TP-IgM-WB在排除早期先天梅毒中的應(yīng)用

宋瀟，王洪軍，趙延明，楊嘉林，蓋希余

（黑龍江省皮膚病防治所，黑龍江 哈爾濱 150001）

先天梅毒（Congenital syphilis）又稱胎傳梅毒（prenatal syphilis）是胎兒被母體血中的梅毒病原體通過胎盤感染所致，可引起死產(chǎn)、早產(chǎn)等，是一種嚴(yán)重影響嬰幼兒身心健康的疾病[1]。先天梅毒患兒大多癥狀不明顯，多為隱性感染，由于母體內(nèi)梅毒特異性IgG抗體分子量較小可自由通過胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)，致使臨床早期診斷胎傳梅毒困難較大，往往需要通過長期的隨訪才能最終確診，從而錯(cuò)失最佳治療時(shí)間。近年來，梅毒發(fā)病率持續(xù)增高，胎傳梅毒逐年攀升，它影響了梅毒患兒家庭的生活質(zhì)量，必須要引起高度重視。早期診斷、及時(shí)治療、及早排除可疑的梅毒患兒，減少其家庭精神負(fù)擔(dān)有著非常重要的社會(huì)意義。目前，國內(nèi)在先天梅毒檢測方法上，以梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)（TPPA）、甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)（TRUST）為主[2]，但梅毒螺旋體免疫蛋白印跡試驗(yàn)（Treponema pallidum IgM Western blot，TP-IgM-WB）曾有過相關(guān)研究[3-4]，具備較好的敏感性和特異性。本研究采用16例疑似先天梅毒患兒血標(biāo)本分別行TRUST、TPPA檢測和TP-IgM-WB檢測，評(píng)價(jià)疑似患兒血清梅毒（TP-IgM-WB）在排除早期先天梅毒中的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 回顧性分析2013年6月～2016年12月到本所性病門診進(jìn)行確診先天梅毒的1月齡內(nèi)可疑患兒血樣，共計(jì)16例。

1.2 疑似先天梅毒隨訪標(biāo)準(zhǔn) 參照我國預(yù)防艾滋病、梅毒、乙肝母嬰傳播工作實(shí)施方案要求，患兒符合梅毒TRUST、TPPA同時(shí)陽性，或TPPA單項(xiàng)陽性，納入疑似先天梅毒隨訪病例范疇，如隨訪期間出現(xiàn)滴度不降反升或由陰轉(zhuǎn)陽，可確診為先天梅毒，隨訪至18月齡時(shí)如TPPA轉(zhuǎn)為陰性，可排除先天梅毒。

1.3 標(biāo)本采集 采集疑似先天梅毒患兒外周靜脈血3 ml，分離血清后置于-20℃冰箱中凍存待檢。

1.4 試劑與檢驗(yàn)方法 按實(shí)驗(yàn)室規(guī)范進(jìn)行TRUST、TPPA、TP-IgM-WB的檢驗(yàn)，TRUST試劑由上海榮盛生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，TPPA試劑由日本富士瑞必歐株式會(huì)社生產(chǎn)，TP-IgM-WB試劑產(chǎn)自于德國歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室診斷試劑有限公司，使用的3種試劑均在有效日期到達(dá)前。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 運(yùn)用SPSS 16.0軟件統(tǒng)計(jì)分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

16例可疑梅毒患兒在首診時(shí)TRUST、TPPA結(jié)果全為陽性，TRUST滴度均未達(dá)到母體4倍及以上，未達(dá)到胎傳梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)，全部需要進(jìn)行血清學(xué)隨訪，具體滴度為1∶1（7例43.75%），1∶2（5 例 31.25%），1∶4（3 例 18.75%），1∶8（1 例6.25%），經(jīng)過3、6、12月隨訪，TRUST、TPPA全部轉(zhuǎn)陰，轉(zhuǎn)陰情況見表1。

表1 16例疑似梅毒患兒血清學(xué)試驗(yàn)轉(zhuǎn)陰情況Table 1 16 cases of suspected syphilis children serological test negative situation

16例可疑梅毒患兒首診時(shí)的TP-IgM-WB結(jié)果全部陰性，45 kD、15 kD、47 kD、17 Kd未出現(xiàn)顯色反應(yīng)，蛋白印記條帶上陽性對(duì)照質(zhì)控線均出現(xiàn)顯色，說明試驗(yàn)有效。

疑似患兒隨訪后的TRUST、TPPA結(jié)果與TP-IgM-WB結(jié)果相符合，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

目前我國先天梅毒的診斷主要以實(shí)驗(yàn)室梅毒血清學(xué)和臨床相結(jié)合的方法為主，存在著不足[5]。有臨床癥狀的早期胎傳梅毒或患兒血清TRUST滴度大于等于母體4倍的情況下很容易進(jìn)行確診，但在實(shí)際臨床工作中，多數(shù)梅毒患兒出生后并沒有明顯的胎傳梅毒癥狀，同時(shí)梅毒血清學(xué)TRUST滴度數(shù)值和與母體結(jié)果一致或低于母體數(shù)值，不容易進(jìn)行及時(shí)確診，可能導(dǎo)現(xiàn)漏診的情況發(fā)生。TPPA、TRUST等作為常用梅毒抗體血清學(xué)檢測方法，檢測的IgG和IgM的混合抗體，其中IgG分離量小于IgM可以自由通過胎盤而IgM則不能通過，所以不能單單通過胎兒出生時(shí)的血液TPPA和TRUST陽性結(jié)果來確診先天梅毒[6]。分別在3個(gè)月、6個(gè)月、12個(gè)月 、18個(gè)月監(jiān)測TPPA和TRUST血清學(xué)變化，對(duì)于這些疑似先天梅毒患兒是非常必要的，在血清學(xué)結(jié)果隨訪3個(gè)月時(shí)如為陰性，并無先天梅毒臨床表現(xiàn)，可以除外先天梅毒感染；3個(gè)月后若TRUST滴度一直不轉(zhuǎn)陰，維持在較低滴度數(shù)值，則在每3個(gè)月時(shí)進(jìn)行TPPA隨訪至18月齡，若隨訪期間任意一次TPPA結(jié)果陰轉(zhuǎn)，就可以排除先天梅毒。但是，這種長期的隨訪容易致使真正的先天梅毒患兒錯(cuò)過最好治療時(shí)機(jī)，另外，還有依從性不好的家庭也容易出現(xiàn)失訪情況。所以，及時(shí)有效的排除先天梅毒感染，對(duì)無癥狀的疑似先天梅毒及時(shí)確診是至關(guān)重要的。

梅毒螺旋體蛋白印跡試驗(yàn)是檢測梅毒特異性IgM或IgG抗體，其敏感性高、特異性強(qiáng)。Dettori等[7]認(rèn)為免疫印記法用于梅毒診斷優(yōu)于FTA-ABS（熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗(yàn)）和TPHA（梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)）方法，對(duì)于早期梅毒的陽性率為100%。Marangoni等[8]發(fā)現(xiàn)，WB的敏感性、特異性均為99%，高于FTA-ABS(敏感性為90%，特異性為89%)。做到早期診斷先天梅毒，為臨床實(shí)現(xiàn)及時(shí)有效干預(yù)可減少先天梅毒的危害[9]。

考慮TP-IgM的檢測在確診早期梅毒中具有重要的意義[10]，本研究針對(duì)2013年6月～2016年12月到本所性病門診進(jìn)行確診先天梅毒的可疑患兒，其TP-IgM-WB結(jié)果與TRUST、TPPA結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，對(duì)于常規(guī)TRUST、TPPA方法16例疑似梅毒患兒均需進(jìn)行隨訪，經(jīng)過3、6、12月隨訪后，TRUST、TPPA全部陰轉(zhuǎn)，與首診時(shí)的TP-IgM-WB陰性結(jié)果全部符合。結(jié)果表明，TP-IgM-WB法應(yīng)用于早期排除先天梅毒感染有較高價(jià)值，可有效避免對(duì)疑似梅毒患兒的長期隨訪過程，值得臨床上大力推廣應(yīng)用。