宇 凌,范明杰,王慧軍,董翠梅,李金峰,黨安坤,蘭鄒然

（1.山東省菏澤市動物疫病預防控制中心,山東 菏澤 274000;2.山東省曹縣動物防疫監(jiān)督所,山東 曹縣 274400;3.山東省動物疫病預防與控制中心,山東 濟南 250022）

布魯菌?。ㄒ韵潞喎Q為布病）是由布魯菌引起的,主要侵害人和動物淋巴系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)的人獸共患傳染性變態(tài)反應(yīng)性疾病,100多年來,該病在全球范圍內(nèi)廣泛流行,嚴重影響了畜牧業(yè)的健康發(fā)展,并帶來嚴重的公共衛(wèi)生問題,同時間接影響了畜產(chǎn)品出口及旅游事業(yè)的發(fā)展。近年來,布魯桿菌病已成為我國部分畜牧業(yè)發(fā)達地區(qū)威脅人類健康的頭號人獸共患病,我國新疆每年因布病流產(chǎn)、空懷等少生幼畜達100～140萬頭,新疆、青海兩地,每年因本病造成的直接經(jīng)濟損失約1億元[1]。2016年山東省人間布病確診病例4 092人,達到1973年以來的最高峰（數(shù)據(jù)來源:2017山東省畜牧獸醫(yī)局布病基線調(diào)查統(tǒng)計數(shù)據(jù)）,各地市均有人間布病病例,人間布病2016年較上年增長3.99%,其中菏澤市增長1.39倍（數(shù)據(jù)來源:2017山東省畜牧獸醫(yī)局布病基線調(diào)查統(tǒng)計數(shù)據(jù)）。菏澤位于魯、蘇、豫、皖四省交界處的魯西南,是農(nóng)業(yè)大市,也是畜牧業(yè)大市,特別是牛羊養(yǎng)殖深受廣大中小家戶喜愛,截止至2016年底,菏澤市有飼養(yǎng)量在100只以上的養(yǎng)羊場戶3 260個,羊存欄量5 785 004只,能繁母羊2 614 257只（數(shù)據(jù)來源:2016年菏澤市畜牧生產(chǎn)統(tǒng)計年報）。前些年菏澤一直堅持以青山羊與小尾寒羊自繁自養(yǎng)為主的飼養(yǎng)方式,但隨著當?shù)厝罕娚钏降奶岣呒皢慰h羊肉湯在全國知名度的提高,菏澤市本地消費及用于加工生產(chǎn)羊肉湯外銷的羊肉需求量增大,當?shù)刈苑弊责B(yǎng)的青山羊、小尾寒羊遠遠不夠需求,每年都從外省調(diào)入其他品種山羊、綿羊進行短期育肥,增加了布病的傳入風險。為切實做好魯西南地區(qū)牛羊布魯菌病防控工作,也為了全面掌握菏澤市畜間羊布病流行情況,菏澤市動物疫病預防控制中心根據(jù)國家和省里有關(guān)文件要求,于2017年8月通過橫斷面研究對我市規(guī)?；驁觯ù鏅诹看笥诘扔?00只的羊場）開展了布病流行病學基線調(diào)查工作。

1 材料與方法

1.1 病例定義 布病陽性羊只:血清樣品通過布病虎紅平板凝集試驗和試管凝集試驗檢測均為陽性的羊只。

布病陽性場群:場群內(nèi)至少有1只羊檢測為布病陽性的養(yǎng)羊場戶。

布病陽性縣區(qū):至少檢測出1例布病陽性養(yǎng)羊場戶的縣區(qū)。

1.2 研究群和抽樣單元

研究群:菏澤市所有存欄100只以上的羊場（戶）,總共有3 260個場戶。

抽樣單元:對于群體,抽樣單元為每個羊場（戶）;對于個體,抽樣單元為每個羊場（戶）內(nèi)所有6月齡以上羊只。

1.3 抽樣方案設(shè)計 參照Yamen等[2]的方法進行調(diào)整。

第1步,初步估算全市要抽取的羊只數(shù)。用估計流行率的方法[3]抽取。3 260個100只以上的規(guī)模羊場,按95%置信水平,預期流行率5%（根據(jù)往年監(jiān)測結(jié)果,本地區(qū)羊群布病感染不嚴重）,1%的可接受誤差,初步計算出全市要抽取的羊只數(shù)為1 825只。計算公式為:

第2步,計算設(shè)計影響:預先確定每個場抽取30只羊,羊布病的ICC根據(jù)文獻[3],由于菏澤地區(qū)養(yǎng)羊情況與該文獻研究地區(qū)情況類似,ICC按0.1來計算,通過以下公式計算設(shè)計影響。

設(shè)計影響（design effect）=1+（m-1）×ICC,式中,m為每場預先確定要抽取的羊只數(shù),本研究m為30,可以計算出設(shè)計影響為4。

第3步,確定最終抽樣的羊只數(shù)為1 825×4=7 300（只）,抽樣場數(shù)為 7 300/30=243（個）。

第4步,配額將總抽樣場戶數(shù)分配到9個縣區(qū),每個縣區(qū)分配數(shù)見表1。

1.4 場戶的隨機選擇和場戶內(nèi)羊的隨機選擇 場戶的隨機選擇和場戶內(nèi)羊的隨機選擇均用系統(tǒng)隨機抽樣方法進行[4]。

1.5 檢測方法 對采集的血清,進行虎紅平板凝集試驗和試管凝集試驗垂直試驗,檢測布病抗體。先用虎紅平板凝集試驗初篩,對檢出的陽性樣品再用試管凝集實驗確診。本次調(diào)查參照文獻[5],設(shè)定虎紅平板凝集試驗的敏感性、特異性分別為95%、80%,試管凝集試驗的敏感性、特異性分別為85%、90%,垂直聯(lián)合試驗的敏感性、特異性分別為81%和98%。

1.6 數(shù)據(jù)收集和分析 分別收集抽樣羊場的血清學檢測結(jié)果,用于后續(xù)統(tǒng)計分析。

個體和群體真實流行率的計算:通過抽樣檢測,可以得到羊布病的個體表觀流行率和群體的表觀流行率,利用公式 TP= （AP+Sp-1）/（Se+Sp-1）就可以計算個體和群體的真實流行率。流行率的95%置信區(qū)間（CI）可用以下公式計算:

式中其中p為流行率,Z標準正態(tài)分布中概率0.05對應(yīng)的統(tǒng)計數(shù),n為抽樣數(shù)量。

2 結(jié)果

2.1 個體流行率 根據(jù)抽樣方案,將全市的縣區(qū)做代號標記,標記為A-I,本次調(diào)查全市應(yīng)抽取243個場的羊血清7 290份,實際檢測了7 282份血清,其中有8份血樣由于質(zhì)量問題沒有得到檢測結(jié)果。7 282份血清中,總共檢出陽性33份,個體表觀流行率為0.45%（95%CI∶0.3% ～0.6%）,個體真實流行率為0.54%（95%CI∶0.4% ～0.7%）（需要交代一下方法的敏感性和特異性）。個體流行率最高的縣區(qū)為C縣區(qū),個體表觀流行率為1.07%（95%CI∶0.5% ～2.0%）,個體真實流行率為1.33%（95%CI∶0.6% ～2.5%）,B、E、F和H縣區(qū)未檢到陽性（見表1）。

表1 各縣區(qū)布病的個體表觀流行率和真實流行率

本次調(diào)查總共在5個縣區(qū)檢出8個布病陽性規(guī)?；驁?其中A、C和G區(qū)分別檢出2個陽性場,D和I區(qū)分別檢測出1個陽性場,個體陽性率最高的場在C區(qū),陽性率最高的規(guī)?；驁霾疾€體表觀流性率達26.67%（95%CI∶12.3% ～45.9%）,個體真實流行率達 31.23%（95%CI∶13.0% ～55.6%）,出現(xiàn)陽性的規(guī)模化羊場中,陽性率最低的規(guī)?；驁霾疾€體表觀流行率達3.33%（95%CI∶0.1% ～17.2%）,個體真實流行率達1.68%（95%CI∶0.0% ～19.2%）（見表2）。

表2 陽性場內(nèi)表觀流行率和真實流行率

2.2 群體流行率 根據(jù)抽樣方案,需要在本市共檢測243個規(guī)模化羊場,共檢測出8個陽性場,這8個陽性場分布上于 A、C、D、G 和I縣區(qū),A、C、G 縣區(qū)各檢出兩個陽性場,D和I縣區(qū)各檢出1個陽性場,而B、E、F和H縣區(qū)未檢出陽性場（見圖1）。檢出陽性場的縣區(qū)中,I縣區(qū)布病群體表觀流行率為最低,為4.55%（1/22）（95%CI∶0.1% ～22.8%）,計算得到的群體真實流行率為 5.73%（95%CI∶0.1% ～28.8%）;G縣區(qū)群體表觀流行最高7.69%（2/26）（95%CI∶0.9% ～25.1%）,計算得到的群體真實流行率為9.71%（95%CI∶1.1% ～31.7%）;本次調(diào)查全市羊布病群體表觀流行率為3.29%（8/243）（95%CI∶1.4% ～6.4%）,計算得到的群體真實流行率為1.64%（95%CI∶0.0% ～5.6%）。

圖1 2017年菏澤市各縣區(qū)羊場布病監(jiān)測結(jié)果

2.3 調(diào)入和未調(diào)入羊只的羊群布病檢測結(jié)果 根據(jù)調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn),調(diào)入羊只的養(yǎng)羊場戶數(shù)總共有92個,檢出布病陽性的8個場均為調(diào)入羊只的場戶（見表3）,調(diào)入羊只的養(yǎng)羊場戶檢測為布病陽性的概率顯著高于未調(diào)入羊只的養(yǎng)羊場戶（卡方檢驗,P ＜0.01）。

表3 調(diào)入和未調(diào)入羊只的羊群布病檢測結(jié)果

3 討論

從表1中可以看出,本次調(diào)查規(guī)模化羊場布病個體表觀流行率為0.45%,從個體水平來看,全市羊布病流行率處于相對較低水平,且通過統(tǒng)計采樣單信息發(fā)現(xiàn),我市自繁自養(yǎng)的青山羊和小尾寒羊布病陽性率是零,而布病陽性場均與從外省調(diào)入羊只有關(guān),這與今年山東省其他縣區(qū)的情況類似[5-6];從表2可以看出,出現(xiàn)陽性的規(guī)?；驁?場內(nèi)個體表觀流行率最低的達到3.33%（95%CI∶0.1% ～17.2%）,最高的已高達26.67%（95%CI∶12.3% ～45.9%）,說明羊場一旦引入布病,容易在場內(nèi)擴散傳播,造成場群流行率逐漸上升;從表3可以看出有的縣區(qū)規(guī)?；驁霾疾∪后w表觀流行率已達7.69%,加強羊布病防控已成為當前的緊急任務(wù),應(yīng)引起高度關(guān)注,及時采取針對性防控措施來降低羊群的布病流行率。

通過調(diào)查分析,我市規(guī)模化羊場出現(xiàn)布病陽性的原因:其一、單縣羊肉湯聞名全國,需求量大,現(xiàn)有羊產(chǎn)量遠遠不能滿足市場需求,需要從周邊省區(qū)調(diào)進大量羊進行短期育肥,此次調(diào)查發(fā)現(xiàn)陽性場戶均存在市場調(diào)入羊只的情況,羊及羊產(chǎn)品的流通加速,加大了動物的飼養(yǎng)、交易、屠宰、檢疫等環(huán)節(jié)監(jiān)管的難度,為布病的傳播創(chuàng)造了客觀條件,增加了羊布病的傳播風險[7]。其二、調(diào)入來自外省的羊只,沒有羊調(diào)出地開具的檢疫證明和布病檢測報告,養(yǎng)羊場戶引種或買入羊只后基本沒有落地報告,也不進行檢疫和隔離,直接混群飼養(yǎng),布病傳入的風險很高。

調(diào)查結(jié)果顯示,本市規(guī)模養(yǎng)羊場場群表觀流行率和個體表觀流行率分別為3.29%（8/243）（95%CI∶1.4% ～ 6.4%）和 0.46% （33/7282）（95%CI∶0.3%～0.6%）,群體流行率顯著高于個體流行率（卡方檢驗,P＜0.01）。布病陽性場群均存在從外省調(diào)入羊只的情況。

4 布病防控建議

4.1 建議各地檢疫部門嚴格動物調(diào)運檢疫工作。各地動物檢疫部門在調(diào)出牛羊時都應(yīng)對調(diào)出動物進行布病檢測,防止布病陽性動物調(diào)運,動物調(diào)入后應(yīng)及時開展隔離檢測,混群前應(yīng)開展布病檢測,以防布病陽性動物混入群體。

4.2 建立并加強畜牧獸醫(yī)、商業(yè)、食藥、衛(wèi)生等部門的協(xié)同作戰(zhàn)機制,嚴把動物及其產(chǎn)品的流通關(guān),規(guī)范活羊交易、屠宰、羊肉市場及食品加工企業(yè)、餐飲企業(yè)的管理。特別對于因布病感染而流產(chǎn)的死胎,個別養(yǎng)殖戶為了圖謀小利益,會偷偷賣掉,流入市場后造成人的感染,應(yīng)嚴厲查處。鼓勵養(yǎng)殖戶為布病易感活畜參保,一旦出現(xiàn)布病疫情或檢出布病陽性時能把經(jīng)濟損失降到最低,并有利于病畜和陽性畜的撲殺無害化處理。

4.3 加強布病知識及其危害的宣傳工作。獸醫(yī)部門聯(lián)合衛(wèi)計委對養(yǎng)殖戶、屠宰、加工羊肉的人員有針對性地開展健康教育,使這些從業(yè)人員自我防護意識得以提高,一旦出現(xiàn)布病類似癥狀,應(yīng)及時診斷,早期治療,以保證良好預后。

4.4 加強縣級獸醫(yī)實驗室建設(shè)和獸醫(yī)檢驗人員業(yè)務(wù)培訓,提高基層檢測人員的布病檢測能力和診療水平。縣級獸醫(yī)部門每年都要做好本轄區(qū)內(nèi)布病的流行病學調(diào)查,為布病的科學防控提供有效技術(shù)支持。