一例疑似仔豬流行性腹瀉的診斷與防控

謝周松，湯海林，張錦余，劉衛(wèi)波，鐘飛鴻，馮 哲

（1.湖南省益陽(yáng)市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，湖南 益陽(yáng) 413046；2.武漢科前生物股份有限公司，湖北 武漢 430070 ）

豬流行性腹瀉（PED）是由豬流行性腹瀉病毒（PEDV）感染所引發(fā)的一種常見(jiàn)的傳染病。各階段豬群均易感，僅僅導(dǎo)致仔豬產(chǎn)生明顯的臨床癥狀，主要表現(xiàn)為嘔吐、水樣腹瀉和消瘦脫水等，具有高感染率和死亡率的特點(diǎn)，給我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。該病于1973年首次在我國(guó)報(bào)道，但一直處于零星發(fā)生的狀態(tài)，養(yǎng)殖戶對(duì)該病的關(guān)注度較少。在2010年末，我國(guó)出現(xiàn)PEDV變異株，導(dǎo)致該病在我國(guó)豬場(chǎng)廣泛流行，且部分豬場(chǎng)在給豬群接種CV777弱毒苗的狀況下也會(huì)暴發(fā)該病，使我國(guó)養(yǎng)豬行業(yè)面臨巨大的挑戰(zhàn)。文章對(duì)近期臨床上遇到的一例疑似仔豬流行性腹瀉的診斷與防控過(guò)程進(jìn)行闡述，旨在提高廣大養(yǎng)殖戶對(duì)該病的防控意識(shí)。

1 發(fā)病情況

湖南益陽(yáng)市某規(guī)模化豬場(chǎng)（存欄母豬400頭左右），于2018年4月初該豬場(chǎng)產(chǎn)房部分欄舍仔豬開(kāi)始腹瀉，主要臨床癥狀表現(xiàn)為嘔吐、水樣腹瀉和厭食等，對(duì)腹瀉仔豬使用常規(guī)的抗生素（恩諾沙星）灌服治療效果較差；其后，產(chǎn)房大部分仔豬出現(xiàn)較為嚴(yán)重的腹瀉癥狀，其中7日齡以下的發(fā)病仔豬在短時(shí)間內(nèi)死亡，且死亡率幾乎為100%。值得注意的是，只有仔豬和保育豬表現(xiàn)出腹瀉的癥狀，但育肥豬、繁殖母豬和種公豬均未出現(xiàn)明顯臨床癥狀。根據(jù)豬場(chǎng)負(fù)責(zé)人反映，該場(chǎng)一直使用豬傳染性胃腸炎/豬流行性腹瀉二聯(lián)疫苗對(duì)豬群進(jìn)行免疫接種，且從未出現(xiàn)仔豬大面積腹瀉的情況。

2 臨床癥狀與病理變化

通過(guò)對(duì)發(fā)病豬群臨床癥狀進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)主要是仔豬發(fā)病，發(fā)病仔豬表觀極度消瘦、被毛粗亂、脫水等癥狀，在保溫室中可見(jiàn)明顯的嘔吐物或水樣糞便（見(jiàn)圖1）。通過(guò)對(duì)發(fā)病較為嚴(yán)重的仔豬進(jìn)行臨床解剖，發(fā)現(xiàn)仔豬小腸充氣、腸壁變薄發(fā)亮，小腸內(nèi)有黃色內(nèi)容物（見(jiàn)圖2），但其他器官未見(jiàn)明顯的實(shí)質(zhì)性病變。根據(jù)發(fā)病豬群的臨床癥狀及病理變化特征，初步判定是腸道腹瀉病毒導(dǎo)致，如PEDV、傳染性胃腸炎病毒（TGEV）和輪狀病毒（PROV）。

3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

分別采集3頭病豬的腸道組織樣品，送至華中農(nóng)業(yè)大學(xué)疫病診斷中心應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)豬PEDV、TGEV和PROV抗原。檢測(cè)結(jié)果表明，3頭豬均檢測(cè)為PEDV陽(yáng)性（見(jiàn)圖3），但未檢出TGEV和PROV抗原。為了再次確定該豬場(chǎng)暴發(fā)的PEDV是否為變異株，隨機(jī)選擇1份陽(yáng)性樣品擴(kuò)增PEDV的ORF3基因全長(zhǎng)，將PCR陽(yáng)性產(chǎn)物送至上海生物工程有限公司進(jìn)行測(cè)序與分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)獲得的序列與Genbank上傳的PEDV變異株同源性為98.3%～99.5%，與PEDV經(jīng)典毒株CV777同源性僅為93.4%，說(shuō)明該豬場(chǎng)流行的PEDV為變異株。

4 治療和防控措施

通過(guò)臨床診斷和實(shí)驗(yàn)室PCR技術(shù)診斷，可以確診該豬場(chǎng)豬群感染PEDV變異株，且流行情況很嚴(yán)重，需要立即采取緊急處理措施防止PEDV進(jìn)一步流行。因此，采取了以下緊急處理措施。

圖1 發(fā)病仔豬臨床表現(xiàn)

圖2 發(fā)病仔豬病理變化

圖3 組織病料PEDV核酸檢測(cè)

4.1 實(shí)施緊急免疫措施

由于該豬場(chǎng)暴發(fā)的豬流行性腹瀉病是由PEDV變異株感染所導(dǎo)致，傳統(tǒng)的經(jīng)典豬CV777弱毒疫苗可能對(duì)該病的防控作用有限，因此用豬傳染性胃腸炎/豬流行性腹瀉二聯(lián)滅活疫苗和豬傳染性胃腸炎/流行性腹瀉二聯(lián)弱毒疫苗對(duì)豬群進(jìn)行緊急接種免疫，其具體免疫措施如下：對(duì)全場(chǎng)母豬肌注滅活苗和弱毒苗各1.5 mL，間隔21 d后再次加強(qiáng)免疫一次；對(duì)產(chǎn)房發(fā)病仔豬接種免疫滅活苗2 mL；對(duì)初生仔豬免疫接種弱毒苗0.5 mL；對(duì)產(chǎn)前30 d、產(chǎn)前10 d的母豬分別免疫弱毒苗、滅活苗2 mL。

4.2 做好環(huán)境消毒工作

對(duì)發(fā)病豬群進(jìn)行緊急隔離，并對(duì)豬舍、食槽進(jìn)行清掃并消毒，更換墊料，將豬舍環(huán)境中的病原盡可能清除[1]。將保育舍豬群全部轉(zhuǎn)出并隔離飼養(yǎng)，保育舍徹底清掃、消毒后將10日齡以上的仔豬進(jìn)行早期斷奶，轉(zhuǎn)入保育舍，保持保育舍溫度高于25 ℃，在水槽中添加適量的葡萄糖、電解多維和甘氨酸等。實(shí)施帶豬消毒措施，并及時(shí)對(duì)糞污清掃和消毒等[2]。此外，為了防止細(xì)菌繼發(fā)感染，對(duì)仔豬群進(jìn)行藥物保健，主要是在飼料中添加適量的阿莫西林、多西環(huán)素等抗生素。

該豬場(chǎng)通過(guò)嚴(yán)格采取以上緊急處理措施后，于4月20日致電回訪，豬場(chǎng)負(fù)責(zé)人表示4月17日、18日和19日分別有17窩、12窩和3窩仔豬腹瀉，但死亡率下降明顯。于5月10日再次致電回訪，豬場(chǎng)負(fù)責(zé)人表示新生仔豬不再有出現(xiàn)腹瀉的臨床癥狀。

5 小結(jié)與討論

如何防控豬流行性腹瀉的發(fā)生與傳播一直是困擾我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)的巨大難題，特別是自2010年以來(lái)，隨著PEDV變異株的出現(xiàn)，經(jīng)典毒株CV777弱毒疫苗對(duì)PEDV變異株的防控能力明顯減弱，導(dǎo)致PEDV變異株在我國(guó)豬場(chǎng)廣泛流行，并導(dǎo)致仔豬的大量死亡，給我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失[3-4]。

此次接診的豬場(chǎng)就是在對(duì)豬群進(jìn)行豬傳染性胃腸炎/豬流行性腹瀉二聯(lián)疫苗免疫接種的情況下仍然暴發(fā)了PED，且確定是由PEDV變異株感染所引起，同時(shí)也驗(yàn)證了在

某種情況下傳統(tǒng)的CV777弱毒疫苗的確對(duì)PEDV變異株防控能力較差。因此，為了有效地對(duì)PEDV變異株進(jìn)行防控，必須選擇與PEDV變異株同源性較高的PEDV毒株弱毒苗或滅活疫苗對(duì)豬群實(shí)施免疫接種。這個(gè)案例中防控所使用的疫苗中的PEDV毒株為PEDV變異株，這也是對(duì)發(fā)病豬群實(shí)施緊急免疫接種后產(chǎn)生良好防控效果的主要原因之一。