郭彩云 張金鳳 魏楚洪 姚龍燕 孫艷娜
[摘要]目的 探討5歲以下喘息兒童血液中KL-6及PAI-1的變化及臨床意義。方法 選取2015年1月~ 2016年12月在我院診斷治療的5歲以下有喘息癥狀的兒童198例納入研究對象,根據(jù)API評分標準將患兒隨機分為API(哮喘預(yù)測指數(shù))陽性組(n=104),API陰性組(n=94)。兩組患兒在第1~4 周布地奈德混懸液及博利康尼霧化吸入,第4周后僅使用孟魯司特鈉口服治療,評估記錄各組患兒治療前,治療后4周,8周,12周時各時間點哮喘癥狀評分,并檢測血液中KL-6及PAI-1的表達水平。結(jié)果 API陰性組中,各時間點KL-6、PAI-1的比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);API陽性組隨著治療時間的延長KL-6及PAI-1的表達逐漸降低(P<0.05),且治療前及治療后4、8周KL-6及PAI-1的表達顯著高于API陰性組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);兩組治療后12周的KL-6及PAI-1的表達水平比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);兩組患兒治療前,哮喘癥狀評分的比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);治療后4、8、12周哮喘癥狀評分顯著下降,與治療前比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);API陽性組治療后4、8周哮喘癥狀評分顯著低于API陰性組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),治療后12周,兩組哮喘癥狀評分的比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 5歲以下喘息兒童血液中KL-6及PAI-1的表達呈動態(tài)變化,與哮喘癥狀評分有相關(guān)性。
[關(guān)鍵詞]喘息;肺泡Ⅱ型上皮細胞表面抗原;纖溶酶原激活物抑制劑-1;兒童
[中圖分類號] R725.6 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721(2018)4(a)-0095-04
Changes and clinical significance of KL-6 and PAI-1 in the blood of children with wheeze less than 5 years old
GUO Cai-yun ZHANG Jin-feng▲ WEI Chu-hong YAO Long-yan SUN Yan-na
Department of Pediatrics,Women and Children′s Affiliated Hospital of Guangdong Medical University in Guangdong Province,F(xiàn)oshan 528300,China
[Abstract]Objective To investigate the changes and clinical significance of KL-6 and Plasminogen activator inhibitor-1(PAI-1) in children with wheezing less than 5 years old.Methods A total of 198 children under 5 years of age with wheezing symptoms diagnosed and treated in our hospital from January 2015 to December 2016 were selected and randomly divided into API positive group (n=104)and API --negative group (n=94) according to API scoring criteria.Patients in the two groups were inhaled budesonide suspension and bricanyl at 1-4 weeks,and only treated with montelukast sodium orally at 4 weeks. the asthma symptom scores were recorded before treatment,4,8 and 12 weeks after treatment,and the expression levels of KL-6 and PAI-1 in blood were detected.Results There was no significant difference between KL-6 and PAI-1 in API negative group(P>0.05).The expression of KL-6 and PAI-1 in API-positive group decreased with the treatment time(P<0.05),and the expression of KL-6 and PAI-1 in API-positive group was significantly higher than that in API-negative group(P<0.05).There was no significant difference in KL-6 and PAI-1 expression between the two groups at 12 weeks after treatment(P>0.05).There was no significant difference in asthma symptom score between the two groups before treatment(P>0.05).The symptom scores of asthma decreased significantly at 4,8 and 12 weeks after treatment,the difference was statistically significant(P<0.05). The scores of asthma symptoms in API positive group were significantly lower than those in API negative group at 4 and 8 weeks after treatment,the difference was statistically significant(P<0.05); there was no significant difference in the scores of asthma symptoms between the two groups at 12 weeks after treatment(P>0.05).Conclusion The expression of KL-6 and PAI-1 in the asthmatic children less than 5 years old is in a dynamic state and associates with the symptom score of asthma.
[Key words]Asthma;Alveolar type Ⅱ epithelial cell surface antigen;Plasminogen activator inhibitor-1;Children
喘息是小兒常見的疾病,2 歲以內(nèi)的嬰幼兒多見,以1~6個月的嬰幼兒為著。隨著我國經(jīng)濟發(fā)展,工業(yè)化和城鎮(zhèn)化進程加快兒童哮喘患病率呈逐年上升趨勢[1]。哮喘是一種遺傳因素和環(huán)境因素相互作用導(dǎo)致的多基因遺傳病[2-3],氣道慢性炎癥是哮喘發(fā)病的核心機制,隨著患兒年齡的增長氣道發(fā)育完善及感染誘因的去除,由病毒感染或氣道發(fā)育不良引起的喘息癥狀可不再出現(xiàn),但哮喘患兒卻曾反復(fù)發(fā)——作甚至延續(xù)至成年。由于幼兒肺功能檢測實施困難,對哮喘的診斷造成一定的影響。如何有效鑒別5 歲以下兒童哮喘并予早期干預(yù)一直是當今熱議的話題[4]。
哮喘預(yù)測指數(shù)(asthmapredictive index, API)是目前認為一種非常有用的預(yù)測嬰幼兒哮喘的指標[5]。
近年來,小氣道及肺組織病變在支氣管哮喘中的重要作用逐漸得到了認識。其中, 已證實哮喘時存在肺泡Ⅱ型上皮細胞(typeⅡalveolar epithelialcell, ATⅡ) 結(jié)構(gòu)和功能的改變[6]。目前作為與肺泡損傷直接相關(guān)的血清學(xué)指標的肺泡Ⅱ型上皮細胞表面抗原(Krebs Von den lungen-6,KL-6), 已用于許多呼吸系統(tǒng)疾病的早期診斷和判斷病情程度。但是,在支氣管哮喘中KL-6的表達情況報道較少。是否通過檢測血清和肺泡灌洗液中KL-6 的D 值,早期診斷和判斷支氣管哮喘的病情程度。
大多數(shù)研究者認為氣道重塑是長期慢性炎癥作用的結(jié)果,研究者從纖溶酶原激活抑制物-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)基因敲除哮喘小鼠的肺組織的膠原沉積不到野生型小鼠的一半,意識到PAI-1 對哮喘的主要作用可能是加重細胞外基質(zhì)沉積產(chǎn)生哮喘氣道重塑[7]。
本研究擬通過對5歲以下喘息兒童按API 進行分組,檢測患兒血液中KL-6及API-1的變化,探討哮喘患兒發(fā)病的危險因素及預(yù)測因子,為5歲以下喘息兒童的早期診治提供理論基礎(chǔ)。
1 資料與方法
1.1一般資料
選取2015年1月~2016年12月在我院診斷治療的5歲以下有喘息癥狀的兒童198例納入研究對象,根據(jù)API評分標準將患兒隨機分為API(哮喘預(yù)測指數(shù))陽性組(n=104),API陰性組(n=94)。API 陽性組中,男58例,女46例;平均年齡(32±11)個月;陰性組中,男54例, 女40例;平均年齡(34±12)個月。兩組患者的一般資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。納入標準:8 h 未吸入短效支氣管擴張劑;24 h 未用長效β2受體激動劑,茶堿類及激素類藥物。排除標準:支氣管肺發(fā)育不良、早產(chǎn)兒、胸廓畸形、心臟疾病及其他影響肺功能疾病的患兒。該研究通過本院倫理委員會批準,受試者均知情且同意。
1.2方法
兩組患兒在喘息急性發(fā)作期(第1~4 周)采用相同常規(guī)治療方法,包括選擇合理抗生素、布地奈德混懸液及博利康尼霧化吸入、維持水、電解質(zhì)平衡,同時輔以化痰、退熱、給氧等綜合治療,第4周后僅使用孟魯司特鈉口服治療,1次/天,1片/次(10 mg)。評估記錄各組患兒治療前,治療后4周,8周,12周時哮喘癥狀評分,并檢測血液中KL-6及PAI-1的表達水平。
1.3 觀察指標以及判斷標準
①兩組患者各時間KL-6及 PAI-1水平表達。②血清中KL-6 及PAI-1測定:治療前、治療后4周、8周、12周,抽取患兒肘部采靜脈血4 ml,留取血清置-70℃冰箱備用,以酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA法)進行KL-6、 PAI-1的檢測,試劑是上海實業(yè)科華生物技術(shù)有限公司提供,實驗步驟嚴格按照試劑盒要求進行。
1.4哮喘日、夜間癥狀評分量表
哮喘日、夜間癥狀評分量表(表1)。
表1 哮喘日、夜間癥狀評分量表
1.4 統(tǒng)計學(xué)分析
采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS16.0分析數(shù)據(jù),計量資料以均數(shù)±標準差(x±s)表示,采用t檢驗,計數(shù)資料以率表示,采用χ2檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1 兩組患兒血液中 KL-6表達的比較
API陰性組中,各時間點的KL-6、PAI-1比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);API陽性組隨著治療時間的延長KL-6及PAI-1表達逐漸降低(P<0.05),且治療前及治療后4、8周KL-6及PAI-1的表達顯著高于API陰性組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義;兩組治療后12周的KL-6及PAI-1的表達水平比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)(表2)。
表2 兩組患兒血液中 KL-6表達的比較(x±s,U/ml)
與API陰性組同時間比較,*P<0.05
2.2 兩組患兒治療前后各時間點哮喘癥狀評分的比較
兩組患兒治療前的哮喘癥狀評分比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);治療后4、8、12周哮喘癥狀評分顯著下降,與治療前比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);API陽性組治療后4、8周哮喘癥狀評分顯著低于API陰性組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),治療后12周,兩組哮喘癥狀評分的比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)(表3)。
表3 兩組患兒治療前后各時間點哮喘癥狀評分的比較(x±s)
與同組治療前比較,*P<0.05
3 討論
API陽性的判斷[8]有嚴格標準和寬松標準之分,符合1項主要指標或2項次要指標,嚴格指標為1 年內(nèi)喘息發(fā)作≥ 4 次,寬松指標為1 年內(nèi)喘息發(fā)作<3 次。生后3 年內(nèi)反復(fù)喘息的兒童,如果符合以下1項主要指標或2 項次要指標,則為API陽性。主要指標包括父母有哮喘史及醫(yī)生診斷的濕疹,次要指標包括醫(yī)生診斷的變應(yīng)性鼻炎、非感冒性喘息或外周血中嗜酸性粒細胞≥4%。
在學(xué)齡期約76%符合嚴格指標的喘息患兒發(fā)展為哮喘,約59%符合寬松指標的喘息患兒發(fā)展為哮喘,API 特異性達97%,被不同人群和RCT 研究采用。因此,臨床將API 嚴格標準作為5歲以下兒童喘息是否發(fā)展為哮喘的預(yù)測工具。
哮喘氣道慢性炎癥的基礎(chǔ)是多種炎性細胞在氣道的募集和活化,嗜酸粒細胞通過釋放細胞因子等炎癥介質(zhì)導(dǎo)致ATⅡ損傷。KL-6 作為ATⅡ損傷、增殖標記物,在哮喘小鼠的動物模型的研究中顯示KL-6的表達與哮喘小鼠激發(fā)次數(shù)增加呈正相關(guān)[9] 。
本研究先顯示喘息患兒API陽性組治療前KL-6水平明顯高于API陰性組。給予同樣的治療后4、8、12周API陽性組血液中KL-6水平較治療前明顯降低,而API陰性組變化不明顯,在API陽性的喘息患兒中KL-6的表達水平與喘息的嚴重程度相關(guān)。KL-6 可能成為支氣管哮喘的早期診斷和判斷病情程度的指標, ATⅡ在哮喘氣道慢性炎癥的循環(huán)放大效應(yīng)中可能起了重要的作用[10]。
大多數(shù)研究者認為氣道重塑是長期慢性炎癥作用的結(jié)果,氣道重塑和氣道炎癥密不可分。哮喘的支氣管平滑肌細胞在體外產(chǎn)生大量PAI-1, 抑制纖溶酶的分裂作用, 導(dǎo)致TGF-B1 釋放減少, 在平滑肌細胞局部誘導(dǎo)平滑肌細胞合成膠原[11]。在疾病狀態(tài)下,PAI-1促進新生血管的形成[12],并與肥大細胞、嗜酸性粒細胞形成復(fù)雜的調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò),從而參與氣道重塑。Cho等[13]在體外實驗證實哮喘患者肺組織中PAI-1 活性增強. 研究顯示PAI-1 基因多態(tài)性導(dǎo)致血漿PAI-1 表達水平不同, 致使PAI-1 的生物學(xué)作用不同, 是哮喘氣道重塑的直接影響因素。在哮喘動物模型中氣道內(nèi)給予小劑量PAI-1干擾RNA或PAI-1的抑制劑能明顯減低哮喘的過敏原誘導(dǎo)的病理反應(yīng)[14-18]。
API陽性組隨著治療時間的延長各時間點PAI-1及KL-6的表達逐漸降低,癥狀減輕,哮喘評分同時降低。分析PAI-1及KL-6的表達與哮喘的嚴重程度相關(guān)。
隨著家居裝飾的普遍化,兒童哮喘的患病率卻也明顯增加;預(yù)防早產(chǎn)、減少室內(nèi)外污染、及時治療變應(yīng)性疾病及預(yù)防呼吸道感染是減少哮喘患病和預(yù)防哮喘發(fā)作的有效方法。及時準確的對哮喘患兒進行診斷和規(guī)范治療尤為重要。通過敏感因子的監(jiān)測,對哮喘的高危兒早期診斷及治療,減輕反復(fù)喘息對患兒肺部炎癥反應(yīng)及呼吸道重構(gòu)的發(fā)生,提高喘息兒童的生活質(zhì)量。
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(收稿日期:2017-11-30 本文編輯:白 婧)