鄧國明++徐鵬++李廣植

【摘要】目的探究解脲支原體（UU）、沙眼衣原體（CT）單獨及合并感染對男性精液參數(shù)及精子功能的影響。

方法通過CTDNA、UUDNA熒光定量PCR檢測精液CT、UU感染情況，根據(jù)檢測結(jié)果分為CT陽性組、UU陽性組、CT+UU陽性組和陰性對照組。以精子活力、前向運動（a+b）%、精子濃度、精液量、精子的正常形態(tài)百分比、腫脹存活率、圓細(xì)胞數(shù)為觀察指標(biāo)，比較各組精液質(zhì)量和精子功能的差異。

結(jié)果UU陽性組、CT陽性組、UU+CT陽性組的精液參數(shù)優(yōu)于陰性對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），UU+CT陽性組的精子活力、前向運動、腫脹存活率與UU陽性組、CT陽性組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

結(jié)論UU、CT單獨及合并感染對男性精液參數(shù)及精子功能有影響，CT合并UU感染對精液質(zhì)量的影響可能存在疊加作用。

【關(guān)鍵詞】 解脲支原體；沙眼衣原體；精液參數(shù)

中圖分類號：R698.2 文獻標(biāo)識碼：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2017.05.013

Influence of UU and CT alone and combined infection on semenparameters in male infertility patients

[HJ2][HJ]

DENG Guoming，XU Peng，LI Guangzhi

（Department of Laboratory，Liuzhou Peoples Hospital，Liuzhou 545006，China）

[HJ2][HJ]

【Abstract】ObjectiveTo investigate the effects of Ureaplasma urealyticum（UU）and Chlamydia trachomatis（CT）alone and combined infection on semen parameters and sperm function in male.

MethodsThe infection of CT and UU was detected by CTDNA and UUDNA quantitative PCR，and patients were divided into CT positive group，UU positive group，CT+UU positive group and negative control group according to the test results.Sperm motility，forward movement（a+b）%，sperm concentration，semen volume，percentage of normal morphology of sperm，swelling survival rate，and the number of oval cells were taken as observation indexes to compare semen quality and sperm function between the two groups.

ResultsSemen parameters among the CT positive group，the UU positive group and the CT+UU positive group were better than those of the negative control group，difference was statistically significant（P<0.05）.The difference of sperm motility，forward movement and swelling survival rate between the UU positive group，the CT+UU positive group and the negative control group was statistically significant（P<0.05）.

ConclusionCT and UU alone and combined infection may have influence on male semen parameters and sperm function，and the effect of CT and UU infection on semen quality may be superimposed.

【Key words】UU；CT；semen parameters

非淋菌性尿道炎的病原體主要為沙眼衣原體（CT）和解脲支原體（UU）。本病目前在歐美國家已超過淋病躍居性傳播疾病之首位，在我國的病例也日漸增多，成為最常見的性傳播疾病之一。CT和UU引起的臨床癥狀具有一定相似性。臨床上存在大量CT合并UU感染的患者，本研究旨在探討CT、UU單獨及合并感染與精液質(zhì)量和精子功能的關(guān)系，為臨床男性不育癥患者的診療提供依據(jù)。

1資料與方法

1.1病例選擇

600例不育癥精液標(biāo)本來自2015年～2017年本院生殖醫(yī)學(xué)中心就診的男性不育癥患者，年齡18～40歲。不育時間1～10年，平均4年。不育癥診斷標(biāo)準(zhǔn)：夫妻同居12個月以上，正常性生活，未采取任何避孕措施，未使女方受孕者[1]。無外傷及遺傳性疾病家族史，無性功能障礙史，檢查未發(fā)現(xiàn)明顯的睪丸、附睪及輸精管結(jié)構(gòu)異常。無精癥患者被排除在外。排除女方不孕及其他影響受孕的相關(guān)疾病。根據(jù)CTDNA、UUDNA 檢測結(jié)果分為CT陽性組、UU陽性組、CT+UU陽性組和陰性對照組，各組年齡、不育時間等比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。endprint

1.2標(biāo)本采集

要求受試者禁欲3～7天，取精前排空尿液，消毒陰莖及雙手，采用手淫法采集精液于無菌杯中。采樣后，即刻放于37℃水浴保溫，待充分液化后進行精液常規(guī)檢測。同時用無菌管留取精液標(biāo)本進行CTDNA、UUDNA檢測。

1.3試劑

CTDNA、UUDNA檢測試劑盒由中山達安基因公司提供，嚴(yán)格按照說明書操作。

1.4檢測方法

精液常規(guī)檢驗：采用計算機輔助精液分析（CASA）系統(tǒng)，所有操作按照第五版《WHO人類精液及精子-宮頸黏液相互作用實驗室檢驗手冊》要求進行。CTDNA和UUDNA采用熒光定量PCR法檢測（拷貝數(shù)大于103copy/ml判定為陽性）。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組間比較采用方差分析，兩兩組間比較用LSDt檢驗，檢驗水準(zhǔn)：α=0.05，雙側(cè)檢驗。

2結(jié)果

2.1精子活力、前向運動、腫脹存活率比較

CT陽性組、UU陽性組、CT+UU陽性組的精子活力、前向運動、腫脹存活率與陰性對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。CT+UU陽性組的精子活力、前向運動、腫脹存活率與CT陽性組、UU陽性組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2精液量、精子濃度、精子正常形態(tài)百分率、圓細(xì)胞數(shù)比較

CT陽性組、UU陽性組、CT+UU陽性組的精液量、精子濃度、精子正常形態(tài)百分率、圓細(xì)胞數(shù)與陰性對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。但CT+UU陽性組的精液量、精子濃度、精子正常形態(tài)百分率與CT陽性組、UU陽性組比較無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），僅CT+UU陽性組的圓細(xì)胞與UU陽性組比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

3討論

流行病學(xué)調(diào)查顯示，男性不育人群日益增多，男性泌尿系感染是導(dǎo)致男性不育的主要原因之一。生殖道感染可導(dǎo)致患者精液量、精子密度、精子活力、存活率明顯下降，使精子畸形率明顯增高。

本研究觀察了600例不育患者，按照精液CTDNA和UUDNA的熒光定量PCR檢測結(jié)果分為CT陽性組、UU陽性組、CT+UU陽性組和陰性對照組。對各組的精液常規(guī)參數(shù)進行比較，結(jié)果顯示，在男性不育患者中，CT陽性組、UU陽性組、CT+UU陽性組與陰性對照組相比存在明顯差異，提示CT、UU感染可導(dǎo)致男性精液質(zhì)量下降。

支原體是一種原核細(xì)胞微生物，在人體中屬于條件致病菌。UU屬于支原體科原體屬，是人類泌尿生殖道諸多支原體感染中為最常見的種類。UUDNA檢測被用作男性生殖道感染和男性不育病因診斷中的一個常規(guī)檢查項目。目前關(guān)于UU引起男性不育的機理尚未完全明確，有學(xué)者采用掃描和透射電子顯微鏡觀察UU感染對精子和生精細(xì)胞的影響，發(fā)現(xiàn)UU感染后，可以黏附在生精細(xì)胞表面或侵入生精細(xì)胞，引起精母細(xì)胞的細(xì)胞膜破損和結(jié)構(gòu)改變，更有可能侵犯曲細(xì)精管內(nèi)生精上皮，干擾精子產(chǎn)生與成熟，從而引起不育癥。此外，UU還可通過吸附于精子[2]，減弱精子穿透卵細(xì)胞的能力，產(chǎn)生神經(jīng)氨酶樣物質(zhì)干擾精子與卵子接觸從而影響受精。UU感染精子后，常常附著在精子的頭部和尾部，使整個精子布滿大小不等的附著物，致使精子游動無力，互相纏繞，導(dǎo)致不育。有報道顯示，男性不育患者精液UU陽性率高達40.5%～48.9%[3]。UU感染導(dǎo)致精子畸形率增加，可高達80%[4]。UU感染還可引起曲細(xì)精管內(nèi)出現(xiàn)多核巨細(xì)胞，生精細(xì)胞嚴(yán)重退變、脫落，許多精母細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)空泡化的線粒體，胞質(zhì)中出現(xiàn)許多小泡狀結(jié)構(gòu)[5]。此外，人精子和精子膜蛋白存在交叉免疫反應(yīng)，不僅產(chǎn)生自身抗體，且UU感染后可吸附于精子細(xì)胞表面，誘導(dǎo)T細(xì)胞活化，通過細(xì)胞免疫殺傷精子細(xì)胞[6]。但支原體感染對男性生育影響與否，一直存在較大爭議。臨床上既存在大量UU感染的不育癥患者，同時也有無癥狀UU攜帶者，這給男性不育癥的臨床診療帶來困難。目前傾向于認(rèn)為和UU不同血清型的感染有關(guān)[7]。

CT是一類專性細(xì)胞內(nèi)生長、有獨特發(fā)育周期的原核型微生物，與UU存在大量的正常帶菌者不同，CT很少在正常男性的尿道分泌物中檢測出來。有報道生殖道CT感染可導(dǎo)致精子凋亡增加，損傷精子頂體膜，引起頂體消失，從而造成精子穿透能力減弱[8]，還有可能引起自身免疫，產(chǎn)生抗精子抗體[9]。Eley等的研究表明男性泌尿生殖道CT感染會影響精子成熟，從而導(dǎo)致活精數(shù)量減少[10]。Spadafora等研究發(fā)現(xiàn)CT感染后，生精細(xì)胞可通過CD4分子介導(dǎo)免疫反應(yīng)，從而獲得自發(fā)獲取外源性DNA的能力，精子與外源DNA相互作用可誘導(dǎo)內(nèi)源核酸剪切降解，導(dǎo)致類似凋亡的細(xì)胞死亡過程[11]。CT寄生于宿主細(xì)胞內(nèi)，可抑制宿主細(xì)胞代謝，使細(xì)胞溶解、破壞而導(dǎo)致溶酶體內(nèi)水解酶的釋放，導(dǎo)致生殖道炎癥而影響生育[12]。

另外，本研究還顯示CT+UU陽性組相比CT或UU單獨感染組，精子活力、前向運動、腫脹存活率顯著降低。CT+UU陽性組相比UU陽性組圓細(xì)胞顯著升高。以往報道尚未提及CT和UU合并感染對精液質(zhì)量影響存在協(xié)同作用。筆者認(rèn)為，一方面，CT和UU對精子影響的機制不同，CT感染主要破壞精子的正常結(jié)構(gòu)，造成精子死亡，而UU主要通過吸附影響精子的運動能力，因此，在CT感染造成精子細(xì)胞大量損傷死亡的同時，UU進一步限制了精子的運動能力，協(xié)同導(dǎo)致CT+UU陽性組精子活力、前向運動、腫脹存活率顯著降低。圓細(xì)胞是泌尿生殖道的上皮細(xì)胞、前列腺細(xì)胞、生精細(xì)胞和白細(xì)胞等非精子細(xì)胞成分，和炎癥反應(yīng)有關(guān)，CT感染不僅破壞精子和生精細(xì)胞，干擾精子成熟，也會引發(fā)泌尿生殖道一系列炎癥反應(yīng)，從而引起圓細(xì)胞增多。另一方面，目前認(rèn)為UU為條件致病菌，在CT感染的前提下，泌尿道出現(xiàn)損害，精液內(nèi)環(huán)境和精子遭受破壞，此時UU亦會發(fā)生致病作用，可能出現(xiàn)協(xié)同作用，因而CT+UU陽性組相比UU陽性組圓細(xì)胞顯著升高，提示感染加重，嚴(yán)重影響精子質(zhì)量。endprint

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（收稿日期：2017-04-09修回日期：2017-05-26）

（編輯：梁明佩）endprint