高延宏

摘 要：本文對(duì)百蕊草口服液工藝進(jìn)行研究。采用高校液相測(cè)定了百蕊草口服液中山奈酚的含量，固定相為USA Agilent ZORBAXSB-C18柱（5μm，4.6mm×150mm），甲醇-0.4%磷酸（55：45）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為428nm；山奈酚對(duì)照品在進(jìn)樣量為0.3～1.5μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，呈良好的線性關(guān)系?；亓魈崛∨c水提醇沉制得百蕊草口服液均為淺褐色透明氣微香，味甘、苦?；亓魈崛≈频冒偃锊菘诜纳侥畏雍扛哂谒岽汲林频冒偃锊菘诜骸?/p>

關(guān)鍵詞：百蕊草口服液；制備；工藝

百蕊草為檀香科植物百蕊草ThesiumchinenseTurcz.的全草。百蕊草具有清熱解毒，補(bǔ)腎澀精的功效。百蕊草常用于急性乳腺炎、肺炎、扁桃體炎、上呼吸道感染、頭昏、遺精等?！顿F州民間方藥集》記載：“治頭昏體弱，腰痛，遺精，滑精?！卑偃锊莺偃锊菟亍?，5，7，4′-四羥基黃酮-3-葡萄糖-鼠李糖甙（3，5，7，4′-tetrahydrox-yflavone-3-glucosyl-rhamnoside）、紫云英甙（astragalin）、琥珀酸、D-甘露醇、山柰酚、3-葡萄鼠李糖甙山柰酚等成分。百蕊草在體外具廣譜抗菌活性、止咳、祛疫、平喘等作用。本文對(duì)百蕊草口服液工藝進(jìn)行研究。

1 儀器與試藥

電子天平FA1004型（南京華欣分析儀器制造有限公司）；LU230四元低壓梯度液相色譜分析系統(tǒng)（大連依利特分析儀器有限公司）；CO-Ⅳ色譜柱溫箱（恒溫柱箱）（天津琛航科苑科技發(fā)展有限公司）；WIGGENS WT2加熱制冷循環(huán)器（北京桑翌實(shí)驗(yàn)儀器研究所）；10升超純水器water-10n（中科儀（北京）儀器有限公司）；IKA RV10數(shù)顯型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海泰坦科技股份有限公司）；新芝scientz-T超聲波提取機(jī)（寧波新芝生物科技股份有限公司）；UV-5500（PC）掃描型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海元析儀器有限公司）。山奈酚對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所提供）。甲醇（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）、磷酸氫二鈉（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）、三乙胺（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）、醋酸（杭州蕭山創(chuàng)益化工儀器有限公司）、乙酸銨（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）、磷酸（杭州蕭山創(chuàng)益化工儀器有限公司）、乙腈（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）。

2 制備百蕊草口服液

2.1 回流提取

稱(chēng)重后，將百蕊草在洗藥機(jī)水槽內(nèi)進(jìn)行淋洗，投入提取提取罐內(nèi)，加7倍的55%的乙醇，浸潤(rùn)三十分鐘，在加熱回流提取時(shí)間為四十五分鐘（加熱溫度為75℃），過(guò)濾，真空濃縮提取液并回收乙醇，回收乙醇，至無(wú)醇味，加純化水至200升，灌裝，滅菌，即得百蕊草口服液。

2.2 水提醇沉

稱(chēng)重后，將百蕊草在洗藥機(jī)水槽內(nèi)進(jìn)行淋洗，投入提取提取罐內(nèi)，煎煮兩遍，第一遍加純化水6倍量，溫浸30分鐘后煎煮60分鐘；第二遍加純化水4倍量，煎煮60分鐘，過(guò)濾，合并濾液。將濾液濃縮至相對(duì)密度1.25（60攝氏度測(cè)）。冷卻至室溫，放至醇洗罐中緩緩加入3倍乙醇，邊加邊攪拌至均勻，靜止24小時(shí)。取上清藥液，回收乙醇，至無(wú)醇味，加純化水至200升，灌裝，滅菌，即得百蕊草口服液。

3 測(cè)定方法

3.1 色譜條件

色譜柱為USA Agilent ZORBAXSB-C18柱（規(guī)格4.6mm×150mm，5μm）；甲醇-0.4%磷酸（55：45）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為428nm；流速1.0mL·min-1；柱溫：30℃[1-6]。

3.2 供試品溶液的制備

取百蕊草口服液適量，精密量取1ml，置10mL量瓶中，加80%甲醇適量，超聲處理5分鐘使溶解，放置至室溫，加80%甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過(guò)，即得。

3.3 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取山奈酚對(duì)照品約10mg，置50mL容量瓶中，用20%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取5mL至10mL容量瓶中，用80%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得（每1mL溶液中含山奈酚100.0μg）。

3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

分別吸入標(biāo)準(zhǔn)品3μl，6μl，9μl，12μl，15μl注入HPLC，以進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)，峰面積積分值A(chǔ)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。試驗(yàn)表明，山奈酚對(duì)照品在進(jìn)樣量為0.3～1.5μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

3.5 精密度試驗(yàn)

精密吸取山奈酚對(duì)照品溶液重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)定峰面積積分值，對(duì)照品峰面積積分值的RSD為0.88%。

3.6 重現(xiàn)性試驗(yàn)

分別稱(chēng)取同批百蕊草口服液樣品6份，按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)含量測(cè)定項(xiàng)下方法測(cè)定含量，并計(jì)算樣品的RSD值為0.98%，此含量測(cè)定方法的重現(xiàn)性良好。

3.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一對(duì)照品溶液與同一供試品溶液，分別在0，4，8，12進(jìn)樣測(cè)定，樣品溶液的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)表明，室溫下12h內(nèi)測(cè)定峰面積基本一致。

3.8 回收率試驗(yàn)

采用加樣回收試驗(yàn)，取已知含量的同一批供試品各6份，精密稱(chēng)定，分別精密添加一定量的山奈酚對(duì)照品，按供試品制備所述方法測(cè)定含量（同時(shí)測(cè)定樣品含量），計(jì)算回收率。6次測(cè)定的平均回收率為99.3%，RSD為0.81%。

4 討論

分別考察甲醇-水-三乙胺（25∶75：0.1），0.01mol/L磷酸氫二鈉-磷酸緩沖液（p H=2.2）-水（80：20），甲醇-水（80：20，含0.1%三乙胺，甲醇-2%醋酸水溶液（18∶82），甲醇：乙酸銨溶液（33：67體積比），乙腈-水（體積比為65∶35），甲醇-0.1%磷酸溶液（30：70），甲醇-0.4%磷酸（55：45）不同比例的流動(dòng)相，結(jié)果以甲醇-0.4%磷酸（55：45）為流動(dòng)相，供試品各峰分離效果最好，故選用甲醇-0.4%磷酸（55：45）為流動(dòng)相?；亓魈崛∨c水提醇沉制得百蕊草口服液均為淺褐色透明氣微香，味甘、苦。回流提取制得百蕊草口服的山奈酚含量高于水提醇沉制得百蕊草口服液。

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