王 磊，姚 泓，彭永正，李嘉雯，吳希陽,*

（1.暨南大學理工學院食品科學與工程系，廣東 廣州 510632；2.南方醫(yī)科大學珠江醫(yī)院檢驗醫(yī)學部，廣東 廣州 510515）

胃腸道作為腸道微生物的主要活動場所，其壁上覆蓋著的黏膜既能吸收營養(yǎng)物質(zhì)，又能抵御有毒物質(zhì)和病原菌的危害，是機體重要的免疫屏障[1-3]。黏膜也稱黏液層，分為內(nèi)黏液層和外黏液層，主要由杯狀細胞合成和分泌，組成成分多為黏蛋白，并且部位不同，黏蛋白的種類也有所變化[4-6]。內(nèi)黏液層和上皮細胞緊密結(jié)合，難溶于水，幾乎無菌群存在；外黏液層在胃腸道的活動中被不斷降解和剝落，眾多腸道菌群生活在此調(diào)節(jié)機體內(nèi)穩(wěn)態(tài)[7-9]。疣微菌門和變形菌門較好地定植在黏液層中[10]，且瘤胃菌科和雙歧桿菌也有一定的黏蛋白降解能力，在其降解的過程中互利共生[11]。黏液層和在其中生存的菌群相互作用對機體健康影響深遠，黏蛋白的降解和生成的穩(wěn)態(tài)或紊亂常常能反映腸道內(nèi)環(huán)境狀況，因此，分離、鑒定黏液層中的菌群、細究菌群特異性成為研究重點[12-14]。

2004年，Derrien等[15]利用豬腸黏蛋白作為選擇培養(yǎng)基首次從人體糞便中分離出了Akkermansia muciniphila，用16S rRNA基因測序分析出其屬于疣微菌門，后被歸類Akkermansiaceae科。A. muciniphila在人類腸道普遍定植，腸道黏液層至少存在8 種不同的Akkermansia屬[16-17]，且不同屬的A. muciniphila很可能同時定植在同一人的腸道中[18]。快速檢測不同人群體內(nèi)Akkermansia屬種類和含量，對不同Akkermansia屬的高效率分離和鑒定具有重大意義。

從人體糞便中首次分離出A. muciniphila已有10余年，但多數(shù)研究只是局限于A. muciniphila的生理特性，對于分子作用機制的探索還未出現(xiàn)。同時，分離方法的優(yōu)化一直停滯不前，如何快速分離和分型一直是研究瓶頸。后工業(yè)化時代的飲食、生活方式和環(huán)境中物理和化學物質(zhì)的變化，使肥胖和糖尿病發(fā)病率的逐年增加，也與腸道菌群息息相關(guān)[19-20]。目前也有研究成果顯示A. muciniphila的數(shù)量與小鼠和人的肥胖、2型糖尿病等的發(fā)病率呈負相關(guān)[17,21-22]，表1列舉了A. muciniphila的主要研究進展，說明只有細究其培養(yǎng)條件，才能建立快速、準確的分離、純化和鑒定技術(shù)，從不同宿主體內(nèi)分離特異的Akkermansia屬菌株，從而能夠?qū)ζ浠虿町惡蜕砩δ苓M行比對。挑選出特異性菌株可以為后續(xù)的功能性研究和探索提供思路，用于機體胃腸道健康的研究。2016年，馮澤猛等[23]的綜述里對A. muciniphila的定植環(huán)境、生理特性、對機體營養(yǎng)代謝的影響、與代謝性疾病及機體免疫相互作用等方面進行了總結(jié)。本文將側(cè)重A. muciniphila的基因組信息及其分子生物學鑒定、分型技術(shù)、菌株分離與純化過程，探討現(xiàn)有的A. muciniphila的培養(yǎng)條件、分離和純化方法的優(yōu)缺點，了解人類與動物體內(nèi)Akkermansia屬的異同點，對比不同宿主之間定植的差異。

表1 A. muciniphila的研究進展Table 1 Milestones in A. muciniphila research

1 A. muciniphila的鑒定、分型和基因組信息

Akkermansiaceae為疣微菌門第Ⅱ科（Family II.Akkermansiaceae fam. nov.），Akkermansia屬是科內(nèi)唯一菌屬，該屬和其16S rRNA 極度相關(guān)的序列廣泛存在于脊椎動物（如人、兔、小鼠和蟒蛇等）的腸道內(nèi)[14]。Akkermansia屬目前主要有A. muciniphila（2004年）和A. glycaniphila（2016年）2 個菌種被鑒定和分類，且A. muciniphila是疣微菌門中第一個被成功分離和鑒定的腸道菌[28]，本文主要對人源A. muciniphila進行總結(jié)。

1.1 A. muciniphila的鑒定

菌種的鑒定技術(shù)主要為菌落形態(tài)分析、菌株生理生化實驗以及分子技術(shù)等，A.muciniphila的鑒定主要是將三者進行聯(lián)用，從而綜合判斷[15]。菌落形態(tài)主要從大小、色澤、形狀以及是否存在莢膜等方面進行考察。A. muciniphila呈橢圓形，為非運動型的革蘭氏陰性菌，單細胞長軸為0.6～1.0 μm，一般是單個或者成雙菌落生長，極少是成群生長。在黏蛋白瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基上菌落呈現(xiàn)白色菌膜，菌落之間通過絲狀結(jié)構(gòu)相連接，單菌落大小約為0.7 mm[15]。挑選疑似目標菌，經(jīng)過革蘭氏染色后的鏡檢以及掃描電子顯微鏡觀察，可以進行初步判斷。

A. muciniphila在分別以葡萄糖、半乳糖、果糖、纖維二糖、N-乙酰葡萄糖胺、N-乙酰半乳糖胺和黏蛋白作為碳源的培養(yǎng)液中生長情況分別為微弱生長、不生長、不生長、不生長、微弱生長、微弱生長、最佳生長[15]，且其主要細胞脂肪酸為4 類：C15:0（飽和直鏈）、反式C15:0（支鏈）、C15:03OH和C17:0，前3 類含量與A. glycaniphila相似[29]。A. muciniphila生理生化特性研究的不完全性（如氧損傷的影響）對鑒定過程造成了很大干擾。本課題組的前期成果發(fā)現(xiàn)，A. muciniphila在固體培養(yǎng)基上生長不穩(wěn)定，這使其形態(tài)鑒定存在缺陷。基于純培養(yǎng)技術(shù)的鑒定費時費力，需在分子和基因水平上進行分析來作為鑒定技術(shù)的補充。

2004年，Derrien等[15]從A. muciniphila單菌落中提取DNA后用通用引物進行聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）擴增，純化產(chǎn)物再進行16S rRNA基因序列測序，得到純化產(chǎn)物長度為1 433 bp。經(jīng)過序列比對得到與其99%相近的序列是未培養(yǎng)的腸道菌群，與疣微菌門中的Verrucomicrobium spinosum存在遠緣關(guān)系（92%），之后歸類于疣微菌門第Ⅱ科Akkermansiaceae[14-15]，被鑒定為一種新的腸道菌群。2007年，Derrien等[24]設(shè)計出A. muciniphila的PCR特異性引物，產(chǎn)物片段為327 bp；Collado等[17]進一步驗證了其特異性后用于A. muciniphila的定量PCR（quantitative PCR，qPCR）。2016年，Guo等[30]利用此特異性引物的PCR和qPCR定量能夠較快確認人類腸道A. muciniphila的存在，并對其鑒定過程提供幫助。本實驗室基于NCBI核酸數(shù)據(jù)庫（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/）中的Akkermansia屬基因序列，通過分析可知，該特異性引物可以用于A.muciniphila和A. glycaniphila基因的擴增，見表2。因此這對引物無法直接特異性識別A. muciniphila，對其鑒定和定量都存在干擾。未來需要進一步優(yōu)化反應條件或重新設(shè)計特異性引物，才能提高A. muciniphila的鑒定準確性。3 種技術(shù)的結(jié)合對于A. muciniphila的鑒定比較全面，但過程稍顯繁瑣，應隨技術(shù)和設(shè)備的改進，開發(fā)快速、精準的鑒定技術(shù)。

表2 A. muciniphila特異性引物與Akkermansia屬和其他細菌的16S rRNA基因的序列比對Table 2 Sequence alignment between A. muciniphila-specific primers and 16S rRNA genes of other Akkermansia bacteria and bacteria from other genera

1.2 A. muciniphila的分型

細菌的分型主要分為2大類：第一類是表型分型，根據(jù)血清型、噬菌體型、染色表現(xiàn)和生理生化實驗等進行判斷；第二類是分子分型，如脈沖場凝膠電泳技術(shù)、多位點序列分型、腸道細菌基因間保守重復序列（enterobacterial repetitive intergenic consensus，ERIC）和PCR聯(lián)用技術(shù)分型等。

ERIC-PCR技術(shù)是基于腸道細菌基因組中非編碼保守重復序列設(shè)計出特異性外向引物，擴增出不同細菌專屬的指紋圖譜用于進一步分型[31-32]，目前關(guān)于A. muciniphila的分型主要依靠ERIC-PCR技術(shù)。2016年，Guo等[30]將分離出的22 株A. muciniphila使用ERIC-PCR技術(shù)分型，經(jīng)過分析確認為12 種亞型，其中在3 人體內(nèi)存在2 種不同的亞型，結(jié)果顯示該技術(shù)存在較好的分型敏感度，這也是目前唯一關(guān)于A. muciniphila分型的報道。

1.3 A. muciniphila的基因組信息

A. muciniphila（ATCC BAA-835）的全基因組是由一條2 664 102 bp大小的環(huán)狀染色體構(gòu)成，總體GC含量為47.6%，存在2 176 種蛋白編碼基因，整體編碼能力為88.8%，1 408 種基因具有潛在功能性，768 種基因編碼假定蛋白質(zhì)，其中38 種蛋白質(zhì)編碼基因歸類于假基因，共能編碼61 種潛在的黏蛋白降解酶，但是缺少基因編碼典型的黏膜結(jié)合域[15,18,33]。規(guī)律成簇的間隔短回文重復（clustered regularly interspaced short palindromic repeats，CRISPR）基因位點負責在古細菌和細菌抵抗外源成分侵襲時表達可遺傳的和適應性的天然免疫，ATCC BAA-835菌株基因組存在2 個CRISPR基因位點，正向重復序列大小分別為36、33 bp，重復次數(shù)分別為11 次和3 次，兩者與9 個預測噬菌體序列相關(guān)，表明A. muciniphila在進化過程中頻繁受細菌噬菌體的侵染[18,34-35]，可能在黏液層中參與機體腸道屏障工作。

2015年，Caputo等[36]使用基于焦磷酸測序的羅氏454 Titanium系統(tǒng)結(jié)合鳥槍法以及5 kb雙端測序技術(shù)對A. muciniphila Urmite進行基因組測序得出：A. muciniphila Urmite基因組草圖大小為2 664 704 bp，僅存在56 個間隔，所有片段GC含量為54%～57%；超過80%的序列和ATCC BAA-835對應，其中2 192 個基因和ATCC BAA-835比對成功，52 個基因未在基因庫中找到對應序列；通過抗生素抗性基因研究發(fā)現(xiàn)，存在8 種β-內(nèi)酰胺酶類抗性基因，其中一種與萬古霉素、氯霉素、甲氧芐啶、磺胺類和四環(huán)素抗性基因存在一定的聯(lián)系。A. muciniphila基因組信息的缺乏使對其基因?qū)哟蔚奶剿餮芯侩y以進行，只有找出基因差異性和特異性才能更深入了解這類腸道優(yōu)勢菌在人體健康中扮演的角色。

2 A. muciniphila的分離、純化和培養(yǎng)

各類組學技術(shù)能檢測到不同菌群的多樣性和功能性，但收集的信息只限于大分子（DNA、RNA和蛋白質(zhì)）在微生態(tài)的作用，而需要探明某種菌株在體外環(huán)境中所表現(xiàn)的生理功能，就需分離純菌株進行研究[37]?；驕y序平臺的飛速發(fā)展往往能檢測到未分離或未培養(yǎng)的腸道菌，而相應的分離和培養(yǎng)技術(shù)卻具有一定的滯后性。大多數(shù)成功分離出來的腸道菌一般是好氧菌或兼性厭氧菌，使用營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基或半組合培養(yǎng)基添加合適的碳源就能達到分離和培養(yǎng)的目的[28]，而嚴格厭氧腸道菌分離和培養(yǎng)的難度大。1950年，Hungate[38]針對嚴格厭氧微生物設(shè)計出的培養(yǎng)技術(shù)給腸道微生物研究提供了巨大幫助，許多方法沿襲至今。A. muciniphila作為典型的腸道厭氧菌，其分離和純化難度極大，學界逾20 年的研究，成功分離到的菌株十分有限，但培養(yǎng)擴增的方式不斷有文獻報道。

2.1 A. muciniphila的分離和純化

2004年，Derrien等[15]總結(jié)Miller[39]和Hoskins[40]等的研究成果，將黏蛋白粉末進行純化后制取高純黏蛋白，作為A. muciniphila分離最關(guān)鍵的特異性碳源和氮源。配制基礎(chǔ)液體培養(yǎng)基對新鮮、健康的高加索人糞便稀釋液進行嚴格厭氧培養(yǎng)后，接種到黏蛋白固體基礎(chǔ)培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，使用軟瓊脂技術(shù)挑出目標菌進行數(shù)次純化（整個過程保證嚴格厭氧環(huán)境），最后成功分離且證明為一種新的疣微菌門腸道革蘭氏陰性菌，能夠特異性降解黏蛋白作為能量大量增殖。

2016年，Guo等[30]將獲取的172 份中國南方人群的糞便提取DNA用qPCR進行驗證，選擇含有A. muciniphila的陽性樣品（Ct≤30），結(jié)合Derrien等[15]的分離方法進行前個兩階段的黏蛋白基礎(chǔ)培養(yǎng)基選擇性擴增。挑選黏蛋白固體基礎(chǔ)培養(yǎng)基上的單菌落接種到添加了硫化鈉和萬古霉素的還原性巧克力培養(yǎng)基連續(xù)進行純化后，最終成功分離得到22 株A. muciniphila，分為12 個亞型，首次從中國人群中分離A. muciniphila，為針對中國人群腸道菌群研究提供新的依據(jù)和思路。2012年，Hansen等[41]用萬古霉素處理非肥胖性糖尿病小鼠，發(fā)現(xiàn)小鼠A. muciniphila的含量和豐度都有增長，且萬古霉素常用來抑制革蘭氏陽性菌的生長，有利于A. muciniphila的分離篩選。

2016年，Ouwerkerk等[29]從動物園中收集新鮮的網(wǎng)紋蟒蛇糞便，將0.2 g的網(wǎng)紋蟒蛇糞便稀釋到含有0.5 g/L半胱氨酸鹽酸鹽的磷酸鹽緩沖液中，利用流式細胞儀控制菌液濃度進行梯度稀釋，再分別接種到黏蛋白固體基礎(chǔ)培養(yǎng)基上。培養(yǎng)一段時間之后挑取單菌落再次接種到相同培養(yǎng)基上，重復操作，嚴格控制厭氧條件，直至得到純化的A. glycaniphila菌株，這是首次從動物體內(nèi)分離和純化得到Akkermiansia屬。2015年，Caputo等[36]用Lagier等[42]的培養(yǎng)組學方法對服用萬古霉素或亞胺培南病人的糞便進行培養(yǎng)，宏基因組測序結(jié)果顯示培養(yǎng)后的溶液中疣微菌門含量較多。但是Caputo等[36]參考Derrien等[15]的方法，在厭氧環(huán)境嘗試分離其中的A. muciniphila，卻以失敗告終。說明A. muciniphila的起始存在的環(huán)境、選擇性培養(yǎng)條件、操作方法等都可能對其分離和純化產(chǎn)生很大影響。設(shè)計出巧妙的培養(yǎng)環(huán)境、優(yōu)化分離和純化方法最為關(guān)鍵，可以大大減少工作難度，提高分離效率。

2.2 A. muciniphila的培養(yǎng)

A. muciniphila在溫度20～40 ℃和pH 5.5～8.0之間都能夠生長，其中最佳溫度是37 ℃、最佳pH值為6.5，需要嚴格厭氧生長（182 kPa、80% N2、20% CO2）。在以寡糖（葡萄糖、N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰半乳糖胺）為碳源的培養(yǎng)基中生長較為緩慢，在黏蛋白基礎(chǔ)培養(yǎng)基中生長狀況最好[15]，黏蛋白基礎(chǔ)培養(yǎng)基也是目前唯一的選擇性培養(yǎng)基。2011年，van Passel等[18]將ATCC BAA-835接種到500 mL無氧黏蛋白（來自美國Sigma公司）液體基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，37 ℃過夜培養(yǎng)就可進行基因組DNA提取用于基因分析。2013年，Kang等[43]用黏蛋白液體培養(yǎng)基，在厭氧環(huán)境下（90% N2、10% CO2）培養(yǎng)出了可以達到后續(xù)實驗要求的菌濃度。2015年，Reunanen等[44]用相同培養(yǎng)基（85% N2、10% CO2、5% H2）達到了同樣的效果。將黏蛋白直接或純化后配制成培養(yǎng)基都能成功培養(yǎng)A. muciniphila，但2 種培養(yǎng)基培養(yǎng)效果的比較還鮮有報道。2010年，Png等[45]從收集到的病人的膀胱液中提取和純化黏蛋白，將其作為唯一碳源培養(yǎng)A. muciniphila。豬源黏蛋白是大多數(shù)報道中A. muciniphila培養(yǎng)基的關(guān)鍵成分，人源黏蛋白是第2種用于其培養(yǎng)的黏蛋白。未來嘗試用其他種類黏蛋白培養(yǎng)A. muciniphila，比較培養(yǎng)效果，將會給探索黏蛋白和A. muciniphila的“特殊關(guān)系”提供證據(jù)。

腦心浸液肉湯（brain heart infusion broth，BHI）營養(yǎng)豐富，常用于菌種擴增，包括A. muciniphila的培養(yǎng)[15,46]。Shin[26]、Li Jin[47]、Ouwerkerk[29]以及Greer[48]等各自通過在BHI培養(yǎng)基中添加一定量的黏蛋白對A. muciniphila進行培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)能夠滿足其生長的營養(yǎng)要求，這種培養(yǎng)方式逐漸被推廣。哥倫比亞肉湯培養(yǎng)基對A. muciniphila的培養(yǎng)也具有效果，Ganesh等[49]進行了驗證。2016年，Plovier等[27]對黏蛋白基礎(chǔ)培養(yǎng)基進行改造，用質(zhì)量濃度16 g/L大豆蛋白胨、4 g/L蘇氨酸以及25 mmol/L混合糖（葡萄糖、N-乙酰葡萄糖胺）來代替黏蛋白，結(jié)果發(fā)現(xiàn)能夠達到相近的培養(yǎng)效果。

由以上可知，A. muciniphila在不含黏蛋白的培養(yǎng)基中也能生長，可能是環(huán)境選擇讓其使用其他碳源維持生存，而菌體是否出現(xiàn)變化有待探索。同時黏蛋白和其他碳源培養(yǎng)A. muciniphila的效果區(qū)別目前鮮有報道闡明，黏蛋白對其生長的特異性也亟待證明。A. muciniphila培養(yǎng)方式的不斷探索對分離方法具有很大的指導意義，也能更好地進行體外實驗和動物實驗。

3 A. muciniphila在不同人群的定植比較

腸道菌群的多樣性因個體差異（年齡、飲食和健康狀況等）產(chǎn)生巨大的差距，且往往通過一種菌屬的種類、數(shù)量和豐度等能夠體現(xiàn)[50-52]。在不同年齡階段，A. muciniphila的定植情況也具有一定的差異：年輕人糞便中A. muciniphila數(shù)量比老年人低，可能是老年人更注重身體健康，飲食較為平衡[22,30,53]；中國百歲老人的A. muciniphila豐度明顯弱于未滿百歲人群[54]，且歐洲成年人豐度較老年人更高[17]；嬰兒的豐度和定植率均低于成年人[17,30]，但在一年內(nèi)會達到成年人水平[17]。對年齡與A. muciniphila的相關(guān)性分析還需進一步研究，擴大樣本量和優(yōu)化檢測技術(shù)是首要問題。

因地域不同，人群居住的環(huán)境和飲食結(jié)構(gòu)存在差異，可能對一些菌群的定植存在影響：巴西人群A. muciniphila的定植率約79.17%[55]，歐洲人群約為74.70%，而中國南方人群約為51.74%[30]；A. muciniphila在澳大利亞的自閉癥兒童糞便中的豐度較正常兒童低[16]，而意大利[56]和美國[57]的自閉癥兒童該菌群豐度比正常兒童要高。

腸道炎癥疾病患者體內(nèi)A. muciniphila的豐度較常人低[13,58-59]，超重或肥胖人群以及Ⅱ型糖尿病患者體內(nèi)A. muciniphila的數(shù)量、豐度都較常人低[60-61]。通過控制飲食、服用益生元和減肥手術(shù)等方式能夠使A. muciniphila的數(shù)量、豐度升高[22,62]，并且常鍛煉的運動員腸道菌群的多樣性更高，A. muciniphila數(shù)量明顯高于肥胖和代謝異常的人群[63]，說明合理飲食、作息規(guī)律以及適當鍛煉可以使A. muciniphila數(shù)量和豐度保持在一個較高的水平，也間接證明A. muciniphila可作為衡量身體健康狀況的潛在指標。

人類黏膜較為發(fā)達，Akkermansia屬作為定植在宿主黏液層的腸道菌群，具有得天獨厚的優(yōu)勢[33,37,64]。在正常飲食狀態(tài)下，A. muciniphila可能會優(yōu)先吸收食物中的營養(yǎng)而不是降解黏蛋白，其增殖較為平穩(wěn)。受試人群主要食用膳食纖維為主的食物來限制卡路里的攝入（比正常生活狀態(tài)下的飲食營養(yǎng)要低）并持續(xù)6 周后，宏基因組測序結(jié)果顯示，相對于起始狀態(tài)A. muciniphila的豐度較低[22]，這說明A .muciniphila在不同物種體內(nèi)定植表達和功能調(diào)控具有一定的差異，且不同個體腸道中定植的Akkermansia屬可能不是A. muciniphila，發(fā)揮出的作用也有所不同。

4 結(jié) 語

Akkermansia屬基因組信息的缺乏使其在腸道微生態(tài)和宿主機體健康的研究中長久被低估。A. muciniphila約占腸道微生物總量的1%～3%，是人體腸道中的優(yōu)勢菌群之一[17,25]，而Akkermansia屬的定量常用A. muciniphila的特異性引物進行分析。雖然A. muciniphila的特異性引物也能擴增A. glycaniphila基因序列，但可能無法識別Akkermansia屬所有菌種，且A. muciniphila可能只占該屬的一小部分，在一定程度上Akkermansia屬在不同宿主上的定性或定量存在低估或偏差。目前關(guān)于A. muciniphila的研究成果中，其數(shù)量的增長或降低多數(shù)都是通過此對引物進行定量，而無法排除A. glycaniphila或其他Akkermansia屬的干擾，對結(jié)果產(chǎn)生了一定誤導。應合理、巧妙地利用現(xiàn)有資源，對現(xiàn)有分型的Akkermansia屬進行基因水平上的分析，找到差異性和特異性，從而可以挑出具有特異性的Akkermansia屬進行針對性的研究。A. muciniphila在人體內(nèi)定植豐度與肥胖和Ⅱ型糖尿病常成負相關(guān)[65-66]，而經(jīng)過膳食或益生元補充等調(diào)控后，在改善機體健康的同時，A. muciniphila豐度也相應恢復甚至升高[21,25,67]，可選擇其在這類病癥中作為腸道微生物的生物標記[68]，因此A. muciniphila與健康息息相關(guān)。在精準醫(yī)療盛行的未來[69-71]，通過結(jié)合這類技術(shù)，可以對與Akkermansia屬相關(guān)的病癥進行分析，針對目標菌種精準調(diào)控[72]，甚至通過移植或服用目標菌株來改善機體健康。

A. muciniphila作為定植在黏液層中可特異性降解黏蛋白的腸道菌，與腸道健康緊密聯(lián)系，但是鮮有證據(jù)直接證明其改善機體代謝。杯狀細胞主要負責分泌大部分黏液層，黏液層在上皮細胞保留了高濃度的抑菌分子，且潘氏細胞分泌的防御素也充滿在小腸黏液層的濾泡腺中，A. muciniphila在外黏液層中活動，在慢性病前期會放出信號，其數(shù)量和豐度也會降低，在中后期更加明顯[22,33,60,68,73]，這可能是因為在病癥較為嚴重時高濃度抑菌物質(zhì)和毒性物質(zhì)充斥在周邊，其生存環(huán)境較為惡劣。而在健康機體腸道黏液層中，A. muciniphila在分解黏蛋白時促進杯狀細胞合成更多黏蛋白，二者相互促進[28,64]，可能作為“友好因子”刺激杯狀細胞始終保持活躍狀態(tài)，調(diào)節(jié)機體腸道健康和加強腸道屏障。關(guān)于急性腸道疾病和A. muciniphila之間的聯(lián)系還少出現(xiàn)報道，這可能是因為A. muciniphila在腸道中的潛在作用是抵抗機體慢性病，通過釋放活性因子引起一系列機體反饋從而調(diào)控宿主健康。總之，Akkermansia屬作為在宿主腸道中廣泛定植的菌屬，且目前還沒有表現(xiàn)出任何致病性[33]，應加快完善A. muciniphila的研究，早日將其列入安全益生菌的范疇，清晰分子作用機制，為人類健康助力。

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