摘 要:豬細小病毒是因為豬細小病毒所引起的一種母豬繁殖障礙病,臨床特征包含有流產跟死胎等等,并會導致新生仔豬的大量死亡。只有做好豬細小病毒的及時有效檢測,并給予針對性的應用措施,才能夠避免養(yǎng)殖場遭受到過大的經濟跟社會損失,本文主要就豬細小病毒的檢測方法進行了探究。
關鍵詞:豬細小病毒;檢測方法;研究
隨著我國養(yǎng)殖行業(yè)的不斷發(fā)展,使得養(yǎng)豬業(yè)也開始朝著規(guī)?;芗姆较虿粩噙M行發(fā)展,使得豬群的跨區(qū)域交流機會變得越來也不多,豬細小病毒病的傳播速度也隨著加快,并朝著多病混合感染的方式進行發(fā)展,對于養(yǎng)豬行業(yè)也會造成嚴重的經濟損失。目前我國在進行豬細小病毒的檢測過程中,主要是從血清學檢測以及分子生物學檢測兩個方面來進行,對于各種病毒也能夠起到快速準確的檢測效果。
一、血清學檢測方法
1.血凝跟血凝抑制試驗
血凝以及血凝實驗作為最為簡便的一種檢測方式,在豬細小病毒檢測工作中也得到了廣泛的應用。將誒主語PPV能夠對人、猴、雞以及大鼠的紅細胞進行聚集,一般實驗室主要是將豚鼠的紅細胞作為凝聚細胞,并且具備有方法簡單易行的應用優(yōu)勢,對于大批量樣品也能夠進行快速有效的診斷,因此獲得了普遍的應用。通過HI實驗能夠對抗體起到良好的檢測效果,在待檢血清進行了滅活處理之后,通過紅細胞進行吸附,能夠對血清之中的非特異性血凝素起到良好的去除效果。此外采用高嶺土吸附的方式還能夠有效減少非康體型抑制因子,方法比較簡便,靈敏度也比較高,但是在該檢測模式中需要進行紅細胞的現配,檢測程序也比較繁瑣。
2.中和試驗
中和實驗作為一種常用的PPV抗體檢測方法,能夠采用PPV跟被檢血清之中的抗體進行綜合處理,在結合培養(yǎng)細胞病變狀況基礎上來進行血清抗體滴度的計算工作。在采用中和試驗方法來進行豬細小病毒的檢測時具有非常高的特異性,但是操作流程復雜,完成一次試驗所需時間往往要一周或者更長的時間,對于臨床診斷工作也就提出了更高的要求,難以滿足各項臨床診斷工作的具體要求。在中和試驗檢測方法中,需要水準比較高的細胞培養(yǎng)技術以及病變結果判定技術,因此對于實驗室水平也會提出非常高的要求,難以在臨床上進行廣泛的應用跟推廣。
3.酶聯免疫吸附試驗
酶聯免疫吸附試驗能夠直接將抗原抗體免疫反應的特異性跟酶的高效催化作用進行有機結合,從而對多種病毒起到良好的檢測效果。采用該實驗室檢測法能夠對抗原以及抗體起到良好的檢測效果,并能夠對豬細小病毒進行有效的檢測。酶聯免疫吸附試驗檢測法具備有特異性強、敏感度高、檢測快速以及高通量等應用優(yōu)勢,在基層獸醫(yī)部門的大面積疫情普查工作中也獲得了良好的應用效果。在田莉莉等人員所構建的豬細小病毒VP2蛋白單克隆抗體檢測模式中,跟傳統(tǒng)的PCR檢測方式對比還有著更好的敏感度跟重復性,在豬細小病毒感染的早期診斷工作中也獲得了良好的應用效果。
二、分子生物學檢測方法
1.PCR檢測技術
PCR技術是一種體外擴增特異DNA片段檢測技術,其能夠將PCR技術跟電泳技術進行有機的結合,并且有著特異性強以及敏感度高的應用優(yōu)勢,在臨床PPV診斷工作之中也得到了廣泛的應用。
2.多重PCR診斷檢測技術
多重PCR診斷檢測技術可以直接將多對特異性引物加入到同一PCR反應體系之中,來對多個DNA模板或者同一模板之內的不同區(qū)域進行PCR擴增,借此來獲得良好的病毒檢測效果。采用多重PCR技術能夠在一個PCR反應管中進行多個目的片段的擴增處理,因此可以節(jié)省出大量的人力、時間跟物力,對于各種病毒導致的疾病也能夠起到良好的檢測效果。在進行混合感染病原體的診斷過程中,采用多重PRC技術可以實現對多種病毒的檢測工作,對于后續(xù)治療也有著積極的意義。
3.可視化基因芯片檢測方法
可視化芯片技術是在常規(guī)芯片檢測技術上延伸的一種病毒檢測技術,該技術能夠在以往基因芯片技術基礎上,將待檢病原體的特異片段直接固定的芯片上,隨后采用標記有生物素的靶基因跟病原體特異片段進行雜交處理。在接入了經過納米金標記的鏈霉親和素之后進行銀染處理,可以直接生成肉眼的光學捕捉信號。采用可視化基因芯片檢測方法,可以對豬微小病毒進行快速準確的診斷,因此近年來在病原檢測以及基因突變檢測等多個領域也得到了廣泛的應用,具備有良好的應用前景。
三、結語
豬細小病毒是導致豬群患上疫病的一個重要因素,對于我國養(yǎng)殖行業(yè)的發(fā)展以及居民的健康生長也會造成嚴重的影響。應用最多的是血清學檢測技術,該技術中的血凝以及血凝抑制試驗,能夠起到良好的豬細小病毒檢測效果。但是不同檢測方法在應用過程中均存在有一定的局限性,要求相關獸醫(yī)部門能夠在結合當地具體情況的基礎上,進行檢測方法的合理選擇跟不斷強化,這樣才能夠滿足該區(qū)域豬細小病毒的檢測需求。
參考文獻:
[1]劉勝利,呂玉金,李文剛.豬細小病毒檢測方法的研究綜述[J].河南畜牧獸醫(yī)(市場版),2017,38(11):32-33.
[2]南京農業(yè)大學.一種檢測豬細小病毒抗體的可視化蛋白芯片制備方法和檢測方法:中國,CN201810301162.7[P].2018-07-24.
[3]劉立兵,王建昌,經美, 等.豬細小病毒重組酶聚合酶擴增快速檢測方法的建立[J].中國畜牧獸醫(yī),2017,44(11):3320-3326.
[4]河南牧業(yè)經濟學院.一種檢測豬細小病毒的基因芯片的制備方法及使用方法:中國,CN201710287489.9[P].2017-09-01.
作者簡介:余新玲(1977-07-)女,河南確山人,本科,中級獸醫(yī)師。工作內容及方向:動物檢疫及動物衛(wèi)生監(jiān)督執(zhí)法。