劉曉娜+杜以梅+杜予州

摘要：連續(xù)2年檢測(cè)揚(yáng)州地區(qū)煙粉虱生物型，并對(duì)其危害程度和發(fā)生動(dòng)態(tài)進(jìn)行系統(tǒng)調(diào)查，以期為揚(yáng)州地區(qū)煙粉虱的防治提供依據(jù)。利用細(xì)胞色素氧化酶I（cytochrome axidase I，簡(jiǎn)稱COI）分子標(biāo)記檢測(cè)揚(yáng)州地區(qū)煙粉虱的生物型，采用定時(shí)定點(diǎn)的方法調(diào)查煙粉虱的危害程度和發(fā)生動(dòng)態(tài)。結(jié)果表明，2014年和2015年揚(yáng)州地區(qū)發(fā)生的煙粉虱均為Q型；煙粉虱從6月初到11月初在主要蔬菜上的危害等級(jí)一直保持在4級(jí)，在其他時(shí)間的危害程度不高。2014年揚(yáng)州地區(qū)大棚蔬菜上的煙粉虱始見于4月上旬，消亡期為12月下旬，在7月下旬有1個(gè)危害高峰；2015年煙粉虱始見期為4月中下旬，到11月底仍有煙粉虱危害，其間有2個(gè)危害高峰，分別在5月底至6月初和7月底至8月中旬。2014年揚(yáng)州地區(qū)煙粉虱的發(fā)生危害及蟲口密度高于2015年，其發(fā)生的蟲口密度在不同年份之間有波動(dòng)，而且在不同的月份之間也存在差異。

關(guān)鍵詞：煙粉虱；生物型；危害程度；發(fā)生動(dòng)態(tài)；揚(yáng)州市

中圖分類號(hào)： S433.39文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2017）23-0100-03

該蟲為多食性害蟲，寄主范圍廣，寄主適應(yīng)性強(qiáng)，在熱帶、亞熱帶和溫帶地區(qū)一年發(fā)生11～15代，具有世代重疊的特性。煙粉虱可以在溫暖地區(qū)的野外雜草和花卉上越冬，但在寒冷地區(qū)的煙粉虱則主要在保護(hù)地作物上越冬。煙粉虱是一類快速進(jìn)化的復(fù)合種，其中B型煙粉虱（也稱Middle East-Asia 1）和Q型煙粉虱（Mediterranean）在全球范圍內(nèi)危害較為嚴(yán)重，入侵性也最強(qiáng)[1-2]。2001年在揚(yáng)州地區(qū)首次發(fā)現(xiàn)B型煙粉虱，隨后在江蘇地區(qū)迅速擴(kuò)散危害，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[3]。但2005年在江蘇省發(fā)現(xiàn)Q型煙粉虱后，Q型煙粉虱的種群數(shù)量逐年增加，而B型煙粉虱的種群數(shù)量卻逐年遞減，到2010年Q型煙粉虱已成為優(yōu)勢(shì)種[4]。孫偉等連續(xù)多年對(duì)江蘇省范圍內(nèi)煙粉虱的發(fā)生危害進(jìn)行調(diào)查發(fā)現(xiàn)，煙粉虱的發(fā)生危害不僅在不同年份之間存在波動(dòng)，而且在不同地區(qū)之間也存在著顯著差異[5-6]。為進(jìn)一步了解和掌握揚(yáng)州地區(qū)煙粉虱生物型及全年的發(fā)生危害動(dòng)態(tài)，于2014、2015年對(duì)揚(yáng)州不同地區(qū)煙粉虱的生物型進(jìn)行檢測(cè)，并以揚(yáng)州蔣王蔬菜基地作為系統(tǒng)調(diào)查點(diǎn)，對(duì)煙粉虱在其主要嗜好寄主植物上的發(fā)生危害動(dòng)態(tài)做詳細(xì)的調(diào)查，以期為揚(yáng)州地區(qū)煙粉虱綜合防治提供科學(xué)依據(jù)。

1材料與方法

1.1揚(yáng)州地區(qū)煙粉虱生物型檢測(cè)

1.1.1材料供試蟲源：于2014、2015年在揚(yáng)州市邗江區(qū)、廣陵區(qū)、江都區(qū)、高郵市、儀征市、寶應(yīng)縣的番茄（Lycopersicon esculentum）、黃瓜（Cucumis sativus）、辣椒（Capsicum annuum）、茄子（Solanum melongena）等主要蔬菜和過渡寄主葎草（Humulus scandens）上采集煙粉虱成蟲。將采集到的樣本浸泡于裝有無水乙醇的1.5 mL Eppendorf管中，于-20 ℃條件下保存。

主要試劑有蛋白酶K、rTaq DNA聚合酶、10×Buffer，購自寶生物工程（大連）有限公司；dNTPs，購自中美泰和生物技術(shù)（北京）有限公司。

1.1.2方法采用細(xì)胞色素氧化酶I（cytochrome axidase I，簡(jiǎn)稱COI）分子標(biāo)記快速檢測(cè)法，該方法引用福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所申請(qǐng)的專利201110413571《煙粉虱生物B型和Q型特異性引物和快速鑒定方法》。這個(gè)專利主要針對(duì)B型和Q型分別設(shè)計(jì)了2對(duì)特異性引物，構(gòu)建了一套適合煙粉虱生物型快速鑒定的雙引物PCR擴(kuò)增體系。該方法可以快速鑒定田間外來入侵煙粉虱的生物型。若該方法不能檢測(cè)出煙粉虱樣本的生物型，筆者采用通用引物，即上游引物 C1-J-2195（5′-TTGATTTTTTGGTCATCCAGAAGT-3′）和下游引物L(fēng)2-N-3014（5′-TCCAATGCACTAATCTGCCATA

TTA-3′）對(duì)煙粉虱mtDNA COI基因進(jìn)行擴(kuò)增并送中美泰和生物技術(shù)有限公司測(cè)序，將測(cè)序結(jié)果進(jìn)行Blast比對(duì)分析，確定其生物型。本研究共檢測(cè)揚(yáng)州地區(qū)288個(gè)樣本。

1.2揚(yáng)州地區(qū)煙粉虱危害程度及發(fā)生動(dòng)態(tài)調(diào)查

于每年2月開始定期對(duì)揚(yáng)州市蔣王蔬菜基地的番茄、茄子、辣椒進(jìn)行系統(tǒng)調(diào)查，每7 d調(diào)查1次。對(duì)不同的寄主均采用“Z”字形5點(diǎn)采樣，每點(diǎn)隨機(jī)調(diào)查5株，每株分別摘取上、中、下3張葉片，將不同寄主的葉片放入不同的袋子中帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行鏡檢，記錄每張葉片中煙粉虱卵、若蟲和偽蛹的數(shù)量以及葉面積，然后折算成單位葉面積的蟲口密度并劃分危害等級(jí)。具體方法：（1）將煙粉虱的危害程度劃分為5級(jí)。（2）設(shè)定1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)葉面積為10 cm2。調(diào)查時(shí)，將調(diào)查葉片的平均葉面積換算為標(biāo)準(zhǔn)葉面積。（3）以1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)葉面積上的平均煙粉虱數(shù)量（卵、若蟲和偽蛹的總數(shù)量）為分級(jí)單位，即蟲量（頭）/標(biāo)準(zhǔn)葉面積。（4）分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)[平均蟲量（頭）/標(biāo)準(zhǔn)葉面積（10 cm2）]：0級(jí)為無蟲，1級(jí)≤1頭/10 cm2，2級(jí)為2～3頭/10 cm2，3級(jí)為 4～6頭/10 cm2，4級(jí)≥7頭/10 cm2，分別記為“-”“+”“++”“+++”“++++”。

2結(jié)果與分析

2.1揚(yáng)州地區(qū)煙粉虱生物型檢測(cè)

連續(xù)2年對(duì)揚(yáng)州市邗江區(qū)、廣陵區(qū)、江都區(qū)、高郵市、儀征市、寶應(yīng)縣蔬菜基地不同寄主植物上的煙粉虱進(jìn)行生物型檢測(cè)。結(jié)果表明，揚(yáng)州地區(qū)主要蔬菜和過渡寄主葎草上的煙粉虱均為Q型煙粉虱，沒有發(fā)現(xiàn)B型煙粉虱（表1）。這表明揚(yáng)州地區(qū)主要蔬菜上的B型煙粉虱已被Q型所取代。

2.2揚(yáng)州地區(qū)煙粉虱的發(fā)生危害程度

2014年的調(diào)查數(shù)據(jù)表明，揚(yáng)州地區(qū)煙粉虱4月初開始在番茄上出現(xiàn)，至5月初危害較輕，危害程度一直保持在1級(jí)；5月中旬危害開始逐漸加重，危害程度上升至2級(jí)，5月下旬后危害程度升至4級(jí)，其危害在7月中旬達(dá)到高峰，與蔡力等2013年的調(diào)查結(jié)果[7]相比提前40 d左右，此間主要種植的蔬菜有番茄、茄子和黃瓜等；從5月下旬至10月底，煙粉虱在番茄、茄子、黃瓜等主要蔬菜上的危害程度一直維持在4級(jí)水平；從11月初開始，煙粉虱的危害程度開始下降，此時(shí)已開始種植下一季番茄，11月10日左右危害程度降為3級(jí)，到11月末煙粉虱的危害程度降到1級(jí)，直到12月中旬調(diào)查結(jié)束。endprint

2015年的調(diào)查數(shù)據(jù)表明，煙粉虱從4月中下旬開始在番茄上發(fā)生，較2014年發(fā)生晚，直到5月中旬，危害程度一直處在1級(jí)；5月中下旬危害程度開始上升至2級(jí)，此時(shí)寄主蔬菜主要以番茄為主；從5月下旬開始，煙粉虱的危害程度迅速上升至4級(jí)，直到10月初，此時(shí)除了種植番茄以外還有黃瓜、茄子等蔬菜；從10月中旬開始危害程度降為3級(jí)，此時(shí)大棚里主要種植的是茄子、豇豆等蔬菜；此后到12月初，煙粉虱主要轉(zhuǎn)至十字花科蔬菜危害，其危害程度較輕，危害級(jí)別為1級(jí)。

從揚(yáng)州地區(qū)2014年和2015年的調(diào)查數(shù)據(jù)可以看出，煙粉虱在番茄、茄子、黃瓜等主要蔬菜上的危害程度趨勢(shì)基本一致，但2015年較2014年發(fā)生晚，發(fā)生危害程度略輕。

2.3揚(yáng)州地區(qū)煙粉虱的發(fā)生動(dòng)態(tài)

2014年的調(diào)查結(jié)果表明，從4月3日發(fā)現(xiàn)煙粉虱到5月中下旬，在葉片上的蟲口密度一直很低，為0.03～0.15頭/cm2；從5月底開始，煙粉虱的蟲口密度開始增加，為 0.83頭/cm2 左右；在6月20日至7月24日的1個(gè)月時(shí)間里，蟲口密度由4.09頭/cm2迅速增長為30.68頭/cm2，達(dá)到危害最高峰，此間田間主要種植茄子；隨后蟲口密度迅速下降，到8月9日蟲口密度降至3.64頭/cm2；此后煙粉虱的蟲口密度除了在10月27日有小幅度的增長外，一直維持在較低水平，為0～0.59頭/cm2，直到調(diào)查結(jié)束（圖1）。

2015年的調(diào)查數(shù)據(jù)表明，4月18日開始發(fā)現(xiàn)煙粉虱危害番茄，直到5月22日，葉片上的蟲口密度一直不高，在 0.02～0.36頭/cm2之間；到5月下旬至6月初，發(fā)生危害形成1個(gè)小高峰，其蟲口密度在6月6日達(dá)到4.11頭/cm2，此時(shí)田間主要種植番茄；6月中旬番茄收獲，主要寄主更換為黃瓜，蟲口密度有所下降，6月12日的蟲口密度為 1.08頭/cm2。隨后20 d左右的時(shí)間，蟲口密度沒有大幅變化，在2.35～2.77頭/cm2；7月10日蟲口密度達(dá)到1個(gè)月之內(nèi)的最小值為0.75頭/cm2；7月中旬以后，煙粉虱的危害加重，蟲口密度快速上升，8月7日達(dá)到最高峰，蟲口密度為1472頭/cm2；隨后，蟲口密度迅速下降，到8月28日蟲口密度降到2.77頭/cm2，之后的蟲口密度逐漸下降，此間煙粉虱的寄主蔬菜主要是茄子；在10月30日茄子收獲后，大多數(shù)煙粉虱轉(zhuǎn)到在十字花科蔬菜上危害，但數(shù)量很少（圖2）。

從調(diào)查的數(shù)據(jù)可以看出，2014年揚(yáng)州地區(qū)煙粉虱危害高峰期的蟲口密度明顯高于2015年的，是2015年的2倍多；2014年煙粉虱只出現(xiàn)了1個(gè)明顯的危害高峰，而2015年則出現(xiàn)了2個(gè)危害高峰，1個(gè)危害高峰期在5月底至6月初，另1個(gè)危害高峰期在7月底至8月中旬， 出現(xiàn)的時(shí)間和2014年

基本一致。

3討論

2001年，在揚(yáng)州儀征花卉生產(chǎn)基地的一品紅上首次發(fā)現(xiàn)B型煙粉虱，這也是江蘇省的首例[3]，隨后其不斷的擴(kuò)散，給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成了嚴(yán)重的損失。2005年江蘇省檢測(cè)到Q型煙粉虱，此后Q型煙粉虱的種群數(shù)量逐年遞增，而B型煙粉虱卻逐年遞減[4]。2008—2013年揚(yáng)州地區(qū)都未檢測(cè)到B型煙粉虱[7]，2014—2015年的檢測(cè)結(jié)果也同樣如此。短短幾年的時(shí)間，揚(yáng)州地區(qū)B型煙粉虱完全被Q型煙粉虱所取代，可能的原因有：（1）Q型煙粉虱有更強(qiáng)的寄主適應(yīng)性，雜草是Q型煙粉虱的主要寄主，這一點(diǎn)在調(diào)查中也有體現(xiàn)[8-9]；（2）有研究報(bào)道，Q型煙粉虱對(duì)新煙堿類農(nóng)藥有更強(qiáng)的抗性[10]；（3）可能與揚(yáng)州地區(qū)蔬菜種植布局及品種有關(guān)。由于目前揚(yáng)州地區(qū)煙粉虱都為Q型，它對(duì)新煙堿類農(nóng)藥更有抗性，所以在對(duì)其進(jìn)行化學(xué)防治時(shí)，應(yīng)注意不同藥劑之間合理的混用輪用，以延緩抗性產(chǎn)生。

調(diào)查結(jié)果表明，2014、2015年揚(yáng)州地區(qū)煙粉虱的危害動(dòng)態(tài)大體一致，5月中旬之前危害程度一直為1級(jí)，從6月初到11月初一直保持4級(jí)的危害程度，這與孫偉等的調(diào)查結(jié)果[5，11]一致。通過2年的種群動(dòng)態(tài)調(diào)查可以看出，2014年揚(yáng)州地區(qū)煙粉虱危害高峰期的蟲口密度明顯高于2015年，是2015年的2倍多；2014年在揚(yáng)州蔣王蔬菜基地的煙粉虱只出現(xiàn)了1個(gè)危害高峰，而2015年則出現(xiàn)了2個(gè)危害高峰，這可能與揚(yáng)州地區(qū)這2年的天氣（溫度、濕度、降水和風(fēng)等）和寄主蔬菜的生長狀況等因素有關(guān)。因?yàn)闇囟?、濕度可以影響煙粉虱的生長發(fā)育、存活和繁殖[12-13]，也可以影響寄主蔬菜的生長狀況，從而影響煙粉虱的發(fā)生動(dòng)態(tài)。而2014年揚(yáng)州地區(qū)早春的平均氣溫高于2015年，有利于煙粉虱的發(fā)生危害。揚(yáng)州地區(qū)2015年的降水量明顯高于2014年，且在4月中旬、5月中旬至7月中旬以及8月上旬出現(xiàn)多個(gè)持續(xù)降水天氣，這一天氣條件不利于煙粉虱發(fā)生危害。此外，由于揚(yáng)州蔣王蔬菜基地溫室設(shè)施老舊，防雨、保溫、保濕的效果較差，而2015年雨水較多，寄主蔬菜受澇害較重，長勢(shì)較差。這些因素導(dǎo)致2014年煙粉虱的發(fā)生危害和蟲口密度明顯高于2015年。

值得注意的是，煙粉虱在-2 ℃以下時(shí)開始出現(xiàn)死亡，隨著溫度的下降和處理時(shí)間的延長，煙粉虱的死亡率迅速上升，-6 ℃時(shí)煙粉虱處理7 h以上全部死亡[12]。而在揚(yáng)州地區(qū)，最低氣溫是要低于煙粉虱致死溫度的，且持續(xù)時(shí)間較長，故在揚(yáng)州地區(qū)煙粉虱只能在溫室中越冬，不能在野外越冬。因此，在防治溫室大棚內(nèi)的煙粉虱時(shí)，要注意保持棚內(nèi)空氣流通，適當(dāng)掀開大棚的薄膜以降低棚內(nèi)溫度，有效地抑制煙粉虱的生長繁殖。通過調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在寄主輪換時(shí)煙粉虱數(shù)量驟減，而在蔣王地區(qū)作物的種植是沒有間隔期的，這就導(dǎo)致煙粉虱種群數(shù)量驟減后又迅速增長。因此，在煙粉虱的防治工作中，要注意徹底清理殘枝落葉，減少危害下一茬作物的蟲源基數(shù)，適當(dāng)調(diào)整作物種植間隔期。

參考文獻(xiàn)：

[1]Dinsdale A，Cook L，Riginos C，et al. Refined global analysis of Bemisia tabaci （Hemiptera：Sternorrhyncha：Aleyrodoidea：Aleyrodidae） mitochondrial cytochrome oxidase 1 to identify species level genetic boundaries.[J]. Annals of the Entomological Society of America，2010，103（2）：196-208.endprint

[2]Barro P D，Ahmed M Z. Genetic networking of the Bemisia tabaci cryptic species domplex reveals pattern of biological invasions[J]. PLoS ONE，2011，6（10）：e25579.

[3]周福才，杜予州，陸自強(qiáng). 江蘇發(fā)現(xiàn)B型煙粉虱危害[J]. 揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2001，4（3）：37.

[4]沈媛，杜予州，任順祥，等. 江蘇地區(qū)煙粉虱生物型演替研究初報(bào)[J]. 應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào)，2011，48（1）：16-21.

[5]孫偉，杜予州，沈媛，等. 江蘇揚(yáng)州地區(qū)蔬菜煙粉虱寄主調(diào)查及種群動(dòng)態(tài)[J]. 華東昆蟲學(xué)報(bào)，2005，14（1）：38-43.

[6]蔡力，許麗麗，杜以梅，等. 江蘇地區(qū)煙粉虱發(fā)生危害及其生物型監(jiān)測(cè)[J]. 應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào)，2015，52（1）：124-134.

[7]蔡力. 江蘇地區(qū)煙粉虱生物型監(jiān)測(cè)及其遺傳多樣性研究[D]. 揚(yáng)州：揚(yáng)州大學(xué)，2014：32-38.

[8]Iida H，Kitamura T，Honda K. Comparison of egg-hatching rate，survival rate and development time of the immature stage between B-and Q-biotypes of Bemisia tabaci （Gennadius） （Homoptera：Aleyrodidae） on various agricultural crops[J]. Applied Entomology and Zoology，2009，44（2）：267-273.

[9]Tsueda H，Tsuchida K. Reproductive differences between Q and B whitefly，Bemisia tabaci，on three host plants and negative interactions in mixed cohorts[J]. Entomologia Experimentalis et Applicata，2011，141（3）：197-207.

[10]Horowitz A R，Kontsedalov S，Khasdan V，et al. Biotypes B and Q of Bemisia tabaci and their relevance to neonicotinoid and pyriproxyfen resistance[J]. Archives of Insect Biochemistry and Physiology，2005，58（4）：216-225.

[11]趙偉. 山東煙田煙粉虱的發(fā)生動(dòng)態(tài)及防治技術(shù)[D]. 北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院，2014，48-54.

[12]崔紅旭，鄭丹，蒲桂林，等. 溫度對(duì)B型、Q型煙粉虱生長發(fā)育、存活和繁殖的影響[J]. 植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2009，36（6）：571-572.

[13]陳夜江，羅宏偉，黃建，等. 濕度對(duì)煙粉虱實(shí)驗(yàn)種群的影響[J]. 華東昆蟲學(xué)報(bào)，2001，10（2）：76-80.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)2017年第45卷第23期王呈玉，張浩，崔俊濤，等. 人參根際防病促生放線菌的篩選及其活性[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017，45（23）：103-106.endprint