劉志強(qiáng)，郭會玲，金映紅，薛 晶，阿布都，吉恩斯，努爾·庫爾瑪那里*

（1.新疆畜牧科學(xué)院獸醫(yī)研究所，烏魯木齊 830000；2.新疆裕民縣畜牧獸醫(yī)站，新疆 裕民 834800；3.新疆吉木乃縣畜牧獸醫(yī)站，新疆 吉木乃 836800）

新疆與蒙古、俄羅斯、哈薩克斯坦、吉爾吉斯斯坦、塔吉克斯坦、巴基斯坦、印度、阿富汗八個國家接壤[1、2]，邊境線長達(dá)5 600多km。周邊多數(shù)國家動物疫病防控能力和動物衛(wèi)生狀況較差，畜牧養(yǎng)殖以散養(yǎng)、放牧為主，管理粗放、防疫技術(shù)落后，野生動物流動、非法邊境產(chǎn)品貿(mào)易、跨境放牧等活動頻繁，極大的增加了跨境動物疫病傳入我國的風(fēng)險，給邊境地區(qū)畜牧業(yè)生產(chǎn)安全和動物衛(wèi)生安全帶來了極大危害。有關(guān)研究資料表明，我國邊境地區(qū)的跨境動物疫病，發(fā)病率明顯高于內(nèi)地，對當(dāng)?shù)匦竽翗I(yè)發(fā)展造成極大危害。

伊氏錐蟲病是世界范圍廣泛分布的一種動物寄生蟲病，又稱蘇拉病[3]，是由錐蟲屬的伊氏錐蟲寄生于多種動物體內(nèi)引起的一種血液原蟲病，主要由虻和廄螫蠅等吸血昆蟲傳播。伊氏錐蟲可感染多種家畜，包括馬、騾、驢、駱駝、水牛、黃牛、山羊、綿羊、犬及貓等[4]，其中以馬、騾最為易感。且在我國分布廣泛，伊氏錐蟲病能導(dǎo)致感染動物的貧血、死胎、流產(chǎn)、泌乳減少等癥狀，嚴(yán)重的可引起動物的急性死亡或隱性感染，嚴(yán)重危害我國畜牧業(yè)的發(fā)展[5、6、7]。

本文分別對中國新疆與哈薩克斯坦國邊境地區(qū)進(jìn)行伊氏錐蟲病的流行病學(xué)調(diào)查，（中方：阿勒泰地區(qū)：吉木乃縣；塔城地區(qū)：裕民縣；伊犁地區(qū)：昭蘇縣，調(diào)查結(jié)果如下：

1 材料與方法

1.1 馬匹及駱駝癥狀觀察

對疑似感染錐蟲的馬和駝進(jìn)行癥狀觀察與描述。

1.2 血清的采集

在伊犁州昭蘇縣、阿勒泰地區(qū)吉木乃縣、塔城地區(qū)裕民縣選擇有伊氏錐蟲病病史的鄉(xiāng)鎮(zhèn)，或水草豐盛的河谷地區(qū)馬匹和駱駝作為調(diào)查對象，共采集血清512份，詳見表1。按常規(guī)方法采血，分離血清，冰箱保存待檢。

表1 樣品采集匯總表

伊氏錐蟲病檢測試劑盒：哈薩克斯坦國立農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院寄生蟲病研究室提供的補(bǔ)體結(jié)合試驗檢測試劑盒，按照操作規(guī)程進(jìn)行檢驗、制定。

小白鼠：選擇體重為15～18 g體重的小白鼠6只，購于新疆醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)實驗動物中心。

1.3 蟲體分離

將有疑似伊氏錐蟲病癥狀的馬和駝，采血，迅速添加抗凝血劑（2%鞣酸液），離心，1 500 r/min計15 min，取白細(xì)胞層沉淀物以0.15M、pH7.2 PBS稀釋備用。

取小白鼠，將上述稀釋物小白鼠皮下注射0.5 mL/只，第2 d開始，每日觀察2次，第4 d后尾尖采血鏡檢2次/d，連續(xù)至第15 d。

1.4 蟲體鑒定

形態(tài)學(xué)鑒定，取小白鼠尾尖血，制成血液涂片，置400倍下觀察活標(biāo)本，有蟲體的涂片，經(jīng)姬姆薩染色制成標(biāo)本，油鏡觀察。

1.5 傳播媒介的捕捉與鑒定

在對馬和駝放牧地點，對吸血的虻類用紗網(wǎng)進(jìn)行捕捉，捕捉后小心移入廣口瓶中，蓋緊，讓蟲體窒息死亡，帶回實驗室，解剖顯微鏡觀察，鑒定。

2 結(jié) 果

2.1 馬和駱駝的臨床癥狀

馬：臨床癥狀潛伏期4～7 d。體溫升高39℃～41.4℃，或出現(xiàn)無名高熱；初期結(jié)膜潮紅，有出血點流淚，眼上部腫脹，臉部和嘴唇神經(jīng)麻木或臉部不對稱出現(xiàn)歪斜現(xiàn)象；食欲下降，呼吸急促，脈搏增加，尿量少，深色。黏稠。體外特別是在腋下，腹部出現(xiàn)黃豆樣黃痘，淋巴結(jié)腫大（見圖1）。

圖1 感染伊氏錐蟲馬匹的臨床癥狀

駱駝：早期無明顯癥狀；后期隨著病程發(fā)展，主要表現(xiàn)為食欲減退，精神不振，行動遲緩，喜臥，脫毛，漸進(jìn)性消瘦，觸診可見體表淋巴結(jié)腫大，體下部出現(xiàn)水腫，體溫升高可達(dá)38.5℃～41℃（見圖2）。

圖2 感染伊氏錐蟲的駱駝的臨床癥狀

2.2 伊氏錐蟲病檢測試劑盒（補(bǔ)體結(jié)合試驗CF）檢查結(jié)果

經(jīng)哈薩克斯坦國立農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院寄生蟲病研究室提供的補(bǔ)體結(jié)合試驗檢測試劑盒對404匹馬和108峰駱駝進(jìn)行檢測，陽性檢出率分別為馬3.96%（16/404），駝的陽性率4.62%（5/108）；檢測結(jié)果見表2。

表2 檢測結(jié)果

2.3 蟲體分離結(jié)果

小白鼠在接種后的第7 d，出現(xiàn)食欲下降，精神沉郁、拱背、被毛雜亂、行動遲緩等癥狀（見圖3）。

圖3 感染伊氏錐蟲的小白鼠癥狀

2.4 蟲種鑒定結(jié)果

形態(tài)學(xué)鑒定：尾尖采血，制血片，加生理鹽水置普通光學(xué)顯微鏡下觀察（400×），可見游動的蟲體，有的活動能力很強(qiáng)；另將全血涂于載玻片上，制成血涂片，姬姆薩染色，顯微鏡下觀察，可見大小為長18～34 μm，寬為1～2.9 μm的蟲體；蟲體前寬后尖，身體兩側(cè)有波動膜，較發(fā)達(dá)；游離鞭毛長6 μm；蟲體中央可見橢圓形細(xì)胞核；動基體距后端約1.5 μm，蟲體細(xì)胞核和動基體呈暗紅色，鞭毛和波動膜呈棕黃色，胞漿呈淡藍(lán)色。見圖4。

圖4 小鼠尾尖采血血涂片及姬姆薩染色

3 討 論

引進(jìn)哈薩克斯坦共和國國立農(nóng)業(yè)大學(xué)成熟的伊氏錐蟲檢測試劑盒，制備技術(shù)較簡單，能夠用于臨床馬、駱駝的伊氏錐蟲病的檢測調(diào)查，根據(jù)結(jié)果符合率顯示，試劑盒檢測準(zhǔn)確率可達(dá)90%以上。

新疆自60年代以來，一直有伊氏錐蟲發(fā)生的報道，流行病學(xué)資料顯示[8-11]，主要流行于阿勒泰、塔城、昌吉、吐魯番、哈密、巴音郭楞、阿克蘇、克孜勒蘇、喀什、和田等地、州、市。尤其是駱駝伊氏錐蟲病較為嚴(yán)重，平均發(fā)病率7.2%～43.5%，病死率可達(dá)18.30%～48.99%；新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)的統(tǒng)計材料顯示[12-14]，本病在兵團(tuán)農(nóng)二師、農(nóng)三師和農(nóng)九師范圍里均有散發(fā)。平均發(fā)病率為37.9%，致死率為26.60%。而今年未見有系統(tǒng)的流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù)，本次試驗針對邊境地區(qū)，對我國與哈薩克斯坦接壤地區(qū)進(jìn)行的伊氏錐蟲病流行病學(xué)檢測，結(jié)果顯示，該病陽性率明顯降低，馬為3.96%，駝4.62%，但仍然流行嚴(yán)重，需要持續(xù)關(guān)注并加大防控力度。

成功從陽性樣品中接種小白鼠分離到蟲株，蟲體增殖較多，且成果保存于液氮，為該病的進(jìn)一步研究提供了病原資料。

此次檢測結(jié)果陽性率有所降低，但依然較高，需要有關(guān)部門加強(qiáng)重視。而且許多家畜陽性卻不表現(xiàn)臨床癥狀，說明伊氏錐蟲病的通過臨床癥狀較難發(fā)現(xiàn)，隱性感染率較高，因此應(yīng)加強(qiáng)對該病的監(jiān)控工作，定期抽檢，并將伊氏錐蟲檢測試劑盒進(jìn)一步完善，用于該病的防控。