劉玉華，吳桂銀，陳光明，陳志國，陳佳欣

(江蘇農牧科技職業(yè)學院，江蘇 泰州 225300)

鴨大腸桿菌病又稱鴨大腸桿菌敗血癥，是由大腸埃希菌的某些致病血清型菌株或條件致病性菌株引起鴨全身或局部感染的一種細菌性傳染病[1]，嚴重危害養(yǎng)鴨業(yè)的發(fā)展[2]。隨著泰州養(yǎng)鴨業(yè)的發(fā)展，大腸桿菌病趨于增多，給養(yǎng)鴨業(yè)帶來巨大經濟損失[3]。本研究對泰州鴨場大腸埃希菌感染情況進行調查，可補充泰州地區(qū)鴨大腸桿菌病流行病學資料，為鴨大腸桿菌病的防治提供流行病學依據。對鴨場大腸埃希菌耐藥性情況調查，可指導臨床合理用藥，提高治療效果，減少藥物殘留，減緩耐藥性，提高養(yǎng)殖效益，在社會公共衛(wèi)生等方面具有重要意義。

1 材料和方法

1.1 材料

疑似病鴨采自泰州地區(qū)鴨場。

1.2 方法

1.2.1 發(fā)病情況調查

在泰州地區(qū)鴨場發(fā)放調查問卷，并進行實地走訪、查閱病歷檔案，了解當地鴨場大腸桿菌病的發(fā)生情況。

1.2.2 病料采集

通過現場觀察，對流行病學、臨床癥狀疑似大腸桿菌病的發(fā)病鴨、瀕死鴨進行病理剖檢，無菌采集病變明顯病鴨的肝臟、心臟、血液等組織病料，4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 細菌分離培養(yǎng)

將采集病料劃線接種于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基，37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)18 h，選取中等大小、表面光滑濕潤的紅色菌落，用麥康凱瓊脂培養(yǎng)基進行純化，觀察平板上菌落特征，并挑取紅色菌落進行涂片、革蘭氏染色、鏡檢。

1.2.4 生化試驗

將麥康凱瓊脂純化后的可疑菌落進行甲基紅、V-P、吲哚、枸櫞酸鹽、葡萄糖、甘露糖、乳糖、麥芽糖、硫化氫、尿素酶等生化試驗。

1.2.5 血清型鑒定

取高壓抗原分別與大腸埃希菌單因子血清進行玻板凝集試驗。分別取高壓抗原和血清10 μL在玻板上混勻，0.5 min內出現明顯凝集者判為陽性。同時用高壓抗原與0.5%石炭酸生理鹽水混合物作對照，觀察有無自凝現象。

1.2.6 藥敏試驗

采用紙片擴散法檢測大腸埃希菌分離株對氨卞西林、阿莫西林/克拉維酸、頭孢噻趺、頭孢他啶、慶大霉素、大觀霉素、四環(huán)素、多西環(huán)素、氟苯尼考、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、阿米卡星等12種抗菌藥物的敏感程度，大腸埃希氏菌(ATCC25922)為標準菌株。用接種環(huán)取大腸埃希菌單菌落4～5個置于盛有滅菌生理鹽水的試管中，調整菌懸液的濃度為0.5麥氏比濁單位(相當于1.5×108mL-1)。試驗方法參考文獻[4]，測量抑菌圈直徑，判斷大腸埃希菌對藥物的敏感情況。

2 結果與分析

2.1 發(fā)病情況

泰州鴨場有規(guī)?；唸?、專業(yè)合作社和養(yǎng)鴨專業(yè)戶，飼養(yǎng)品種有櫻桃谷鴨、番鴨、高郵鴨、麻鴨，飼養(yǎng)類型有肉鴨、蛋鴨、種鴨，飼養(yǎng)方式有散養(yǎng)、籠養(yǎng)及稻田養(yǎng)鴨。鴨大腸桿菌發(fā)病率在不同鴨場為2%～20%，不同鴨場大腸桿菌病發(fā)病率不同，專業(yè)合作社最高，其次為農村散養(yǎng)戶，規(guī)模鴨場最低，原因可能與專業(yè)合作社飼養(yǎng)密度大、衛(wèi)生條件差、防疫跟不上等有關。不同品種的鴨如麻鴨、番鴨、櫻桃谷鴨等均有大腸桿菌病發(fā)生，品種間差異不顯著。鴨大腸桿菌病一年四季均可發(fā)生，在秋、春季節(jié)發(fā)病率最高。不同日齡鴨均可發(fā)病，以10～30日齡多發(fā)。發(fā)病鴨排綠色稀糞、羽毛松亂、走路不穩(wěn)；剖檢典型病變?yōu)闅饽?、肝臟、心包膜表面有纖維素性滲出物覆蓋，嚴重者與粘膜粘連，肝臟腫大，成年病死鴨出現腹水較多。

2.2 細菌分離

對采集的36份病料進行細菌分離培養(yǎng)、染色鏡檢、生化試驗，分離鑒定大腸埃希菌23株。

2.3 血清型

通過玻板凝集試驗進行鴨大腸埃希菌分離株血清型的鑒定，結果顯示(表1)，23株中有22株定型菌株。其中優(yōu)勢血清型為O78、O2、O76。

表1 鴨大腸埃希菌血清型鑒定結果

2.4 耐藥性

對鴨大腸埃希菌的耐藥性檢測結果(表2)表明，23株鴨大腸埃希菌對頭孢噻呋、頭孢他啶、阿米卡星的耐藥率較低，分別為4.3%、8.7%、21.7%，對慶大霉素、氨芐西林的耐藥率較高，分別為73.9%、95.7%。

表2 大腸埃希菌分離株耐藥性檢測結果

3 討論

本研究系統(tǒng)調查了泰州地區(qū)鴨場大腸埃希菌感染情況及耐藥性情況，為泰州地區(qū)防治鴨大腸桿菌病提供了流行病學依據。根據耐藥性情況指導臨床合理用藥，對于提高治療效果，提高養(yǎng)殖效益具有重要意義。泰州地區(qū)鴨場大腸桿菌病發(fā)病率2%～20%，一年四季均有發(fā)生，不同品種的鴨均會發(fā)生，表明大腸桿菌病是泰州地區(qū)鴨場的一種常見病、多發(fā)病。為避免該病的發(fā)生，減少該病帶來的損失，應采取以下綜合防治措施：一是改善衛(wèi)生條件，做好鴨場和水源的消毒工作。要按時清潔、消毒禽舍、用具，嚴格對鴨場和水源進行消毒，病鴨糞便要及時消毒并清除。二是加強幼齡鴨的飼養(yǎng)管理，如注意育雛期的保溫及飼養(yǎng)密度，改善通風，降低灰塵，勤于除糞，合理搭配日糧等。三是加強免疫接種，最好選用本地流行血清型菌株制成的疫苗進行預防接種。四是選用敏感藥物進行治療，以提高治療效果，降低大腸桿菌病病鴨的病死率。

從發(fā)病鴨或瀕死鴨的組織病料中分離鑒定大腸埃希菌23株，血清型鑒定結果表明，優(yōu)勢血清型為O78、O2、O76，為選用優(yōu)勢血清型菌株制備疫苗提供參考。藥敏試驗結果表明，23株鴨大腸埃希菌對頭孢噻呋、頭孢他啶、阿米卡星的耐藥率較低，對慶大霉素、氨芐西林的耐藥率較高。當地獸醫(yī)人員或養(yǎng)殖戶在治療鴨大腸桿菌病時，應盡量選用頭孢噻呋、頭孢他啶、阿米卡星等耐藥率低的藥物，避免選用耐藥率高的藥物如慶大霉素、氨芐西林等。本研究中23株鴨大腸埃希菌對氟苯尼考的耐藥率為34.8%，而劉玉華等[3]對泰州地區(qū)分離的13株大腸埃希菌進行耐藥性試驗中，氟苯尼考的耐藥率為15.4%。在治療鴨大腸桿菌病之前，有條件的地方，盡量做藥敏試驗，篩選敏感藥物進行治療，提高治療效果。