劉興華，倪俊卿，宋首宏，李建明，楊玉英

（河北省畜牧良種工作站，河北石家莊050000）

種公牛冷凍精液的質(zhì)量優(yōu)劣直接影響母牛的受胎率和繁殖率,也與養(yǎng)牛戶的經(jīng)濟利益密切相關(guān),所以時刻樹立質(zhì)量意識,對冷凍精液質(zhì)量進行嚴格的控制尤為重要。河北品元畜禽育種有限公司作為全國大站,擁有優(yōu)質(zhì)種公牛200多頭,生產(chǎn)的冷凍精液發(fā)往全國各地,多年來一直遵循確保每一支凍精優(yōu)質(zhì)合格,讓每位養(yǎng)牛戶用上放心凍精的原則，在生產(chǎn)過程中，形成一系列的質(zhì)量控制措施，保證了冷凍精液的質(zhì)量。

1　細菌數(shù)的控制

國標規(guī)定，每劑量的精液細菌數(shù)不能超過800個，在實際生產(chǎn)中，細菌數(shù)是最不好控制的指標，往往一個細節(jié)的疏忽，就造成最終細菌數(shù)的超標,尤其在炎熱潮濕的夏季,細菌數(shù)控制更是重中之重,為此我們也做了大量的工作。

首先，精液采集及處理的大環(huán)境衛(wèi)生無菌處理是非常必要的，而大環(huán)境主要就是精液處理室、采精廳、采精準備室。精液處理室及采精準備室需要定人定崗進行衛(wèi)生打掃，保持室內(nèi)的干凈清潔，并且使用定時開關(guān)在每天下班后對室內(nèi)進行紫外線照射30～60min消毒，而為了防止外來因素對環(huán)境造成的污染，精液處理室嚴禁非工作人員進入，工作人員必須首先在更衣室更換干凈無菌鞋帽后進入走廊最后進入精液處理室，更衣室以及走廊也設(shè)有紫外線燈照射進行消毒；工作人員保證個人衛(wèi)生，勤洗手不留指甲等等，有效的防止人為造成細菌污染；保持采精廳內(nèi)的通風(fēng)干燥，采精廳每次使用完畢后由專人進行清掃消毒，用水沖刷地面然后再潑灑消毒液，防止細菌的滋生。

第二個大的方面是精液采集處理過程中所使用的器具，由于這些器具跟精液有直接的接觸，如果消毒不完全或者被污染，那么精液自然也就被污染，所以器具必須進行嚴格消毒。采精所用的假陰道、內(nèi)胎、三角漏斗需經(jīng)過三道清洗，首先使用清水沖刷后用洗潔精水進行二次清洗，最后再用清水沖洗，清洗干凈后使用蒸汽消毒機進行蒸汽消毒，消毒后放在無菌的環(huán)境中備用，在安裝時再使用75%酒精擦拭消毒。集精杯、錐形瓶、量筒等直接和精液接觸的玻璃器皿在常規(guī)清洗后使用干燥箱120度消毒2h；包裝用的塑料管、塑料細管及紗布袋都于前一天用紫外線消毒30min。所有器皿消毒后放于無菌環(huán)境中備用，防止污染。

第三方面就是精液采集和處理過程中的控制：無論是公牛和采精用的臺牛都要做好牛體清潔消毒工作，要定期對公牛進行牛體刷拭以保證干凈，尤其是牛體腹部的清潔，采精前對采精公牛陰莖周圍陰毛進行修剪并清洗消毒，避免采精過程中身上污染物、微生物或者包皮中的污物進入精液。臺牛每次使用前需用高錳酸鉀溶液刷洗后軀并用干凈毛巾擦拭干凈，在采精過程中要保持臺牛的干凈狀態(tài)，一旦后驅(qū)被牛糞污染需要立即清洗，同時定期剪除臺牛尾巴上過長的尾毛，在采精過程中使用栓系尾巴的方法來避免臺牛甩尾，這樣可以有效的避免臺牛身上污物和微生物落入假陰道污染精液；采精過程中采精員需佩戴一次性手套，防止細菌污染以及交叉感染的發(fā)生，假陰道潤滑液定期消毒避免細菌的滋生。

精液采集后通過無菌傳遞窗送達精液處理室，在精液處理室進行活力檢測使用的槍頭應(yīng)提前使用紫外線進行消毒，其他玻璃器皿全部進行高溫消毒后使用。精液稀釋所用稀釋液需進行無菌處理，最好使用進口稀釋液，避免自配稀釋液使用卵黃，因無菌處理不到位而造成細菌數(shù)超標。

2　活力的控制

精液冷凍后由兩人一組進行凍后活力的初次檢測。檢測方法是同時解凍兩支混勻，用移液槍吸取7～8ul滴于載玻片上，蓋上蓋玻片置于37℃的載物臺上 （載玻片蓋玻片提前放置37℃載物臺上預(yù)熱）進行觀察，每個鏡片取三個視野進行活力檢測，取其平均活力評價值作為最終結(jié)果，而兩人一組的方法有效的避免了人為主觀因素對活力的誤判，減少誤差的發(fā)生。初步檢測合格精液放入儲藏室等待質(zhì)檢人員進行質(zhì)檢，質(zhì)檢合格在進行分裝后，對產(chǎn)品再一次進行抽檢，經(jīng)過這三次活力的檢測確保精液活力合格。

3　有效精子數(shù)、劑量的控制

有效精子數(shù)由稀釋儀、密度分析儀來進行分析，精密的儀器保證了每劑凍精中精子的總數(shù)，而嚴格把關(guān)活力則保證了每劑凍精中有效精子數(shù)。為確保儀器準確性，避免出現(xiàn)錯誤，生產(chǎn)人員需要每周對稀釋儀、密度分析儀進行一次人工校對。校對需由兩人進行，防止人為的誤差。對灌裝機每次使用完后進行嚴格的清潔以及保養(yǎng)，確保了劑量的合格。

4　畸形率的控制

畸形率表面上人為控制不了，但是從精子畸形的形態(tài)可以分析出某些原因，比如采精的頻率，飼養(yǎng)水平等等，所以質(zhì)檢人員及時與生產(chǎn)管理人員溝通，根據(jù)每頭牛精子的形態(tài)情況及時調(diào)整某些牛的采精頻率以及營養(yǎng)水平。

在生產(chǎn)過程中,制定操作規(guī)程，要求操作人員嚴格按照操作規(guī)程進行操作，每一道工序責(zé)任落實到人，并且定期培訓(xùn)，監(jiān)督，防止因為人員操作不當(dāng)造成的質(zhì)量問題。

5　質(zhì)量檢測控制

定期檢測凍精的劑型、劑量、畸形率、有效精子數(shù)、細菌數(shù)、直線前進運動精子數(shù)，嚴格按照質(zhì)量檢測操作規(guī)程操作，質(zhì)檢所用儀器設(shè)備定期校對，自檢。質(zhì)檢標準執(zhí)行高于國家標準的企業(yè)標準，任何一項指標不合格，該產(chǎn)品即作廢處理，不讓一支不合格產(chǎn)品流入市場。檢測過程做好原始記錄，檢測人員、復(fù)核人員、檢測負責(zé)人簽字，最后出具檢測報告。同時在質(zhì)量檢測中使用精子分析系統(tǒng)進行輔助檢測，檢測結(jié)果出具詳細的數(shù)據(jù)報告，質(zhì)檢結(jié)果更加客觀準確，并且根據(jù)各項精子數(shù)據(jù)來隨時做好種公牛的飼養(yǎng)管理工作。

細節(jié)決定成敗，近幾年來，嚴格控制生產(chǎn)中的每一個環(huán)節(jié)，確保了凍精質(zhì)量，為牛品種改良和牛養(yǎng)殖戶繁殖率提高提供了質(zhì)量的保障。