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      轉(zhuǎn)基因食品分析檢測技術研究進展

      2019-07-12 13:21:58辛建偉佟新龍葛偉強
      消費導刊 2019年45期
      關鍵詞:紙條轉(zhuǎn)基因雜交

      辛建偉 佟新龍 葛偉強

      青島譜尼測試有限公司

      引言:轉(zhuǎn)基因食品具有優(yōu)良的形狀,它的誕生很大程度上解決了糧食短缺、農(nóng)藥污染、食品品質(zhì)低下等問題。然而轉(zhuǎn)基因食品所產(chǎn)生的安全隱患值得引起社會各界的重視。因此,必須使用相關的食品安全檢測技術來保障轉(zhuǎn)基因食品的安全。

      一、轉(zhuǎn)基因食品概論

      (一)轉(zhuǎn)基因食品概述。在整個基因工程中,通過使用DNA重組技術,可將外源性基因逐漸轉(zhuǎn)移到其他不同的生物體,而此生物體則會顯示出具有一定特殊性的遺傳特征,進而產(chǎn)生新的基因重組生物體。

      (二)轉(zhuǎn)基因食品所存在的問題。傳統(tǒng)食品通常被認為是安全的,所以在轉(zhuǎn)基因食品出現(xiàn)后引起了廣泛的爭論。在我國轉(zhuǎn)基因水稻已經(jīng)商品化。那么,轉(zhuǎn)基因植物是不是有危險?截至目前,并沒有任何實驗能夠準確地證明轉(zhuǎn)基因植物有不利的方面,當然也沒有實驗證明轉(zhuǎn)基因植物沒有風險。所以對轉(zhuǎn)基因的理解僅僅停留在理論方面。在本人看來,轉(zhuǎn)基因不過是在基因水平上對植物進行改造,而且在人體內(nèi)會對食物進行重新的分解利用,所以轉(zhuǎn)基因食品應該不會造成損失。轉(zhuǎn)基因是人類生命科學史上一次非常重要的發(fā)明,只要合理利用轉(zhuǎn)基因技術,就可以解決人類本來難以解決的問題,提高人類的生存質(zhì)量。轉(zhuǎn)基因是在基因的水平上對動植物進行改造,表達出來的產(chǎn)物是生物有機分子,在人體內(nèi)也會被重新利用,合成人體所需的各種物質(zhì)。所以從本質(zhì)上來看,轉(zhuǎn)基因應該不會對人類造成傷害。技術無罪,關鍵在于掌握技術的人。我們應該相信我們的生物學家是為了人類的發(fā)展而努力的。

      (三)轉(zhuǎn)基因食品檢測技術的內(nèi)容和分類。根據(jù)相關標準可知,相關部門對轉(zhuǎn)基因食品的安全性檢測,主要是通過對轉(zhuǎn)基因食品的分析檢測而進行的。針對轉(zhuǎn)基因食品的整個分析檢測過程,主要對3類物質(zhì)進行重點測定,分別是DNA、蛋白質(zhì)和核酸。在實際中,因蛋白質(zhì)水平的檢測方法多用在沒有經(jīng)過加工的食品檢測,且在使用中的局限性比較大,當前廣泛使用的是外源基因測定方法。

      二、特異性蛋白檢測技術

      (一)試紙條法。試紙條法是近些年興起的方法,其通過反應膜毛細管與示蹤分子結(jié)合到一起,并與固定生物識別分子發(fā)生反應,生成復合物,同時在檢測區(qū)域顯示出顏色,進而展開有效的檢測。在試紙條中,反應膜通常具備較好的吸附能力,且有一定的孔隙和濕潤度,現(xiàn)階段最為常見的反應膜是硝酸纖維素膜。在實際情況中,試紙條法還可以根據(jù)檢測物質(zhì)的不同而分為免疫層析試紙條法以及核酸試紙條法。其中,免疫層析試紙條法主要是指利用抗原抗體免疫學反應以及層析反應達到快速檢測的目的。

      (二)酶聯(lián)免疫吸附法

      酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)主要是指將抗原抗體與固相載體結(jié)合到一起,利用抗原抗體的特異性反應將待測物與酶連接到一起,繼而通過顯色情況進行快速檢測。在實際情況中,根據(jù)操作步驟的不同,可以將該測定方法分為夾心法、間接法以及競爭法等不同的方法。酶聯(lián)免疫吸附法有很多優(yōu)點,如:操作簡單、檢測成本低廉、檢測速度較快、易于操作等,因此,該方法被廣泛引用于生物學、醫(yī)學研究等研究領域?,F(xiàn)階段,ELISA試劑盒已經(jīng)成功研發(fā)出來,廣泛應用于轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測。需要注意的是,ELISA所標記的酶需要與其他試劑結(jié)合到一起才能夠產(chǎn)生反應,進行進一步的測定。

      (三)蛋白芯片檢測技術

      蛋白芯片檢測技術是以基因芯片技術為基礎而發(fā)展起來的快速檢測技術之一,是除了質(zhì)譜技術、酵母雙雜交技術之外的另外一種重要技術。該技術主要是指將已知序列的蛋白、多肽分子、抗原抗體以及酶等物質(zhì)以預先設計好的方式固定在載體上,進行有序排列,待到靶分子以及探針分子充分結(jié)合后,再借助激光掃描系統(tǒng)進行全面檢測和分析。該技術具有很多優(yōu)點,能夠為轉(zhuǎn)基因植物蛋白的檢測提供有效手段。

      三、PCR檢測技術

      (一)PCR檢測技術。PCR檢測技術是當前使用最為廣泛的轉(zhuǎn)基因檢測技術,根據(jù)其檢測原理的不同,可以將其分為定性PCR檢測技術以及定量PCR檢測技術。其中定性PCR檢測技術又包括普通PCR、巢式PCR以及多重PCR等,巢式PCR技術的優(yōu)點是可以檢測出大多數(shù)轉(zhuǎn)基因作物中的CaMV35S啟動子以及NOS終止子;而多重PCR具有檢測快速、準確性高、效率高、靈敏度高等優(yōu)點。定量PCR則包括競爭性定量PCR以及實時熒光定量PCR等,二者均在轉(zhuǎn)基因作物的定量檢測中得到了廣泛的應用?,F(xiàn)階段,業(yè)界的研究者Hardegger、王小花、白月等人都在對PCR技術做進一步研究,具有一定的發(fā)展前景。

      (二)分子雜交技術

      核酸分子雜交技術是當前應用較為廣泛的檢測技術之一,該技術利用已知序列的DNA以及RNA片段來進行未知核酸的檢測,將外源基因與探針進行雜交,形成帶有特殊標記的特異性雜交體,并根據(jù)反應情況來做進一步檢測分析。通常情況下,常見的雜交種類主要包括以下幾種:Southern雜交法、Northern雜交法、菌落原位雜交法、斑點雜交法等。在該技術發(fā)展的過程中,Sidorov等相關學者利用Southernblot技術對轉(zhuǎn)基因植株進行了檢測,結(jié)果表明轉(zhuǎn)化效率較低。因此,該方法還在進一步的研究中。

      結(jié)束語:轉(zhuǎn)基因食品分析檢測技術應用的主要目的,是評價轉(zhuǎn)基因食品的安全性。但是,在現(xiàn)階段,轉(zhuǎn)基因食品分析檢測的技術越來越多,相關人員在轉(zhuǎn)基因食品分析檢測中,需要根據(jù)轉(zhuǎn)基因食品的基因片段來選擇相應的檢測技術和方法,只有這樣,才能夠在最大程度上保證檢測技術的有效性和可靠性。

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