林柳 郝菲 李君 榮翔飛 朱順
【摘要】目的 制備β-環(huán)糊精(β-CD)包合Fe+2,并探索最佳制備條件。方法 N2保護下制備包合物,紅外光譜儀進行結(jié)構(gòu)驗證,通過鹽酸羥胺溶液與鄰菲羅啉溶液顯色,用紫外分光光度法測包合率,探索不同投料比,溶劑配比,反應(yīng)時間,反應(yīng)溫度,攪拌速度下,包合率情況。結(jié)果 在投料比
(β-CD:FeSO4·7H2O,n/n)為1:3,溶劑配比(C2H5OH:H2O,n/n)為2:1,攪拌速度為250 r/min時,60℃條件下反應(yīng)4 t,β-CD-Fe2+能得到最大包合率。結(jié)論 成功制得β-CD-Fe+2包合物,并且摸索到較佳制備條件。
【關(guān)鍵詞】β-環(huán)糊精;硫酸亞鐵;工藝優(yōu)化
【中圖分類號】R943 【文獻標識碼】B 【文章編號】ISSN.2095-6681.2018.02..02
【Abstract】Objective To synthesize β-CD-Fe+2 complex,and to explore the optimal preparation conditions.Methods To protect the complexes by N2,verified the complexes by infrared spectroscopy, measuring the inclusion rate by 1,10- phenanthroline hydrate spectrophotometer method. then exploring the inclusion rate in different feed ratio, solvent ratio, reaction time, reaction temperature and stirring speed.Results When the feed ratio
(β-CD:FeSO4·7H2O,n/n) was 1:3,the solvent ratio (C2H5OH:H2O,n/n) was 2:1,the stirring speed was 250r/min,the reaction time was 4t,the reaction temperature was 60℃,β-CD-Fe+2 could get the best inclusion rate.Conclusion The β-CD-Fe+2 inclusion complexes were successfully prepared. and the optimized conditions were found.
【Key words】Beta cyclodextrin;Ferrous sulfate;Process optimization
鐵是人體必須的微量元素,在人體內(nèi)發(fā)揮多種作用,其中Fe+2是制造血紅蛋白的重要組成部分,當人體缺乏亞鐵離子,會造成血紅蛋白水平過低,身體無法獲得足夠的氧氣,導(dǎo)致缺鐵性貧血,因此補充Fe+2是治療缺鐵性貧血的關(guān)鍵。但是Fe+2活性非常強,極易氧化為Fe+3,保持Fe+2穩(wěn)定性是研發(fā)鐵補充劑的重點。
β-CD是由7個葡萄糖單元通過β-1,4糖苷鍵連接而形成的環(huán)狀分子結(jié)構(gòu)。該環(huán)狀結(jié)構(gòu)周邊排列著氫原子和醚鍵,而中間為空穴[1]。β-CD的糖苷鍵氧原子上的游離電子對更趨向于空穴的內(nèi)側(cè),產(chǎn)生較高的電子云密度,呈現(xiàn)出某些Lewis堿的特性[2],能與某些藥物或者過渡金屬化合物形成穩(wěn)定的包合物,從而提高藥物穩(wěn)定性,掩蓋藥物的不良氣味,降低不良反應(yīng),也可制備靶向制劑[3]。應(yīng)用β-CD對藥物進行包合是現(xiàn)代藥物制劑研究的熱點。
1 內(nèi)容與結(jié)果
1.1 試劑與儀器
β-CD(湖北遠成賽創(chuàng)科技有限公司)、FeSO4·7H2O(武漢宏信康精細化工有限公司),無水乙醇為分析純,水為去離子水。
UV-2000型紫外可見分光光度儀(上海龍躍儀器設(shè)備有限公司)、ALPHA系傅立葉紅外光譜儀(德國Bruker公司)、PHS-3B型精密級數(shù)字式酸度計(上海滬粵明科學(xué)儀器有限公司)、HG03-JJ型電動攪拌儀(北京億百萬電子有限公司)、TYD-600型超聲波清洗機(北京泰元達精密清洗機)。
1.2 包合物的制備
將一定量β-CD置于一定體積的去離子水與無水乙醇的混合溶液中。N2保護下,在半小時內(nèi)分多次加入一定量FeSO4·7H2O,并且在設(shè)定的溫度下加熱反應(yīng)設(shè)定的時間。反應(yīng)結(jié)束后將產(chǎn)物轉(zhuǎn)移至潔凈燒杯中冰水浴靜置8小時,抽濾,水洗沉淀物直至濾液加入1%鹽酸羥胺溶液后與鄰菲羅啉溶液不顯色6,真空干燥沉淀物,置于干燥箱中。
1.3 包合物的鑒定
將β-CD與FeSO4·7H2O物理混合,取等量的混合物和包合物,分別與溴化鉀壓片,使用紅外光譜儀掃描,結(jié)果顯示混合物在1700~2000 CM-1處有吸收峰,包合物沒有吸收峰,說明制備過程中不是物理混合,而是化學(xué)鍵合。
1.4 包合率的測定
找出最大吸收波長:制備20 μg/ml亞鐵離子溶液,先加入1%鹽酸羥胺溶液,再加入鄰菲羅啉溶液,用紫外風(fēng)光光度儀進行全波長掃描,發(fā)現(xiàn)在510 nm處有最大吸收。
作標準曲線:制備不同濃度梯度的Fe+2,先加入1%鹽酸羥胺溶液,再加入鄰菲羅啉溶液,在510 nm處測吸光度,作Fe+2濃度與其吸光度的標準曲線,V=55.4A-0.266
(V為Fe+2濃度,A為吸光度)。
測包合率:取一定質(zhì)量產(chǎn)物,定溶于50 mlPH為1的強酸溶液中,靜置數(shù)分鐘后超聲1 min,再稀釋成40 μg/50 ml的待測液,加入PH為4.6的磷酸鹽緩沖液,1%鹽酸羥胺溶液,再加入鄰菲羅啉溶液,在510 nm處測吸光度,將吸光度代入標準曲線中,算出釋放的Fe+2的質(zhì)量,從而算出包合率。
1.5 制備工藝對包合率的影響
溶劑配比(C2H5OH:H2O,n/n)為1:1,50℃,攪拌速度300 r/min,反應(yīng)2小時,(β-CD:FeSO4·7H2O,n/n)為1:1,1:2,1:3,1:4,1:5時,包合率分別為0.623,0.879,1.112,1.115,1.119。投料比(β-CD:FeSO4·7H2O,n/n)為1:1,50℃,300 r/min,反應(yīng)2小時,(C2H5OH:H2O,n/n)為3:1,2:1,1:1,1:2,1:3時,包合率分別為0.746,0.802,0.623,0.516,0.446。投料比(β-CD:FeSO4·7H2O,n/n)為1:1,溶劑配比(C2H5OH:H2O,n/n)為1:1,50℃,
300 r/min,反應(yīng)時間為2 t,3 t,4 t,5 t,6 t時,包合率分別為0.623,0.690,0.753,0.750,0.749。投料比(β-CD:FeSO4·7H2O,n/n)為1:1,溶劑配比(C2H5OH:H2O,n/n)為1:1,300 r/min,反應(yīng)2小時,反應(yīng)溫度為40 min,45 min,50 min,55 min,60 min,65 min時,包合率分別為0.410,0.519,0.623,0.782,0.939,0.738。投料比(β-CD:FeSO4·7H2O,n/n)為1:1,溶劑配比(C2H5OH:H2O,n/n)為1:1,50℃反應(yīng)2小時,攪拌速度為150 r/min,200 r/min,250 r/min,300 r/min,350 r/min時,包合率分別為0.598,0.657,0.721,0.623,0.621。
2 結(jié)論與分析
經(jīng)過以上21組實驗條件的摸索,初探得投料比(β-CD:FeSO4·7H2O,n/n)為1:3,溶劑配比(C2H5OH:H2O,n/n)為2:1,攪拌速度為250 r/min時,60℃條件下反應(yīng)4 t,β-CD包合Fe2+能得到最大包合率。
隨著投料比(β-CD:FeSO4·7H2O,n/n)增加,包合率整體增加,但是,當投料比為1:3時,繼續(xù)增加FeSO4·7H2O,包合率增加不明顯,排除誤差,可以認定為包合率基本不變,因此選取最佳投料比為1:3,當投料比小于1:3時,包合率均大于1,分析可能有少部分β-CD空腔中包合了多個Fe2+。隨著溶劑配比(C2H5OH:H2O,n/n)增加,包合率先增后減,在配比為2:1時,達到峰值,說明在溶劑配比為2:1時,最利于Fe2+進入β-CD空腔。隨著反應(yīng)時間增加,包合率增加到一定程度就不再增加,說明反應(yīng)時間并非越長越好,當反應(yīng)時間足夠后再增加,并不能讓更多的Fe2+進入β-CD空腔。隨著反應(yīng)溫度的增加,包合率先增后減,說明反應(yīng)溫度并非越高越好,溫度太高,離子運動過快,F(xiàn)e2+反而難以進入空腔。隨著反應(yīng)過程中攪拌速度增快,包合率增加到一定程度不再增加,攪拌可以加快分子、離子運動,但是分子、離子運動速度達到一定程度后繼續(xù)增加運動速度,不能進一步促進Fe2+進入β-CD
空腔。
制備β-CD-Fe+2包合物,本方案重復(fù)性好,穩(wěn)定可行,由于分組例數(shù)有限,探索最佳制備方法以及最佳合成條件有待進一步研究。
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本文編輯:吳宏艷