覃貴勇 許彥 劉露

不同農(nóng)藥聯(lián)用對(duì)松材線蟲的作用研究

覃貴勇，許 彥，劉 露

重慶三峽職業(yè)學(xué)院，重慶 404155

摘要? 以阿維菌素和甲維鹽為主藥，選用市場上常用農(nóng)藥，開展農(nóng)藥聯(lián)用室內(nèi)毒力測定和林間藥效試驗(yàn)。結(jié)果表明，從各單劑農(nóng)藥有效成分LC50可以看出，甲維鹽的有效成分LC50最小，阿維菌素和噻唑磷次之，吡蟲啉相對(duì)較大，毒死蜱最大，其有效成分LC50分別為0.60、3.20、3.69、19.62和32.41 mg/L。供試的所有聯(lián)用農(nóng)藥CTC均大于120，表現(xiàn)為增效作用。其中以阿維菌素+毒死蜱、甲維鹽+毒死蜱增效最明顯，CTC值分別為440.99和451.48。甲維鹽+噻唑磷、甲維鹽+吡蟲啉、阿維菌素+吡蟲啉、阿維菌素+噻唑磷的增效作用次之，CTC值分別為248.81、208.10、194.33和174.17。甲維鹽+阿維菌素增效作用最小，CTC值為120.37。選用阿維菌素+毒死蜱、甲維鹽+毒死蜱做林間藥效試驗(yàn)，結(jié)果表明2種配方防治效果分別為78.7%、89.4%。

關(guān)鍵詞 松材線蟲;農(nóng)藥聯(lián)用;阿維菌素;甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽;毒死蜱;噻唑磷;吡蟲啉

中圖分類號(hào)：S763.18 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：2095-3305（2018）06-001-03

DOI： 10.19383/j.cnki.nyzhyj.2018.06.001

Effects of Different Pesti cide Combinations on Bursaphelenchus xyloph ilus

QIN Gui-yong? et al（Chongqing Three Gorges Polytechnic College， Chongqing 404155）

Abstract Abamectin and emamectin benzoate were used as the main drugs， and the commonly used pesticides in the market were selected to carry out laboratory toxicity test and forest efficacy test for pesticide combinations. The results showed that the effective component LC50 of emamectin benzoate was the smallest（0.60 mg/L）， followed by abamectin and fosthiazate， the effective component LC50 of chlorpyrifos was the largest（32.41 mg/L）. CTC of all the tested pesticides was greater than 120， showing synergistic effect. The synergistic effects of abamectin+chlorpyrifos and emamectin benzoate+chlorpyrifos were the most obvious， and the CTC values were 440.99 and 451.48， respectively.The CTC values of emamectin benzoate+fosthiazate， emamectin benzoate+imidacloprid， aba mectin+imidacloprid， and abamectin+ fosthiazate were 248.81， 208.10， 194.33 and 174.17， respectively. The synergistic effect of emamectin benzoate+abam ectin was the least， and the CTC value was 120.37. The abamectin+chlorpyrifos， emamectin benzoate+chlorpyrifos were selected to carry out forest efficacy test. The results showed that the control effects of the two pesticide combinations were 78.7% and 89.4%， respectively.

Key words? ?Bursaphelenchus xylophilus; Pesticide combinations; Abam ectin; Emamectin benzoate; Chlorpyrifos; Fosthiazate; Imidacloprid

松材線蟲病是由松材線蟲[Bursaphelenchus xylophilus（Steiner & Buhrer） Nickle]侵入松樹引起的一種毀滅性病害。三峽庫區(qū)是我國松材線蟲病重點(diǎn)發(fā)生區(qū)域，2006—2015年，僅重慶市松材線蟲病疫點(diǎn)就從24個(gè)增加到55個(gè)，危害趨勢明顯[1]。萬州區(qū)位于重慶東北部，地處三峽庫區(qū)腹地，也是松材線蟲病發(fā)生較嚴(yán)重的區(qū)域[2]。近年來，關(guān)于松材線蟲病防治的研究較多，主要包括植物檢疫、疫木管控、防治媒介昆蟲、生物防治和化學(xué)防治等[3]。在化學(xué)防治方面，篩選了以阿維菌素、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽等為代表的高效藥劑[4-5]。為了提高藥效，部分學(xué)者在篩選有效藥劑的基礎(chǔ)上，開展了農(nóng)藥聯(lián)用試驗(yàn)，取得了一定的成效[6-9]。但是在此類研究中，存在聯(lián)用農(nóng)藥毒性較高，或藥劑成分非常見藥劑，或?yàn)橥愋娃r(nóng)藥聯(lián)用等問題。筆者以阿維菌素和甲維鹽為主藥，選用市場上常用農(nóng)藥，開展農(nóng)藥聯(lián)用室內(nèi)毒力測定和林間藥效試驗(yàn)，為重慶萬州區(qū)松材線蟲化學(xué)防治提供參考。

1 材料與方法

1.1? 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試藥劑? 阿維菌素（5%阿維菌素乳油，河南昊瀾化工科技有限公司）;甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽，海利爾藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，后簡稱“甲維鹽”）;毒死蜱（40%毒死蜱乳油，江西巴菲特化工有限公司）;噻唑磷（5%噻唑磷微乳劑，河南三農(nóng)農(nóng)用化工有限公司）;吡蟲啉（20%吡蟲啉可溶液劑，海利爾藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司）。

根據(jù)預(yù)備試驗(yàn)結(jié)果，將以上藥劑及其混合制劑（1∶1混合）配制成以下濃度備用。阿維菌素（500.00、250.00、125.00、62.50、31.25 μl/L），甲維鹽（250.00、125.00、62.50、31.25、15.625 μl/L），毒死蜱（1 000.00、500.00、250.00、125.00、62.50 μl/L），噻唑磷（1 000.00、500.00、250.00、125.00、62.50 μl/L），吡蟲啉（1 000.00、500.00、250.00、125.00、62.50 μl/L），阿維菌素+毒死蜱（500.00、250.00、125.00、62.50、31.25 μl/L），阿維菌素+噻唑磷（500.00、250.00、125.00、62.50、31.25 μl/L），阿維菌素+吡蟲啉（500.00、250.00、125.00、62.50、31.25 μl/L），甲維鹽+毒死蜱（500.00、250.00、125.00、62.50、31.25 μl/L），甲維鹽+噻唑磷（500.00、250.00、125.00、62.50、31.25 μl/L），甲維鹽+吡蟲啉（500.00、250.00、125.00、62.50、31.25 μl/L），甲維鹽+阿維菌素（500.00、250.00、125.00、62.50、31.25 μl/L）。

1.1.2 供試蟲源 松材線蟲是從重慶市萬州區(qū)林業(yè)站提供的松材線蟲病疫木中分離得到，并在室內(nèi)用灰霉病菌絲體繁殖獲得大量供試蟲源。用漏斗分離法，將繁殖后的松材線蟲分離出來，用離心機(jī)在1 000 r/min下離心2 min，獲得高濃度松材線蟲懸浮液，再將高濃度松材線蟲懸浮液稀釋至2 000條/ml左右的松材線蟲懸浮液備用（松材線蟲活蟲率在80%以上）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 室內(nèi)毒力測定 取平底培養(yǎng)板（96孔）若干，每孔中加入50 μl松材線蟲懸浮液（約100頭/孔）和50 μl相應(yīng)的藥液（加入藥液后，藥液濃度減半），每藥液5個(gè)梯度濃度處理，對(duì)照組加入蒸餾水，每處理3次重復(fù)。將處理好的培養(yǎng)板蓋好，放入25℃恒溫箱保溫培養(yǎng)24 h，用吸管吸取線蟲平展于玻片上，在體視顯微鏡下觀察記錄蟲口總數(shù)及死亡蟲口數(shù)。由于松材線蟲較小，在結(jié)果檢查和數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)時(shí)比較困難，所以每次一般只做1～2種藥劑，每種藥劑都設(shè)置空白對(duì)照。

1.2.2 林區(qū)藥效試驗(yàn) 選取效果較好的2種藥劑組合，應(yīng)用于林區(qū)防治。試驗(yàn)地位于重慶市萬州區(qū)甘寧鎮(zhèn)紅巖村，林區(qū)馬尾松胸徑約30 cm，松材線蟲病年發(fā)生率約10%，地勢平坦，利于試驗(yàn)進(jìn)行。施藥時(shí)間為2018年5月下旬。首先，將藥劑按1∶1混合，再稀釋10倍，注入50 ml塑料小尖嘴瓶（藥液自流裝置）中，每瓶30 ml，貼好標(biāo)簽備用。然后，選取300株胸徑約30 cm，生長勢相似的馬尾松，隨機(jī)選擇確定處理方法（每種藥劑組合100株，對(duì)照100株），并做好標(biāo)記。在確定為藥劑處理的馬尾松上，用電鉆在離地1 m處，斜向下45°鉆直徑5 ml，深度5 cm左右小孔。取出裝有對(duì)應(yīng)藥劑的尖嘴瓶，插入樹孔，用針在尖嘴瓶底扎一小孔，確保藥液能順利流入樹體。對(duì)照松樹不做處理，只做標(biāo)記。最后，在10月中旬，依次檢查各處理松樹的死亡情況。

1.2.3 數(shù)據(jù)處理 使用SPSS 17.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析。部分計(jì)算公式如下：

死亡率（%）=（死亡數(shù)/供試蟲數(shù)）×100（1）

校正死亡率（%）=[（處理組死亡率-對(duì)照死亡率）/（1-對(duì)照死亡率）]×100（2）

枯死率（%）=（枯死株數(shù)/調(diào)查總數(shù)）×100（3）

防治效果（%）=[（空白對(duì)照區(qū)枯死率-處理區(qū)枯死率）/空白對(duì)照區(qū)枯死率]×100（4）

試驗(yàn)將藥劑濃度轉(zhuǎn)化成濃度對(duì)數(shù)值作為x，校正死亡率轉(zhuǎn)化成幾率值作為y，擬合直線方程，再根據(jù)方程計(jì)算藥劑致死中濃度LC50值。另外，試驗(yàn)采用孫云沛的方法[10]計(jì)算聯(lián)用農(nóng)藥的共毒系數(shù)（CTC），以CTC值評(píng)判2種藥劑的聯(lián)合毒力作用。CTC<80為拮抗作用，CTC>120為增效作用，CTC在80～120為相加作用。

2 結(jié)果與分析

2.1 農(nóng)藥對(duì)松材線蟲的室內(nèi)毒力測定

從表1可以看出，不同濃度藥劑處理下，松材線蟲死亡率除部分藥劑在高濃度區(qū)域差異不顯著外，其他差異顯著。不同對(duì)照組松材線蟲死亡率差異明顯，但死亡率都在20%以下，對(duì)照組與藥劑處理組死亡率差異明顯。校正死亡率隨濃度的增加而增大。

根據(jù)各處理藥劑的濃度和校正死亡率，擬合直線方程并計(jì)算制劑LC50。根據(jù)農(nóng)藥的有效成分含量計(jì)算有效成分LC50（表2）。從表中相關(guān)系數(shù)R值可以看出，直線方程擬合效果好。從幾種單劑農(nóng)藥的制劑LC50可以看出，甲維鹽的制劑LC50最小，阿維菌素、毒死蜱、噻唑磷和吡蟲啉間差異不大;從有效成分LC50可以看出，甲維鹽的有效成分LC50仍然最?。?.60 mg/L），阿維菌素和噻唑磷次之（分別為3.20、3.69 mg/L），吡蟲啉相對(duì)較大（19.62 mg/L），毒死蜱最大（32.41 mg/L）。

根據(jù)各處理農(nóng)藥制劑的LC50計(jì)算CTC。從聯(lián)用農(nóng)藥CTC值可以看出，供試的所有聯(lián)用農(nóng)藥CTC都大于120，表現(xiàn)為增效作用。其中以阿維菌素+毒死蜱、甲維鹽+毒死蜱增效最明顯，CTC值分別為440.99和451.48。甲維鹽+噻唑磷、甲維鹽+吡蟲啉、阿維菌素+吡蟲啉、阿維菌素+噻唑磷的增效作用次之，CTC值分別為248.81、208.10、194.33和174.17。甲維鹽+阿維菌素增效作用最小，CTC值為120.37。

2.2 林間藥效

根據(jù)室內(nèi)毒力測定結(jié)果，選擇阿維菌素+毒死蜱和甲維鹽+毒死蜱作為林間藥效的配方藥劑。在林間試驗(yàn)實(shí)施后，按計(jì)劃通過調(diào)查各處理松樹的死亡情況，計(jì)算供試藥劑防效。從表3可以看出，阿維菌素+毒死蜱、甲維鹽+毒死蜱和對(duì)照組均有松樹枯死現(xiàn)象，枯死率分別為2.0%、1.0%和9.4%，對(duì)照組松樹枯死率高于藥劑處理組。阿維菌素+毒死蜱和甲維鹽+毒死蜱防治效果分別為78.7%、89.4%。

3 結(jié)論與討論

通過對(duì)比5種農(nóng)藥單獨(dú)使用時(shí)的制劑LC50和有效成分LC50，可以基本確定甲維鹽對(duì)松材線蟲的毒力效果最好，阿維菌素和噻唑磷次之，吡蟲啉和毒死蜱效果最差。國內(nèi)對(duì)于甲維鹽、阿維菌素和吡蟲啉對(duì)松材線蟲作用的研究報(bào)道較多。如來燕學(xué)等[4]研究報(bào)道，農(nóng)藥甲維鹽、阿維菌素和吡蟲啉對(duì)松材線蟲1 h有效成分LC50分別為0.3、4.5和25.2 mg/L，與該試驗(yàn)24 h有效成分LC50基本吻合。但夏彥飛等[11]報(bào)道，吡蟲啉對(duì)松材線蟲48 h有效成分LC50為154.88 g/L，與該試驗(yàn)結(jié)果差異很大。

從農(nóng)藥聯(lián)用后的毒力試驗(yàn)結(jié)果來看，毒死蜱、噻唑磷和吡蟲啉分別與阿維菌素和甲維鹽聯(lián)用后，對(duì)松材線蟲均表現(xiàn)出增效作用，特別是毒死蜱與阿維菌素和甲維鹽聯(lián)用增效作用最明顯。在田間藥效試驗(yàn)結(jié)果也可以看出，毒死蜱分別與阿維菌素和甲維鹽聯(lián)用均能有效防治松材線蟲病，防治效果分別為78.7%和89.4%。毒死蜱作為一種常用殺蟲劑，在對(duì)線蟲毒殺作用方面的研究并不多，特別是對(duì)松材線蟲的毒殺作用研究極少，如夏彥飛等[12]報(bào)道5%丁硫·毒死蜱顆粒劑對(duì)松材線蟲有一定的毒力作用。但是，有多篇文獻(xiàn)報(bào)道毒死蜱可有效防治松材線蟲媒介昆蟲——松褐天牛[13-15]。從而可以看出，選取毒死蜱與阿維菌素和甲維鹽聯(lián)用應(yīng)用到松材線蟲病的防治中，可以起到一舉兩得的作用。

該試驗(yàn)所使用的藥劑都為商品農(nóng)藥，試驗(yàn)結(jié)果還不能完全代表藥劑本身對(duì)松材線蟲的作用，需做原藥毒力試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證。在施藥方面，打孔注藥方式比較麻煩，費(fèi)時(shí)費(fèi)力。如要大范圍推廣應(yīng)用化學(xué)防治，必須尋找一種快速的施藥方式來解決該問題。

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