潘燕燕

（河南省漯河市動物疫病預(yù)防控制中心 462000）

豬瘟（Classical swine fever, CSF）是由豬瘟病毒（Classical swine fever virus, CSFV）引起的豬的一種急性、高度接觸性傳染病，被世界動物衛(wèi)生組織（OIE）列為必須報告的傳染病[1]，也被我國列入一類動物疫病病種，是危害養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展的主要疫病之一，也是我國實施重點免疫的疫病。注射豬瘟疫苗是預(yù)防豬瘟病發(fā)生的有效措施，可以大大降低豬瘟發(fā)生。但由于受豬瘟疫苗質(zhì)量、免疫程序、豬群個體狀況、注射操作過程等多種因素影響，豬瘟免疫抗體效價不穩(wěn)定，有時免疫可能起不到預(yù)防效果。因此，在養(yǎng)豬場豬瘟免疫后，對豬群開展豬瘟免疫抗體血清檢測，及時、準確摸清抗體水平，對提高防控豬瘟能力具有重要的參考和指導(dǎo)意義。

漯河市下轄郾城區(qū)、臨潁縣、舞陽縣、源匯區(qū)和召陵區(qū)5個縣區(qū)。據(jù)調(diào)查，規(guī)模養(yǎng)豬場約占92.6%，散養(yǎng)豬戶占比很小。近年來，漯河市在強化實施消毒、免疫和綜合防控措施下，總體看全市豬瘟抗體水平保持較高水平，但種種原因?qū)е逻€存在一定的隱形感染和持續(xù)性感染現(xiàn)象。因此，為了解漯河市豬瘟抗體水平，評估豬瘟防控成效，確保豬瘟疫苗免疫確實有效，2018年1～12月，筆者對漯河市下轄 5 個縣區(qū) 8 個散養(yǎng)豬戶、15 個規(guī)模豬場的豬瘟疫苗免疫抗體水平進行檢測分析，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 血清

無菌操作采集豬前腔靜脈血液30ml，共152 份血液樣本，在實驗室分離血清后，置-20℃冰箱中保存?zhèn)溆?。詳細記錄每份血液樣本的來源、豬群階段、豬瘟免疫程序、疫苗生產(chǎn)廠家及接種劑量等有關(guān)試驗信息。

1.2 被檢測豬群

被檢測豬群均進行豬瘟免疫。152 份血液樣本中，按不同縣區(qū)分，郾城區(qū) 32 份、臨潁縣 43 份、舞陽縣 36 份、源匯區(qū)24 份、召陵區(qū) 17 份；按飼養(yǎng)方式不同，散養(yǎng)豬戶 56 份、規(guī)模養(yǎng)殖豬場 96 份；按不同生長階段，種豬 15 份、妊娠母豬 26份、后備母豬 21 份、哺乳母豬 20 份、哺乳仔豬 27 份、保育豬 18 份、育肥豬 25 份。

1.3 檢測試劑

豬瘟抗體阻斷ELISA 檢測試劑盒，美國IDEXX 公司生產(chǎn)，批號：D361。96 孔板酶標儀、微量移液器等其余儀器、試劑均由河南省農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院實驗室提供。

1.4 方法及結(jié)果判定標準

嚴格參照豬瘟抗體ELISA 檢測試劑盒說明書操作。用酶標儀于 450nm（630nm 作參比波長）讀取吸光度 OD450值。試驗成立的條件是：陰性對照 OD450＞0.5，同時，陽性對照阻斷率＞50%。計算方法：阻斷率%＝（陰性對照 OD450平均值-樣本OD450值）/陰性對照 OD450平均值×100%。陰陽性判斷：被檢樣品阻斷率≥40%，判斷為陽性；被檢樣品阻斷率≤30%，判斷為陰性；被檢樣品阻斷率在30%～40%為可疑。

2 結(jié)果

2.1 漯河市各縣區(qū)豬瘟免疫抗體水平

檢測結(jié)果表明，2018年漯河市豬瘟抗體陽性率為80.9%，5 個縣區(qū)豬瘟抗體陽性合格率均高于國家規(guī)定的抗體合格率70%。源匯區(qū)最高，為 86.3%，郾城區(qū)最低，為 75.3%。5 個縣區(qū)豬瘟抗體平均阻斷率均高于50%，且相差不大，豬瘟抗體水平基本相同，見表1。

表1 不同縣區(qū)豬瘟免疫抗體水平

2.2 不同性別、生長階段被檢測豬群抗體

檢測結(jié)果表明，種豬抗體陽性率最高，為100%，育肥豬最低，為68.2%，達不到國家要求的抗體合格率70%。其他豬群抗體合格率均高于70%。種豬平均阻斷率最高，為96.7%，育肥豬最低，為48.5%，低于保護率50%。其他豬群平均阻斷率均高于50%，見表2。

2.3 不同飼養(yǎng)方式豬瘟抗體水平

檢測結(jié)果表明，散養(yǎng)場豬瘟抗體陽性率為67.4%，而規(guī)模場抗體陽性率為86.8%，見表3。

3 討論

抗體檢測是評估豬瘟疫苗抗體水平，制定科學(xué)免疫程序的重要手段。目前，應(yīng)用檢測豬瘟抗體的方法很多。本試驗應(yīng)用的美國IDEXX 公司生產(chǎn)豬瘟疫苗抗體阻斷ELISA 檢測試劑盒被廣泛應(yīng)用于檢測豬瘟抗體，評估豬場豬瘟疫苗免疫狀況。該試劑盒把阻斷率≥40%作為豬瘟疫苗抗體陽性檢測標準。但據(jù)南文金等[1]報道，該試劑盒檢測豬瘟疫苗抗體阻斷率達到50%時，豬瘟疫苗抗體水平相當于中和抗體滴度1:32，此水平的中和抗體水平才對豬群具有保護力，實際生產(chǎn)中要以阻斷率＞50%作為豬瘟疫苗抗體合格標準。因此，本次檢測采用阻斷率＞50%作為抗體陽性標準。

表2 不同性別、生長階段被檢測豬群分布

表3 不同飼養(yǎng)方式豬瘟抗體水平

本次檢測結(jié)果表明，2018年，漯河市豬瘟疫苗免疫抗體陽性率達80.9%，高于國家標準70%，其他縣區(qū)的抗體陽性率也均高于70%，且相互之間差距不大?？傮w上看，漯河市豬群抗體水平較高，免疫效果較好，處于安全保護范圍內(nèi)。

從檢測結(jié)果看，規(guī)?；i場的豬瘟抗體陽性率86.8%，明顯高于散養(yǎng)戶的抗體陽性率67.4%。出現(xiàn)這種情況可能是與規(guī)?；i場的飼養(yǎng)管理水平較高，對免疫工作較為重視，而散養(yǎng)戶的飼養(yǎng)管理水平較低，免疫空白，免疫接種不當，導(dǎo)致接種失敗或?qū)σ呙缃臃N工作不重視有關(guān)[2]。具體原因可以結(jié)合臨床病例分析。但經(jīng)過免疫的規(guī)?；i場抗體陽性率也未達到100%，說明規(guī)模化豬場還存在潛在的危險性。

從不同性別、生長階段被檢測豬群抗體結(jié)果來看，種豬抗體陽性率達到100%，其次為妊娠母豬和后備母豬，分別為89.5%和 82.6%，育肥豬最低，為 68.2%。經(jīng)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，這次被檢測種豬全部來源于規(guī)模豬場，免疫防控工作做得到位。

4 小結(jié)

抗體水平檢測對調(diào)整優(yōu)化免疫程序、保證疫苗免疫效果至關(guān)重要。通過此次檢測也表明，漯河市的豬瘟疫苗免疫較好，在豬瘟的防控中有不可替代的作用。今后，要堅持定期開展免疫監(jiān)測，評價豬瘟免疫效果，建立適合本場的免疫程序，抗體不合格及時補免。淘汰帶毒種豬，培育健康、無豬瘟帶毒豬的種豬和后備種豬群。堅持自繁自養(yǎng)、全進全出、減少應(yīng)激；加強飼養(yǎng)管理，改善生態(tài)環(huán)境，搞好綜合防疫，提高豬群的抵抗力。