楊 艷 湯玉喜 唐 潔 李永進(jìn) 吳 敏

（湖南省林業(yè)科學(xué)院，湖南 長沙 410004）

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所需材料為汨羅梔子種植基地所收集的4種不同種類的梔子（LH、ML、FJ和 JX）成熟果實(shí)。

1.2 儀器與試藥

本試驗(yàn)所用儀器為LC-20AD高效液相色譜儀 (日本島津)、DAD檢測(cè)器、Class-vp色譜工作站、自動(dòng)進(jìn)樣器。梔子苷、氯原酸對(duì)照品分別為中國藥品生物制品檢定所提供，批號(hào)分別為110749-201116和110753-200415，梔子酸、藏紅花素均由中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所提供（純度98.9%）。試驗(yàn)所需分析純均購自國藥集團(tuán)，超純水自制。

1.3 供試樣品的制備

分別取各種梔子果實(shí)粉末0.1g，4種成分測(cè)定需要4份，每份3個(gè)重復(fù)。將取出的梔子果實(shí)粉末置入具塞錐形瓶中，加入甲醇25mL，超聲處理20min，之后搖勻過濾，取過濾液10mL于25mL量筒中，加入甲醇稀釋至刻度，搖勻。

1.4 色譜條件

色譜柱：AgilentEclipseXDB-C18（4.6mm×250mm，5μm）；流動(dòng)相A表示乙腈，B表示水溶液，梯度洗脫（0～12min、A10%～15%；12～32min、A15%～30%；32～42min、A30%～50%；42～52min、A50%）；檢測(cè)波長：苷類為 238nm、綠原酸為 332nm、藏紅花素為440nm、柱溫30℃、進(jìn)樣量10μL。

2 結(jié)果與分析

2.1 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取相同的溶液放置于室溫下，從0～24h，每隔2h按照色譜條件進(jìn)行分析，計(jì)算出不同種類梔子中梔子酸、綠原酸、梔子苷以及藏紅花素各色譜峰面積的RSD（結(jié)果見表1）。由表1可知，每種梔子主要成分的RSD均＜2%，表明所測(cè)試的溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

表1 穩(wěn)定性結(jié)果（RSD，%）

2.2 梔子有效成分含量

通過以上各測(cè)試條件檢測(cè)之后，對(duì)不同種類梔子的有效成分含量進(jìn)行測(cè)定（結(jié)果見表2）。

表2 不同梔子果實(shí)主要成分的含量(mg/g)

根據(jù)圖譜分析得出，各種梔子主要有效成分均含有梔子酸、綠原酸、梔子苷以及藏紅花素，但種類之間以及各有效成分間存在差異。根據(jù)表2可以看出，梔子LH的各有效成分含量均較高，其次是梔子FJ，梔子ML各有效成分含量均為最低，梔子酸含量僅為0.84mg/g，只有LH的50%。

2.3 梔子有效成分遺傳變異分析

供試的4種梔子的有效成分變異系數(shù)均較大，梔子酸、綠原酸和藏紅花素的變異系數(shù)都在10%以上，梔子苷相對(duì)較小僅為8.18%。各有效成分的遺傳力相對(duì)較小，都在0.4以下，表明供試的梔子種類具有較強(qiáng)的遺傳分化能力，有利于今后的良種選育。

3 結(jié)論與討論

測(cè)定供試的4個(gè)梔子品種的主要有效成分，發(fā)現(xiàn)不同種類的梔子有效成分種類相同，但各有效成分的含量差異較大，梔子酸、綠原酸、梔子苷以及藏紅花素含量最高的為梔子LH，分別為 1.48mg/g、2.17mg/g、11.73mg/g、10.75mg/g，最低的為梔子ML。根據(jù)梔子有效成分的遺傳分析，可知供試梔子具有較高的遺傳分化性，遺傳基礎(chǔ)廣闊。以上研究結(jié)論對(duì)梔子后期的遺傳改良以及梔子的開發(fā)利用提供了相應(yīng)的參考依據(jù)。

1 游偉良，平其能，孫敏捷等.梔子苷的藥理學(xué)研究新進(jìn)展[J].藥學(xué)進(jìn)展，2012（4）

2 楊全軍，范明松，孫兆林等.梔子化學(xué)成分、藥理作用及體內(nèi)過程研究進(jìn)展[J].中國現(xiàn)代中藥，2010（9）