不同溶氧水平對(duì)吉富羅非魚幼魚生長(zhǎng)、血液生化、脂肪酸組成及其抗海豚鏈球菌病的影響

陳德舉,強(qiáng) 俊 ,陶易凡,包景文,朱昊俊,胡樂佳,徐 跑,

(1.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)無錫漁業(yè)學(xué)院，江蘇無錫 214081；2.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心，農(nóng)業(yè)農(nóng)業(yè)部淡水漁業(yè)和種質(zhì)資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇無錫 214081；3.上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，上海200444)

水體中溶氧水平對(duì)于水生生物的生存和生長(zhǎng)至關(guān)重要，水體溶氧是有氧代謝的主要限制因子[1]。當(dāng)氧氣供應(yīng)與需求間存在較大差異時(shí)，易引起魚體缺氧應(yīng)激。缺氧應(yīng)激會(huì)抑制魚類生長(zhǎng)，改變免疫調(diào)控，從而影響魚體的健康狀態(tài)。已有報(bào)道顯示，低氧脅迫會(huì)明顯抑制尼羅羅非魚(Oreochromisniloticus)[2]的生長(zhǎng)，影響鯔(Mugilcephalus)和鯧鲹(pompano)肝臟與鰓的抗氧化酶活性，改變肝臟中一些能源物質(zhì)[3-4]。除此之外，低氧環(huán)境會(huì)影響黑鱸(Dicentrarchuslabrax)血清免疫球蛋白水平[5]，降低尼羅羅非魚免疫力，從而增加嗜水氣單胞菌感染后的死亡率[2]。同時(shí)，Evans 等[6]研究發(fā)現(xiàn)，低氧脅迫下(1 mg/L)尼羅羅非魚感染無乳鏈球菌的死亡率明顯上升。這些研究表明，魚類的生長(zhǎng)、免疫以及代謝均與溶氧水平密切相關(guān)。

通常在羅非魚集約化養(yǎng)殖中，利用增氧機(jī)，加注新水等措施，使得水中溶氧保持穩(wěn)定。然而，由于突發(fā)的極端天氣、赤潮、水華以及生產(chǎn)管理失誤等均會(huì)造成養(yǎng)殖水體溶氧急劇下降；同時(shí)，大規(guī)模苗種長(zhǎng)途運(yùn)輸過程也易出現(xiàn)低氧情況。羅非魚對(duì)低氧的耐受力較強(qiáng)，是研究長(zhǎng)期低氧脅迫對(duì)魚類影響的有利模型之一；而關(guān)于長(zhǎng)期低氧脅迫對(duì)吉富羅非魚生長(zhǎng)性能和脂肪酸組成方面的研究目前尚未見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)探索不同溶氧水平下，吉富羅非魚生長(zhǎng)性能和血液生化指標(biāo)的差異與變化，并進(jìn)行海豚鏈球菌感染實(shí)驗(yàn)，以期為羅非魚健康養(yǎng)殖、緩解低氧脅迫提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

實(shí)驗(yàn)吉富羅非魚選自中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)院淡水漁業(yè)研究中心無錫宜興基地，實(shí)驗(yàn)開始前，將魚放入室內(nèi)450 L循環(huán)養(yǎng)殖桶中，(28±1)℃水溫下暫養(yǎng)15 d。在此期間，投喂市售商品膨化飼料(粗蛋白質(zhì)28.0%，粗脂肪6.0%，寧波天邦股份有限公司)。挑選初始體重為(20.00±0.10)g、體質(zhì)健壯、無病無傷的吉富羅非魚用于實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)設(shè)3個(gè)溶氧水平：低氧組(2.0±0.3)mg/L，對(duì)照組(4.5±0.4)mg/L，高氧組(7.0±0.4)mg/L。每組設(shè)置3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30尾魚，分別放入9個(gè)450 L循環(huán)養(yǎng)殖桶，桶內(nèi)含水約360 L。實(shí)驗(yàn)期間，每3 h用溶氧儀檢測(cè)一次水體溶氧，通過控制循環(huán)水流速和氣閥通氣大小(三組循環(huán)水流速分別為0.5、1.5、2.0 L/min)，使各組溶氧水平維持在預(yù)設(shè)值上。每天飽食投喂兩次(8∶00和16∶00)膨化飼料，并在投喂2 h后清除桶底糞便，每3 d換水1/3，更換用水為已調(diào)整到預(yù)設(shè)溶氧水平的曝氣自來水。實(shí)驗(yàn)期間，通過循環(huán)桶加熱系統(tǒng)將水溫控制在(28±1)℃，pH值控制在7.4～7.8，氨氮含量<0.1 mg/L。養(yǎng)殖周期為8周。

1.2 樣品采集與處理

采樣前，吉富羅非魚禁食24 h。用濃度為200 mg/L的MS-222預(yù)先麻醉，記錄每桶魚的尾數(shù)并且稱重，每桶隨機(jī)取3尾魚抽取血液，吸取20 μL用于血常規(guī)檢測(cè)，剩余血液經(jīng)4 ℃、 5 000 r/min離心15 min收集血清，放入-40 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。采血后進(jìn)行解剖，取肝臟組織稱重后，用生理鹽水漂洗、吸干其表面水分后再放入-40 ℃冰箱保存；同時(shí)取剩余內(nèi)臟團(tuán)并稱重。

1.3 指標(biāo)測(cè)定方法

1.3.1 生長(zhǎng)指標(biāo)的測(cè)定

吉富羅非魚成活率(SR)、飼料轉(zhuǎn)化率(FCR)、特定生長(zhǎng)率(SGR)、肝體比(HSI)、臟體比(VSI)等生長(zhǎng)指標(biāo)計(jì)算公式如下：

SR=S1/S2×100%；

FCR=C/(W2-W1)×100%；

SGR=(lnW2-lnW1)/t×100%；

HSI=M1/M×100%；

VSI=M2/M×100%

式中S1為終末尾數(shù)，S2為初始尾數(shù)；C為總攝食量，W1為初始體重(g)，W2為終末體重(g)，t為試驗(yàn)時(shí)間(d)；M1：肝臟重(g)，M2:內(nèi)臟團(tuán)重(g)，M：魚體重(g)。

1.3.2 血常規(guī)指標(biāo)測(cè)定

根據(jù)Qiang等[7]的方法使用血細(xì)胞分析儀(Mindray，bc-5300，Shenzhen，China)對(duì)血常規(guī)指標(biāo)包括白細(xì)胞(WBC)、紅細(xì)胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)以及紅細(xì)胞比容(Hct)進(jìn)行計(jì)數(shù)。

1.3.3 血液生化指標(biāo)測(cè)定

使用自動(dòng)生化分析儀(Mindray，BS-400，Shenzhen，China)測(cè)定血清中總蛋白(TP)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、葡萄糖(GLU)的濃度以及谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)的活性。

1.3.4 肝臟脂肪酸組分的測(cè)定

肝臟組織從-20 ℃冰箱取出后立即放入預(yù)冷真空冷凍干燥機(jī)中，干燥36 h以去除水分，取出捻成粉末后，送至江南大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行脂肪酸組分測(cè)定。采用面積歸一化法對(duì)脂肪酸的含量進(jìn)行計(jì)算。

1.4 海豚鏈球菌感染實(shí)驗(yàn)

1.4.1 供試菌株來源及培養(yǎng)基的制備

供試海豚鏈球菌(Streptococcusiniae)菌株由廣西水產(chǎn)科學(xué)研究院提供，從患病吉富羅非魚上分離鑒定而來。本次實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基為腦心浸液液體培養(yǎng)基，按培養(yǎng)基說明書配置1 L溶液，經(jīng)121 ℃滅菌15 min后分裝，4 ℃冷藏備用。

1.4.2 海豚鏈球菌菌液的制備

將海豚鏈球菌接種于已制備好的無菌腦心浸液液體培養(yǎng)基中，放入搖床，過夜振蕩培養(yǎng)(37 ℃，180 r/min)。細(xì)菌濃度通過平板計(jì)數(shù)達(dá)到1.0×1010～1.0×1011數(shù)量級(jí)后，離心收集細(xì)菌，用0.85% NaCl重懸，稀釋濃度至5×106～5×108CFU/mL，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.4.3 海豚鏈球菌感染實(shí)驗(yàn)

根據(jù)文獻(xiàn)[8-9]的方法，配制5×106、1×107、5×107、1×108、5×108CFU/mL 5個(gè)海豚鏈球菌液濃度水平，隨機(jī)選取30尾與實(shí)驗(yàn)魚同等規(guī)格的魚進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，選擇注射后使吉富羅非魚接近半數(shù)致死的菌液濃度(5×107CFU/mL)用于正式實(shí)驗(yàn)。養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，將剩余吉富羅非魚在原溶氧水平下繼續(xù)暫養(yǎng)10 d，正常投喂，以減少采樣應(yīng)激。正式實(shí)驗(yàn)時(shí)，從3個(gè)溶氧水平組中各取45尾魚(每桶15尾)，按每100 g魚體重/0.5 mL注射菌液(5×107CFU/mL)。實(shí)驗(yàn)期間正常投喂，每天觀察吉富羅非魚活動(dòng)情況，及時(shí)撈出死魚，記錄24、48、72、96 h吉富羅非魚死亡數(shù)。每3 h用便攜式溶氧儀檢測(cè)一次水中溶氧，水中溶氧控制方法與養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)時(shí)相同。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

結(jié)果均采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(mean±SE，n=9)表示。使用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件中單因素方差分析和Duncan’s多重比較法對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的差異顯著性進(jìn)行分析處理，P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 不同溶氧水平對(duì)吉富羅非魚生長(zhǎng)的影響

由表1可知，養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)開始前三組羅非魚的初始體重?zé)o顯著差異，飼喂8周后，低氧組羅非魚存活率顯著低于對(duì)照組、高氧組；低氧組羅非魚的末體重顯著小于對(duì)照組和高氧組，且高氧組羅非魚末體重高于對(duì)照組。低氧組羅非魚的SGR、HSI和VSI均顯著低于對(duì)照組和高氧組，而低氧組羅非魚FCR顯著高于對(duì)照組和高氧組，對(duì)照組和高氧組羅非魚SGR、FCR、HSI、VSI均無顯著差異。

表1 不同溶氧水平下吉富羅非魚生長(zhǎng)指標(biāo)的變化

注：同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著，P<0.05，下同。

2.2 不同溶氧水平對(duì)吉富羅非魚血液指標(biāo)的影響

飼喂8周后，不同溶氧水平對(duì)吉富羅非魚血液指標(biāo)影響的結(jié)果見表2。低氧組羅非魚血液中RBC、WBC、Hb、Hct顯著高于對(duì)照組和高氧組，而對(duì)照組與高氧組無顯著差異。

表2 不同溶氧水平下吉富羅非魚血液指標(biāo)的變化

2.3 不同溶氧水平對(duì)吉富羅非魚血清生化指標(biāo)的影響

飼喂8周后，對(duì)吉富羅非魚血清生化指標(biāo)影響的結(jié)果見表3。羅非魚血清中TP的含量隨著溶氧水平的降低而下降，低氧組羅非魚血清中TP、GLU的含量顯著低于對(duì)照組和高氧組，對(duì)照組和高氧組TP與GLU的含量無顯著差異；而TC和TG的含量隨溶氧水平的降低而下降，且在三組間無顯著差異；低氧組羅非魚血清中ALT與AST的含量顯著高于對(duì)照組和高氧組，對(duì)照組和高氧組ALT與AST的含量無顯著差異。

表3 不同溶氧水平下吉富羅非魚血液指標(biāo)的變化

2.4 不同溶氧水平對(duì)吉富羅非魚肝臟脂肪酸組成的影響

飼喂8周后，不同溶氧水平對(duì)吉富羅非魚肝臟脂肪酸組成影響的結(jié)果見表4。三組羅非魚肝臟中飽和脂肪酸(SFA)、單不飽和脂肪酸(MUFA)、多不飽和脂肪酸(PUFA)的含量無顯著差異，但是在三組中占組成比例較高的脂肪酸，如C18∶0，其含量在低氧組中最高，且顯著高于對(duì)照組和高氧組。低氧組羅非魚肝臟中n-3PUFA的含量以及n-3PUFA/n-6PUFA比值均顯著低于對(duì)照組與高氧組；必需脂肪酸花生四烯酸(ARA)和二十二碳六烯酸(DHA)的含量隨溶氧水平的下降而降低，且低氧組羅非魚肝臟中ARA與DHA的含量顯著低于對(duì)照組與高氧組。三組羅非魚肝臟中二十碳五烯酸(EPA)的含量無顯著差異。

表4 不同溶氧水平下吉富羅非魚肝臟脂肪酸組成的變化

2.5 不同溶氧水平對(duì)吉富羅非魚感染海豚鏈球菌后存活率的影響

不同溶氧水平對(duì)吉富羅非魚感染海豚鏈球菌后存活率影響的結(jié)果見圖1。三組羅非魚在感染海豚鏈球菌24 h內(nèi)均未出現(xiàn)死亡；感染48～96 h，對(duì)照組羅非魚累計(jì)存活率在三組中最低，但與高氧組無顯著差異；感染96 h后，低氧組、對(duì)照組和高氧組羅非魚累計(jì)存活率分別達(dá)到82.22%、55.56%、57.78%，且低氧組羅非魚存活率顯著高于對(duì)照組與高氧組。

圖1 不同溶氧水平下吉富羅非魚感染海豚鏈球菌后96 h累計(jì)存活率的變化Fig.1 Changes of cumulative survival rate at 96 h after GIFT tilapia challenged with S.iniae under different dissolved oxygen concentrations

3 討論

3.1 不同溶氧水平對(duì)吉富羅非魚生長(zhǎng)的影響

水體溶氧會(huì)影響魚類的生長(zhǎng)，溶氧降低常常會(huì)引起魚類攝食量的減少，導(dǎo)致魚類生長(zhǎng)緩慢、甚至死亡[10]。Gan等[11]研究發(fā)現(xiàn)，草魚(Ctenopharyngodonidellus)在低氧(3.5 mg/L)環(huán)境中攝食量、體增重、飼料轉(zhuǎn)化率均比高氧(6 mg/L)環(huán)境中要低，其生長(zhǎng)受到明顯抑制。相關(guān)研究報(bào)道表明水中溶氧缺乏同樣會(huì)使兔脂鯉(Leporinuselongatus)、斑點(diǎn)叉尾鮰(Ictaluruspunctatus)和黃顙魚(Pseudobagrusvachelli)的生長(zhǎng)受到抑制[12-14]，Brito等[15]研究發(fā)現(xiàn)，在溶解氧充足的環(huán)境下，蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)素能夠有效地轉(zhuǎn)變?yōu)樯L(zhǎng)能，因而魚類生長(zhǎng)快速。本研究結(jié)果與上述研究報(bào)道類似，吉富羅非魚在不同溶氧水平下生長(zhǎng)速率存在差異，低氧組羅非魚攝食量少、生長(zhǎng)緩慢，魚體瘦小。高氧組羅非魚生長(zhǎng)最好，其SGR在三組中最大而FCR最小，對(duì)照組羅非魚的各項(xiàng)生長(zhǎng)指標(biāo)值均低于高氧組，但兩組之間無顯著差異，這說明低氧脅迫下，羅非魚無法有效地將蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)素有效地轉(zhuǎn)變?yōu)樯L(zhǎng)能。

HSI和VSI是兩個(gè)可以反映魚類營(yíng)養(yǎng)健康狀況的指標(biāo)。本研究中，低氧組羅非魚HSI和VSI顯著小于對(duì)照組和高氧組，低氧條件下羅非魚代謝受限，機(jī)體攝入的能量可能主要用于維持各項(xiàng)基本代謝活動(dòng)，這導(dǎo)致羅非魚生長(zhǎng)緩慢，體內(nèi)各臟器器官的發(fā)育也受到明顯抑制。對(duì)照組和高氧組羅非魚HSI和VSI無顯著差異，因此，基于本次試驗(yàn)結(jié)果，水體溶氧達(dá)到4.5 mg/L時(shí)，基本滿足吉富羅非魚的溶氧需求。

3.2 不同溶氧水平對(duì)吉富羅非魚血液指標(biāo)的影響

魚類血液組成受多種內(nèi)源性因素(營(yíng)養(yǎng)狀況、個(gè)體大小)和外源性因素(光照、溫度、溶氧)的影響。一些血液指標(biāo)(RBC、Hb、Hct、WBC)通?？梢杂脕碓u(píng)估魚體的生理和病理狀況[16]。RBC具有運(yùn)輸氧氣和二氧化碳的功能，而Hb是紅細(xì)胞內(nèi)與氧氣結(jié)合的特殊蛋白，其濃度與RBC含量密切相關(guān)[17]，Hct是指紅細(xì)胞在全血中所占的比例，是影響血液黏稠度的主要因素，也是反映血液氧運(yùn)輸能力的指標(biāo)之一[18]。在本研究中，低氧組吉富羅非魚RBC、Hb、Hct等指標(biāo)值均顯著上升，這一結(jié)果與沈凡等[19]黃顙魚慢性缺氧實(shí)驗(yàn)所得的結(jié)果相一致。長(zhǎng)期低氧脅迫下，吉富羅非魚可能通過增加血液中RBC的數(shù)量來提高血液的運(yùn)氧能力，Hb和Hct數(shù)值的升高，也在一定程度上反映缺氧狀態(tài)下魚體需要提高RBC攜氧能力，已盡可能地滿足自身對(duì)氧的需求。另外，對(duì)照組和高氧組羅非魚RBC、Hb、Hct值無顯著差異，這說明水體中溶氧水平高于4.5 mg/L時(shí)，吉富羅非魚自身的供氧能力就能滿足機(jī)體對(duì)氧的需求，并不需要提高額外的運(yùn)氧、攜氧能力。

WBC是參與非特異免疫防御的一類血細(xì)胞，當(dāng)魚類受到病菌侵染或處于應(yīng)激狀態(tài)下時(shí)，血液中WBC的數(shù)量會(huì)發(fā)生改變[20]。沈凡等[19]研究發(fā)現(xiàn)，黃顙魚在2.28 mg/L的低溶氧水體中飼養(yǎng)8周后，血液中的WBC數(shù)量顯著增加。而魯倫文[21]研究發(fā)現(xiàn)，斑點(diǎn)叉尾鮰在不同溶氧條件下飼喂56 d，低氧(2.01 mg/L)水環(huán)境下，斑點(diǎn)叉尾鮰血液中WBC的數(shù)量顯著低于其他組。本研究中，低氧組吉富羅非魚WBC數(shù)量顯著升高，與沈凡等[19]研究結(jié)果相一致。長(zhǎng)期低氧脅迫后，吉富羅非魚體內(nèi)的免疫防御系統(tǒng)可能被激活，血液中WBC數(shù)量升高，更有利于提高羅非魚對(duì)低氧環(huán)境的耐受性。

3.3 不同溶氧水平對(duì)吉富羅非魚血清生化指標(biāo)的影響

血清中的GLU是魚體能夠用于各項(xiàng)生命活動(dòng)的基本能源物質(zhì)。GLU含量的升高可以使更多的GLU參與糖酵解反應(yīng)，增強(qiáng)厭氧代謝，為魚類生命活動(dòng)提供更多的能量。本研究中，低氧組羅非魚血清GLU含量顯著低于對(duì)照組和高氧組，低氧脅迫下，魚體攝取的能源物質(zhì)可能無法滿足機(jī)體原本對(duì)能量代謝的需求，體內(nèi)的能源物質(zhì)加劇分解，導(dǎo)致低氧組羅非魚血清GLU水平較低。

TP是魚類血清中重要組成成分之一，在魚類生理和免疫中均發(fā)揮了重要的作用。研究表明，血清中TP水平受機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)分解代謝的影響[22]。本研究中，低氧組羅非魚血清中TP的含量顯著下降，可能是低氧脅迫下，羅非魚免疫系統(tǒng)被激活，需要消耗更多免疫相關(guān)的蛋白質(zhì)參與免疫、代謝調(diào)控，進(jìn)而維持魚體內(nèi)穩(wěn)態(tài)。

AST和ALT活性變化與肝細(xì)胞受損傷密切相關(guān)[23]。通常魚類血清中轉(zhuǎn)氨酶的活性較低且相對(duì)穩(wěn)定，本研究中，低氧組羅非魚血清中AST與ALT的活性顯著上升，因此，低氧脅迫可能促進(jìn)吉富羅非魚的肝臟受損，從而造成血清中AST和ALT活性的升高。這與丁晨雨等[24]對(duì)鰱低氧脅迫實(shí)驗(yàn)的結(jié)果相一致。

3.4 不同溶氧水平對(duì)吉富羅非魚肝臟脂肪酸組成的影響

脂肪酸是構(gòu)成脂肪的主要成分。面對(duì)外界環(huán)境的變化，魚類可以通過調(diào)節(jié)一系列生理和生化反應(yīng)來適應(yīng)外界環(huán)境，通常機(jī)體脂肪酸組成也會(huì)隨之發(fā)生變化。目前關(guān)于溫度[25]、饑餓[26]與密度脅迫[27]對(duì)魚體脂肪酸組成影響的研究較多，但是關(guān)于低氧脅迫對(duì)魚類脂肪酸組成的影響尚未見報(bào)道。脅迫狀態(tài)下，魚類生理狀態(tài)發(fā)生改變會(huì)優(yōu)先利用脂肪酸中的SFA、MUFA供能[25]，本研究中，三個(gè)實(shí)驗(yàn)組吉富羅非魚肝臟中SFA、MUFA、PUFA的比例無顯著差異，同時(shí)三組吉富羅非魚TG和TC的含量也無顯著差異。低氧脅迫下，吉富羅非魚可能未消耗過多的脂質(zhì)用于供能，進(jìn)而導(dǎo)致肝臟中SFA、MUFA、PUFA比例無明顯變化。但是本研究發(fā)現(xiàn)，低氧脅迫會(huì)顯著降低羅非魚肝臟中n-3PUFA的比例，n-3系列PUFA是組成生物膜重要的結(jié)構(gòu)和功能物質(zhì)，因此，低氧脅迫可能會(huì)影響細(xì)胞生物學(xué)的功能，進(jìn)而影響羅非魚的生長(zhǎng)發(fā)育。

DHA、EPA和ARA是魚類非常重要的三種必需脂肪酸。馬昕羽等[28]研究發(fā)現(xiàn)，羅非魚可以將C18∶3n-3和C18∶2n-6轉(zhuǎn)化為EPA、DHA和ARA，本研究中，低氧組吉富羅非魚肝臟中DHA和ARA的比例顯著降低，而C18∶2n-6的比例顯著升高，低氧脅迫可能會(huì)抑制羅非魚肝臟中C18∶2n-6向DHA和ARA的轉(zhuǎn)化，而EPA缺乏會(huì)使魚類的生長(zhǎng)和飼料利用受到抑制[29]，這可能也是本研究中低氧組羅非魚生長(zhǎng)緩慢的原因之一。

3.5 不同溶氧水平對(duì)吉富羅非魚感染海豚鏈球菌后存活率的影響

吉富羅非魚在不同溶氧條件下飼養(yǎng)8周后，采用5×107CFU/mL濃度的海豚鏈球菌菌液對(duì)吉富羅非魚進(jìn)行腹腔注射，低氧組累計(jì)存活率顯著高于對(duì)照組與高氧組，這與沈凡等[29]的研究結(jié)果有所差異。低氧脅迫下黃顙魚感染嗜水氣單胞菌后的累計(jì)死亡率出現(xiàn)顯著增加。此外，盧邁新[30]報(bào)道海豚鏈球菌對(duì)100 g以上的成魚和幼魚感染性較強(qiáng)，而本研究中低氧組吉富羅非魚的體重為58.58 g，對(duì)照組與高氧組的實(shí)驗(yàn)魚末體重均超過100 g，規(guī)格差異可能也是導(dǎo)致低氧組感染后存活率較高的原因之一。與此同時(shí)，本研究中低氧組吉富羅非魚WBC的數(shù)量明顯上升，長(zhǎng)期低氧脅迫可能激活了吉富羅非魚體內(nèi)的免疫防御系統(tǒng)，在面對(duì)海豚鏈球菌侵染時(shí)，使得吉富羅非魚具有較強(qiáng)的抵抗力。然而，對(duì)于其具體的作用機(jī)制尚未可知，需要進(jìn)一步的研究。