馮艷男，孫德君，秦立鑫，胡瑞鴻，叢秋實(shí)

（ 哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司，哈爾濱 150069）

禽流感病毒屬甲型流感病毒，在禽類中高致病性的屬于H5、H7亞型。禽流感H5屬于A類傳染病，給我國養(yǎng)禽業(yè)帶來嚴(yán)重威脅[1-2]。水禽感染后發(fā)病率和死亡率較高。隨著 H5N1Re-8株生產(chǎn)，重組禽流感病毒 H5亞型三價(jià)滅活疫苗（H5N1，Re-6株+Re-7株+Re-8株）在水禽上的應(yīng)用逐漸增加[3-6]。本試驗(yàn)通過重組禽流感病毒 H5亞型三價(jià)滅活疫苗（Re-6株+Re-7株+Re-8株）免疫SPF鴨， 觀察臨床效果和抗體檢測結(jié)果，以此判斷該重組禽流感病毒 H5亞型三價(jià)滅活疫苗對免疫SPF鴨的保護(hù)情況，為該疫苗在水禽上應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

1.2 疫苗

試驗(yàn)用疫苗為市售的某廠家生產(chǎn)的重組禽流感病毒H5亞型三價(jià)滅活疫苗（Re-6株+Re-7株+Re-8株）產(chǎn)品批號(hào)為201718，生產(chǎn)日期為20170209。

1.3 檢驗(yàn)用血清

檢測用Re-6株、Re-7株和Re-8株標(biāo)準(zhǔn)陽性血清、抗原購買于維科生物技術(shù)有限公司。

1.4 試驗(yàn)方法

選用14日齡SPF鴨20只分2組，每組10只，其中第1組10只腿部肌肉注射重組禽流感病毒H5亞型三價(jià)滅活疫苗（Re-6株+Re-7株+Re-8株）0.5 mL·只-1，第2組對照組10只不免疫。兩組SPF鴨在不同隔離器中飼養(yǎng)。每7 d采血一次；60 d后，每14 d采血一次，直至120 d。采血后分離的血清置于-20℃保存?zhèn)溆?。按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄中的紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)法進(jìn)行HI抗體效價(jià)測定，并計(jì)算HI抗體效價(jià)平均值。

SPF鴨，購于維科生物技術(shù)有限公司，隔離器飼養(yǎng)。

2 試驗(yàn)結(jié)果

重組禽流感病毒H5亞型三價(jià)滅活疫苗（Re-6株+Re-7株+Re-8株）免疫SPF鴨，血清中HI抗體消長規(guī)律結(jié)果見附表、附圖。

附表 SPF鴨免疫禽流感病毒H5亞型三價(jià)滅活疫苗（Re-6株+Re-7株+Re-8株）抗體效價(jià)平均值log 2

附圖 SPF鴨免疫禽流感病毒H5亞型三價(jià)滅活疫苗(Re-6株+Re-7株+Re-8株)抗體效價(jià)平均值

根據(jù)檢測數(shù)據(jù)結(jié)果可知，此疫苗1次免疫SPF鴨后第7天開始產(chǎn)生抗體，第14天抗體效價(jià)平均值約達(dá)到6.0 log2，第35天達(dá)到抗體高峰值，此后逐漸下降，第120天抗體效價(jià)平均值下降到約7.0 log2。根據(jù)以上數(shù)據(jù)可知，一次免疫保護(hù)期為約120 d。

3 討論

SPF鴨采用重組禽流感病毒H5亞型三價(jià)滅活疫苗（Re-6株+Re-7株+Re-8株）免疫SPF鴨后，抗體效價(jià)平均值在同一時(shí)間點(diǎn)上Re-6株、Re-7株和Re-8株抗體水平稍有差異，免疫后7～35 d時(shí)抗體效價(jià)平均值差異較小，35d后Re-8株的抗體效價(jià)平均值要比Re-6株、Re-7株的抗體效價(jià)平均值要高一些。試驗(yàn)結(jié)果表明，1次免疫禽流感病毒H5亞型三價(jià)滅活疫苗（Re-6株+Re-7株+Re-8株）對鴨具有良好的免疫原性，1次免疫可以提供4個(gè)月的保護(hù)。但此試驗(yàn)數(shù)據(jù)是對SPF鴨使用此疫苗的數(shù)據(jù)分析結(jié)果，在現(xiàn)地應(yīng)根據(jù)不同品系的鴨及抗體消長情況制定合理的免疫程序。

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