郭永剛,胡立磊,陳志明,章啟東(通訊作者)
(1.河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院,鄭州450011;2.河南醫(yī)學(xué)高等??茖W(xué)校,鄭州451191;3.江西省動物疫病預(yù)防控制中心,南昌330096;4.江西鄱陽縣農(nóng)業(yè)局,333100)
疥螨感染是養(yǎng)兔場常見的一種體表寄生蟲病,其具有接觸性、高度傳染性和頑固性等特點(diǎn)。各種年齡段的兔都會感染此病,但幼兔比成年兔更易感染。兔感染疥螨后常見局部巨癢,伴有皮炎、脫毛等,輕者出現(xiàn)消瘦、精神沉郁等癥狀,重者會造成死亡,因此疥螨病是對養(yǎng)兔業(yè)危害嚴(yán)重的一類疾病。目前,常用的治療疥螨感染藥物多為阿維菌素類驅(qū)蟲藥物、有機(jī)氯類和有機(jī)磷類殺蟲藥物等,這些藥物作用快,療效顯著,但也存在藥物殘留、耐藥性產(chǎn)生和環(huán)境危害等問題[1-3]。相對于化學(xué)抗螨藥物,中藥具有安全、低毒、不易產(chǎn)生耐藥等優(yōu)點(diǎn),因此,本試驗在參考相關(guān)研究的基礎(chǔ)上,使用具有抗螨作用中藥制得復(fù)方苦參軟膏,并觀察其對兔疥螨感染的療效,旨在為臨床治療兔疥螨病提供參考[4]。
苦參、蛇床子購自亳州中藥材市場;升華硫,銀豐生物集團(tuán)。
實驗動物:河南新鄉(xiāng)一肉兔養(yǎng)殖場于2019年5月群發(fā)肉兔皮膚病,選擇臨床癥狀明顯,經(jīng)檢驗確診為疥螨感染的病兔20 只,體重1.6kg 左右。
1.2.1 復(fù)方苦參軟膏的制備
稱取苦參、蛇床子各100 g,粉碎,置于圓底燒瓶中,分別加6 倍量體積分?jǐn)?shù)為60%的乙醇回流提取3 次,每次提取2 h,對提取液進(jìn)行真空抽濾,合并濾液,置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上,60℃濃縮至半流體稠膏狀,然后將半流體稠膏置于80℃水浴中加熱至稠膏;升華硫研磨,過100 目篩,稱取10 g加入稠膏,攪拌均勻,作為藥物備用。制備軟膏基質(zhì),按比例稱取硬脂酸10.0 g,液體石蠟12.5 g,白凡士林12.5 g,單硬脂酸甘油酯10.0 g 置容器內(nèi),水浴加熱至熔化,于水浴鍋上80 ℃保溫,作為油相;將三乙醇胺2.5 g,甘油15.0 g,尼泊金乙酯1.0 g,蒸餾水,加熱至完全溶解,作為水相。將5.0 g 氮酮加入油相中,并將水相緩慢倒入油相中,攪拌均勻后制得軟膏基質(zhì)。藥物與基質(zhì)以3:7 的比例將藥物加入基質(zhì)中,邊加邊攪拌,至混合均勻,放冷即得。
1.2.2 苦參軟膏制劑外觀性狀和穩(wěn)定性檢測
主要觀察所制軟膏制劑外觀顏色、均勻性、是否易于涂布等。
離心試驗:取自制復(fù)方苦參蛇床子軟膏10 g放入帶刻度離心管中,對稱放入離心機(jī)內(nèi),于溫度為25℃、轉(zhuǎn)速為3000 r/min 的條件下,離心30 min。取出后,觀察到離心管內(nèi)軟膏變化。
耐熱試驗:取相同量的自制復(fù)方苦參蛇床子軟膏分別置于2 個離心管內(nèi),置室溫25 ℃下48 h、50 ℃恒溫箱中6 h,取出后觀察軟膏外觀變化。
耐寒試驗:取適量自制復(fù)方苦參蛇床子軟膏置于離心管內(nèi),置-20 ℃冰箱24 h,取出后觀察軟膏變化。
1.2.3 復(fù)方苦參軟膏治療兔疥螨病療效觀察
將20 只試驗病兔隨機(jī)分為2 組,每組10只,第1 組為試驗用藥組,第2 組為不用藥對照組。將用藥組病兔腳爪患部被毛剪除,用手術(shù)刀片背面刮去表面痂皮,將復(fù)方苦參軟膏均勻涂于患部皮膚,每日一次,連續(xù)使用10 天,觀察療效。
試驗制得復(fù)方苦參軟膏,通過肉眼觀察外觀呈灰綠色、均勻細(xì)膩、有光澤、無粗顆粒、易涂布。通過對軟膏進(jìn)行離心、耐寒、耐熱試驗來考察其穩(wěn)定性,經(jīng)25℃、3000 r/min 的條件下,離心30 min 后,離心管內(nèi)軟膏無分層及破乳現(xiàn)象;經(jīng)在室溫25 ℃下放至24 h 后,離心管內(nèi)軟膏無變化,在50 ℃恒溫箱中保溫6 h 后,軟膏出現(xiàn)分層現(xiàn)象;經(jīng)在-20 ℃冰箱中冷藏24 h 后,軟膏無分層、破乳、顆粒變粗的現(xiàn)象,結(jié)果表明,所制復(fù)方苦參軟膏短期內(nèi)穩(wěn)定性良好。
療效觀察結(jié)果:用藥組病兔經(jīng)過10 天治療,腳爪的感染部位皮膚紅腫狀況減輕,無明顯瘙癢癥狀,患部皮屑減少,周圍毛發(fā)脫落部位開始有少量毛發(fā)生長。不用藥對照組病兔出現(xiàn)明顯瘙癢癥狀,周圍被毛粗亂并脫落,患部腳掌腫脹,并出現(xiàn)灰白色痂皮,呈石灰樣,試驗期間對照組有1只病兔出現(xiàn)明顯消瘦并死亡。結(jié)果表明,與對照組相比,使用復(fù)方苦參軟膏組病兔疥螨感染癥狀明顯減輕,患部皮膚病變損傷基本愈合。
本試驗通過參考相關(guān)研究,選擇苦參、蛇床子提取物和升華硫為軟膏劑的主要成分??鄥槎箍浦参锟鄥⒌母稍锔?,其性寒味苦,具有清熱燥濕、抗菌、殺蟲、利尿等功效,可用于熱痢、濕疹、便血、皮膚瘙癢等[5];蛇床子為傘形科一年生草本植物蛇床的干燥成熟果實,研究表明蛇床子提取物有殺菌、止癢、抗真菌等作用[6];升華硫是硫黃的一種,為黃色結(jié)晶性粉末,有微臭,具有殺細(xì)菌、殺真菌和殺疥蟲的作用[7]。試驗所制復(fù)方苦參軟膏外觀性狀均符合軟膏劑相關(guān)要求,通過離心、耐寒、耐熱試驗,表明該軟膏劑短期穩(wěn)定性良好。療效試驗表明復(fù)方苦參軟膏對兔疥螨感染有較好療效,這與相關(guān)研究結(jié)果基本一致[8],說明本試驗所制復(fù)方苦參軟膏可用于臨床疥兔疥螨感染的治療。