辣木葉揮發(fā)性成分的GC—MS研究

袁明焱　劉守金　楊柳

摘要[目的]探究辣木葉揮發(fā)性成分的化學(xué)構(gòu)成。[方法]采用丙酮浸泡，正己烷萃取法提取辣木葉揮發(fā)性成分，利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）方法分析其成分構(gòu)成，采用峰面積歸一化法計(jì)算各成分的相對(duì)含量。[結(jié)果]辣木葉中共鑒定出43種化合物，主要成分為新植二烯（3.752%）、植醇（9.309%）、9Z，12Z，15Z-三烯-1-十八醇（4.198%）、二十五烷（1.308%）、二十七烷（2.098%）、二十二碳烯酰胺（2.360%）、二十九烷（2.352%）、維生素E（8.495%）、菜油甾醇（3.368%）、豆甾醇（1.104%）、β-谷甾醇（14.239%）、β-香樹素（3.325%）、24-亞丙基膽甾-5-烯-3-醇（7.170%）、4，8-二甲氧基-3-甲基-2（1H）-奎諾酮（1.586%）等。[結(jié)論]辣木葉揮發(fā)性成分主要包括甾體、醇、烴、雜環(huán)、胺、酯、醛、脂肪酸與酮，其中含量最高的為甾體類。

關(guān)鍵詞辣木葉；揮發(fā)性成分；GC-MS

中圖分類號(hào)S759.82文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)0517-6611（2018）08-0174-03

Study on Volatile Components of Moringa oleifera Leaf by GCMS

YUAN Mingyan1，2， LIU Shoujin1， YANG Liu2 et al

（1.College of Pharmacy， Anhui University of Chinese Medicine， Hefei，Anhui 230031；2.State Key Laboratory of Phytochemistry and Plant Resources in West China， Kunming Institute of Botany， Chinese Academy of Sciences， Kunming，Yunnan 650201）

Abstract[Objective] The research aimed to explore the chemical composition of volatile components of Moringa oleifera leaf. [Method] The volatile components of Moringa oleifera leaf were obtained by immersing in acetone and then extracting with nhexane， the composition of the constituents was analyzed by gas chromatographymass spectrometry （GCMS） method and the relative content of each component was calculated by the normalization of peak area.[Result] 43 compounds were identified， the major components were neophytadiene （3.752%）， phytol （9.309%）， 9Z，12Z，15ZOctadecaterien1ol （4.198%）， pentacosane （1.308%）， heptacosane （2.098%）， dicarboxamide（2.360%），nonacosane（2.352%），VE （8.495%）， campesterol （3.368%）， stigmasterol （1.104%）， βsitosterol （14.239%）， βAmyrin （3.325%）， 24 propyl cholester5ene 3alcohol （7.170%） and 4，8Dimethoxy3methyl2（1H）quinolone （1.586%）. [Conclusion] The volatile components of Moringa oleifera leaf mainly include steroids， alcohols， hydrocarbons， heterocycles， amines， esters， aldehydes， fatty acids and ketones etc. Among them， the highest content is steroids.

Key wordsMoringa oleifera leaf；Volatile components；GCMS

基金項(xiàng)目大型企業(yè)委托項(xiàng)目（Y65J8232C1）。

作者簡介袁明焱（1992—），女，四川瀘州人，碩士研究生，研究方向：藥用植物資源化學(xué)。*通訊作者，副研究員，博士，碩士生導(dǎo)師，從事藥用植物資源化學(xué)研究。

收稿日期2017-11-29

辣木（Moringa oleifera Lam.）又名鼓槌樹、山葵樹、象腿樹，是白花菜目辣木屬辣木科多年生熱帶落葉喬木，全球約14個(gè)品種[1]。辣木樹皮軟木質(zhì)，枝有明顯的葉痕及皮孔，小枝有短柔毛，根有辛辣味?；ㄆ谌?，果期6—12月。辣木原產(chǎn)印度，常種于樹旁園地，也有野生于雜林[2]。辣木被譽(yù)為“地球上營養(yǎng)最密集的植物”，其中富含蛋白質(zhì)、礦物元素、維生素、微量元素和氨基酸[3-5]，是一種理想的素食。辣木的化學(xué)成分包括皂苷、多糖、揮發(fā)油、黃酮、多酚類化合物與少量的生物堿、蒽醌、香豆素與三萜化合物等[6-11]。辣木具有降低血壓、調(diào)節(jié)血脂、保護(hù)肝損傷、抗癌、抑菌消炎等藥理活性[12-14]。辣木作為傳統(tǒng)藥物，可用于治療蛀牙、梅毒、腹瀉、癲癇、通便、發(fā)燒與前列腺癌等疾病[15-16]。辣木在醫(yī)藥品中有著廣泛的應(yīng)用，如辣木排毒養(yǎng)顏膠囊、辣木胃泰顆粒、辣木膠囊、辣木眼膏等。辣木還可作為食品保健品，當(dāng)前已開發(fā)出了多種辣木食品保健品，如辣木面包、辣木面條、辣木酸奶、辣木營養(yǎng)餅干、辣木保健年糕和辣木營養(yǎng)飲料等。辣木除了可以作為食品、藥品、保健品外，在日化用品領(lǐng)域也有廣泛應(yīng)用，如辣木面膜、辣木防曬霜、辣木潔面膏、辣木洗發(fā)水、辣木手工皂和辣木牙膏等。此外，辣木還可作為天然凈水劑和畜禽飼料等[17-21]。辣木最早于1910年在臺(tái)灣地區(qū)引進(jìn)并栽培種植，到20世紀(jì)60年代，云南省開始系統(tǒng)性研究辣木。我國已引進(jìn)栽培了印度傳統(tǒng)辣木、印度改良辣木和非洲辣木，主要分布于臺(tái)灣、海南、廣東、廣西、貴州、四川和云南等地。目前，云南辣木種植面積約0.13萬hm2，約占全國種植面積的70%[22]?；诖?，筆者選取了云南德宏的印度傳統(tǒng)辣木葉，對(duì)其揮發(fā)性成分進(jìn)行研究，以期為辣木揮發(fā)性成分的進(jìn)一步開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1藥材

辣木于2015年采自云南德宏種植基地，經(jīng)劉守金教授鑒定為印度傳統(tǒng)辣木（Moringa oleifera Lam.）。

1.2儀器與試劑

HP6890GC/5973MS氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國Agilent Technologies 公司）；Heidolph Hei-VAP旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（德國 Heidolph Instuments 公司 ）；SHZ-D（III）循環(huán)水式真空泵（鞏義市英峪予華儀器廠）；丙酮（分析純，天津市大茂化學(xué)試劑廠）；正己烷（分析純，天津市大茂化學(xué)試劑廠）。

1.3試驗(yàn)方法

1.3.1供試品溶液的制備。

新鮮辣木葉（500 g）粉碎，分別用75%與85%的丙酮各浸提1次，合并提取液，過濾后加入正己烷萃取，減壓蒸餾濃縮得供試品浸膏4.4 g，得率0.88%。

1.3.2揮發(fā)性成分的GC-MS分析。

1.3.2.1

色譜條件。HP-5MS石英毛細(xì)管柱（30 mm×0.25 mm×0.25 μm）；柱溫：起始溫度80 ℃，程序升溫5 ℃/min至280 ℃，保持30 min；柱流量為1.0 mL/min；進(jìn)樣口溫度250 ℃；柱前壓100 kPa；進(jìn)樣量2.0 μL；分流比10∶1；載氣為高純氦氣。

1.3.2.2質(zhì)譜條件。電離方式EI；電子能量70 eV；傳輸線溫度250 ℃；離子源溫度230 ℃；四極桿溫度150 ℃；質(zhì)量范圍35～500 eV。

1.4數(shù)據(jù)分析

1.4.1定性分析?；衔锝?jīng)計(jì)算機(jī)檢索與wiley7n.1標(biāo)準(zhǔn)普庫相匹配。選擇較高匹配度的檢索結(jié)果，并結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道的已知化合物確認(rèn)檢測成分。

1.4.2定量分析。利用峰面積歸一化法，通過GC-MS分析結(jié)果得出不同化學(xué)成分的相對(duì)百分含量。

2結(jié)果與分析

辣木葉揮發(fā)性成分GC-MS分析總離子流圖見圖1。對(duì)總離子流圖中各峰的一級(jí)質(zhì)譜經(jīng)計(jì)算機(jī)檢索以及與wiley7n.1標(biāo)準(zhǔn)普庫相匹配，并與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)對(duì)照進(jìn)行鑒定；利用峰面積歸一化法得出不同化學(xué)成分的相對(duì)百分含量，結(jié)果見表1。由表1 可知，辣木葉中主要揮發(fā)性成分結(jié)構(gòu)類型為甾體類（6個(gè)），其次為醇類（4個(gè)）、烴類（12個(gè)）、雜環(huán)類（6個(gè)）、胺類（1個(gè)）、酯類（8個(gè)）、醛類（1個(gè)）、脂肪酸（1個(gè)）、酮類（1個(gè)）與芳香類（1個(gè)）。甾體類化合物中含量由高到低依次為β-谷甾醇（14.239%）、維生素E（8.459%）、24-亞丙基膽甾-5-烯-3-醇（7.170%）、菜油甾醇（3.368%）、β-香樹素（3.325%）、豆甾醇（1.104%），共占總量的37.665%。醇類化合物中含量由高到低依次為植醇（9.309%）、9Z，12Z，15Z-三烯-1-十八醇（4.198%）、3，7，11，15-四甲基-2Z-烯-1-十六醇（1.394%）、3，7，11，15-四甲基-2E-烯-1-十六醇（0.953%），共占總量的15.854%。烴類化合物中共占總量的14.234%，雜環(huán)類化合物中共占總量的3.4%，胺類化合物中共占總量的2.306%，酯類化合物中共占總量的2.11%，醛類化合物中共占總量的2.005%，脂肪酸化合物中共占總量的0.775%，酮類化合物中共占總量的0.475%，芳香類化合物中共占總量的0.256%。其中，4，8-二甲氧基-3-甲基-2（1H）-奎諾酮與Hydroxy-6-cytosine在辣木化學(xué)成分中未見報(bào)道。

3討論

該研究采用丙酮浸泡、正己烷萃取方法提取辣木葉揮發(fā)性成分，利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）方法分析其成分構(gòu)成，共鑒定了43個(gè)化學(xué)成分，主要包括醇、烷烴、烯烴、酯、酸、胺、酮、醛與雜環(huán)等。陳榮榮等[23]采用HD/GC-MS法對(duì)辣木樹不同部位揮發(fā)性香氣成分進(jìn)行了分析，在辣木葉中共鑒定了43種成分，主成分為苯乙醛、苯甲醛、棕櫚酸甲酯和棕櫚酸等。但不論是在化合物類型上還是含量上均與該研究結(jié)果存在較大差異。由于該研究公司提供，并未指出所用辣木材料采自何地，屬于什么品種，因此可能因?yàn)槠贩N或者干燥程度以及提取方法不同導(dǎo)致的。蔡彩虹等[24]采用水蒸氣蒸餾法提取辣木葉揮發(fā)性成分并用GC-MS對(duì)其進(jìn)行成分分析，從中鑒定了33個(gè)化合物，在成分組成上與該研究差異較小，但在含量上存在明顯差異，這說明水蒸餾法與丙酮浸泡、正己烷萃取法這2種不同的方法可能會(huì)影響辣木葉中不同成分的含量，但對(duì)成分組成影響不大。植物揮發(fā)性成分是一個(gè)十分復(fù)雜的體系，不同的提取方法、干燥程度、產(chǎn)地可能會(huì)導(dǎo)致分析結(jié)果的差異，單一的提取方法并不能鑒定出辣木葉中所有揮發(fā)性成分，因此可采用多種方法對(duì)辣木進(jìn)行進(jìn)一步的綜合研究。

植醇，又稱為葉綠醇，廣泛存在于植物中，它是葉綠素的組成成分之一，經(jīng)葉綠素水解可得。雙鍵E構(gòu)型與Z構(gòu)型2種異構(gòu)體均有天然存在。植醇可用于制備、合成維生素E和維生素K1。維生素E是一種脂溶性維生素，其水解產(chǎn)物為生育酚，是最主要的抗氧化劑之一。這2種化合物在此次辣木葉揮發(fā)性成分研究中含量較高，闡明了辣木葉在抗氧化、抗癌與降低血清膽固醇等方面的利用。此外，新鮮辣木葉用丙酮迅速殺酶，能夠更真實(shí)反映辣木葉的化學(xué)物質(zhì)構(gòu)成；浸漬液回收溶劑后用正己烷溶解，能夠闡明辣木葉的原本風(fēng)味，為后續(xù)辣木相關(guān)產(chǎn)品開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

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