段正贏,周志忠,周丹娜,楊克禮,郭 銳,劉 威,劉澤文,袁芳艷,焦祖武,田永祥
(1.湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所/農(nóng)業(yè)部畜禽細(xì)菌病防治制劑創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/動(dòng)物胚胎工程及分子育種湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖北 武漢 430064;2.湖北省洪湖市農(nóng)業(yè)綜合執(zhí)法大隊(duì),湖北 洪湖 433200)
豬瘟(Classical swine fever,CSF)是由豬瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起豬的一種高度接觸性傳染病,被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)列為必須報(bào)告的傳染病[1],我國(guó)將豬瘟列入一類動(dòng)物疫病病種,是目前危害我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展的主要疫病,也是我國(guó)重點(diǎn)防范的主要疫病。1956年我國(guó)研制出了豬瘟兔化弱毒疫苗,經(jīng)免疫的豬具有持久免疫能力,也減少了被其他病毒感染的概率,該疫苗被認(rèn)為是最具有安全性和免疫原性最好的疫苗[2]。至今該疫苗仍被許多國(guó)家應(yīng)用于豬瘟病毒的防控。
目前,規(guī)模豬場(chǎng)在豬瘟疫苗高密度免疫下,豬瘟的發(fā)生與流行已逐步減少,但“非典型豬瘟”以及疫苗免疫失敗現(xiàn)象仍時(shí)有發(fā)生。對(duì)豬群進(jìn)行抗體水平監(jiān)測(cè),是我們?cè)u(píng)價(jià)免疫效果及優(yōu)化免疫程序的重要手段。為了使豬群保持較高而整齊的豬瘟抗體水平,保證豬瘟疫苗免疫確實(shí)有效,2017年對(duì)湖北洪湖某豬場(chǎng)的豬瘟疫苗免疫抗體水平進(jìn)行了檢測(cè)與分析,為豬場(chǎng)豬瘟疫苗免疫效果的評(píng)價(jià)與免疫程序的優(yōu)化提供參考與指導(dǎo)。
該場(chǎng)存欄母豬610頭,種公豬13頭。該豬場(chǎng)豬瘟疫苗免疫程序:種豬一年接種4次,免疫劑量為4頭份/頭;商品豬21日齡進(jìn)行首免,60日齡進(jìn)行二免,免疫劑量為2頭份/頭。根據(jù)該豬場(chǎng)養(yǎng)殖數(shù)量與豬瘟疫苗免疫現(xiàn)狀,分別抽檢后備母豬血清樣品20份,妊娠母豬血清樣品30份,哺乳母豬血清樣品50份,種公豬血清樣品13份,21日齡(首免前)哺乳仔豬血清樣品100份,42日齡(首免后21 d)保育豬血清樣品100份,81日齡(二免后21 d)肥育豬血清樣品100份,共計(jì)抽檢血清樣品413份。血液樣品采集時(shí)間為2017年10月,血樣在實(shí)驗(yàn)室分離血清后,置-20℃冰箱中保存,備用。
豬瘟抗體ELISA檢測(cè)試劑盒為IDEXX公司生產(chǎn),其余試劑、儀器及耗材均由農(nóng)業(yè)部畜禽細(xì)菌病防治制劑創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供。
采用IDEXX公司生產(chǎn)的豬瘟抗體ELISA檢測(cè)試劑盒對(duì)所有血清樣品進(jìn)行抗體檢測(cè),檢測(cè)程序和判斷標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格參照試劑盒使用說(shuō)明進(jìn)行操作。樣品豬瘟抗體判定標(biāo)準(zhǔn):阻斷率≥40%為陽(yáng)性,阻斷率≤30%為陰性,30%<阻斷率<40%為可疑。并計(jì)算和分析抗體的離散度、平均值。
豬瘟抗體檢測(cè)樣品共計(jì)413份,其中種豬群檢測(cè)樣品113份,商品豬群300份。種公豬的抗體陽(yáng)性率為100%,離散度為13%,平均值為83,表明抗體水平高且整齊度較好;后備母豬、妊娠母豬及哺乳母豬的抗體陽(yáng)性率分別為100%、97%、98%,離散度分別為23%、21%、17%,平均值分別為 78、79、81,顯示抗體水平均較高且較整齊。哺乳仔豬、保育豬及肥育豬的抗體陽(yáng)性率分別為67%、54%、93%,離散度分別為39%、45%、24%,平均值分別為 53、49、67,可以看出,哺乳仔豬和保育豬抗體水平的整齊度和效價(jià)均不高,肥育豬抗體水平較整齊且較高。結(jié)果詳見(jiàn)表1。
表1 豬瘟抗體檢測(cè)
目前,疫苗免疫接種仍是控制豬瘟的最重要手段,而豬瘟疫苗免疫抗體水平檢測(cè)是評(píng)價(jià)豬群豬瘟疫苗免疫效果的主要方法,對(duì)指導(dǎo)豬場(chǎng)制定科學(xué)的免疫程序至關(guān)重要[3]。本次檢測(cè)的豬場(chǎng)種豬群的抗體平均值均在78以上,抗體陽(yáng)性率均達(dá)97%以上,離散度均在23%以下,顯示抗體效價(jià)較高,整齊度較好,豬瘟疫苗免疫效果較好,免疫程序合理科學(xué)。
但在商品豬群的豬瘟抗體檢測(cè)中,哺乳仔豬群首免前母源抗體陽(yáng)性率達(dá)67%,抗體平均值為53,表明此時(shí)母源抗體尚維持在較高水平,而選擇此時(shí)進(jìn)行豬瘟疫苗的首次免疫,疫苗中的抗原將被較高水平的母源抗體所中和,疫苗抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生的免疫應(yīng)答反應(yīng)十分有限,導(dǎo)致首次免疫后豬瘟抗體水平提高緩慢,至首免后21 d的保育豬群免疫抗體效價(jià)平均值為49,離散度達(dá)45%,抗體陽(yáng)性率僅為54%,顯示抗體滴度較低,整齊度較差。而二免后21 d的肥育豬群,免疫抗體陽(yáng)性率達(dá)93%,抗體平均值為67,離散度為24%,顯示抗體水平較高且整齊度較好。表明該豬場(chǎng)首免時(shí)間應(yīng)調(diào)整,應(yīng)在連續(xù)監(jiān)測(cè)母源抗體水平變化后進(jìn)行優(yōu)化,調(diào)整其免疫程序,而二免的免疫時(shí)機(jī)掌握較準(zhǔn)確,疫苗免疫效果較理想。
因此,抗體水平檢測(cè)對(duì)調(diào)整優(yōu)化免疫程序、保證疫苗免疫效果至關(guān)重要。通過(guò)此次檢測(cè),也表明我國(guó)的豬瘟疫苗免疫效果確實(shí),在豬瘟的防控中有不可替代的作用。按照國(guó)家《動(dòng)物疫病防控中長(zhǎng)期規(guī)劃(2012—2020年)》,豬瘟是列入凈化的病種之一,目前我國(guó)已研發(fā)出標(biāo)記疫苗及配套的檢測(cè)試劑盒,豬瘟的防控和凈化又有了更為有力的工作手段。