潘紅平 黃春梅 李廣鋒 朱旭瑤 徐巖 王瓊 楊素芳

(1.廣西大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院/廣西大學(xué)野生動(dòng)物研究所，南寧 530005； 2.廣西盛凱投資有限公司，南寧 530004)

穿山甲屬于脊索動(dòng)物門，脊椎動(dòng)物亞門，哺乳綱，鱗甲目，穿山甲科，穿山甲屬，現(xiàn)存穿山甲僅8種。鱗甲目為單型目，且為單科單屬，組成的物種少，其滅絕的危險(xiǎn)程度比其它任何同級(jí)(目)分類階元都要大，依據(jù)國際上分類階元優(yōu)先保護(hù)的原則，穿山甲應(yīng)當(dāng)予以優(yōu)先保護(hù)[1，2]。一旦這8種穿山甲全部滅絕，哺乳綱動(dòng)物將會(huì)永遠(yuǎn)喪失一個(gè)目的分支，帶來無可挽回的物種多樣性和遺傳多樣性的巨大損失！穿山甲體外覆有角質(zhì)鱗甲，鱗片間雜有稀疏硬毛。不具齒。吻尖、舌發(fā)達(dá)，前爪長(zhǎng)，適應(yīng)于挖掘蟻穴、舐食蟻類等昆蟲[3]。穿山甲多生長(zhǎng)于熱帶及亞熱帶地區(qū)。分布在東南亞、中國及非洲，在中國主要分布在長(zhǎng)江以南地區(qū)，包括廣西、廣東、云南等省區(qū)。中華穿山甲(Manispentadactyla)主要分布在中國和東南亞地區(qū)，馬來穿山甲(Manisjavanica)主要分布在越南、老撾、柬埔寨、緬甸、泰國、馬來西亞、印度尼西亞、菲律賓等東南亞各國，我國云南南部也有分布[4]。

穿山甲性涼味咸，能消腫潰癰，搜風(fēng)活絡(luò)，通經(jīng)下乳。主治瘡癰腫毒，風(fēng)寒濕痹，月經(jīng)停閉，乳汁不能殺蟲，行血，攻堅(jiān)散瘀，能經(jīng)治痹[5]。外用可止血其肉質(zhì)不僅味道鮮美，口感細(xì)膩，更可助弱撫正，行血健體。歷來被視為滋補(bǔ)上品。另外，現(xiàn)在一些醫(yī)學(xué)研究甚至還認(rèn)為，穿山甲具有防癌和預(yù)防心血疾病的功效，因此人們大量使用穿山甲。鑒于其傳統(tǒng)藥用、食用市場(chǎng)需求巨大，供需矛盾十分突出，長(zhǎng)期以來形成了亂捕濫殺的惡性局面。同時(shí)由于雜木林被砍伐，以人工杉木林、速生桉所取代，再加上土地的開發(fā)、旅游者增多和環(huán)境污染，使得穿山甲棲息地大量喪失，生態(tài)環(huán)境受到嚴(yán)重破壞，穿山甲面臨威脅，資源急速枯竭，已造成全球野生穿山甲種群數(shù)量急劇下降[6]，幾乎絕了跡。穿山甲列為我國二級(jí)保護(hù)動(dòng)物名錄，明文嚴(yán)禁濫殺和貿(mào)易，受到國家重點(diǎn)保護(hù)；在2014年，世界自然保護(hù)聯(lián)盟(IUCN )紅色名錄將中華穿山甲馬來穿山甲和從瀕危級(jí)(EN)提升為極度瀕危級(jí)(CR)；2016 年10 月，在第 17 屆《瀕危野生動(dòng)植物種國際貿(mào)易公約》(CITES)締約方大會(huì)上，各締約國通過了將所有 8 種穿山甲從附錄Ⅱ提升至附錄Ⅰ的決議，自2017年1月起穿山甲國際商業(yè)貿(mào)易被全面禁止。

穿山甲的救護(hù)、疾病防治、馴養(yǎng)繁殖是當(dāng)今的世界性難題。徐聰?shù)葘?duì)中華穿山甲人工飼養(yǎng)常見疾病治療和預(yù)防進(jìn)行了研究[7]，鄧斌等穿山甲人工馴養(yǎng)繁殖技術(shù)進(jìn)行了初步研究[8]，高天柱對(duì)長(zhǎng)尾穿山甲仿生態(tài)圈養(yǎng)行為保育進(jìn)行了研究[9]。近年來，我們參與了穿山甲的救護(hù)、疾病防治、馴養(yǎng)繁殖的工作，取得了初步進(jìn)展。下面就穿山甲的救護(hù)過程中一起穿山甲腸炎病的診治進(jìn)行總結(jié)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

馬來穿山甲(Manisjavanica)：來自廣西壯族自治區(qū)林業(yè)廳所屬的廣西珍稀瀕危野生動(dòng)物救護(hù)研究中心。

生化培養(yǎng)箱：購自杭州匯爾儀器設(shè)備有限公司(型號(hào)為SPX-1500)。

超凈工作臺(tái)：購自蘇凈集團(tuán)蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司(SW-CJ-2F)。

營(yíng)養(yǎng)瓊脂：購自廣東環(huán)凱微生物技術(shù)有限公司。

藥敏試紙：購自杭州天和微生物試劑有限公司。藥敏試紙敏感性判斷標(biāo)準(zhǔn)見表1。

1.2 臨床癥狀

患病穿山甲精神不振，常趴伏于屋角，不活動(dòng)，食欲減退、不進(jìn)食或是拒食，消瘦，頻繁作拉大便的姿勢(shì)。肚腹部膨脹，主要是胃內(nèi)容物滯于胃中發(fā)酵膨脹而產(chǎn)生大量氣體，胃部逐漸膨大、呼吸急促。用手按肚腹有脹滿且柔軟感，手敲有鼓音，肛門周圍粘有糞便?；疾≈衅谇爸槐憩F(xiàn)為排稀糞，糞便多而稀或呈水樣、淡黃、青綠、腥臭并帶膠凍樣黏液及膿樣物，或帶紅色血絲。眼結(jié)膜發(fā)紅或發(fā)紺，呼吸急促、困難、口唇蒼白。

1.3 剖檢情況

死亡的穿山甲為雌性，體重為3.70kg。經(jīng)過解剖發(fā)現(xiàn)，病死穿山甲的胃、十二指腸、大腸均充滿氣體和粘液狀液體，腸粘膜充血，直腸內(nèi)容物呈水樣、青綠、腥臭并有膠凍樣粘液；肝臟暗紅色，有血斑；肺部有出血點(diǎn)；心臟、膽囊、脾臟、腎臟、膀胱、卵巢和子宮等均無明顯病變。

表1 藥敏試紙敏感性判斷標(biāo)準(zhǔn)表

圖1 患病的穿山甲

圖2 患病穿山甲的糞便

圖3 死亡的穿山甲

1.4 細(xì)菌分離培養(yǎng)

無菌取樣，用消毒小剪刀在腸上剪一小口，將接種環(huán)從小口插入2cm，前后刮動(dòng)數(shù)次，取出腸的內(nèi)容物，培養(yǎng)皿靠近酒精燈，將接種環(huán)上的內(nèi)容物按照“連續(xù)劃線法”涂布到培養(yǎng)基上。同樣，在肝臟上剪一小口，將接種環(huán)從小口插入1cm，取出內(nèi)容物，涂布到培養(yǎng)基上。置于培養(yǎng)箱，37℃培養(yǎng)24h。革蘭氏染色，鏡檢。

圖4 穿山甲胃腸充血

圖5 穿山甲腸胃充氣

1.5 藥敏試驗(yàn)

無菌操作臺(tái)上，挑取菌落接種于肉湯中，置于培養(yǎng)箱，37℃培養(yǎng)24h，肉湯渾濁。取菌液均勻涂布于普通平板上，貼上藥敏試紙，每個(gè)培養(yǎng)皿貼5片藥敏試紙。置于培養(yǎng)箱，37℃培養(yǎng)8h，測(cè)量抑菌圈直徑。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 細(xì)菌分離和鏡檢結(jié)果

在平板上長(zhǎng)出灰白色、半透明、邊緣整齊、圓形、隆起的菌落，鏡檢為革蘭氏陰性。

2.2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

從穿山甲肝臟、腸2個(gè)部位分離出來的菌株對(duì)20種試驗(yàn)藥物的敏感性存在一定差異，都高度敏感的藥物有環(huán)丙沙星、阿米卡星、舒普深(頭孢哌酮鈉/舒巴坦鈉)等3種，都不敏感的藥物有利福平、頭孢克肟2種。藥敏試驗(yàn)結(jié)果見表2。

表2 穿山甲藥敏試驗(yàn)結(jié)果

2.3 治療

根據(jù)臨床癥狀、剖檢情況、鏡檢和藥敏試驗(yàn)結(jié)果，判定本批次的穿山甲患有嚴(yán)重的細(xì)菌性腸炎。根據(jù)上述結(jié)果，對(duì)本批次存活的其它患病穿山甲進(jìn)行治療。

用藥：環(huán)丙沙星+法莫替丁+口服補(bǔ)液鹽。

用量：按每1kg穿山甲體重計(jì)算。環(huán)丙沙星為，10mg/kg。法莫替丁為，3mg/kg。

用法：稱量穿山甲體重，按每1kg穿山甲使用環(huán)丙沙星10mg兌溫開水，溶解冷卻后灌服，間隔2.5小時(shí)灌服法莫替丁(消化道疾病常用藥)，每天一次，連續(xù)給藥3d，口服補(bǔ)液鹽散(葡萄糖11g、氯化鈉1.75g、氯化鉀0.75g、碳酸氫鈉1.25g)兌500ml冷開水灌服，每天4～6次，連續(xù)3d。停藥后用干酵母片兌水灌服，一天兩次，連續(xù)2d。一星期后穿山甲病情好轉(zhuǎn)。

3 討論

有關(guān)穿山甲疾病防治的研究和文獻(xiàn)不多，陶立等對(duì)一起穿山甲疫情的病原分析，從2只病死穿山甲肺中各分離到1株優(yōu)勢(shì)菌株，2株分離菌株均為摩氏摩根菌，摩氏摩根菌主要引發(fā)穿山甲的肺炎病，對(duì)新霉素、壯觀霉素、阿米卡星高度敏感[10]。徐聰?shù)葘?duì)中華穿山甲飼養(yǎng)過程中出現(xiàn)的消化道腹瀉、呼吸道感染、體內(nèi)寄生蟲感染等問題進(jìn)行了研究，通過治療得到明顯的改善，活動(dòng)能力增強(qiáng)，其中治療穿山甲消化道疾病的方法是每天在飼料中添加蒙脫石散半袋 (1．5g)用水泡開 、諾氟沙星(300 mg)、益生菌一袋，用藥治療7d后穿山甲精神狀態(tài)有所好轉(zhuǎn) 可以自主覓食，表現(xiàn)活躍[7]。藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，諾氟沙星對(duì)肝臟部位的病菌高度敏感，而對(duì)腸部位的病菌低度敏感，與徐聰?shù)难芯坑邢嗨频胤?。試?yàn)組采用對(duì)肝臟、腸2個(gè)部位分離出來的菌株都高度敏感的環(huán)丙沙星進(jìn)行治療，取得良好的效果，同時(shí)由于患病穿山甲腹瀉引起脫水，須給患病穿山甲灌服口服補(bǔ)液鹽，以免患病穿山甲過度脫水死亡。

本批次的穿山甲的腸炎是由致病性細(xì)菌及其產(chǎn)生的毒素引起的一種急性、爆發(fā)性的腸道疾病，各個(gè)年齡階段的穿山甲均可發(fā)病。在南方陰雨潮濕的天氣，細(xì)菌容易繁殖導(dǎo)致疫病爆發(fā)，所以要保持穿山甲救護(hù)和馴養(yǎng)室內(nèi)空氣清新，注意通風(fēng)換氣，并做好穿山甲籠舍和喂食飲水器具的衛(wèi)生消毒工作。發(fā)現(xiàn)本病應(yīng)及時(shí)隔離，避免交叉感染。由于抗菌素的濫用致使產(chǎn)生很多耐藥菌株，因此在治療之前，要通過藥敏試驗(yàn)篩選出高敏藥物，以便有針對(duì)性的用藥。

患病穿山甲多數(shù)食欲減退、不進(jìn)食或是拒食，同時(shí)為了保證藥物劑量，在用藥時(shí)一般采用灌服的方法。在灌服時(shí)要注意小心操作，最好2個(gè)人配合操作，一個(gè)人負(fù)責(zé)保定(抓牢)穿山甲，另外一個(gè)負(fù)責(zé)插管推藥，插管要輕柔，不要插得太深，以免弄傷穿山甲的口腔。穿山甲的爪很鋒利，尾巴也很有力，操作時(shí)要帶上皮手套，同時(shí)用小毛巾被包住穿山甲。

4 結(jié)論

從患腸炎的穿山甲肝臟、腸2個(gè)部位分離出來的致病菌株為革蘭氏陰性，對(duì)環(huán)丙沙星、阿米卡星、舒普深高度敏感?？捎铆h(huán)丙沙星、法莫替丁、口服補(bǔ)液鹽聯(lián)合用藥治療，效果良好。