趙玲敏　左妍斐　黃力行

摘要水產(chǎn)健康養(yǎng)殖理論近年來(lái)被提出、認(rèn)可、發(fā)展、完善和推廣應(yīng)用。水產(chǎn)健康養(yǎng)殖中，健康管理和病害控制技術(shù)是病害綜合防治的關(guān)鍵技術(shù)。對(duì)國(guó)內(nèi)外如何從采取合理的水質(zhì)管理和調(diào)控技術(shù)來(lái)進(jìn)行健康管理和如何采用病害的生態(tài)防治、藥物防治和免疫防治進(jìn)行病害的控制做一綜述，為水產(chǎn)動(dòng)物病害的綜合防治提供思路。

關(guān)鍵詞水產(chǎn)健康養(yǎng)殖；健康管理；病害控制技術(shù)；生態(tài)防治； 藥物防治； 免疫防治

中圖分類號(hào)S942文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼

A文章編號(hào)0517-6611（2018）28-0018-04

Research Progress on Control of Disease in Aquaculture

ZHAO Lingmin1，2，ZUO Yanfei1，2，HUANG Lixing1，2（1.Fisheries College，Jimei University，Xiamen，F(xiàn)ujian 361021；2.Key Laboratory of Healthy Mariculture for the East China Sea，Ministry of Agriculture，Xiamen，F(xiàn)ujian 301021）

AbstractIn recent years，aquaculture theory has been put forward，recognized，developed，perfected and popularized. Aquatic health management and disease control technology are the key technologies for comprehensive prevention and control of disease. How to adopt reasonable water quality management and control technology for health management and how to use ecological prevention and control of disease，drug control and immunization against disease control was introduced in this paper，which provided a way in the research of aquatic disease.

Key wordsHealthy cultivation of aquaculture；Health management；Technology of disease control；Ecological prevention；Medication prevention；Immunological prevention

在過(guò)去的30年里，水產(chǎn)疾病發(fā)病的速度增快和出現(xiàn)一些未知的疾病對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成危害。為了防止這些傳染病的傳播，并盡量減少它們對(duì)漁業(yè)保護(hù)計(jì)劃的影響，制定控制策略成為當(dāng)務(wù)之急。1972年，水產(chǎn)品健康養(yǎng)殖與生態(tài)養(yǎng)殖的觀點(diǎn)在聯(lián)合國(guó)有關(guān)會(huì)議上提出，是水產(chǎn)健康養(yǎng)殖理念的產(chǎn)生的最初起源。20世紀(jì)80年代的日本，由于飼養(yǎng)環(huán)境的惡化和水產(chǎn)養(yǎng)殖疾病頻發(fā)，水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè)開始重視和加強(qiáng)健康養(yǎng)殖問題，尤其是水產(chǎn)養(yǎng)殖雜質(zhì)處理方法，水產(chǎn)養(yǎng)殖容量及其對(duì)環(huán)境的影響。90年代早期，“主要的水產(chǎn)養(yǎng)殖方式對(duì)環(huán)境的影響”的研究議題被亞太水產(chǎn)養(yǎng)殖網(wǎng)組織（NACA）提出，促進(jìn)了亞太地區(qū)水產(chǎn)健康養(yǎng)殖理論的推廣。中國(guó)是在90年代中期由于對(duì)蝦病毒性疾病和捕蝦產(chǎn)業(yè)的發(fā)展受到了沉重的打擊，開始探索水產(chǎn)健康養(yǎng)殖理論。近年來(lái)，水產(chǎn)養(yǎng)殖健康養(yǎng)殖的概念得到了充分的認(rèn)可。由于水產(chǎn)養(yǎng)殖規(guī)模和容量擴(kuò)張，病害頻發(fā)，養(yǎng)殖水質(zhì)惡化，研究健康養(yǎng)殖技術(shù)，并應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)，來(lái)提高產(chǎn)品質(zhì)量和保護(hù)水域環(huán)境成為大勢(shì)所趨[1]。

全國(guó)科學(xué)技術(shù)名詞審定委員會(huì)審定公布的水產(chǎn)健康養(yǎng)殖的概念：從選擇親本、育苗，水質(zhì)管理、飼料營(yíng)養(yǎng)等方面均提出規(guī)范的操作以防水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物疾病的暴發(fā)。具體就是在水產(chǎn)品種的選育上要選育優(yōu)質(zhì)品種，對(duì)苗種進(jìn)行疫病的檢疫，對(duì)資源進(jìn)行循環(huán)利用，對(duì)病害進(jìn)行綜合防治，最大限度地降低對(duì)環(huán)境的污染達(dá)到可持續(xù)性發(fā)展[2]。

水產(chǎn)養(yǎng)殖許多疾病的暴發(fā)與養(yǎng)殖的條件密切相關(guān)，如水質(zhì)差，過(guò)度擁擠或營(yíng)養(yǎng)不足。魚類疾病的暴發(fā)通常是復(fù)雜的，涉及到傳染性和非傳染性的過(guò)程。傳染病是由寄生蟲、細(xì)菌、病毒或真菌引起，這些通常需要某種類型的藥物來(lái)幫助魚恢復(fù)。非傳染性疾病大致分為環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)或遺傳，這些問題經(jīng)常通過(guò)加強(qiáng)管理實(shí)踐來(lái)糾正。因此，在水產(chǎn)健康養(yǎng)殖方面，健康管理和病害控制是綜合防治疾病的關(guān)鍵。

1健康管理

水產(chǎn)養(yǎng)殖健康管理是預(yù)防魚類疾病的實(shí)踐管理。一旦水產(chǎn)動(dòng)物發(fā)病，治療用藥的難度很大。水產(chǎn)動(dòng)物經(jīng)常處于在機(jī)會(huì)性病原體的水體中，像細(xì)菌、真菌和寄生蟲，這些都是水體中經(jīng)常存在。當(dāng)水質(zhì)惡化，營(yíng)養(yǎng)不良，或免疫系統(tǒng)的抑制，使這些機(jī)會(huì)性的病原體引起疾病。健康管理始于預(yù)防疾病而不是治療。通過(guò)良好的水質(zhì)管理、營(yíng)養(yǎng)和衛(wèi)生設(shè)施來(lái)預(yù)防疾病。沒有這個(gè)基礎(chǔ)，就不可能預(yù)防機(jī)會(huì)性疾病的暴發(fā)。

目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)健康管理的研究主要集中在環(huán)境影響評(píng)價(jià)和水產(chǎn)養(yǎng)殖體系中水質(zhì)控制技術(shù)方面。

20世紀(jì)80～90年代，我國(guó)的大型綜合水產(chǎn)養(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)環(huán)境不夠友好，因?yàn)樗鼈兇蠖嗤耆蕾囉诖笠?guī)模的養(yǎng)殖，在廢棄物處理上不夠完善，導(dǎo)致水體中有機(jī)物含量增多，造成水體的富營(yíng)養(yǎng)化。在過(guò)去30年中，池塘養(yǎng)殖的迅速擴(kuò)增已經(jīng)在我國(guó)導(dǎo)致水質(zhì)的退化。自2006年以來(lái)，中國(guó)農(nóng)業(yè)部啟動(dòng)了一項(xiàng)全國(guó)性的行動(dòng)，促進(jìn)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的行動(dòng)計(jì)劃，提高效率和減少不良環(huán)境影響的池塘養(yǎng)殖通過(guò)改進(jìn)土地利用和池塘的水再循環(huán)減少?gòu)U水污染[3]。越南在湄公河三角洲發(fā)展養(yǎng)殖巴丁魚（Pangasianodon hypophthalmus）是對(duì)水質(zhì)影響較小的一個(gè)成功的例子，據(jù)報(bào)道，巴丁魚的生產(chǎn)和加工過(guò)程中所產(chǎn)生的垃圾排放量不到總懸浮固體和氮和磷負(fù)荷的1%，對(duì)主要河流的環(huán)境幾乎沒有任何負(fù)面影響[4]。

在水產(chǎn)養(yǎng)殖中，環(huán)境影響是最重要的。環(huán)境問題包括低溶解氧、高氨、高亞硝酸鹽或天然或人為毒素在水生環(huán)境中。適當(dāng)?shù)乃|(zhì)管理技術(shù)將使生產(chǎn)者能夠預(yù)防大多數(shù)環(huán)境疾病。用循環(huán)水產(chǎn)養(yǎng)殖系統(tǒng)（RAS）對(duì)水處理，去除有毒魚類的代謝廢物和水系統(tǒng)中重用循環(huán)使用，已經(jīng)引起了越來(lái)越多的科學(xué)家的興趣，自20世紀(jì)70年代中期以來(lái)，最著名的系統(tǒng)已經(jīng)在維爾京群島大學(xué)（UVI）進(jìn)行試點(diǎn)?；赨VI設(shè)計(jì)的系統(tǒng)已經(jīng)在許多國(guó)家的溫帶和熱帶地區(qū)建造并表現(xiàn)良好。循環(huán)水（Aquaponic）系統(tǒng)具有較高的資本和運(yùn)營(yíng)成本，高的能源投入，每單位生產(chǎn)的溫室氣體排放量高于池塘和網(wǎng)箱養(yǎng)殖。通過(guò)在水產(chǎn)養(yǎng)殖系統(tǒng)生產(chǎn)水培蔬菜可以有效地、更經(jīng)濟(jì)地生產(chǎn)魚類和蔬菜，降低成本[5]。

近年來(lái)，我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)也開始倡導(dǎo)健康養(yǎng)殖管理的實(shí)施，并開發(fā)了相應(yīng)的技術(shù)和措施。例如，在水產(chǎn)養(yǎng)殖體系內(nèi)的質(zhì)量控制和疾病控制等方面，中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心已研究形成一套較為成熟的理論和技術(shù)。在不同養(yǎng)殖方式對(duì)水域生態(tài)的影響及研究如何進(jìn)行可持續(xù)發(fā)展，我國(guó)也一直在進(jìn)行深入的調(diào)查和考證。但總的來(lái)說(shuō)，我國(guó)的養(yǎng)殖健康管理理念還相對(duì)落后，表現(xiàn)在嚴(yán)重的水體自身污染和病害疾病頻發(fā)。在育種生物學(xué)，生態(tài)學(xué)理論研究基礎(chǔ)薄弱，對(duì)生產(chǎn)環(huán)境的治理手段落后，一味追求高的產(chǎn)量。因此，推廣和普及健康養(yǎng)殖理念的形勢(shì)十分緊迫。

2病害控制

水產(chǎn)健康養(yǎng)殖中，病害控制技術(shù)主要包括病害的生態(tài)防治、藥物防治和免疫防治。

2.1生態(tài)防治

關(guān)于病害的生態(tài)防治，許多由病原微生物引起的水產(chǎn)養(yǎng)殖疾病，不僅與引起疾病的微生物的存在有關(guān)，而且和養(yǎng)殖的水生生物和微生物的相互作用和影響密切相關(guān)。換句話說(shuō)，微生物群落的組成直接決定了病原體是否會(huì)最終導(dǎo)致疾病。

通過(guò)對(duì)水體物理和化學(xué)因素的分析和對(duì)微生物群落關(guān)系組成的探求，發(fā)現(xiàn)可以通過(guò)維持水體的生態(tài)平衡來(lái)消除某些疾病發(fā)生。在這方面國(guó)內(nèi)外都進(jìn)行了初步研究，取得了重大進(jìn)展。在微生物生態(tài)養(yǎng)殖系統(tǒng)方面，澳大利亞著名微生物學(xué)家莫里亞蒂博士有著深入的研究，認(rèn)為預(yù)防和控制水產(chǎn)養(yǎng)殖疾病的發(fā)生可以采用微生物生態(tài)調(diào)控技術(shù)，而且對(duì)于水產(chǎn)養(yǎng)殖的可持續(xù)發(fā)展意義重大[6]。在我國(guó)對(duì)養(yǎng)殖水體生態(tài)系統(tǒng)研究也在進(jìn)行，發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖水體底質(zhì)的變化是一個(gè)逐漸進(jìn)展的過(guò)程，和其中的物理化學(xué)因素及底棲生物種群有著密切的關(guān)系，它們之間的相互關(guān)系會(huì)影響水質(zhì)的改變，這種變化可為水產(chǎn)疾病的預(yù)測(cè)提供依據(jù)。嘗試采用農(nóng)業(yè)土壤改良技術(shù)，修復(fù)在水產(chǎn)養(yǎng)殖過(guò)程中微生物種群的多樣性的喪失，培育水體中有利于生態(tài)的藻類的生長(zhǎng)，使整體養(yǎng)殖生態(tài)處于可持續(xù)發(fā)展的狀態(tài)。目前改良環(huán)境的方法有采用生物技術(shù)和物理化學(xué)技術(shù)。生物技術(shù)改良環(huán)境的關(guān)鍵點(diǎn)是微生態(tài)技術(shù)，主要是在養(yǎng)殖環(huán)境中添加能夠降解養(yǎng)殖中廢物的微生物。這類微生物可以分泌高活性的消化酶，常見的可以調(diào)節(jié)水質(zhì)的細(xì)菌有光合細(xì)菌、芽胞桿菌、放線菌、蛭弧菌、硝化和反硝化細(xì)菌等[7]。對(duì)這類微生物的菌株的篩選及改良的市場(chǎng)也非常巨大，產(chǎn)品的類型和劑型也不斷進(jìn)行升級(jí)。在養(yǎng)殖水體中培育水生植物也是常用的凈化水體的生物方法。養(yǎng)殖水體物理改良的方法有曝氣、沉淀、過(guò)濾、吸附、泡沫分離和磁分離及臭氧和紫外線殺菌消毒等方法?；瘜W(xué)改良的方法主要是用氧化劑、還原劑、絮凝劑、消毒劑等化學(xué)試劑和水體中污染物產(chǎn)生反應(yīng)或形成懸浮顆粒達(dá)到去除的目的。但目前針對(duì)養(yǎng)殖水體底基質(zhì)的修復(fù)改良的方法措施還比較少，一般是用石灰消毒和清塘的方法。

2.2藥物防治

藥物防治必須要對(duì)疾病的病因和致病病原進(jìn)行深入研究，疾病的早期快速診斷也為疾病的防治提供可能。國(guó)內(nèi)外也一直致力于研究水產(chǎn)疾病的快速檢測(cè)技術(shù)。

水產(chǎn)疾病的快速檢測(cè)技術(shù)常用的有DNA 、PCR 、ELISA、IFA T等技術(shù)。目前我國(guó)研制出草魚呼腸病毒、錦鯉皰疹病毒、嗜水氣單胞菌、愛德華菌、嗜水氣單胞菌等快速檢測(cè)技術(shù)和試劑盒，但由于商品化程度不高，易用性差，種類單一，技術(shù)水平還有待提高等原因使其沒有被廣泛使用[8]。

目前我國(guó)對(duì)一些常見暴發(fā)性水產(chǎn)疾病的研究還不夠深入，對(duì)引起疾病的原因、致病機(jī)理、病理過(guò)程、流行機(jī)制等都不了解，更談不上如何預(yù)防及治療，都只是根據(jù)癥狀進(jìn)行命名。因此，在我國(guó)大多數(shù)水產(chǎn)疾病的診斷沒有對(duì)致病的病原進(jìn)行檢測(cè)，而是根據(jù)癥狀和經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行判斷，容易診斷錯(cuò)誤且出現(xiàn)藥物過(guò)度使用。在這一點(diǎn)上，近期國(guó)際上出現(xiàn)了將“循證醫(yī)學(xué)”應(yīng)用于水產(chǎn)健康養(yǎng)殖的呼聲，且日益高漲[9]。循證醫(yī)學(xué)，縮寫為EBM，是英語(yǔ)Evidence-based medicine的簡(jiǎn)稱，意為基于遵守事實(shí)依據(jù)上的醫(yī)學(xué)。循證醫(yī)學(xué)與傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)不同在于不是根據(jù)傳統(tǒng)的經(jīng)驗(yàn)，而是根據(jù)大樣本的隨機(jī)對(duì)照臨床試驗(yàn)基礎(chǔ)上，對(duì)病人作出治療，制定各項(xiàng)醫(yī)療政策、指南。在人類臨床醫(yī)學(xué)等應(yīng)用上，循證醫(yī)學(xué)是準(zhǔn)確的診斷疾病，正確的使用藥物進(jìn)行預(yù)防及治療，科學(xué)的制定各項(xiàng)決策是進(jìn)行衛(wèi)生管理的基石。將循證醫(yī)學(xué)應(yīng)用于水產(chǎn)健康養(yǎng)殖是有其合理性和必要性的。首先，水產(chǎn)養(yǎng)殖涉及的物種繁多，光是魚類就超過(guò)27 000種[10]，而物種間的差異往往是非常明顯的。因此，搜集針對(duì)不同物種不同病害的科學(xué)研究證據(jù)是十分必要的。其次，用于水產(chǎn)動(dòng)物的疾病傳統(tǒng)診斷的技術(shù)主要包括：血液檢測(cè)技術(shù)、成像技術(shù)、微生物分離培養(yǎng)技術(shù)以及組織學(xué)分析技術(shù)。然而，最近的研究指出，在2006—2012年發(fā)表的66篇關(guān)于硬骨魚疾病診斷測(cè)試的SCI論文中，僅有11篇文章中所采用的方法是符合檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的[11]。血液檢測(cè)技術(shù)對(duì)魚類來(lái)說(shuō)可能是不夠靈敏和特異的，因?yàn)榄h(huán)境因素和營(yíng)養(yǎng)水平都可以對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生干擾[12]，所以，進(jìn)一步研究確證血液檢測(cè)結(jié)果與魚類疾病癥狀之間的相關(guān)性是非常重要的，切忌直接將哺乳動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)證據(jù)套用在魚類身上[13]。傳統(tǒng)的微生物分離培養(yǎng)技術(shù)在容易受到培養(yǎng)條件（溫度、鹽度、培養(yǎng)基種類）影響的同時(shí)，對(duì)分離得到的菌落進(jìn)行精確鑒定一直是一個(gè)難題，幸而近年來(lái)得益于基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)的發(fā)展，越來(lái)越多的水產(chǎn)病原被成功鑒定，利用該技術(shù)進(jìn)一步豐富水產(chǎn)病原數(shù)據(jù)庫(kù)將是未來(lái)發(fā)展的一大趨勢(shì)[14]。組織學(xué)分析技術(shù)是水產(chǎn)疾病診斷的常用技術(shù)手段，但是由于現(xiàn)有的商業(yè)化抗體往往是針對(duì)哺乳動(dòng)物的，免疫組化分析在魚類上的應(yīng)用一直受到限制，所以驗(yàn)證現(xiàn)有抗體在魚類免疫組化中的適用性具有重要意義[15]?？偠灾?，更嚴(yán)格的診斷測(cè)試技術(shù)和標(biāo)準(zhǔn)是我們迫切需要的，因此，在現(xiàn)有技術(shù)基礎(chǔ)上，進(jìn)一步完善檢測(cè)技術(shù)，并搜集檢測(cè)結(jié)果與水產(chǎn)病害相關(guān)性的科學(xué)研究證據(jù)等工作勢(shì)在必行。而這些科學(xué)研究證據(jù)的搜集過(guò)程，正是循證醫(yī)學(xué)的基礎(chǔ)與前提?？紤]到水產(chǎn)養(yǎng)殖過(guò)程中涉及到的物種、疾病、環(huán)境因素等的多樣性，要達(dá)到循證醫(yī)學(xué)的執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)并應(yīng)用于水產(chǎn)健康養(yǎng)殖，未來(lái)勢(shì)必投入大量的人力物力致力于相關(guān)科學(xué)研究證據(jù)的搜集工作[9]。

此外，在我國(guó)水產(chǎn)疾病藥物，防治所使用的藥物主要是來(lái)源于農(nóng)藥和獸用藥的各種抗生素和化學(xué)藥物，對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的藥理學(xué)和毒理學(xué)的研究缺乏，故藥物使用的方式和劑量不科學(xué)，導(dǎo)致藥物殘留和污染環(huán)境[16]。

因此，為了使藥物防治正規(guī)化，進(jìn)行漁藥代謝動(dòng)力學(xué)研究，藥物的殘留檢測(cè)技術(shù)的研發(fā)勢(shì)在必行。對(duì)藥物在水生動(dòng)物體內(nèi)如何進(jìn)行分布，代謝和排除，確定藥物的用量和給藥途徑，并進(jìn)一步研制開發(fā)新的藥物。其次要加強(qiáng)藥物在水生動(dòng)物體內(nèi)殘留的檢測(cè)，在水環(huán)境分布的檢測(cè)，既能使檢測(cè)快速有效又能降低檢測(cè)的成本為廣大養(yǎng)殖生產(chǎn)者所接受。

2.3免疫防治

免疫防治目前是水產(chǎn)動(dòng)物疾病防治的熱點(diǎn)，因其療效可靠，對(duì)水域環(huán)境的污染破壞小，在病害的防控中具有重要的地位，主要包括疫苗，免疫調(diào)節(jié)劑，以及益生菌的使用。

2.3.1疫苗。

漁用疫苗接種已成為世界范圍內(nèi)公認(rèn)的、經(jīng)證實(shí)且具有成本效益的控制水產(chǎn)養(yǎng)殖某些傳染病的方法。漁用疫苗可以顯著減少特定疾病相關(guān)的損失，從而減少抗生素的使用。而且它們是天然的生物材料，不會(huì)在產(chǎn)品或環(huán)境中留下任何殘留物，因此不會(huì)引起疾病機(jī)體的耐藥菌株，最終可以使整體養(yǎng)殖成本的降低和進(jìn)行可預(yù)測(cè)性的生產(chǎn)。在20世紀(jì)70年代的美國(guó)，基于福爾馬林滅活的浸泡漁用疫苗已經(jīng)被證明是對(duì)弧菌病有效，對(duì)鮭科魚類弧菌病作用顯著。這些疫苗的良好療效立即導(dǎo)致使用抗生素的減少。然而，一種新的細(xì)菌性疾病魚類皮膚癤瘡病 （Aeromonas沙門氏菌?。┏霈F(xiàn)了，由于浸泡式疫苗對(duì)這種病原體無(wú)效，在20世紀(jì)90年代初開發(fā)了含有佐劑的注射疫苗。經(jīng)過(guò)幾年的不同疫苗佐劑和一系列不同抗原組合的測(cè)試后，很快就發(fā)現(xiàn)，一種油佐劑疫苗功效優(yōu)秀，導(dǎo)致廣泛使用含佐劑的疫苗，減少抗生素的使用，同時(shí)三倍增加魚產(chǎn)量。1995年引入重組病毒疫苗對(duì)鮭魚進(jìn)行疫苗接種[17]。

我國(guó)從1960年左右就開始進(jìn)行漁用疫苗的研究，80年代研制的“草魚出血病細(xì)胞滅活疫苗”是最早的漁類疫苗。在此基礎(chǔ)上，90年代研制出“草魚出血病凍干細(xì)胞弱毒疫苗”是一種弱毒疫苗，免疫的效果大大提高，且安全可靠易于保存和運(yùn)輸。近年來(lái)又開發(fā)出針對(duì)草魚腸炎、爛鰓、赤皮的多聯(lián)疫苗。目前我國(guó)各大水產(chǎn)研究所致力于水產(chǎn)疫苗的市場(chǎng)化和產(chǎn)業(yè)化發(fā)展，將疫苗技術(shù)的研發(fā)和市場(chǎng)推廣高度結(jié)合。對(duì)于疫苗研制流程也開始完善，從制備攻毒模型，然后選擇疫苗的種類，并通過(guò)添加佐劑、免疫增強(qiáng)劑的措施增強(qiáng)疫苗的效力，通過(guò)一系列免疫效果來(lái)評(píng)價(jià)疫苗的安全性和效力，再在此基礎(chǔ)上進(jìn)行臨床試驗(yàn)來(lái)篩選有效疫苗。并通過(guò)分析不同實(shí)驗(yàn)感染攻毒模型，取樣方式及部位，樣本的采集及分析來(lái)建立疫苗安全評(píng)價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)。

隨著生物技術(shù)的不斷進(jìn)步，商業(yè)化的漁用疫苗在北歐、智利、挪威及美國(guó)幾個(gè)地區(qū)廣泛推廣。目前，接種疫苗是大多數(shù)北歐和北美的鮭魚養(yǎng)殖場(chǎng)的一個(gè)部分，他們抗生素的使用非常有限。20世紀(jì)90年代早期，大多數(shù)魚類疫苗都是由當(dāng)?shù)匦」鹃_發(fā)和商業(yè)化的。迄今為止，已有5家跨國(guó)動(dòng)物保健公司收購(gòu)或成立了合資公司，這些公司與專門從事水產(chǎn)養(yǎng)殖疫苗領(lǐng)域的較小公司合作。目前主要的魚類疫苗生產(chǎn)商是Intervet International（荷蘭），Novartis Animal Health（瑞士），Schering-Plough Animal Health （USA）， Pharmaq（挪威）和Bayer Animal Health （Bayotek）/Microtek，Inc.（德國(guó)/加拿大）。目前，這些公司的主要商業(yè)市場(chǎng)是北歐、智利、加拿大和美國(guó)的鮭魚和鱒魚產(chǎn)業(yè)。在日本使用的疫苗主要是由日本公司開發(fā)和分發(fā)的。商業(yè)疫苗也可于美國(guó)的鯰魚產(chǎn)業(yè)，規(guī)模較小，適用于歐洲的鯛科魚類、石斑魚和羅非魚。在中國(guó)、俄羅斯、西班牙和德國(guó)等國(guó)也有一些小范圍使用疫苗[18]。

疫苗已成為國(guó)際上預(yù)防和控制水產(chǎn)疾病的主要措施，對(duì)于保證水產(chǎn)品的質(zhì)量安全，防治濫用藥物，減輕環(huán)境污染的意義重大。在我國(guó)，漁用疫苗研究與發(fā)達(dá)國(guó)家相比還有很大的差距。我國(guó)對(duì)于漁用疫苗的研究存在以下不足：首先對(duì)魚類免疫的基礎(chǔ)研究較為薄弱，免疫系統(tǒng)的免疫應(yīng)答規(guī)律和保護(hù)機(jī)制等研究不夠深入；其次很多重大疾病的病原菌尚未分離到，無(wú)法制備全菌滅活苗；一些已經(jīng)分離到的病原菌因?qū)ζ浔Ｗo(hù)性抗原的研究不足，限制了基因工程苗或核酸疫苗等的發(fā)展。這些瓶頸成為影響我國(guó)漁用疫苗產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要因素。

2.3.2免疫增強(qiáng)劑和免疫調(diào)節(jié)劑。

在提高水產(chǎn)動(dòng)物抗病力的研究中，使用免疫增強(qiáng)劑和免疫調(diào)節(jié)劑的效果也引起關(guān)注。水產(chǎn)動(dòng)物大多是低等脊椎動(dòng)物，其免疫防御機(jī)制中非特異性免疫占有重要地位。特別是對(duì)于重組抗原或滅活病原體的疫苗，通常不能單獨(dú)提供保護(hù)。因此，通常需要使用免疫增強(qiáng)劑或免疫調(diào)節(jié)劑來(lái)提高疫苗的效力。傳統(tǒng)的免疫增強(qiáng)劑如礦物油通常用于不同的商業(yè)疫苗中，然而，這種類型的免疫增強(qiáng)劑可能會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的副作用。為了在不降低保護(hù)水平的前提下，探索研究靶向性免疫增強(qiáng)劑針如MontanideISA711 和Montanide ISA763A具有特定細(xì)胞反應(yīng)的組合，特別是對(duì)于有前景的魚抗病毒DNA疫苗[19]。對(duì)大西洋鮭魚一種沙門氏菌的免疫效果研究中發(fā)現(xiàn)，用硫酸鋁鉀作為免疫增強(qiáng)劑，可減低疫苗副作用及降低毒性[20]。研究發(fā)現(xiàn)IL-8能夠調(diào)節(jié)對(duì)DNA疫苗反應(yīng)產(chǎn)生的早期細(xì)胞因子免疫應(yīng)答，因此，可能是一種潛在的免疫增強(qiáng)劑[21]。虹鱒中白介素-2 （IL-2）也被研究認(rèn)為可增加兩個(gè)轉(zhuǎn)錄因子STAT5 和Blimp-1的表達(dá)，認(rèn)為可作為魚類疫苗增強(qiáng)劑的用途[22]。Poly（I：C）也認(rèn)為是有效的免疫增強(qiáng)劑，可以對(duì)七帶石斑魚神經(jīng)壞死病毒NNV感染的保護(hù)，且保護(hù)能持續(xù)10個(gè)月以上。此外，即使在VNN發(fā)生后，Poly（I：C）免疫接種也可以降低魚的死亡率，對(duì)VNN感染的魚有一個(gè)較好的療效[23]。

目前國(guó)內(nèi)也開始使用大黃蒽醌提取物，海藻硫酸多糖和殼聚糖，香菇多糖和黃芪多糖等作為免疫增強(qiáng)劑使用，也取得較好的免疫增效效果。

2.3.3益生菌。

隨著對(duì)環(huán)境友好型水產(chǎn)養(yǎng)殖的需求，水產(chǎn)動(dòng)物益生菌的研究日益增多?！耙嫔边@個(gè)術(shù)語(yǔ)是帕克（1974）定義的，它是促進(jìn)腸道微生物平衡的有機(jī)體和物質(zhì)。富勒（1989）修訂了微生物飼料添加劑的定義，通過(guò)改善腸道微生物平衡，對(duì)宿主動(dòng)物進(jìn)行有益的影響。隨后，莫里亞蒂（1998）建議將益生菌的定義擴(kuò)展到微生物水添加劑。通過(guò)在水中添加益生菌已被證明可以減少氮和磷的濃度，改善水質(zhì)。在水或飲食中加入的益生菌也可能抑制致病微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)消化酶的生長(zhǎng)，促進(jìn)飼料的利用，提供其他促生長(zhǎng)因子，刺激機(jī)體的免疫反應(yīng)。被確認(rèn)的益生菌可能影響魚的免疫力、抗病性和其他性能指標(biāo)，包括芽孢桿菌屬和各種乳酸菌（乳酸菌、乳球菌、卡諾菌、小球菌、腸球菌和鏈球菌）。益生菌的作用模式包括競(jìng)爭(zhēng)排斥，即益生菌通過(guò)抗生素或競(jìng)爭(zhēng)對(duì)營(yíng)養(yǎng)或空間的競(jìng)爭(zhēng)，改變微生物代謝，或通過(guò)對(duì)宿主免疫的刺激，積極抑制潛在病原體在消化道的定殖。益生菌可以促進(jìn)食欲，通過(guò)生產(chǎn)維生素、排毒和消化不良的成分來(lái)改善營(yíng)養(yǎng)。有越來(lái)越多的證據(jù)表明益生菌能有效地抑制多種魚類病原體。在生產(chǎn)使用過(guò)程中，益生菌儲(chǔ)存和處理的過(guò)程中必須保持活性，以獲得有益的效果，但死細(xì)胞、凍干細(xì)胞或無(wú)細(xì)胞提取物或孢子的應(yīng)用都有一定程度的成功[24]。

在現(xiàn)代化綠色生態(tài)養(yǎng)殖生產(chǎn)中，益生菌作為抗生素的替代品，作為無(wú)藥物殘留、天然無(wú)污染的凈水和防疾病的微生物制品，具有廣闊的應(yīng)用前景。當(dāng)然，由于益生菌進(jìn)入水產(chǎn)養(yǎng)殖的時(shí)間并不長(zhǎng)，很多問題還在研究探討中，因此，在將益生菌應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖時(shí)還需謹(jǐn)慎[25]。具體來(lái)說(shuō)，目前益生菌進(jìn)入水產(chǎn)養(yǎng)殖的問題可以歸結(jié)為如下幾個(gè)：首先，益生菌的篩選鑒定方面，目前技術(shù)層面還比較落后，效率也不夠高；同時(shí)，益生菌應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖中的一些機(jī)理還沒有完全明朗，大部分益生菌的使用都是出于促進(jìn)生長(zhǎng)和凈化水質(zhì)的用途，一些更深入的使用目標(biāo)和方法還有待研究發(fā)現(xiàn)；同時(shí)，益生菌在養(yǎng)殖環(huán)境內(nèi)能否有效生存與繁殖，這個(gè)問題還不清楚；最后，如果將益生菌大量投入使用，可能會(huì)造成生態(tài)安全問題，尤其是可能會(huì)發(fā)生生態(tài)入侵問題，這個(gè)風(fēng)險(xiǎn)目前還沒有找到有效的化解與應(yīng)對(duì)策略。目前益生菌用于水產(chǎn)養(yǎng)殖，還處于研發(fā)與嘗試階段，這一技術(shù)的使用還并不成熟。因此，在未來(lái)的研究中，應(yīng)當(dāng)不斷有新的技術(shù)手段產(chǎn)生，讓益生菌可以更為穩(wěn)定持續(xù)的應(yīng)用到水產(chǎn)養(yǎng)殖中，促進(jìn)養(yǎng)殖產(chǎn)量和質(zhì)量的共同提升。

3展望

總體來(lái)說(shuō)，全球水產(chǎn)病害防控技術(shù)的發(fā)展速度已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)落后于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，這一點(diǎn)在我國(guó)尤為突出。盡管如此，仍然有一些新的技術(shù)值得期待，例如靶向噬菌體治療[26]和RNA干擾為基礎(chǔ)的抗病毒治療[27]等技術(shù)，也正在被考慮引入水產(chǎn)養(yǎng)殖。雖然這些技術(shù)有很大的前景，但它們具有潛在的風(fēng)險(xiǎn)，例如致病基因轉(zhuǎn)移、噬菌體抗性的發(fā)生，甚至涉及到基因操縱的問題[28]。

參考文獻(xiàn)

[1]

邴旭文.中國(guó)水產(chǎn)健康養(yǎng)殖技術(shù)研究的現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢(shì)[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2004，20（3）：249-251，276.

[2] 魏寶振.水產(chǎn)健康養(yǎng)殖的內(nèi)涵及發(fā)展現(xiàn)狀[J].中國(guó)水產(chǎn)，2012（7）：5-7.

[3] LI X P，LI J R，WANG Y B，et al.Aquaculture industry in China：Current state，challenges，and outlook[J].Reviews in fisheries science，2011，19（3）：187-200.

[4] AHN P T，KROEZE C，BUSH S R，et al.Water pollution by Pangasius production in the Mekong Delta，Vietnam：Causes and options for control[J].Aquaculture research，2010，42（1）：108-128.

[5] RAKOCY J E，MASSER M P，LOSORDO T M.Aquaponics：Integrating fish and plant culture[J].North eastern regional center publication，2006，11：767-822.

[6] DECAMP O，MORIARTY D J W，LAVENS P.Probiotics for shrimp larviculture：Review of field data from Asia and Latin America[J].Aquaculture research，2008，39（4）：334-338.

[7] 張信娣，金葉飛，陳瑛.光合細(xì)菌對(duì)魚病原細(xì)菌生長(zhǎng)的影響[J].中國(guó)生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2008，16（3）：659-663.

[8] 李寧求，付小哲，石存斌，等.大宗淡水魚類病害防控技術(shù)現(xiàn)狀及前景展望[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2011，32（4）：113-117.

[9] VERGNEAUGROSSET C，LARRAT S.Evidencebased advances in aquatic animal medicine[J].Veterinary clinics of North America，2017，20（3）：839-856.

[10] CLAVER J A，QUAGLIA A I E，SAGGESE M D.Comparative morphology，development and function of blood cells in nonmammalian vertebrates[J].Journal of exotic pet medicine，2009，18（2）：87-97.

[11] GARDNER I A，BURNLEY T，CARAGUEL C.Improvements are needed in reporting of accuracy studies for diagnostic tests used for detection of finfish pathogens[J].Journal of aquatic animal health，2014，26（4）：203-209.

[12] FALLAH F J，KHARA H，ROHI J D，et al.Hematological parameters associated with parasitism in pike，Esox lucius caught from Anzali wetland[J].Journal of parasitic diseases，2015，39（2）：245-248.

[13] CALHOUN D M，SCHAFFER P A，GREGORY J R，et al.Experimental infections of bluegill with the trematode Ribeiroia ondatrae （Digenea：Cathaemasiidae）：Histopathology and hematological response[J].Journal of aquatic animal health，2015，27（4）：185-191.

[14] OLATE V R，NACHTIGALL F M，SANTOS L S，et al.Fast detection of Piscirickettsia salmonis in Salmo salar serum through MALDI-TOF-MS profiling[J].Journal of mass spectrom，2016，51（3）：200-206.

[15] VERGNEAUGROSSET C，SUMMA N，RODRIGUEZ C O JR，et al.Excision and subsequent treatment of a leiomyoma from the periventiduct of a koi （Cyprinus carpio koi）[J].Journal of exotic pet medicine，2016，25（3）：194-202.

[16] 李立華.我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖病害控制技術(shù)現(xiàn)狀與發(fā)展趨勢(shì)[J].科學(xué)技術(shù)創(chuàng)新，2016（8）：274.

[17] SOMMERSET I，KROSSY B，BIERING E，et al.Vaccines for fish in aquaculture[J].Expert review of vaccines，2005，4（1）：89-101.

[18] BRUDESETH B E，WIULSRD R，F(xiàn)REDRIKSEN B N，et al.Status and future perspectives of vaccines for industrialised finfish farming[J].Fish shellfish immunology，2013，35：1759-1768.

[19] TAFALLA C，BGWALD J，DALMO R A.Adjuvants and immunostimulants in fish vaccines：Current knowledge and future perspectives[J].Fish shellfish immunol，2013，35（6）：1740-1750.

[20] MULVEY B，LANDOLT M L，BUSCH R A.Effects of potassium aluminium sulphate （alum） used in an Aeromonas salmonicida bacterin in Atlantic salmon，Salmo salar L.[J].Fish diseases，1995，18（6）：495-506.

[21] JIMENEZ N，COLL J，SALGUERO F J，et al.Coinjection of interleukin 8 with the glycoprotein gene from viral haemorrhagic septicemia virus（VHSV） modulates the cytokine response in rainbow trout （Oncorhynchus mykiss）[J].Vaccine，2006，24：5615-5626.

[22] DAZROSALES P，BIRD S，WANG T H，et al.Rainbow trout interleukin-2：Cloning expression and bioactivity analysis[J].Fish shellfish immunology，2009，27（3）：414-422.