李海琴，康昭風，譚美芳，曾艷兵，季華員

(江西省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所，江西南昌330200)

豬偽狂犬病(Pseudorabies,PR)是由偽狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的一種急性傳染病，臨床上主要表現(xiàn)為妊娠母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎、木乃伊胎及弱仔，新生仔豬出現(xiàn)明顯的神經(jīng)癥狀以及腹瀉死亡，育肥豬突然發(fā)熱和呼吸道等癥狀[1]，是危害養(yǎng)豬業(yè)最嚴重的傳染病之一。PRV基因組序列測定發(fā)現(xiàn)其由72個閱讀框組成，編碼70種蛋白[2-4]。偽狂犬野毒包括有g(shù)E、gB、gI、gG、TK等基因，其中g(shù)E基因是PRV的主要毒力相關(guān)基因[5]，也是世界動物衛(wèi)生組織所規(guī)定基因缺失疫苗的首選缺失基因，偽狂犬野毒抗體包含上述所有基因?qū)目贵w，我國用于預防豬偽狂犬病的疫苗主要是gE基因缺失的疫苗，配套使用gE缺失疫苗的豬場，使用PRV gE基因抗體檢測試劑盒能夠方便、快速、準確檢測PRV野毒抗體，從而評價豬群PRV野毒感染狀況[6]；gB抗體ELISA檢測，可以了解豬場接種豬偽狂犬疫苗后的免疫保護情況，若gB-ELISA 抗體檢測為陰性，則說明豬群不受免疫保護。近幾年來全國主要養(yǎng)豬地區(qū)均不同程度出現(xiàn)規(guī)模豬場豬偽狂犬病轉(zhuǎn)陽病例[7-8]，引起行業(yè)內(nèi)高度的關(guān)注。江西是個養(yǎng)豬大省，規(guī)模化豬場數(shù)量較多，迫切需要對江西省規(guī)?；i場豬偽狂犬病的流行現(xiàn)狀進行跟蹤與調(diào)查，為此，本研究對2016—2017年江西部分地區(qū)規(guī)?；i場進行PRV抗體分析，初步分析了PRV抗體在不同年份、不同區(qū)域、不同豬群和不同季節(jié)的感染狀況。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗動物 被檢血清來自江西部分地區(qū)(南昌、九江、吉安、新余、東鄉(xiāng)、撫州、贛州、上饒)的規(guī)?；i場，其中哺乳仔豬(0～30日齡)、保育仔豬(30～70日齡)、生長育肥豬(70～180日齡)、后備豬為180日齡以后至配種前、母豬是能繁母豬、公豬為成年公豬，送檢豬場都免疫PRV gE缺失疫苗。

1.1.2 樣品采集與處理 2016年1月—2017年12月，在江西省不同地區(qū)的32個豬場共采集樣本1 820份，血清的采集方法是每只豬耳靜脈采集全血1 mL裝于2 mL滅菌離心管中。豬偽狂犬gE、gB抗體ELISA檢測試劑盒，購自美國IDEXX公司。

1.2 試驗方法

按常規(guī)方法分離所得血液的血清，然后按試劑盒的使用說明書進行樣品的處理及檢測。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同年份江西省PRV gE抗體監(jiān)測情況

由表1可知，在監(jiān)測的32個規(guī)模豬場中，2016年監(jiān)測豬場數(shù)為16個，血清樣品為901份，PRV gE抗體陽性場數(shù)為11個，抗體陰性場數(shù)為5個，場陽性率為68.8%(11/16)；PRV gE樣品陽性數(shù)為362份，樣品陽性率為40.1%(362/901)。2017年監(jiān)測豬場數(shù)為16個，血清樣品為919份，PRV gE抗體陽性場數(shù)為10個，抗體陰性場數(shù)為6個，場陽性率為62.5%(10/16)；PRV gE樣品陽性數(shù)為318份，樣品陽性率為34.6%(318/919)。

2.2 江西省不同地區(qū)PRV血清學檢測結(jié)果

由表2可知，本研究從江西省南昌、九江、吉安、贛州、新余、上饒、宜春、撫州8個地區(qū)的32個規(guī)?；i場采集血清樣品，PRV gE抗體檢測結(jié)果顯示江西地區(qū)豬偽狂犬gE抗體總的陽性率為37.4%，九江市g(shù)E抗體陽性率最高，達到52.2%；其次依次為撫州、宜春、南昌、贛州、吉安、新余；上饒市g(shù)E抗體陽性率最低，為13.2%。PRV gB抗體檢測結(jié)果顯示gB抗體總陽性率為93.2%，南昌和贛州PRV gB抗體陽性率最高，為97.8%；其次依次為新余、九江、撫州、宜春、吉安；上饒地區(qū)的gB抗體陽性率最低，為74.7%。

表1 不同年份江西省PRV gE抗體檢測結(jié)果

表2 江西省不同地區(qū)PRV gE、gB抗體檢測結(jié)果

2.3 不同階段豬群PRV血清學檢測結(jié)果

從不同階段豬群PRV gE抗體陽性率結(jié)果(表3)來看，育肥豬的PRV gE陽性率最高(48.9%)，其次為母豬(44.2%)和公豬(35.8%)，依次是哺乳仔豬(33.5%)和后備豬(32.7%)，保育豬的陽性率最低(29.2%)；PRV gB抗體陽性率最高的是公豬(98.2%)，其次是哺乳仔豬(97.4%)和母豬(95.7%)，依次是后備豬(93.6%)和保育仔豬(87.6%)，育肥豬最低為(82.5%)。

表3 江西省不同階段豬群PRV gE、gB抗體檢測結(jié)果

2.4 不同季度PRV血清學檢測結(jié)果

對不同季度規(guī)模豬場PRV gE抗體陽性率進行統(tǒng)計，結(jié)果(表4)顯示，4個季度的PRV gE陽性率均在30%以上，其中第四季度PRV gE抗體陽性率最高(43.0%)，第三季度PRV gE抗體陽性率最低為30.5%；其中第四季度PRV gB抗體陽性率最高(94.4%)，第三季度PRV gB抗體陽性率最低為92.1%。

表4 2016—2017年江西省不同季度PRV gE、gB抗體檢測結(jié)果

3 小結(jié)與討論

本研究通過對江西省不同地區(qū)32個規(guī)?；i場的1 820份血清進行了豬偽狂犬血清學調(diào)查，2016年與2017年被調(diào)查的豬場gE抗體陽性率分別為68.8%和62.5%，因為送檢豬場均免疫PRV gE缺失疫苗，使用PRV gE基因抗體檢測試劑盒能夠準確檢測PRV野毒抗體，從而評價豬群PRV野毒感染狀況，被檢豬場gE抗體陽性率結(jié)果說明江西省豬偽狂犬野毒感染已十分普遍，2016年與2017年血清樣品gE抗體陽性率分別為40.1%和34.6%，PRV gE抗體總陽性率達37.4%，這比前期對江西省豬偽狂犬野毒感染的血清學調(diào)查結(jié)果更高[9-10]，結(jié)果表明江西省豬偽狂犬野毒感染已更嚴重。

從江西省8個地區(qū)采集的樣品檢測PRV感染的情況來看，九江市、撫州市、宜春市、南昌市和贛州市PRV gE抗體陽性率都較高，吉安市、新余市，上饒市PRV gE抗體陽性率較低；不同地區(qū)檢出率的差異與區(qū)域內(nèi)豬場的疫苗種類，免疫程序，養(yǎng)殖密度，生物安全等諸多因素有關(guān)。

從不同階段豬群gE抗體陽性率來看，哺乳仔豬和保育仔豬PRV gE抗體陽性率偏低，這可能是受母源抗體的干擾，據(jù)報道，母豬產(chǎn)前30 d免疫偽狂犬疫苗，其仔豬30日齡時獲得母源抗體合格率為93.33%以上，且母源抗體可以維持到60日齡[11]；而隨著日齡增長，生長育肥豬的感染率顯著增高(48.9%)，原因可能是育肥豬舍的消毒衛(wèi)生和生物安全工作較差，這也是育肥豬感染率居高不下的重要原因，結(jié)果提示商品豬的偽狂犬疫苗免疫也是豬偽狂犬防控和凈化的關(guān)鍵環(huán)節(jié)；公豬和母豬及后備豬的PRV野毒感染率也較高，均在30%以上，種豬野毒陽性率居高不下，容易造成豬場內(nèi)豬偽狂犬病毒循環(huán)傳播。

2016—2017年4個季度的PRV gE抗體陽性率均在30%以上，其中第四季度gE抗體陽性率最高(43%)，說明豬偽狂犬病四季都可能發(fā)生，沒有明顯的季節(jié)差異性，但以冬季較為多發(fā)，這與其他研究結(jié)果一致[12-14]。監(jiān)測結(jié)果表明氣候也是影響豬偽狂病野毒感染的因素之一，可能原因是低溫有利于病毒存活，冬季寒冷，豬舍內(nèi)通風不良，易導致有害氣體聚集，易于病毒的傳播。

豬偽狂犬病gB抗體檢測結(jié)果顯示，南昌和贛州地區(qū)PRV gB抗體陽性率最高(97.8%)，但PRV gE野毒感染率也較高，分別為42%和35.2%；宜春地區(qū)的PRV gB抗體陽性率相對較低(93.4%)，gE抗體陽性率卻高為47.3%；公豬的PRV gB陽性率最高(98.2%)，但是公豬的PRV gE野毒感染率也較高，這種現(xiàn)象表明較高的gB抗體陽性率不能說明豬群未受到偽狂犬野毒的感染。

2012年國務院辦公廳頒布的《國家中長期動物疫病防治規(guī)劃2012—2020》中要求，到2020年全國所有種豬場豬偽狂犬要達到凈化標準，面對我省如此嚴峻的偽狂犬流行情況，凈化豬偽狂犬病已迫在眉睫。疫苗免疫接種是預防和控制豬偽狂犬病的根本措施，我們需要制定科學的免疫方案，配合抗體檢測驗證免疫效果，采取嚴格的生物安全措施，并做好消毒工作及血清學監(jiān)測工作，加強豬場飼養(yǎng)管理，嚴格把好引種關(guān)，爭取在2020年達到凈化標準。