楊曉明

人類發(fā)展進(jìn)程中，傳染病始終是威脅人類健康安全的重大隱患，是人類面臨的嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。從肆虐人類的天花、脊髓灰質(zhì)炎、鼠疫、霍亂、結(jié)核等烈性傳染病，到非典型肺炎（severe acute respiratory syndrome，SARS）、高致病性禽流感（H5N1）、甲型 H1N1流感大流行、中東呼吸綜合征（Middle East respiratory syndrome，MERS）、人感染H7N9禽流感等各種新舊傳染病此起彼伏。為應(yīng)對(duì)來(lái)勢(shì)兇猛已知未知的天敵，新中國(guó)成立以來(lái)，一代又一代科研人員前赴后繼不斷地攻克技術(shù)難關(guān)，創(chuàng)造了一個(gè)又一個(gè)奇跡，疫苗研發(fā)能力與技術(shù)創(chuàng)新水平隨著人類健康事業(yè)得到快速的進(jìn)步和發(fā)展，疫苗品種和數(shù)量大幅度增加，產(chǎn)品質(zhì)量大幅提升，疫苗產(chǎn)業(yè)得到了前所未有的發(fā)展壯大，良好的發(fā)展格局為推進(jìn)健康中國(guó)建設(shè)打下了夯實(shí)的基礎(chǔ)。

1 菌毒株及研制的疫苗

新中國(guó)成立以來(lái)，隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，我國(guó)不斷分離自己的菌毒株，利用變更宿主、交替?zhèn)鞔?、改變選育條件，使我國(guó)自己選育的菌毒株免疫原性好、遺傳性穩(wěn)定、安全且適于長(zhǎng)期穩(wěn)定規(guī)?；a(chǎn)，為預(yù)防控制及消滅傳染病發(fā)揮了巨大的作用。

1.1 天花減毒活疫苗

1926年，由我國(guó)北平天壇防疫處從北平傳染病醫(yī)院 1名天花患者身上分離并傳代減毒，獲得“痘苗病毒天壇株”。解放后，用該株痘苗病毒制備的天花疫苗免疫效果及安全性均良好，為我國(guó)預(yù)防和維持無(wú)天花發(fā)揮了關(guān)鍵作用。

1.2 霍亂疫苗

20世紀(jì)50年代，中國(guó)藥品生物制品檢定所從我國(guó)本土分離的霍亂菌株中選出2株：1株稻葉型，1株小川型，用于霍亂疫苗生產(chǎn)。①二價(jià)滅活霍亂疫苗（O1/O139 WCV），由蘭州生物制品研究所（簡(jiǎn)稱蘭州所）研制，生產(chǎn)菌株為霍亂O1群的古典型Ogawa血清型18001株、El Tor型Inaba血清型16012株及O139群的93-3株，該疫苗于2008—2009年在柳州市柳城縣完成了臨床 Ⅰ、Ⅱa、Ⅱb 和Ⅲ期研究，臨床結(jié)果顯示疫苗具有良好的安全性。②霍亂毒素 B亞單位-全菌體霍亂疫苗（CTB-WCV），是加熱滅活和甲醛滅活的O1群霍亂弧菌古典型Ogawa與El Tor生物型Inaba血清型混合制劑。中國(guó)軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物工程研究所應(yīng)用遺傳工程技術(shù)研制的凍干口服霍亂疫苗（O1rCTB-WCV）是以大腸桿菌為載體，獲得了rCTB可分泌到胞外的高效表達(dá)菌株，再采用免疫親和層析技術(shù)純化工程菌表達(dá)的具有活性的rCTB蛋白，該產(chǎn)品由上海聯(lián)合賽爾生物工程有限公司以商品名OraVacs（腸溶膠囊凍干制劑）生產(chǎn)銷售。由于rCTB無(wú)論結(jié)構(gòu)還是功能均與ETEC的毒素相似，且這兩種毒素間還可出現(xiàn)免疫交叉反應(yīng)，因此，該疫苗在一定程度上有預(yù)防ETEC感染的作用。

1.3 森林腦炎滅活疫苗

1952年，中國(guó)醫(yī)科大學(xué)衛(wèi)生流行病組從吉林省臨江鎮(zhèn)三岔子森林腦炎死亡患者張某腦組織分離得到森林腦炎毒株，稱為“森張”毒株。1953年長(zhǎng)春生物制品研究所（簡(jiǎn)稱長(zhǎng)春所）采用該毒株開(kāi)展森林腦炎疫苗的研發(fā)工作，1967年成功研制地鼠腎原代細(xì)胞森林腦炎疫苗，1969年森林腦炎疫苗開(kāi)始規(guī)模推廣應(yīng)用，2004年成功研制具有完全自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的森林腦炎新型疫苗，實(shí)現(xiàn)了產(chǎn)品更新?lián)Q代，新型疫苗的研制成功為我國(guó)森林腦炎的預(yù)防發(fā)揮了巨大作用。2006年，國(guó)家將森林腦炎新型疫苗列為國(guó)家戰(zhàn)略儲(chǔ)備疫苗。長(zhǎng)春所是國(guó)內(nèi)生產(chǎn)森林腦炎疫苗唯一的企業(yè)。

1.4 斑疹傷寒疫苗

1957年，我國(guó)學(xué)者在蘭州分離1株普氏斑疹立克次體，命名為“蘭株”，經(jīng)國(guó)家鑒定列為疫苗生產(chǎn)用毒株之一。自1966年始，斑疹傷寒疫苗由蘭州所和成都生物制品研究所（簡(jiǎn)稱成都所）生產(chǎn)，1986年該疫苗停止生產(chǎn)。

1.5 卡介苗

我國(guó)在50年代均采用丹麥823株生產(chǎn)卡介苗，并將北京生物制品研究所（簡(jiǎn)稱北京所）保存的823株稱為D1（丹麥1）株，上海生物制品研究所（簡(jiǎn)稱上海所）保存的823株稱為D2（丹麥2）株。經(jīng)臨床觀察，于1993年在全國(guó)統(tǒng)一推行免疫原性好、接種后不良反應(yīng)率低的上海D2株為我國(guó)唯一的生產(chǎn)用卡介苗菌株。1990年，卡介苗給藥途徑由皮上劃痕法改為皮內(nèi)注射。

1.6 百日咳疫苗

1957年，經(jīng)北京所和蘭州所分離并選育，獲得了抗原性穩(wěn)定的優(yōu)良菌株（CS）。該菌株含有1、2、3血清型凝集原，并能在液體培養(yǎng)基中產(chǎn)生大量FHA和PT保護(hù)性抗原，之后該菌株用于無(wú)細(xì)胞百日咳疫苗規(guī)?；a(chǎn)。

1.7 炭疽活疫苗

1958年，我國(guó)學(xué)者從患炭疽的驢體內(nèi)分離的強(qiáng)毒菌株 A16，經(jīng)減毒培養(yǎng)獲得無(wú)莢膜水腫型 A16R減毒株。后經(jīng)蘭州所進(jìn)行了全面檢定，包括多種動(dòng)物安全性和免疫效力試驗(yàn)，1962年，該毒株用于生產(chǎn)A16R人用炭疽活疫苗。

1.8 脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗

1967年，中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所對(duì)從健康兒童糞便中分離出的 4株Ⅲ型脊灰野毒株進(jìn)行毒種選育試驗(yàn)，1969年成功選育出的Ⅲ2型減毒株，命名為中Ⅲ2株。1971年，衛(wèi)生部正式批準(zhǔn)中Ⅲ2株用于疫苗生產(chǎn)。2015年11月，北京所生產(chǎn)包含Sabin Ⅰ型+Ⅲ型、液體劑型的二價(jià)脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗。

1.9 麻疹減毒活疫苗

1960年，上海所從上海1名 2歲麻疹患兒血液中分離出麻疹病毒，先經(jīng)原代人胚腎（HK）傳33代，再經(jīng)原代人羊膜（HAM）傳39代后適應(yīng)于雞胚原代細(xì)胞（CEC），進(jìn)一步減毒獲得滬 191疫苗株，于1965年研制成功麻疹減毒活疫苗，該制品僅比世界第1支麻疹疫苗晚3年。60年代初，長(zhǎng)春所和北京所相繼分別將列寧格勒 4株人羊膜細(xì)胞傳至 47代和55代適應(yīng)于雞胚細(xì)胞，選育出麻疹減毒株長(zhǎng)47株和京55株。滬191和長(zhǎng)47疫苗株在我國(guó)連續(xù)使用近40年，為我國(guó)麻疹控制發(fā)揮了決定性作用。

1.10 風(fēng)疹減毒活疫苗

1979年，北京所從1名典型的風(fēng)疹病例6歲女孩李某咽拭子分離出風(fēng)疹病毒，經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)減毒，1984年獲得BRDⅡ風(fēng)疹減毒株。1990年進(jìn)行凍干疫苗的研制，1993年獲生產(chǎn)文號(hào)，1994年風(fēng)疹疫苗開(kāi)始大量供應(yīng)市場(chǎng)。

1.11 腮腺炎減毒活疫苗

1979年，上海所從JL樣病毒疫苗中分離出腮腺炎S79病毒株，在CEC上傳2代，北京所使用S79株進(jìn)行腮腺炎減毒活疫苗生產(chǎn)工藝的研究，1993年獲得試生產(chǎn)文號(hào)。臨床研究結(jié)果表明，疫苗具有良好的安全性和免疫原性，該疫苗于1997年獲正式生產(chǎn)文號(hào)。之后，北京所利用S79株開(kāi)始麻疹-腮腺炎-風(fēng)疹聯(lián)合疫苗的研制工作，1999年完成中試，2000年完成臨床研究，2002年獲正式生產(chǎn)文號(hào)。1956年武漢生物制品研究所（簡(jiǎn)稱武漢所）分離出 WM84病毒株，成功研制出腮腺炎疫苗、麻疹腮腺炎二聯(lián)疫苗。

1.12 腦膜炎球菌多糖疫苗和結(jié)合疫苗

我國(guó)A群流腦多糖疫苗于1980年研制成功，其生產(chǎn)任務(wù)主要由武漢所承擔(dān)。A+C腦膜炎球菌二價(jià)多糖疫苗于 2000年由蘭州所研制成功。ACYW135群四價(jià)腦膜炎球菌多糖疫苗于2006年上市，主要由智飛綠竹生物制藥有限公司、華蘭生物工程股份有限公司、玉溪沃森生物技術(shù)有限公司、成都康華生物制品有限公司等廠家生產(chǎn)。A+C多糖蛋白結(jié)合疫苗于2006年研制成功。A+C群腦膜炎球菌（結(jié)合）、b型流感嗜血桿菌（結(jié)合）聯(lián)合疫苗于2014年研制成功。多糖疫苗和多糖蛋白結(jié)合疫苗的應(yīng)用，有效地降低了腦脊髓膜炎的發(fā)病率，對(duì)由A、C、W135和Y群腦膜炎奈瑟菌引發(fā)的感染起到了預(yù)防作用。

1.13 腎綜合征出血熱疫苗

我國(guó)共分離出 5種腎綜合征出血熱毒株：Ⅰ 型Z10株1982年分離；Ⅱ 型 Z37株1989年分離；Ⅱ 型L99株 1983年分離；Ⅰ 型 LR1株 1983年分離；Ⅰ型PS-6株1994年分離。我國(guó)自主分離的毒株研制的腎綜合征出血熱疫苗有沙鼠腎原代細(xì)胞疫苗（浙江天元生物藥業(yè)有限公司）、地鼠腎原代細(xì)胞疫苗（長(zhǎng)春所）、乳小鼠純化疫苗（蘭州所）及Vero細(xì)胞純化疫苗（浙江衛(wèi)信生物藥業(yè)有限公司和羅益生物制藥有限公司）等，目前上市應(yīng)用的疫苗均為全病毒滅活疫苗。

1.14 甲型肝炎減毒活疫苗和滅活疫苗

我國(guó)于20世紀(jì)80年代分離了4株甲型肝炎毒株。①H2株來(lái)源和選育。1978年，由浙江醫(yī)學(xué)科學(xué)院從杭州附近農(nóng)村一肝炎暴發(fā)點(diǎn)1名12歲患甲型肝炎男孩糞便中分離，毒株在KMB17及MERN細(xì)胞上分離培養(yǎng)適應(yīng)傳代，并經(jīng)恒河猴安全性試驗(yàn)，第5代選育出適合疫苗生產(chǎn)的病毒株。②L-A-1株來(lái)源和選育。1980年，上海市衛(wèi)生防疫站胡孟冬等從黑龍江省1名 2歲患兒糞便中分離，毒株在SL7細(xì)胞傳7代，再經(jīng)2BS細(xì)胞株傳18代，由長(zhǎng)春所完成減毒株的選育，經(jīng)猴體安全性試驗(yàn)，第19代選育出適用于疫苗生產(chǎn)的 L-A-1減毒株。③TZ84株來(lái)源和選育。1984年，北京所從河北省唐山農(nóng)村甲型肝炎暴發(fā)流行村張姓患者早期糞便標(biāo)本分離病毒，經(jīng)2BS細(xì)胞分離培養(yǎng)適應(yīng)傳代，第10代選育出適合疫苗生產(chǎn)的病毒株。④呂8株來(lái)源和選育。1988年初，上海甲型肝炎流行時(shí)，由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所從南通市呂泗鎮(zhèn)甲型肝炎患者早期糞便標(biāo)本分離病毒，經(jīng)KMB17細(xì)胞分離培養(yǎng)適應(yīng)傳代，第10代病毒感染性滴度（7.0～7.75 logTCID50/mL）及抗原滴度（512）均達(dá)到疫苗生產(chǎn)要求。20世紀(jì)80年代我國(guó)利用分離的毒株進(jìn)行甲型肝炎減毒活疫苗的研制，1992年獲得了新藥證書(shū)和試生產(chǎn)文號(hào)，1996年獲得正式生產(chǎn)文號(hào)，2002年甲型肝炎滅活疫苗獲批上市。

1.15 水痘減毒活疫苗

1984年，北京所從1名4歲水痘患兒的水痘液中分離獲得水痘病毒，在2BS細(xì)胞中傳代減毒，獲得VZV84-7株病毒，后用該毒株進(jìn)行凍干疫苗研制，于2009年獲新藥證書(shū)和生產(chǎn)批準(zhǔn)文號(hào)。

1.16 口服輪狀病毒活疫苗

1985年，蘭州所將分離自腹瀉新生羔羊腸內(nèi)容物的羊輪狀病毒繼續(xù)在新生小牛腎細(xì)胞傳代，適應(yīng)株命名為蘭州羔羊輪狀病毒（lanzhou lamb rotavirus，簡(jiǎn)稱LLR株）。蘭州所利用LLR株開(kāi)發(fā)生產(chǎn)了口服輪狀病毒活疫苗，該制品自2001年上市以來(lái)已累計(jì)接種3000多萬(wàn)劑，對(duì)重癥腹瀉的保護(hù)率達(dá)90%以上。

1.17 人用狂犬病疫苗

我國(guó)使用的擁有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的狂犬病疫苗毒株主要有2種：①aG株。1980年以前，我國(guó)曾用此毒株作為羊腦組織狂犬病疫苗的生產(chǎn)毒株。②CTN-1株。1982年衛(wèi)生部批準(zhǔn)將此毒種擴(kuò)大使用。1984年，WHO狂犬病專家委員會(huì)第7次報(bào)告中，認(rèn)可該毒株為狂犬病病毒固定毒株，列為可用于生產(chǎn)疫苗的病毒株。2005年，WHO狂犬病專家委員會(huì)再次確認(rèn)該毒株為符合要求的狂犬病疫苗生產(chǎn)用疫苗株。

原代地鼠腎細(xì)胞疫苗（primary hamster kidney cells-derived vaccine，PHKCV）是第1種被批準(zhǔn)的經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)的狂犬病疫苗（cell cultured rabies vaccine，CCRV）。1980年，武漢所率先研制成功含鋁佐劑的PHKCV，毒株為北京 aG株。我國(guó)于1980年批準(zhǔn)使用PHKCV后，完全取代了Semple型狂犬病腦組織疫苗，使我國(guó)狂犬病疫苗的質(zhì)量達(dá)到了國(guó)際先進(jìn)水平。目前國(guó)內(nèi)很多廠家均使用CTN-1株生產(chǎn)Vero細(xì)胞狂犬病疫苗。2014年，成都康華生物制品有限公司使用CTN-1株研制的人二倍體細(xì)胞狂犬病疫苗（human diploid cells-derived vaccine，HDCV）獲批上市。

1.18 肺炎球菌多糖疫苗和結(jié)合疫苗

國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的23價(jià)肺炎球菌多糖疫苗生產(chǎn)用菌株包含 23種常見(jiàn)的肺炎球菌血清型（1、2、3、4、5、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F、33F）。2007年，成都所生產(chǎn)的23價(jià)肺炎球菌多糖疫苗上市。截至目前，國(guó)內(nèi)共有3家企業(yè)獲得23價(jià)肺炎球菌多糖疫苗生產(chǎn)文號(hào)。各廠家生產(chǎn)的23價(jià)肺炎球菌多糖疫苗所用生產(chǎn)菌株、培養(yǎng)基、殺菌方法及多糖提取和純化工藝各不相同，相應(yīng)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)也有區(qū)別，但所用菌種的血清型別均按WHO規(guī)定的型別進(jìn)行生產(chǎn)。針對(duì)肺炎球菌多糖疫苗對(duì)2歲以下嬰幼兒的免疫原性較差的問(wèn)題，近年來(lái)研發(fā)出多種肺炎球菌多糖-結(jié)合疫苗，如 PCV-13含血清型 1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F和23F的肺炎莢膜多糖。

1.19 b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗

20世紀(jì)末，在美國(guó) NIH的Robbins博士的大力支持下，蘭州所于2000年在國(guó)內(nèi)率先研制出Hib多糖-蛋白結(jié)合疫苗，該疫苗在2003年完成相關(guān)的臨床試驗(yàn)，并獲準(zhǔn)生產(chǎn)。我國(guó)政府為了感謝Robbins博士對(duì)中國(guó)生物制品事業(yè)的無(wú)私奉獻(xiàn)，授予他2009年度“中華人民共和國(guó)友誼獎(jiǎng)”。

1.20 痢疾疫苗

我國(guó)科學(xué)家以 T32株為基礎(chǔ)，通過(guò)不同技術(shù)手段構(gòu)建了多株雙價(jià)或多價(jià)減毒口服痢疾活疫苗，其中由蘭州所研制的口服雙價(jià)痢疾活疫苗FS是通過(guò)質(zhì)粒誘導(dǎo)技術(shù)將表達(dá)宋內(nèi)菌O抗原的大質(zhì)粒轉(zhuǎn)移至T32中，構(gòu)建了同時(shí)表達(dá)福氏2a和宋內(nèi)菌的雙價(jià)疫苗候選株，實(shí)現(xiàn)國(guó)際首創(chuàng)。我國(guó)學(xué)者通過(guò)對(duì)國(guó)內(nèi)流行菌株的抗原性、免疫保護(hù)效果的比較，分子流行病學(xué)調(diào)查和慢性菌痢免疫機(jī)理的研究及T32株、S7株生物學(xué)特性、毒力表型、基因背景、質(zhì)粒穩(wěn)定性的系統(tǒng)研究，利用基因工程技術(shù)在國(guó)內(nèi)首先構(gòu)建成功了能表達(dá)福氏2a和宋內(nèi)氏痢疾雙價(jià)抗原的FS菌株，建立了規(guī)模、特性穩(wěn)定的生產(chǎn)工藝。于1994和1997年在河南省長(zhǎng)葛市開(kāi)展了流行病學(xué)觀察，觀察人數(shù)分別為13989和26230人，兩次臨床觀察結(jié)果顯示，疫苗安全性均良好，對(duì)福氏2a菌保護(hù)率分別為62.84%和61.07%，對(duì)宋內(nèi)菌保護(hù)率分別為49.30%和72.48%，對(duì)其他菌型的保護(hù)率分別為 47.90%和 41.89%。FS株疫苗于1996年獲得新藥證書(shū)和試生產(chǎn)文號(hào)并上市使用，填補(bǔ)了世界預(yù)防醫(yī)學(xué)研究的一項(xiàng)空白。

1.21 EV71滅活疫苗

目前手足口病（hand，foot and mouth disease，HFMD）疫苗的研制主要集中在EV71單價(jià)疫苗研究上，處于研發(fā)和生產(chǎn)階段的EV71疫苗包括全病毒滅活疫苗、病毒樣顆粒（virus-like particle，VLP）疫苗、DNA疫苗、亞單位疫苗以及減毒活疫苗，其中全病毒滅活疫苗、VLP疫苗研發(fā)最為迅速。EV71型HFMD疫苗是中國(guó)領(lǐng)先研發(fā)的創(chuàng)新型疫苗，全球第1支HFMD滅活疫苗在中國(guó)率先上市。

中國(guó)有3家企業(yè)的EV71滅活疫苗成功上市，中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所利用M01株在二倍體KMB17細(xì)胞上培養(yǎng)、北京科興生物制品有限公司利用H07株在Vero細(xì)胞上培養(yǎng)及國(guó)藥中生生物技術(shù)研究院有限公司聯(lián)合武漢所利用 FY株在Vero細(xì)胞上培養(yǎng)均研制成功了EV71滅活疫苗，并已于2016和2017年獲批上市，該疫苗的應(yīng)用使我國(guó)兒童HFMD的流行和蔓延得到有效控制。

1.22 乙型腦炎減毒活疫苗

主要包括2種毒株：①P3株。1950和1951年，北京所先后用雞胚和鼠腦制備了流行性乙型腦炎滅活疫苗。1967年，北京所用地鼠腎細(xì)胞成功培養(yǎng)乙腦病毒P3株，并研制出地鼠腎細(xì)胞滅活疫苗，1968年正式投產(chǎn)和應(yīng)用。②SA14-14-2減毒株。該毒種母株 SA14是我國(guó)學(xué)者1954年從西安一種庫(kù)蚊幼蟲(chóng)中分離。SA14-14-2株乙腦減毒活疫苗為我國(guó)獨(dú)創(chuàng)，1989年獲新藥證書(shū)并由成都所投產(chǎn)，之后武漢所和蘭州所相繼投產(chǎn)。該疫苗是我國(guó)第一個(gè)獲得WHO預(yù)認(rèn)證的疫苗產(chǎn)品，除在國(guó)內(nèi)大規(guī)模應(yīng)用外，近年來(lái)已出口韓國(guó)、尼泊爾、印度、泰國(guó)等國(guó)家，年出口量超過(guò)3000萬(wàn)劑。該毒株生產(chǎn)的乙腦減毒活疫苗不僅保護(hù)效率高、安全性好、毒副反應(yīng)低，而且生產(chǎn)工藝穩(wěn)定。乙型腦炎減毒活疫苗的出口應(yīng)用為流行地區(qū)或國(guó)家的乙腦疫情控制發(fā)揮了重要作用。

1.23 傷寒Vi多糖疫苗

我國(guó)傷寒疫苗品種有滅活疫苗和組分疫苗。①滅活疫苗。主要有全菌體傷寒滅活疫苗、傷寒和甲型副傷寒聯(lián)合疫苗及傷寒甲型和乙型副傷寒聯(lián)合疫苗等品種。②組分疫苗。1990年，中國(guó)食品藥品檢定研究院聯(lián)合中國(guó)生物技術(shù)股份有限公司旗下6家生物制品研究所成立傷寒Vi多糖疫苗研制協(xié)作組，于1992年成功研制出質(zhì)優(yōu)價(jià)廉的傷寒Vi多糖疫苗。

2 細(xì)胞基質(zhì)

與疫苗研究和生產(chǎn)相伴而行，中國(guó)科技工作者研究建立了病毒類疫苗所用的細(xì)胞基質(zhì)。

2.1 原代細(xì)胞

將新鮮動(dòng)物組織剪碎、消化、分散后，在適當(dāng)條件下進(jìn)行培養(yǎng)的細(xì)胞為原代細(xì)胞。

2.2 二倍體細(xì)胞

人二倍體細(xì)胞是指來(lái)源于正常人體組織，并且能在體外進(jìn)行有限傳代培養(yǎng)的細(xì)胞。①2BS。1973年，由北京所自行建立，該細(xì)胞株原始材料來(lái)源于1名 4月齡女性胎兒的肺組織。該細(xì)胞能傳67代，20～40代為生長(zhǎng)旺盛階段，將其第14代細(xì)胞凍存于液氮中作為原始代次細(xì)胞。2BS株已用于風(fēng)疹減毒活疫苗、水痘減毒活疫苗、脊髓灰質(zhì)炎減毒疫苗、H2甲型肝炎減毒活疫苗、呂8株甲型肝炎滅活疫苗的制備。②KMB17。1973年，由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所自行建立，該細(xì)胞株原始材料來(lái)源于 1名3月齡女性胎兒的肺組織。3代細(xì)胞作為原始種子細(xì)胞保存，6代細(xì)胞作為主種子細(xì)胞大量?jī)龃嬗谝旱?，?xì)胞齡以群體倍增水平計(jì)算，可用于1∶4分種法繼續(xù)傳代。KMB17株于2～60代為生長(zhǎng)旺盛階段。根據(jù)WHO規(guī)程規(guī)定，該細(xì)胞株于 44代以前可用于疫苗生產(chǎn)。KMB17株已用于EV71滅活疫苗、脊髓灰質(zhì)炎減毒疫苗、H2甲型肝炎減毒活疫苗、呂 8株甲型肝炎滅活疫苗的制備。③ Walvax-2。2013年8月31日，云南沃森生物技術(shù)股份有限公司建立的新人二倍體細(xì)胞株Walvax-2通過(guò)鑒定，該細(xì)胞株來(lái)源合法，背景清晰，資料較齊全，符合現(xiàn)行版《中國(guó)藥典》有關(guān)細(xì)胞用于疫苗生產(chǎn)的相關(guān)要求；Walvax-2細(xì)胞株已獲得中國(guó)食品藥品檢定研究院及中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心的檢定報(bào)告。研究表明，該細(xì)胞株對(duì)狂犬病、甲肝及水痘病毒均有較好的敏感性。

2.3 傳代細(xì)胞

傳代細(xì)胞是指能夠無(wú)限繁殖傳代培養(yǎng)的細(xì)胞系。我國(guó)常用的傳代細(xì)胞有Vero細(xì)胞、CHO細(xì)胞、Sf9昆蟲(chóng)細(xì)胞。Vero細(xì)胞對(duì)許多病毒敏感，我國(guó)已用Vero細(xì)胞生產(chǎn)EV71型滅活疫苗、脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗、狂犬病滅活疫苗和乙型腦炎滅活疫苗。CHO細(xì)胞能廣泛地表達(dá)重組蛋白疫苗如基因工程乙肝疫苗。Sf9細(xì)胞能培養(yǎng)病毒如桿狀病毒，用于生產(chǎn)重組蛋白。

3 疫苗生產(chǎn)工藝

近30年來(lái)，隨著病原體、細(xì)胞或工程菌規(guī)?；囵B(yǎng)技術(shù)、疫苗抗原制備、提取與純化技術(shù)及后加工技術(shù)的發(fā)展，使疫苗的品種、數(shù)量、質(zhì)量及控制等得到飛躍發(fā)展。

3.1 培養(yǎng)基的持續(xù)改進(jìn)

改進(jìn)培養(yǎng)基制備、供應(yīng)和質(zhì)量是生物制品生產(chǎn)和質(zhì)量的關(guān)鍵，同時(shí)疫苗的檢定也離不開(kāi)培養(yǎng)基。1960年，中國(guó)藥品生物制品檢定所研制了“生檢No.1膽鹽”和“生檢No.2膽鹽”產(chǎn)品，其各項(xiàng)指標(biāo)均達(dá)到國(guó)際同類產(chǎn)品先進(jìn)水平。1976—1981年期間，我國(guó)研制成功了100多種干燥培養(yǎng)基，在多種制品研發(fā)過(guò)程中得到廣泛應(yīng)用。培養(yǎng)基經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基及無(wú)血清培養(yǎng)基階段。無(wú)血清培養(yǎng)基的使用，使生產(chǎn)的疫苗更安全、產(chǎn)量更高、成本更低。

以鉤端螺旋體疫苗研制所使用的培養(yǎng)基為例，該疫苗的生產(chǎn)歷經(jīng)3個(gè)發(fā)展階段：蒸餾水疫苗時(shí)期、人胎盤浸液疫苗時(shí)期和綜合培養(yǎng)基疫苗時(shí)期。在成都所科技人員的努力下，這3個(gè)發(fā)展階段使我國(guó)鉤體疫苗的生產(chǎn)能力和質(zhì)量提高到了一個(gè)嶄新階段，為該疫苗的國(guó)際領(lǐng)先奠定了基礎(chǔ)。1984年，我國(guó)學(xué)者應(yīng)用問(wèn)號(hào)鉤端螺旋體外膜為抗原研制的多價(jià)鉤端螺旋體組分疫苗獲得成功，該疫苗免疫效果與鉤端螺旋體全菌死疫苗相近，但不良反應(yīng)更低，已于2001年獲疫苗生產(chǎn)批文。

3.2 深層培養(yǎng)技術(shù)的開(kāi)發(fā)

深層培養(yǎng)技術(shù)使細(xì)菌類疫苗質(zhì)量全面提升，產(chǎn)量大幅增加。20世紀(jì)50年代以來(lái)，我國(guó)先采用固體培養(yǎng)工藝培養(yǎng)百日咳桿菌制備全菌體百日咳疫苗（whole cell pertussis vaccine，WPV），之后采用液體培養(yǎng)工藝制備百日咳疫苗原液。20世紀(jì)50年代中后期，武漢所去掉生產(chǎn)百日咳疫苗包姜氏培養(yǎng)基中的羊血成分，加入活性炭，并將活性炭培養(yǎng)基用于生產(chǎn)。20世紀(jì)60年代，各生物制品研究所先后采用反應(yīng)器通氣攪拌深層培養(yǎng)生產(chǎn)霍亂、傷寒、鉤端螺旋體和百日咳疫苗等制品。百日咳疫苗的深層培養(yǎng)是 20世紀(jì) 70年代中期開(kāi)始的，至2004年，武漢所無(wú)細(xì)胞百日咳桿菌培養(yǎng)規(guī)模達(dá)到5 t（單個(gè)發(fā)酵罐最大體積為5 t，能培養(yǎng)3 t；3個(gè)罐一起培養(yǎng)，單批可達(dá)8 t），極大地提高了細(xì)菌的培養(yǎng)效率。

3.3 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的進(jìn)步使多種病毒類疫苗開(kāi)發(fā)成功

20世紀(jì)50年代，我國(guó)采用單層細(xì)胞培養(yǎng)方法和轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)方法用于脊髓灰質(zhì)炎疫苗、麻疹疫苗、痘苗、乙型腦炎疫苗和狂犬病疫苗等研發(fā)和生產(chǎn)。細(xì)胞培養(yǎng)方式分為兩類，一類是貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)方式，由傳統(tǒng)方瓶和轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)，發(fā)展到多層細(xì)胞工廠。進(jìn)入21世紀(jì)以來(lái)，生物反應(yīng)器微載體懸浮培養(yǎng)和片狀載體培養(yǎng)工藝及生物反應(yīng)器懸浮培養(yǎng)技術(shù)和搖床技術(shù)的應(yīng)用極大地提高了哺乳動(dòng)物細(xì)胞基質(zhì)的培養(yǎng)能力，進(jìn)而提高了病毒類疫苗的規(guī)模生產(chǎn)能力和質(zhì)量。

3.4 規(guī)?；崛∨c純化抗原技術(shù)得到快速發(fā)展

隨著我國(guó)疫苗市場(chǎng)規(guī)模的持續(xù)快速增長(zhǎng)、科學(xué)技術(shù)的發(fā)展以及人們對(duì)疫苗安全性和不良反應(yīng)認(rèn)識(shí)的加深，經(jīng)簡(jiǎn)單提純的疫苗已不能滿足對(duì)疫苗純度、無(wú)菌性和安全性等要求。疫苗的純化過(guò)程是指通過(guò)不同的方法，如離心、澄清過(guò)濾、超濾、鹽析、層析等去除不需要的雜質(zhì)，將目的產(chǎn)物如細(xì)菌/病毒本身或亞單位等成分從培養(yǎng)物中分離出來(lái)，從而最終得到高純度的疫苗有效成分。

20世紀(jì)80年代中期，北京所將從百日咳菌體濃鹽浸出的抗原，經(jīng)Sepharose 6B凝膠柱層析獲得FHA和PT組分，在去除內(nèi)毒素的基礎(chǔ)上，控制FHA和PT比例（9∶1），經(jīng)解毒后制成血凝素組分疫苗。蘭州所于1991年研制出含有PT和FHA的無(wú)細(xì)胞百日咳疫苗，1994年研制出無(wú)細(xì)胞百白破聯(lián)合疫苗。

3.5 冷凍干燥技術(shù)使疫苗的有效期延長(zhǎng)

冷凍干燥（簡(jiǎn)稱凍干）技術(shù)是將疫苗溶液在低溫下凍結(jié)，然后在真空條件下升華干燥，除去冰晶，待升華結(jié)束后再進(jìn)行解吸干燥，除去部分結(jié)合水的干燥方法。應(yīng)用凍干技術(shù)制備的疫苗有卡介苗、牛痘苗、麻疹疫苗、黃熱病疫苗、狂犬病疫苗、痢疾疫苗、鼠疫疫苗等。如液體卡介苗的有效期為1個(gè)月，凍干卡介苗則可達(dá)1年；液體牛痘苗的有效期為2～3個(gè)月，武漢所率先采用蛋白胨作為保護(hù)劑研制成功的凍干痘苗，有效期可達(dá)1年。

3.6 基因工程技術(shù)使疫苗更新?lián)Q代

基因重組乙肝疫苗是我國(guó)第一個(gè)成功使用基因工程技術(shù)改造和替代傳統(tǒng)疫苗的典范。我國(guó)乙肝疫苗經(jīng)歷了兩個(gè)階段：血源性乙肝疫苗和基因工程乙肝疫苗。1985年北京所獲血源性乙肝疫苗新藥證書(shū)，該制品是新藥審評(píng)委員會(huì)成立以來(lái)第一個(gè)接受評(píng)審并予以批準(zhǔn)的新生物制品。我國(guó)于1995年引進(jìn)美國(guó)Merck公司的重組釀酒酵母乙肝疫苗生產(chǎn)工藝，由北京生所和深圳康泰生物制品股份有限公司生產(chǎn)，2004年由大連漢信生物制藥有限公司研發(fā)的重組漢遜酵母乙肝疫苗獲批上市。除此之外，還有以哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)的乙肝疫苗，最早應(yīng)用的細(xì)胞是中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢（Chinese hamster ovary，CHO）細(xì)胞。CHO乙肝疫苗于1992年以長(zhǎng)春所為主研制成功。

4 獨(dú)創(chuàng)疫苗

我國(guó)科學(xué)家在開(kāi)拓創(chuàng)新中不斷超越自我，研制成功了多種中國(guó)獨(dú)創(chuàng)疫苗。

4.1 乙型腦炎減毒活疫苗詳見(jiàn)1.22項(xiàng)。

4.2 痢疾疫苗詳見(jiàn)1.20項(xiàng)。

4.3 人用大流行流感疫苗

大流行流感主要由流行于禽、豬等其他物種之間的流感病毒（H5N1、H1N1、H7N9）傳染給人造成。人感染后起病急、致死率高，預(yù)防大流行流感最有效的方法是接種疫苗。2007年，國(guó)內(nèi)首家人用大流行流感（H5N1型）疫苗獲批上市。2009年，我國(guó)首創(chuàng)的甲型H1N1大流行流感疫苗的應(yīng)用，成功預(yù)防了甲型H1N1流感的流行，取得了良好的社會(huì)效益。

4.4 幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，Hp）疫苗

第三軍醫(yī)大學(xué)和安徽蕪湖康衛(wèi)生物科技有限公司從1995年起開(kāi)展Hp基因工程疫苗的研究。該項(xiàng)目運(yùn)用生物信息學(xué)表位預(yù)測(cè)、表位肽合成與步移、免疫DC細(xì)胞負(fù)載特異性抗原鑒定等技術(shù)，從Hp的1600余個(gè)候選疫苗抗原中篩選出外膜蛋白UreB的免疫保護(hù)性抗原優(yōu)勢(shì)表位。在此基礎(chǔ)上，篩選獲得了疫苗抗原（UreB）和佐劑（LTB）天然一體的重組 Hp亞單位分子佐劑疫苗工程菌株。2003年 5月，口服重組Hp疫苗獲準(zhǔn)進(jìn)入 Ⅰ、Ⅱ 期臨床試驗(yàn)。2003年8月—2004年3月完成了Ⅰ、Ⅱ期臨床研究。2004年12月獲準(zhǔn)進(jìn)入Ⅲ期臨床試驗(yàn)。2004年12月—2006年9月，該制品完成了Ⅲ期臨床試驗(yàn)。2009年，我國(guó)自主研制的口服重組Hp疫苗獲國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局頒布的原創(chuàng)1.1類新藥證書(shū)，成為世界上首個(gè)獲批的Hp疫苗。

4.5 戊型肝炎疫苗

由于戊型肝炎病毒（hepatitis evirus，HEV）缺乏有效的組織培養(yǎng)體系，難以開(kāi)展HE滅活和減毒活疫苗的研制工作。目前HE疫苗研究主要集中于HE基因工程疫苗的研制。全球第1支HE疫苗（p239疫苗）于2012年10月在我國(guó)上市，該產(chǎn)品的應(yīng)用是全球戊肝防控歷史性的突破，2019年該疫苗已獲批在美國(guó)進(jìn)行臨床試驗(yàn)?，F(xiàn)已上市的HE疫苗為成人型疫苗，適用于16歲及以上人群，如何盡快開(kāi)發(fā)出適合于兒童應(yīng)用的HE疫苗是今后需重點(diǎn)開(kāi)展的工作。

4.6 Sabin IPV滅活疫苗

2015年7月，由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所自主研發(fā)的全球首個(gè) Sabin IPV正式投入市場(chǎng)，Sabin株脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗是我國(guó)也是全球首個(gè)采用現(xiàn)行脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗生產(chǎn)毒株（Sabin株）生產(chǎn)的。2017年9月，由北京所生產(chǎn)的Sabin株脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗（以下簡(jiǎn)稱“sIPV疫苗”）正式上市，sIPV疫苗采用世界衛(wèi)生組織提供的Sabin株脊髓灰質(zhì)炎Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 型毒株。自2015年上市以來(lái)，Sabin IPV疫苗生產(chǎn)企業(yè)已向市場(chǎng)投入約 8000萬(wàn)人份的Sabin IPV疫苗，市售疫苗具有良好的安全性和免疫原性。

2016年4月29日，響應(yīng)WHO的決議，國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委下發(fā)通知（國(guó)衛(wèi)發(fā)明電〔2016〕34號(hào)），全國(guó)范圍內(nèi)自 2016年 5月 1日起停用tOPV，改用bOPV，并將IPV納入國(guó)家免疫規(guī)劃。由此，我國(guó)脊髓灰質(zhì)炎疫苗免疫程序調(diào)整為“1+3”模式，即：2月齡接種1劑次IPV，3、4月齡及 4周歲各接種 1劑次bOPV。按照WHO全球?qū)崿F(xiàn)消滅脊髓灰質(zhì)炎目標(biāo)的計(jì)劃，隨著條件的逐漸成熟，脊髓灰質(zhì)炎疫苗序貫接種策略將會(huì)由“1+3”→“2+2”→“3+1”的過(guò)渡方案，最終實(shí)現(xiàn)全程4劑IPV的目標(biāo)方案。

4.7 HFMD疫苗詳見(jiàn)1.21項(xiàng)。

4.8 埃博拉疫苗

由軍事醫(yī)學(xué)研究院生物工程研究所與康希諾生物股份公司聯(lián)合開(kāi)發(fā)的埃博拉疫苗（Ad5-EBOV）2017年獲得批準(zhǔn)注冊(cè)，該疫苗為全球首創(chuàng)。Ad5-EBOV是一種基于人5型重組腺病毒載體構(gòu)建的疫苗，可表達(dá)扎伊爾型（Makona株，2014）埃博拉病毒GP蛋白，該疫苗在豚鼠和食蟹猴上顯示了100%的免疫保護(hù)效果。該疫苗分別在我國(guó)和塞拉利昂進(jìn)行了中國(guó)人群、在華非洲人群和塞拉利昂本地非洲人群的臨床觀察，這是我國(guó)自主研發(fā)的疫苗首次在境外實(shí)施的臨床試驗(yàn)。觀察結(jié)果顯示，疫苗具有良好的安全性，接種疫苗最常見(jiàn)的反應(yīng)為注射部位疼痛，疫苗相關(guān)不良反應(yīng)低于rVSVZEBOV疫苗。

4.9 腎綜合征出血熱疫苗

我國(guó)用細(xì)胞培養(yǎng)方法研制成功的腎綜合征出血熱疫苗是世界獨(dú)創(chuàng)疫苗，其所用的細(xì)胞基質(zhì)有沙鼠腎原代細(xì)胞、地鼠腎原代細(xì)胞和Vero細(xì)胞等。

5在研疫苗

近20年間，我國(guó)開(kāi)發(fā)研制的多種新疫苗，有的處于臨床研究階段，有的完成了臨床前研究，其中有些新疫苗走在世界的前列。

5.1 傷寒和副傷寒結(jié)合疫苗

由蘭州所研制的甲型副傷寒結(jié)合疫苗，選用來(lái)自尼泊爾甲型副傷寒患者分離的 NTP-6株，經(jīng)全面檢定后作為生產(chǎn)用菌株。該疫苗于2006年在廣西開(kāi)展了Ⅰ期臨床安全性研究，在疫苗安全性得到充分保障的基礎(chǔ)上，2011年在廣西隆安縣開(kāi)展了不同免疫人群、不同免疫劑量的Ⅱ期臨床研究，結(jié)果表明，疫苗具有良好的安全性和免疫原性。云南沃森生物技術(shù)股份有限公司研制的甲型、乙型副傷寒結(jié)合疫苗生產(chǎn)用菌株選擇細(xì)菌脂多糖鏈有優(yōu)勢(shì)的CMCC50073的甲型副傷寒沙門菌菌株和 CMCC50074的乙型副傷寒沙門菌菌株，該制品已完成實(shí)驗(yàn)室和動(dòng)物安全性評(píng)價(jià)研究，其中甲型副傷寒結(jié)合疫苗在2017年已獲得臨床研究批件。

5.2 霍亂疫苗

由中國(guó)軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物工程研究所與蘭州所聯(lián)合研制的O139 rCTB-WCV是由rCTB和甲醛滅活的O139群霍亂弧菌93-3株構(gòu)建的，每劑含 1 mg rCTB，菌體濃度為5×1010的凍干腸溶膠囊制劑。該制品在山東省高密市完成Ⅰ、Ⅱ期臨床研究，在江蘇省鹽城市完成Ⅲ期臨床觀察，試驗(yàn)效果顯示，該疫苗具有良好的安全性和免疫原性。

5.3 多價(jià)HFMD疫苗

隨著EV71滅活疫苗的成功研制，CVA16滅活疫苗的研究也取得重大進(jìn)展。目前國(guó)內(nèi)已完成了CA16單價(jià)、EV71-CA16二價(jià)滅活疫苗的臨床前研究，并申請(qǐng)臨床研究。其他類型疫苗如以EV71、CA16為基礎(chǔ)的多價(jià)HFMD VLP疫苗，均顯示具有較好的動(dòng)物免疫原性和保護(hù)效果，是具有發(fā)展?jié)摿Φ暮蜻x疫苗。

5.4 多價(jià)輪狀病毒疫苗

蘭州所開(kāi)發(fā)了羊-人輪狀病毒基因重配三價(jià)活疫苗，并完成了Ⅲ期臨床觀察。武漢所開(kāi)發(fā)的六價(jià)UK重配株輪狀病毒活疫苗已完成Ⅰ、Ⅱ期臨床研究，正在進(jìn)行Ⅲ期臨床研究。國(guó)內(nèi)還有多家單位正在進(jìn)行五價(jià)輪狀病毒疫苗的研究。

5.5 重組人乳頭瘤病毒（HPV）疫苗

目前，我國(guó)有多家單位正在進(jìn)行HPV L1 VLP疫苗的研究，多種HPV疫苗已進(jìn)入 Ⅲ 期臨床試驗(yàn)。其中，以廈門大學(xué)和廈門萬(wàn)泰滄海生物技術(shù)有限公司聯(lián)合研制的二價(jià)HPV16/18疫苗（Cecolin?）進(jìn)度最快，2012年底率先進(jìn)入Ⅲ期臨床試驗(yàn)。上海澤潤(rùn)生物技術(shù)有限公司研發(fā)的二價(jià) HPV16/18疫苗（酵母表達(dá)）2014年11月進(jìn)入Ⅲ 期臨床試驗(yàn)。成都所四價(jià)HPV疫苗（漢遜酵母表達(dá)）處于Ⅲ期臨床階段，此外上海所、上海博唯生物科技有限公司和北京康樂(lè)衛(wèi)士等公司的產(chǎn)品正在進(jìn)行臨床研究。我國(guó)現(xiàn)有多個(gè)第2代HPV疫苗——九價(jià)HPV疫苗正處于臨床試驗(yàn)申報(bào)階段。由國(guó)藥中生生物技術(shù)研究院有限公司、北京所和成都所聯(lián)合申報(bào)的11價(jià)HPV疫苗已進(jìn)入臨床研究。

5.6 重組諾如病毒雙價(jià)疫苗

由國(guó)藥中生生物技術(shù)研究院有限公司和蘭州所申報(bào)的一類新藥——重組諾如病毒雙價(jià)疫苗獲得國(guó)家藥品監(jiān)督管理局臨床試驗(yàn)許可。該品種在國(guó)內(nèi)外均無(wú)上市產(chǎn)品，為國(guó)內(nèi)第一個(gè)獲批臨床研究的同類疫苗。諾如病毒是引起兒童、老人和成人急性胃腸炎的主要致病原，具有高度傳染性和快速傳播能力，極易引起聚集性疫情。近年來(lái)，我國(guó)諾如病毒感染頻繁暴發(fā)，散發(fā)病例也逐年增多。GⅠ和GⅡ是引起人類急性 胃腸炎的主要基因群，該疫苗組分中GⅠ.1和GⅡ.4是2個(gè)最關(guān)鍵的基因型。

5.7 金黃色葡萄球菌疫苗

第三軍醫(yī)大學(xué)國(guó)家免疫生物制品工程技術(shù)研究中心與成都?xì)W林生物科技股份有限公司應(yīng)用“反向疫苗學(xué)”技術(shù)，并結(jié)合大規(guī)模動(dòng)物（1.6萬(wàn)余只小鼠及40只食蟹猴）免疫保護(hù)篩選實(shí)驗(yàn)，從金黃色葡萄球菌全基因組2742個(gè)ORFs中篩選并鑒定出抗原性強(qiáng)、保守性好、免疫保護(hù)效果明顯的5個(gè)免疫優(yōu)勢(shì)抗原，獲得了分別針對(duì)金黃色葡萄球菌黏附定植、重要代謝途徑、毒素分泌、免疫逃逸路徑等關(guān)鍵致病環(huán)節(jié)的“雞尾酒式”疫苗保護(hù)性抗原組方，該疫苗安全性良好，LD90致死劑量攻毒免疫保護(hù)率穩(wěn)定大于85%。采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)株及國(guó)內(nèi)不同地區(qū)、不同感染部位來(lái)源、不同耐藥程度、不同毒力程度等多株臨床分離菌株攻毒，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，該疫苗具有良好的免疫原性。該疫苗為國(guó)際上抗原種類最多的五價(jià)重組金黃色葡萄球菌疫苗，為我國(guó)第一個(gè)完全自主研發(fā)并獲批開(kāi)展Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期人體臨床試驗(yàn)的金黃色葡萄球菌疫苗。

5.8 登革疫苗

軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所與成都所等有關(guān)單位合作成功建立了該疫苗株SA14-14-2的反向遺傳學(xué)系統(tǒng)，并成功制備了乙腦/登革嵌合病毒。該嵌合病毒接種乳鼠后神經(jīng)毒力顯著降低，高劑量接種猴體后也未產(chǎn)生病毒血癥，具有明確的減毒特征和遺傳穩(wěn)定性；單劑量免疫小鼠及恒河猴均能誘導(dǎo)特異的保護(hù)性免疫應(yīng)答，顯示出良好的應(yīng)用前景，有望在不遠(yuǎn)的將來(lái)進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段。

單位疫流感疫苗流感病毒疫苗上市以來(lái)，先后經(jīng)歷了全病毒滅活疫苗、流感病毒裂解疫苗、減毒活疫苗以及基因工程疫苗等4個(gè)時(shí)期。目前上市的流感疫苗為季節(jié)性流感病毒裂解疫苗。2018年，國(guó)家藥品監(jiān)督管理局（NMPA）批準(zhǔn)了華蘭生物的四價(jià)流感病毒裂解疫苗上市；NMPA官網(wǎng)顯示，武漢所和長(zhǎng)春所的四價(jià)流感病毒裂解疫苗已進(jìn)入生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)核查階段，即將上市；長(zhǎng)春百克生物科技股份公司的流感減毒活疫苗已經(jīng)完成臨床研究，正在申報(bào)生產(chǎn)注冊(cè)。隨著四價(jià)流感病毒裂解疫苗以及減毒活疫苗的上市，補(bǔ)充了我國(guó)流感疫苗的品種，有利于我國(guó)更好地防控流感。國(guó)內(nèi)還有很多單位正在從事基因工程流感亞單位疫苗的研究。

5.10 艾滋病疫苗

我國(guó)艾滋病疫苗研究始于 1996年，科研人員在國(guó)內(nèi)艾滋病高發(fā)區(qū)進(jìn)行了大量流行病學(xué)調(diào)查，并從患者血液中分離出 HIV—1中國(guó)流行株，據(jù)此構(gòu)建了由DNA疫苗及重組病毒載體疫苗組成的復(fù)合型艾滋病疫苗。2004年11月25日，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)中國(guó)自主研制的首支艾滋病疫苗進(jìn)入Ⅰ期臨床研究。2006年6月，Ⅰ期臨床研究在廣西完成，全部49位受試者均未出現(xiàn)明顯不良反應(yīng)，接種疫苗受試者產(chǎn)生了針對(duì)HIV的特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)。2009年3月21日，首支艾滋病疫苗Ⅱ期臨床研究在廣西南寧正式啟動(dòng)，繼續(xù)招募志愿者開(kāi)展新的臨床試驗(yàn)，以進(jìn)一步檢驗(yàn)我國(guó)自主研制的首支艾滋病疫苗的安全有效性。2006年，中國(guó)疾病預(yù)防控制中心和北京所以復(fù)制型天壇痘苗病毒為載體的艾滋病疫苗DNA-rTV獲準(zhǔn)進(jìn)入臨床試驗(yàn)。Ⅰ期臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示，rTV在人體具有良好的安全性和耐受性，2014年完成 Ⅱa期臨床試驗(yàn)。2019年6月，在北京佑安醫(yī)院和浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院全面啟動(dòng) Ⅱ 期多中心臨床試驗(yàn)，此次臨床試驗(yàn)計(jì)劃招募160名HIV陰性的健康志愿者，主要目的是優(yōu)化疫苗的免疫接種程序。受試者需接受3次疫苗接種及相關(guān)抽血檢查，并進(jìn)行2年隨訪。

5.11 腦膜炎球菌多糖結(jié)合疫苗

ACYW135群腦膜炎球菌多糖結(jié)合疫苗國(guó)內(nèi)有4家企業(yè)申請(qǐng)臨床批件，其中蘭州所申請(qǐng)臨床批件；華蘭生物工程股份有限公司和智飛綠竹生物制藥有限公司獲得臨床批件；北京所進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段。

5.12 肺炎球菌結(jié)合疫苗

國(guó)內(nèi)多家企業(yè)進(jìn)行 PCV13研制，工作進(jìn)展分別處在不同研究階段。沃森生物技術(shù)股份有限公司PCV13已申報(bào)生產(chǎn)批文，康泰生物制品股份有限公司已完成Ⅲ期臨床試驗(yàn)；蘭州所已完成Ⅱ期臨床試驗(yàn)；北京科興中維生物技術(shù)有限公司正在進(jìn)行Ⅰ期臨床試驗(yàn)；成都安特金生物技術(shù)有限公司獲得臨床批件；武漢博沃生物科技有限公司提交臨床試驗(yàn)申請(qǐng)。另外，智飛綠竹生物制藥有限公司PCV15獲批臨床試驗(yàn)。

5.13 多聯(lián)疫苗及其他疫苗

國(guó)內(nèi)以DTP為基礎(chǔ)的五聯(lián)和六聯(lián)疫苗已基本完成了臨床前研究，即將進(jìn)入臨床研究階段，MMRV已進(jìn)入臨床研究。其他非傳染病疫苗如腫瘤疫苗、高血壓疫苗等正在進(jìn)行臨床前研究。

6 展望

回顧過(guò)去，展望未來(lái)。隨著現(xiàn)代疫苗學(xué)技術(shù)如結(jié)構(gòu)疫苗學(xué)、反向疫苗學(xué)、系統(tǒng)疫苗學(xué)、合成生物學(xué)、載體疫苗、核酸疫苗等的發(fā)展和應(yīng)用，將會(huì)有多種新型疫苗問(wèn)世，為預(yù)防各種傳染病甚至治療一些非傳染性疾病，保護(hù)人類健康發(fā)揮更大的作用。