小三陽 300 140 46.7 7.31±0.24 HBsAg 200 115 57.5 5.74±1.21 HBsAb 100 33 33.0 4.57±0.29健康者 100 5 5.0 3.44±0.14組別 例數(shù) HBV-DNA陽性數(shù)HBV-DNA陽性率
肝炎的發(fā)生主要是有肝炎并對感染引起,病發(fā)發(fā)生對患者的健康會產(chǎn)生嚴重影響,同時未經(jīng)及時治療的情況下,極有可能使得肝炎演變?yōu)楦斡不蚋伟?,因此我們應該早期對患者做出診斷并給予治療[2]。
目前臨床多數(shù)研究認為,肝炎疾病的傳染性尚不能完全明顯,但是病情進展必然和患者的病毒復制存在密切關系,此時有效的檢測方法就成為臨床關注的重點所在[3]。熒光定量PCR檢測是近年來臨床中逐漸應用的一種檢測方法,熒光技術在檢測中的聯(lián)合使用,使得PCR過程中的熒光信號能夠被準確的反應,從而通過其變化和檢測獲得較高的靈敏度和準確性[4]。本次我們通過對相關的受檢者樣本進行分析發(fā)現(xiàn),大三陽患者的陽性率明顯較高,同時病毒拷貝數(shù)較高,健康者相關指標均明顯較低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。同時說明了乙肝病毒DNA對于患者病情程度的反應價值,臨床可及時根據(jù)患者的檢測結果對其實施干預和治療。
綜上所訴,乙肝病毒DNA熒光定量PCR檢測的特異性和靈敏性較高,能夠對患者疾病做出準確的判斷和分析,其臨床實施的意義則在于,可以根據(jù)患者的乙肝病毒復制狀態(tài)對其實施治療,最終幫助患者改善其預后。
[1]翟秀英.熒光定量PCR檢測乙型肝炎病毒DNA的臨床意義[J].臨床合理用藥雜志,2014,02(8):108-109.
[2]李秀義,高冬梅,潘繼文,等.熒光定量PCR檢測乙型肝炎病毒DNA的臨床價值[J].蚌埠醫(yī)學院學報,2014,06(12):804-806.
[3]顏 敏.血清HBV-DNA熒光定量PCR檢測與乙乙肝病毒標志物模式的相關因素探討[J].中外醫(yī)療,2014,26(10):193-194.
R446.1
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ISSN.2095-8242.2017.053.10427.01
本文編輯:趙小龍