孫 明 ， 劉巧榮 ， 喬明明 ， 張 謙 ， 陳西釗,2

(1.北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司 ， 北京 海淀 100094 ； 2. 中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 ， 北京 朝陽(yáng) 100125)

寵物犬感染布魯菌的診斷報(bào)告

孫 明1， 劉巧榮1， 喬明明1， 張 謙1， 陳西釗1,2

(1.北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司 ， 北京 海淀 100094 ； 2. 中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 ， 北京 朝陽(yáng) 100125)

布魯菌病是由布魯菌引起的一種人獸共患傳染病，以侵害生殖系統(tǒng)為主要特征的傳染性疾病。主要表現(xiàn)為睪丸炎、附睪炎、流產(chǎn)、不育等特征。犬種布魯菌屬于粗造型菌株，主要引起犬類(lèi)發(fā)病，導(dǎo)致母犬流產(chǎn)、公犬睪丸炎等。流產(chǎn)后的母犬常表現(xiàn)為子宮內(nèi)膜炎，出現(xiàn)屢配不孕。公犬感染后，以睪丸炎、附睪炎、前列腺炎、包皮炎等。潛伏期一般為兩周至半年。現(xiàn)將1例寵物犬感染布魯菌病的診斷情況報(bào)告如下。

1 基本情況

1.1 患犬資料 來(lái)自東北某種犬養(yǎng)殖場(chǎng)，犬年齡2歲，性別：公，品種：巨型貴婦犬。

1.2 發(fā)病情況 公犬患病前身體健康，無(wú)不良病史。突患睪丸炎。簡(jiǎn)單治療后沒(méi)有治愈。后與同養(yǎng)殖場(chǎng)一經(jīng)產(chǎn)母犬(之前生產(chǎn)正常)交配，母犬未懷孕。后來(lái)母犬又與同場(chǎng)別的公種犬(交配前身體健康)和外借種公犬交配，母犬亦沒(méi)懷孕，且兩只公犬亦發(fā)生睪丸炎。半年內(nèi)養(yǎng)殖場(chǎng)大多數(shù)公犬出現(xiàn)睪丸炎癥狀：睪丸紅腫，體積明顯增大，局部增溫、疼痛。陰囊皮膚緊張、發(fā)亮；母犬則發(fā)生不孕。巨型貴婦犬主人懷疑自家犬感染布魯菌，取血送檢，檢測(cè)結(jié)果顯示布魯菌抗體陽(yáng)性。

1.3 病史調(diào)查 養(yǎng)殖場(chǎng)為半封閉性場(chǎng)地，第1只公犬患睪丸炎2月前曾與場(chǎng)外1母犬交配，后期調(diào)查發(fā)現(xiàn)該母犬曾有不孕史，后診斷為布魯菌感染。

2 診斷

2.1 實(shí)驗(yàn)室診斷 采集巨型貴婦犬精液、唾液、血、尿液和陰莖分泌物用北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司生產(chǎn)的布魯菌快速熒光試劑盒進(jìn)行抗原檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果顯示：唾液和精液為陽(yáng)性(見(jiàn)圖1)。種型鑒定結(jié)果顯示，此犬感染布魯菌為犬種布魯菌(見(jiàn)圖2)。

2.2 序列測(cè)定分析 設(shè)計(jì)引物，從精液DNA中擴(kuò)增OMP25(626 bp)基因和16S rRNA(1 368 bp)基因(擴(kuò)增結(jié)果見(jiàn)圖3)，連接載體，將鑒定陽(yáng)性菌送上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司進(jìn)行測(cè)序。測(cè)序和同源進(jìn)化分析結(jié)果顯示，擴(kuò)增序列是犬種布魯菌序列，并與犬布魯菌xue1(中國(guó))分離株、2010009751(美國(guó))分離株和A52141(韓國(guó))分離株親緣關(guān)系最為接近。

3 討論

當(dāng)寵物犬公犬患睪丸炎、母犬出現(xiàn)流產(chǎn)、不孕時(shí)，一般可以考慮布魯菌感染。布魯菌潛伏期為2周至半年。布魯菌病患犬的排泄物和流產(chǎn)物中可攜帶大量病原菌，成為傳染源[1-2]。另外交配也可以傳染病布魯菌，該報(bào)告就是一例由交配傳播引起的案例。

該案例養(yǎng)殖場(chǎng)，最初出現(xiàn)一例布魯菌感染犬，后來(lái)出現(xiàn)養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)大范圍暴發(fā)。究其原因，主要由于與外來(lái)布魯菌病感染犬交配引起。起初公犬出現(xiàn)睪丸炎，母犬出現(xiàn)不孕，沒(méi)有引起足夠重視，沒(méi)有及時(shí)隔離發(fā)病犬和健康犬，而是繼續(xù)把發(fā)病犬當(dāng)作種犬使用，從而導(dǎo)致小范圍內(nèi)暴發(fā)流行。該種犬場(chǎng)在首個(gè)公犬出現(xiàn)睪丸炎到全養(yǎng)殖場(chǎng)60%以上的種犬感染布魯菌病僅半年時(shí)間，且極可能感染了場(chǎng)外的犬只。故在寵物犬養(yǎng)殖過(guò)程中，特別是養(yǎng)犬場(chǎng)，一旦發(fā)現(xiàn)公犬睪丸炎，母犬流產(chǎn)、屢配不孕等癥狀時(shí)，應(yīng)及時(shí)隔離病犬和與其接觸犬，并采集樣品進(jìn)行布魯菌檢測(cè)，確診后，立刻上報(bào)動(dòng)物檢疫部門(mén)，并對(duì)患犬進(jìn)行無(wú)公害化處理，同時(shí)對(duì)污染場(chǎng)地徹底消毒處理[3-4]。以盡可能的減少傳播，以及由此帶來(lái)的經(jīng)濟(jì)損失。

圖1 布魯菌快速熒光PCR檢測(cè)

1：陽(yáng)對(duì)； 2：精液； 3:唾液； 4:血； 5:尿液； 6：陰莖分泌物； 7：陰性對(duì)照

圖2 犬布魯菌種型鑒定

1：陽(yáng)對(duì)； 2：精液； 3：唾液； 4：陰對(duì)

圖3 從精液中擴(kuò)增OMP25和16S rRNA 基因1：OMP25基因； 2：16S rRNA 基因； M：DNA Marker

4 小結(jié)

本文用布魯菌快速熒光試劑盒對(duì)一例患睪丸炎犬進(jìn)行了布魯菌初步檢測(cè)，并進(jìn)一步通過(guò)序列測(cè)定對(duì)其進(jìn)行確診。序列同源進(jìn)化分析顯示，該株犬布魯菌與中國(guó)的犬布魯菌xue1分離株、美國(guó)的犬布魯菌2010009751分離株和韓國(guó)的犬布魯菌A52141分離株親緣關(guān)系最為接近。

犬只可以通過(guò)交配傳播布魯菌病，管理不當(dāng)會(huì)引起布魯菌病的暴發(fā)流行。故養(yǎng)殖場(chǎng)，特別是種犬場(chǎng)一定要加強(qiáng)安全防范管理。

[1] 王寧，韓吉壽，呂艷麗，等.北京地區(qū)寵物犬布魯氏菌的分離與鑒定[J]. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2014，36(6)：490-492.

[2] 王傳清，李星.布魯氏菌病的流行和研究現(xiàn)狀及防控策略[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫，2009，26(6)：63-65.

[3] 殷文武，孫輝.中國(guó)布魯氏菌病疫情形勢(shì)及對(duì)策建議[J].疾病監(jiān)測(cè)，2009，24(7)：475-477

[4] 鄭連湖.布氏桿菌病的檢疫及處理辦法[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘，2014，30(6)：99.

S858.292

B

0529-6005(2017)09-0048-02

2017-07-10

“十三五”國(guó)家重點(diǎn)研究計(jì)劃(2016YFD0501006)

孫明(1963-)，男，博士，主要從事分子病毒診斷技術(shù)研究，E-mail: sunming@anheal.com

陳西釗，E-mail: chenxizhao@anheal.com