黑占財(cái) 楊桂梅 宋生熹 汪海霞
(1.西寧市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,青海西寧 810003;2.青海省家畜改良中心,青海西寧 810003;3.湟中縣福源種養(yǎng)殖專業(yè)合作社,青海湟中 810016)
血液是指存在于動(dòng)物機(jī)體血管中的鮮紅色液體,血液由血漿和血細(xì)胞組成。血液指標(biāo)檢測可為疾病的診斷與治療、臨床確定病情、監(jiān)測治療效果等提供依據(jù)。目前,秸稈飼料中纖維對豬血液指標(biāo)的影響尚無定論。大量試驗(yàn)表明,可溶性日糧纖維可以降低動(dòng)物血漿及肝臟中的膽固醇含量,低密度膽固醇含量會(huì)顯著降低,而高密度膽固醇含量變化并不顯著。也有文獻(xiàn)報(bào)道,在生長豬日糧中添加12%的甜菜澄(可溶性日糧纖維為主),血液中的極低密度脂蛋白含量、甘油三酯含量降低,添飼麥麩等可溶性日糧纖維會(huì)使公豬的血糖水平顯著降低。但秸稈中粗纖維以不可溶纖維為主,但目前關(guān)于不可溶纖維日糧對豬血液指標(biāo)的研究較少,且尚無定論。在本試驗(yàn)用30.2%燕麥秸稈替代部分玉米的高纖維日糧飼喂長約二元母豬,采集血液指標(biāo)用以檢測血液常規(guī)指標(biāo)、血清生化指標(biāo)及血液免疫指標(biāo),旨在研究秸稈飼料對長約二元母豬血液指標(biāo)及免疫指標(biāo)的影響。
試驗(yàn)動(dòng)物為青海省湟中福源種養(yǎng)殖合作社的60頭體重相近(120.32±2.25kg)的后備長約二元母豬。試驗(yàn)用于配制飼料的燕麥秸稈均來自湟中縣本地。
日糧設(shè)計(jì)按表1飼料配方配制。
表1 飼料配方(%)
1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理
本試驗(yàn)的飼養(yǎng)過程是在青海省湟中縣福源種養(yǎng)殖專業(yè)合作社完成的,試驗(yàn)時(shí)間為2017年9月5日至2017年11月5日,試驗(yàn)的正式飼養(yǎng)期為60d。
試驗(yàn)選用后備長約二元母豬6 0頭,初始體重為120.32±2.25kg,分2個(gè)處理,每個(gè)處理10欄,每欄飼養(yǎng)3頭,分別飼喂對照組日糧和試驗(yàn)組日糧。試驗(yàn)期間,每天打掃舍內(nèi)衛(wèi)生,觀察并記錄試驗(yàn)豬的健康狀況,包括腹瀉狀況、精神狀況和死亡情況等,試驗(yàn)期間育肥豬不進(jìn)行任何疫苗注射。
1.2.2 樣品采集及指標(biāo)測定
(1)樣品采集
采集血液樣品:所有試驗(yàn)豬用本課題組自制的多管式采血器通過前腔靜脈采集血液樣品,用于血液生化指標(biāo)測定的樣品,在采血后立刻將血液靜置1h,3000r/min,離心10min,吸取上清液,-20℃保存待檢。
(2)血液指標(biāo)測定
血液常規(guī)指標(biāo)和血清生化指標(biāo)委托青海省某人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科測定。血清中的IgM、IgA、IgG的含量分別使用相應(yīng)的Elisa測定試劑盒進(jìn)行測定。血清中的IgM、IgA、IgG的含量測定方法如下:
①制取標(biāo)準(zhǔn)品:用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液將標(biāo)準(zhǔn)品原液稀釋成等梯度濃度的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液,分裝于5個(gè)離心管中備用;
②加樣:分別設(shè)定空白對照孔、待測樣品孔、標(biāo)準(zhǔn)孔。待測樣品孔加入樣本、免疫球蛋白抗體、鏈酶親和素-HRP50,標(biāo)準(zhǔn)品孔加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品。然后蓋上封板膜后,在37℃溫度下孵育60min。
③配置洗滌液:用雙蒸水稀釋洗滌液,混勻后備用;
④洗滌:用洗滌液重復(fù)5次洗滌酶標(biāo)板,每次靜置30秒;
⑤顯色:加入顯色劑A和顯色劑B,然后震蕩混勻,在37℃下避光反應(yīng)15min。
⑥終止:加入終止劑終止反應(yīng);⑦測定:使用酶標(biāo)儀測定OD值;⑧計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中免疫球蛋白的含量。
所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel初步分析后,運(yùn)用SPSS16.0軟件中的獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)進(jìn)行差異性分析。試驗(yàn)結(jié)果以平均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)誤表示。
與對照組相比,試驗(yàn)組中長約二元母豬的血小板數(shù)量和血小板壓積顯著降低(P<0.05),血細(xì)胞比容顯著低于對照組(P<0.05),其他血液常規(guī)指標(biāo)不存在差異。(分析結(jié)果見表2)
與對照組相比,試驗(yàn)組中長約二元母豬的血液葡萄糖含量顯著降低(P<0.05),試驗(yàn)組長約二元母豬的血紅蛋白濃度顯著低于對照組(P<0.05),其他血清生化指標(biāo)不存在差異。(分析結(jié)果見表3)
表2 秸稈飼料對長約二元母豬血液常規(guī)指標(biāo)的影響
表3 秸稈飼料對長約二元母豬血清生化指標(biāo)的影響
與對照組相比,試驗(yàn)組中長約二元母豬血液免疫球蛋白含量不存在差異(P>0.05)。(分析結(jié)果見表4)
表4 秸稈飼料對長約二元母豬血液免疫球蛋白的影響
添加秸稈飼料的試驗(yàn)組中長約二元母豬的血小板數(shù)量和血小板壓積顯著低于對照組,血細(xì)胞比容顯著低于對照組,血液葡萄糖含量顯著低于對照組,血紅蛋白濃度顯著低于對照組,而免疫球蛋白含量等其他血液常規(guī)指標(biāo)不存在差異,這表明:秸稈飼料可以改善長約二元豬的生理代謝,可以降低其患血栓等疾病的風(fēng)險(xiǎn),具有一定的保健作用,且秸稈飼料不會(huì)影響長約二元母豬的血液免疫指標(biāo)。