周陽，肖文軍,3，林玲，袁冬寅，彭影琦，譚春波，張強，龔志華,3*

紅茶及其發(fā)花紅磚茶對高血糖模型小鼠的降血糖作用

周陽1，肖文軍1,3，林玲1，袁冬寅1，彭影琦1，譚春波2，張強2，龔志華1,3*

1. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)茶學(xué)教育部重點實驗室，湖南 長沙 410128；2.湖南武陵秀峰茶業(yè)有限公司，湖南 常德 415000；3. 國家植物功能成分利用工程技術(shù)研究中心，湖南 長沙 410128

以相同鮮葉加工而成的紅茶及其發(fā)花紅磚茶為原料，在應(yīng)用鏈脲佐菌素腹腔注射并成功建立高血糖模型小鼠方法的基礎(chǔ)上，將90只KM雄性小鼠按每組10只，隨機分為正常組、模型組、紅茶及發(fā)花紅磚茶高、中、低劑量組和鹽酸二甲雙胍片組，連續(xù)灌喂28天，探討了紅茶及其發(fā)花紅磚茶對高血糖模型小鼠的降血糖作用。結(jié)果表明，與正常組相比，模型組小鼠體重、飲水、飲食、血糖水平均有極顯著差異（＜0.01），且血糖水平達到高血糖標(biāo)準(zhǔn)，說明造模成功；與模型組相比，紅茶及發(fā)花紅磚茶高劑量組的肝臟指數(shù)顯著下降（＜0.05）、胰腺指數(shù)顯著上升（＜0.05）；中、高劑量組的總膽固醇顯著下降（＜0.05），過氧化氫酶、超氧化物岐化酶顯著上升（＜0.05）；各劑量組的血糖、甘油三酯、丙二醛含量水平顯著下降（＜0.05），口服耐糖量、谷胱甘肽過氧化物酶活性及胰島素含量水平則顯著上升（＜0.05），除紅茶低劑量組外各劑量組肝糖原含量水平均顯著上升（＜0.05），同時可修復(fù)受損胰島；與紅茶組相比，發(fā)花紅磚茶高劑量組在改善胰島素水平、血糖水平、口服耐糖量、丙二醛水平及肝糖原水平上顯著優(yōu)于紅茶高劑量組（＜0.05），中、高劑量組在提高過氧化氫酶、超氧化物岐化酶及谷胱甘肽過氧化物酶的酶活性上顯著優(yōu)于紅茶中、高劑量組（＜0.05）。由此表明，紅茶及其發(fā)花紅磚茶均具有降低高血糖模型小鼠血糖的作用，且在作用效果上發(fā)花紅磚茶優(yōu)于紅茶，但其機制有待進一步探究。

紅茶；發(fā)花紅磚茶；高血糖癥；模型小鼠；降血糖作用

糖尿病是一種以高血糖為特征的慢性、非傳染性、代謝性疾病[1]，是由T細(xì)胞介導(dǎo)的胰島細(xì)胞功能受損而引起機體胰島素缺乏或胰島素利用率降低，進而導(dǎo)致機體葡萄糖、蛋白和脂肪代謝紊亂而產(chǎn)生的自身免疫性疾病[2-6]。促胰島素分泌劑類、二甲雙胍類、-糖苷酶抑制劑類、噻唑烷二酮衍生物、DDP-4酶抑制劑等常用口服降血糖藥雖具有較好的降血糖效果，但多為化學(xué)合成，存在一定毒副作用，難以有效預(yù)防并發(fā)癥[7]。開發(fā)利用天然、安全、有效的降血糖藥物或輔助降血糖功能食品將是防治糖尿病的發(fā)展趨勢，也是膳食營養(yǎng)干預(yù)的重要發(fā)展方向。茶葉作為一種傳統(tǒng)健康飲品，含有茶多酚、茶多糖等多種具有降血糖作用的天然生物活性成分[8-14]，同時研究表明，綠茶、紅茶、黑茶、烏龍茶、黃茶等茶產(chǎn)品均具有降血糖作用[15-20]，但相關(guān)研究主要局限于某種茶類或者茶中某一類物質(zhì)是否具有降血糖作用，而鮮見以相同茶鮮葉為原料經(jīng)不同工藝加工而具有不同品質(zhì)特色的同一茶類的降血糖作用研究。發(fā)花紅磚茶是在紅茶的基礎(chǔ)上增加了汽蒸、壓制、發(fā)花、干燥等工藝的一種紅茶新產(chǎn)品，但是否具有較好的降血糖作用尚有待進一步探究。本研究以高血糖模型小鼠為試驗對象，以相同的茶鮮葉加工而成的紅茶及其發(fā)花紅磚茶為原料，參照國家食品藥品監(jiān)督管理局《輔助降血糖功能評價方法》，比較研究了紅茶及其發(fā)花紅磚茶的降血糖效果，以期為發(fā)花紅磚茶的生產(chǎn)與消費提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器設(shè)備

1.1.1 試驗動物

SPF級KM小鼠90只，雄性，(20±2)?g，購于湖南斯萊克景達試驗動物有限公司，試驗動物生產(chǎn)許可證號：SCXK(湘)2016-0002。

1.1.2 材料

紅茶及發(fā)花紅磚茶均由湖南武陵秀峰茶業(yè)有限公司生產(chǎn)加工。紅茶是由碧香早一芽三四葉經(jīng)萎凋、揉捻、發(fā)酵、干燥等工藝加工而成；發(fā)花紅磚茶是在紅茶的基礎(chǔ)上增加了汽蒸、壓制、發(fā)花、干燥等工藝加工而成。兩種樣品的直觀圖如圖1所示，感官品質(zhì)特點如表1所示。

1.1.3 試劑

鹽酸二甲雙胍片，購于中美上海施貴寶制藥有限公司；鏈脲佐菌素STZ（S0130），購于美國Sigma公司；總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GPx）試劑盒購于南京建成生物工程研究所；超氧化物岐化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、肝糖原試劑盒購于蘇州科銘生物有限公司；其他試劑均為分析純。

圖1 紅茶及發(fā)花紅磚茶試驗原料直觀對比圖

表1 紅茶及發(fā)花紅磚茶試驗原料感官品質(zhì)特點

1.1.4 儀器設(shè)備

多功能酶標(biāo)儀（賽默飛世爾上海儀器有限公司）、MIKRO 22R型臺式冷凍離心機（德國Hettich公司）、電子天平（梅特勒-托利多儀器上海有限公司）、電熱恒溫水浴鍋（上海精宏實驗設(shè)備有限公司）、冷凍干燥機（廣州三元科技有限公司）、PowerGen 125高速勻漿機（中國賽默飛世爾科技公司）、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海榮亞生化儀器廠）、高效液相色譜儀（美國安捷倫公司）、紫外分光光度計UV-2550（日本島津公司）。

1.2 試驗方法

1.2.1 茶樣前處理方法

稱取紅茶和發(fā)花紅磚茶各600?g，分別粉碎后，按茶水比1∶10在沸水浴中提取30?min，浸提2次，過濾，合并濾液于55℃下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至固形物含量約30%后，冷凍干燥分別得干粉143.50?g與147.70?g，鋁箔袋收集干粉，放入冰箱保存。經(jīng)檢測，紅茶干粉中茶多酚、咖啡堿、簡單兒茶素、酯型兒茶素、兒茶素總量、茶黃素、茶紅素、茶褐素含量分別為31.30%、10.24%、1.30%、1.69%、3.29%、1.55%、19.61%、22.67%；發(fā)花紅磚茶干粉中茶多酚、咖啡堿、簡單兒茶素、酯型兒茶素、兒茶素總量、茶黃素、茶紅素、茶褐素的含量分別為30.90%、11.44%、1.61%、1.19%、2.80%、1.22%、19.18%、29.70%。

1.2.2 高血糖小鼠模型的方法建立

購買SPF級KM雄性小鼠，20只，20?g左右，自由飲食，適應(yīng)性喂養(yǎng)3~5?d。禁食16?h，測其空腹血糖值和體重，按照體重值確定所需鏈脲佐菌素量，配置溶液，腹腔注射50?mg·kg-1，連續(xù)注射5?d，每天1次。最后一次注射結(jié)束后，禁食16?h，測定血糖值，血糖值高于11.1?mmoL·L-1視為造模成功；同時觀察記錄小鼠的體重、飲水、飲食等生理變化。

1.2.3 動物試驗設(shè)計

以建立的高血糖小鼠模型方法為基礎(chǔ)，將90只SPF級KM小鼠在22~25℃條件下適應(yīng)性飼養(yǎng)7?d后，稱重，隨機取10只作為正常組（NC），其余小鼠進行造模，將80只造模成功小鼠隨機分為模型組（MC）、紅茶高劑量組（BH）、紅茶中劑量組（BM）、紅茶低劑量組（BL）、發(fā)花紅磚茶高劑量組（FBH）、發(fā)花紅磚茶中劑量組（FBM）、發(fā)花紅磚茶低劑量組（FBL）、鹽酸二甲雙胍片組（MHT），每組10只。參照文獻[21-22]，確定鹽酸二甲雙胍片劑量為250?mg·kg-1·d-1，按照1.2.1章節(jié)處理所得紅茶和發(fā)花紅磚茶的茶粉高、中、低劑量分別為1?000、500、300?mg·kg-1·d-1。正常組與模型組均灌喂等體積水，灌喂體積為10?mL·kg-1·d-1，連續(xù)灌喂28?d，在7、14、21、28?d分別測定各組小鼠體重和血糖值；同時在第28天，進行口服耐糖量測試。第29天，各組小鼠注射2%戊巴比妥鈉麻醉，摘眼球取血，每組采血時間不超過5?min，并解剖肝臟、腎臟、胰腺組織，測定其質(zhì)量。

1.3 檢測方法

1.3.1 小鼠體重與器官指數(shù)測定

體重：每天稱每組小鼠總體重，隔日稱每只小鼠體重。

器官指數(shù)：將小鼠肝臟和腎臟于4℃的生理鹽水洗凈血漬，濾紙吸干表面水分后稱其濕重。

器官指數(shù)=器官質(zhì)量/小鼠體質(zhì)量×100%。

1.3.2 小鼠口服耐糖量曲線下面積測定

在各組小鼠灌喂第28天時，禁食5?h，各給茶劑量組均給予相應(yīng)劑量受試樣品，正常組、模型組給予同體積生理鹽水，20?min后經(jīng)口灌喂劑量為2.0?g·kg·d-1的葡萄糖，0、0.5、2?h后測定各組小鼠血糖值，分析正常組、模型組與各給茶劑量組各時間點血糖曲線下面積的變化。血糖曲線下面積計算方法如下：

血糖＝1/2×(0?h血糖值＋0.5?h血糖值)×0.5＋1/2×(2?h血糖值＋0.5?h血糖值)×1.5＝0.25×(0?h血糖值＋4×0.5?h血糖值＋3×2?h血糖值)

1.3.3 血漿中TC、TG、CAT、INS含量測定

采血后室溫靜置1?h，4℃下3?000?r·min-1離心10?min，取血清，按試劑盒操作說明測定TC、TG、CAT、INS含量。

1.3.4 肝臟組織中SOD、GPx、MDA、肝糖原含量測定

按肝臟組織質(zhì)量（g）∶試劑盒里的試劑體積（mL）=1∶(5~10)的比例進行冰浴勻漿，8?000?r·min-1，4℃離心10?min，取上清液按試劑盒操作說明測定SOD、GPx、MDA活性。

稱取0.1~0.2?g小鼠肝臟組織，加入0.75?mL試劑盒中的提取液充分勻漿；轉(zhuǎn)移至10?mL試管中；95℃水浴20?min，每隔5?min振搖試管1次，使充分混勻；待組織液全部溶解后，取出試管冷卻后，用蒸餾水定容到5?mL，混勻，8?000?r·min-125℃離心10?min，取上清液測定肝糖原。

1.3.5 胰腺組織切片及HE染色觀察

按以下步驟依次進行：（1）60℃下烘烤載玻片1~2?h；（2）切片脫蠟至水化，先將切片置于二甲苯中10?min，重復(fù)2次，然后將切片依次放入100%、95%、85%和75%乙醇中，每級放置5?min，再用蒸餾水浸洗5?min；（3）將切片用蘇木素染色5~10?min，蒸餾水沖洗，再用PBS返藍；（4）用伊紅染色3~5?min，蒸餾水沖洗；（5）酒精梯度（95%~100%）脫水，每級5?min，然后取出后置于二甲苯10?min，重復(fù)2次，用中性樹膠封片后于顯微鏡下觀察。

1.4 數(shù)據(jù)處理

2 結(jié)果與分析

2.1 高血糖小鼠模型的方法建立

由表2可知，造模后的小鼠血糖值高于11.1?mmoL·L-1，同時飲水、飲食明顯增加，體重明顯減少。通過觀察小鼠喂養(yǎng)時籠子里的墊料發(fā)現(xiàn)，高血糖小鼠籠子里墊料濕的面積及程度均大于正常組，說明尿量增多；出現(xiàn)了明顯的“三多一少”癥狀，說明造模成功。

2.2 紅茶及其發(fā)花紅磚茶對高血糖模型小鼠的降血糖作用

2.2.1 對高血糖模型小鼠器官指數(shù)的影響

表3表明，與正常組相比，模型組肝臟指數(shù)顯著上升而腎臟、胰腺指數(shù)顯著下降（＜0.05）；與模型組相比，給茶組肝臟指數(shù)降低、胰腺指數(shù)上升，且發(fā)花紅磚茶高劑量組肝臟指數(shù)降低達顯著水平（＜0.05），給茶高劑量組胰腺指數(shù)上升達顯著水平（＜0.05），腎臟指數(shù)無顯著變化，同時兩種茶對應(yīng)劑量組之間無顯著差異；說明紅茶及其發(fā)花紅磚茶對高血糖小鼠均具有降低肝臟指數(shù)、升高胰腺指數(shù)的作用。

表2 應(yīng)用鏈脲佐菌素腹腔注射建立高血糖模型小鼠結(jié)果

注：A：與正常組相比＜0.01

Note: A: compared with NC<0.01

表3 紅茶及其發(fā)花紅磚茶對高血糖模型小鼠器官指數(shù)的影響

注：a：與正常組比較，<0.05；b：與模型組比較，<0.05

Note: a: compared with NC,<0.05. b: compared with MC,<0.05

2.2.2 對高血糖小鼠血糖（GLU）的影響

由表4可知，與正常組相比，造模前的各組小鼠血糖值均處于正常水平，造模后的各組小鼠空腹血糖含量極顯著升高（＜0.01），血糖值均高于11.1?mmoL·L-1，與前述建立高血糖小鼠模型方法的結(jié)果相符。灌喂28?d后，與模型組比較，給茶組和鹽酸二甲雙胍組的血糖水平顯著降低（＜0.05），其中給茶中劑量組達顯著水平（＜0.05）、高劑量組達極顯著水平（＜0.01），由此說明紅茶與發(fā)花紅磚茶均具有顯著的降血糖效果；給茶組組間比較顯示，兩種茶的降血糖效果均隨劑量的增大而增加，且發(fā)花紅磚茶高劑量組血糖值顯著低于紅茶高劑量組，說明發(fā)花紅磚茶的降血糖效果在一定程度上優(yōu)于紅茶。

2.2.3 對高血糖小鼠口服耐糖量（OGTT）的影響

表5顯示，正常組小鼠的血糖值在口服葡萄糖1?h后達最大值，2?h后血糖值基本恢復(fù)到給藥前水平，而高血糖小鼠2?h后恢復(fù)快慢有差異，通過與模型組比較曲線下面積，給茶組均能顯著提高小鼠的耐糖量（＜0.05），其中發(fā)花紅磚茶高劑量組達極顯著水平（＜0.01）；給茶組組間比較，兩種茶在提高小鼠耐糖量的效果均隨劑量的增大而增加，且發(fā)花紅磚茶高劑量組曲線下面積達43.44，顯著低于紅茶高劑量組46.49（＜0.05），說明紅茶、發(fā)花紅磚茶在一定程度上能夠提高高血糖小鼠的耐糖量，且發(fā)花紅磚茶效果優(yōu)于紅茶。

表4 紅茶及其發(fā)花紅磚茶不同灌喂時間對高血糖模型小鼠GLU的影響

注：A：與正常組比較，＜0.01；b：與模型組比較，<0.05；B：與模型組比較，＜0.01；c：與紅茶組比較，<0.05

Note: A: compared with NC,＜0.01. b: compared with MC,<0.05. B:compared with MC,<0.01. c: compared with black tea groups,<0.05

表5 紅茶及其發(fā)花紅磚茶對高血糖模型小鼠OGTT的影響

注：b：與模型組比較，<0.05；B：與模型組比較，＜0.01；c：與紅茶組比較，<0.05

Note: b: compared with MC,<0.05. B:compared with MC,<0.01. c: compared with black tea groups,<0.05

2.2.4 對高血糖小鼠血漿中CAT、TC、TG、INS的影響

表6表明，與模型組相比，給茶組均能顯著降低高血糖小鼠血漿TG水平以及顯著升高INS水平（＜0.05），其中發(fā)花紅磚茶高劑量組在升高INS水平上達極顯著水平（＜0.01）；紅茶與紅磚茶中高劑量能顯著降低高血糖小鼠血漿TC水平以及顯著升高CAT水平（＜0.05）。給茶組組間相比，兩種茶在降低TC與TG水平、升高CAT與INS水平上均具有隨劑量的增大而增加的趨勢，其中在升高CAT水平上發(fā)花紅磚茶中、高劑量組顯著優(yōu)于紅茶中、高劑量組（＜0.05），在升高INS水平上發(fā)花紅磚茶高劑量組顯著優(yōu)于紅茶高劑量組（＜0.05）。

2.2.5 對高血糖小鼠肝臟中GPx、MDA、SOD、肝糖原的影響

表7表明，與模型組相比，給茶組均能顯著提高GPx活性以及顯著降低MDA含量（＜0.05），其中發(fā)花紅磚茶高劑量組達極顯著水平（＜0.01）；給茶組中、高劑量組均能顯著提高SOD活性（＜0.05），其中發(fā)花紅磚茶高劑量組達極顯著水平（＜0.01）；除紅茶低劑量組外，其他給茶組均能顯著增加肝糖原含量（＜0.05），其中發(fā)花紅磚茶高劑量組達極顯著水平（＜0.01）。給茶組組間相比，兩種茶在提高GPx與SOD活性、增加肝糖原含量、降低MDA含量上均隨劑量的增大而增加，且在提高GPx與SOD活性上發(fā)花紅磚茶中、高劑量組優(yōu)于紅茶中、高劑量組（＜0.05），在改善MDA、肝糖原含量上發(fā)花紅磚茶高劑量組優(yōu)于紅茶高劑量組（＜0.05）。

表6 紅茶及其發(fā)花紅磚茶對高血糖模型小鼠TC、TG、CAT、INS的影響

注：b：與模型組比較，<0.05；B：與模型組比較，＜0.01；c：與紅茶組比較，<0.05

Note: b: compared with MC,<0.05. B: compared with MC,<0.01. c: compared with black tea groups,<0.05

表7 紅茶及其發(fā)花紅磚茶對高血糖模型小鼠GPx、MDA、SOD、肝糖原的影響

注：b：與模型組比較，<0.05；B：與模型組比較，＜0.01；c：與紅茶組比較，<0.05

Note: b:compared with MC,<0.05. B:compared with MC,<0.01. c: compared with black tea groups,<0.05

2.2.6 對高血糖小鼠胰腺的影響

圖2表明，正常組胰島呈橢圓形，結(jié)構(gòu)完整，邊界清晰；模型組胰島體積縮小，形態(tài)不規(guī)則，結(jié)構(gòu)被破壞，邊界不清晰。給茶組與模型組相比，胰島結(jié)構(gòu)得到修復(fù)改善，胰島形態(tài)較為完整，細(xì)胞排列較為規(guī)則，胞漿分布均勻，空泡變性較少，邊界較為清晰，說明紅茶及其發(fā)花紅磚茶具有保護胰島形態(tài)結(jié)構(gòu)完整、輔助調(diào)節(jié)細(xì)胞分泌功能的作用，且發(fā)花紅磚茶組的胰島與周圍腺泡組織界限比紅茶組清晰，細(xì)胞排列、胞漿分布均優(yōu)于紅茶組，恢復(fù)程度高于紅茶，從而說明發(fā)花紅磚茶對受損胰島的修復(fù)效果在一定程度上優(yōu)于紅茶。

注：a：正常組；b：模型組；c：紅茶組；d：發(fā)花型紅磚茶組

3 結(jié)論與討論

高血糖癥主要是由T細(xì)胞介導(dǎo)的胰島細(xì)胞功能受損而引起機體胰島素缺乏或胰島素利用率降低所致，是一種以高血糖為特征的慢性、非傳染性、代謝性疾病[23]。隨著人們生活方式、生活環(huán)境、飲食結(jié)構(gòu)的變化，高血糖癥已成為威脅人類健康的重要隱患，防治高血糖癥已成為全世界共同關(guān)注的課題。本試驗結(jié)果表明，與高血糖模型組相比，紅茶及發(fā)花紅磚茶高劑量組的肝臟指數(shù)顯著下降（＜0.05）、胰腺指數(shù)顯著上升（＜0.05）；中、高劑量組的總膽固醇含量水平顯著下降（＜0.05），過氧化氫酶、超氧化物岐化酶的酶活性顯著上升（＜0.05）；各劑量組的血糖、甘油三酯、丙二醛含量水平顯著下降（＜0.05），口服耐糖量、谷胱甘肽過氧化物酶酶活性及胰島素含量水平則顯著上升（＜0.05），除紅茶低劑量組外各劑量組肝糖原含量水平均顯著上升（＜0.05），且兩種茶對受損的胰島均具有一定的修復(fù)作用，推測紅茶及其發(fā)花紅磚茶可在一定程度上通過保護胰腺和肝臟、改善脂質(zhì)代謝、緩減氧化應(yīng)激以及減輕因糖脂代謝異常而造成胰腺負(fù)擔(dān)加重等途徑來促使血糖進入肝細(xì)胞，使葡萄糖合成肝糖原增加，肝糖原輸出減少，葡萄糖氧化分解加快，從而達到調(diào)節(jié)糖脂代謝、降低血糖的作用[24-28]。同時，試驗采用紅茶及發(fā)花紅磚茶提取物進行灌喂，其高劑量均為1?000?mg·kg-1，根據(jù)《藥理實驗方法學(xué)》[29]計算方法，小鼠的等效劑量相當(dāng)于人的9.1倍，即相當(dāng)于人的劑量為110?mg·kg-1。假設(shè)人的體重為60?kg，則一天需要喝6.6?g提取物，相當(dāng)于喝26.4?g紅茶或發(fā)花型紅磚茶（提取率按25%計算），一般日常生活中人們每天僅喝2~4杯茶，這可能是日常飲茶很難達到顯著降血糖效果的主要原因。

另一方面，研究結(jié)果顯示，發(fā)花紅磚茶組與紅茶組相比，發(fā)花紅磚茶高劑量組在改善胰島素水平、血糖水平、口服耐糖量、丙二醛水平及肝糖原水平上顯著優(yōu)于紅茶高劑量組（＜0.05），中、高劑量組在提高過氧化氫酶、超氧化物岐化酶、谷胱甘肽過氧化物酶活性上顯著優(yōu)于紅茶中、高劑量組（＜0.05），說明發(fā)花紅磚茶在降血糖作用效果上優(yōu)于紅茶。究其原因，可能主要是由于發(fā)花紅磚茶在經(jīng)歷“發(fā)花”等后發(fā)酵工藝之后，健康品質(zhì)發(fā)生了以下兩個方面的變化：一是由“發(fā)花”工藝形成的“金花菌”本身就是一種有益于身體健康的益生菌，“金花”菌及其代謝產(chǎn)物與腸道菌群相互作用，具有調(diào)節(jié)糖脂代謝、調(diào)理腸胃等生物活性[30]；二是“金花”菌以紅茶原料為基質(zhì)進行生長繁育過程中，可分泌淀粉酶、脂肪酶、纖維素酶、蛋白酶、果膠酶、氧化酶、單寧酶等多種酶，分泌的酶可參與到茶多酚、糖、有機酸、茶色素等物質(zhì)的轉(zhuǎn)化，從而引起發(fā)花紅磚茶與紅茶在生物活性成分含量上的差異[31]。資料表明，在普洱茶加工的后發(fā)酵過程中，茶褐素含量逐漸增加，而茶黃素、茶紅素顯著降低[32-33]；從本試驗兩種茶的提取物內(nèi)含成分分析結(jié)果來看，除發(fā)花紅磚茶提取物中茶褐素含量明顯高于紅茶提取物外，其他成分相當(dāng)，由此可推測發(fā)花紅磚茶在降血糖作用效果上優(yōu)于紅茶可能主要由于茶褐素等生物活性物質(zhì)所引起，但其機制還有待于從發(fā)花紅磚茶加工品質(zhì)化學(xué)以及與機體糖代謝相關(guān)的基因、蛋白、信號通路層面進行深入的探索。

[1] Amitani H, Asakawa A, Cheng K, et al. Hydrogen improves glycemic control in typeⅠdiabetic animal model by promoting glucose uptake into skeletal muscle [J]. Plos One, 2012, 8(1): e53913. DOI: 10.1371/journal.pone.0053913.

[2] Ichinose K, Kawasaki E, Eguchi K. Recent advancement of understanding pathogenesis of typeⅠdiabetes and potential relevance to diabetic nephropathy [J]. American Journal of Nephrology, 2007, 27(6): 554-564.

[3] Homo-Delarche F, Drexhage H A. Immune cells, pancreas development, regeneration and typeⅠdiabetes [J]. Trends in Immunology, 2004, 25(5): 222-229.

[4] 李甜, 張亞樓, 陳龍, 等. 鏈脲佐菌素誘導(dǎo)C57小鼠Ⅰ型糖尿病模型的研究[J]. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展, 2014, 14(26): 5031-5033.

[5] 孫國鵬, 尹國安, 張艷芳. 低劑量鏈脲佐菌素誘導(dǎo)遲發(fā)性Ⅰ型糖尿病小鼠模型[J]. 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)學(xué)報, 2013, 25(3): 30-33, 41.

[6] 魏榮銳, 苗明三. 糖尿病動物模型及特點分析[J]. 中醫(yī)研究, 2010, 23(2): 6-11.

[7] 尹純, 孫藝紅. II型糖尿病血脂異常及治療[J]. 心血管病學(xué)進展, 2017, 38(5): 488-492.

[8] 于淑池, 蘇濤, 楊建民, 等. 安吉白茶多糖對實驗性糖尿病小鼠的降血糖作用研究[J]. 茶葉科學(xué), 2010, 30(3): 223-228.

[9] 黃智璇, 歐陽蒲月. 靈芝多糖降血糖作用的研究[J]. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥, 2008, 31(8): 24-25.

[10] 張梅, 吳越, 慕春海, 等. 蒼耳子水提取物對實驗性糖尿病小鼠的降血糖作用研究[J]. 石河子大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版), 2008, 26(5): 549-551.

[11] 梁燕, 王岳飛, 謝爭珍, 等. 茶?；旌洗莶杞笛亲饔玫膶嶒炑芯縖J]. 茶葉科學(xué), 2008, 28(5): 358-362.

[12] 張元, 林強, 崔玉梅, 等. 烏龍茶多糖的酶法提取及降血糖活性初步研究[J]. 中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué), 2008, 25(4): 286-288.

[13] 何學(xué)斌, 薛存寬, 魏守蓉, 等. 茶多糖對α-淀粉酶活性抑制作用及對糖尿病模型大鼠血糖影響研究[J]. 醫(yī)藥導(dǎo)報, 2007, 26(11): 1284-1286.

[14] Li S, Chen H, Wang J, et al. Involvement of the PI3K/Akt signal pathway in the hypoglycemic effects of tea polysaccharides on diabetic mice [J]. International Journal of Biological Macromolecules. 2015, 81: 967-974.

[15] 倪德江, 陳玉瓊, 謝筆鈞, 等. 綠茶、烏龍茶、紅茶的茶多糖組成、抗氧化及降血糖作用研究[J]. 營養(yǎng)學(xué)報, 2004, 26(1): 57-60.

[16] 劉琴琴, 葉珊, 羅文娟, 等. 湖南茯茶對糖尿病小鼠血糖的影響[J]. 中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用, 2013, 7(13): 220-221.

[17] 彭曉赟, 趙運林, 何小書, 等. 茯磚茶茶葉品質(zhì)和保健功能的研究概況[J]. 湖南城市學(xué)院學(xué)報(自然科學(xué)版), 2011, 20(4): 45-48.

[18] 蔡正安, 劉素純, 劉仲華, 等. 茯磚茶中冠突散囊菌纖維素酶的酶學(xué)性質(zhì)研究[J]. 茶葉科學(xué), 2010, 30(1): 57-62.

[19] 劉建宇, 劉丹, 張輝, 等. 安化黑茶化學(xué)成分及藥理活性研究進展[J]. 中草藥, 2017, 48(7): 1449-1455.

[20] 張冬英, 邵宛芳, 蔣智林, 等. 普洱茶分離組分的降糖降脂活性作用研究[J]. 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報, 2010, 25(6): 831-834.

[21] 吳揚, 胡志和, 郭嘉, 等. 乳鐵蛋白鉻對實驗性糖尿病小鼠血糖水平的影響[J]. 食品科學(xué), 2010, 31(13): 253-258.

[22] 方玉, 劉剛, 張曉喻, 等. 青刺尖茶湯對便秘模型小鼠潤腸通便的效果[J]. 食品科學(xué), 2014, 35(11): 265-268.

[23] 楊蕾, 舒孌, 姚冬冬, 等. 葛根素對鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病小鼠降糖作用[J]. 中國醫(yī)院藥學(xué)雜志, 2014, 34(16): 1338-1342.

[24] 陳亞藍. 普洱茶茶色素對SD大鼠脂質(zhì)代謝的影響及其作用機理研究[D]. 天津: 天津商業(yè)大學(xué), 2016.

[25] 劉紫萱, 張繼媛, 肖萍, 等. 3種植物活性成分聯(lián)合改善2型糖尿病小鼠氧化應(yīng)激效果研究[J]. 食品研究與開發(fā), 2017, 38(8): 5-10.

[26] Awadallah S M, Ramadan A R, Nusier M K. Haptoglobin polymorphism in relation to antioxidative enzymes activity in type 2 diabetes mellitus [J]. Diabetes & Metabolic Syndrome Clinical Research & Reviews, 2013, 7(1): 26-31.

[27] Hassan A. Amelioration of altered antioxidant enzyme activity by Satureja khuzistanica essential oil in alloxan-induced diabetic rats [J]. Chinese Journal of Natural Medicines, 2014, 12(9): 672-676.

[28] 陳剛. 茶多糖對代謝綜合征大鼠糖脂代謝的干預(yù)作用及機理研究[D]. 上海: 復(fù)旦大學(xué), 2011.

[29] 徐淑云, 卞如濂, 陳修. 藥理實驗方法學(xué)[M]. 2版. 北京: 人民衛(wèi)生出版社, 1991.

[30] 王瑤, 季宇彬, 陳明蒼. 中藥與腸道菌群相互作用的研究進展[J]. 中國醫(yī)藥導(dǎo)報, 2012, 9(2): 12-13.

[31] 楊富亞, 許波, 李俊俊, 等. 普洱茶渥堆過程中復(fù)合酶制劑的應(yīng)用研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué), 2013, 41(9): 4057-4060.

[32] 邵春甫, 賈黎暉, 李長文, 等. 普洱茶茶褐素研究進展[J]. 天津化工, 2011, 25(6): 1-3, 11.

[33] 羅龍新, 吳小崇, 鄧余良, 等. 云南普洱茶渥堆過程中生化成分的變化及其與品質(zhì)形成的關(guān)系[J]. 茶葉科學(xué), 1998, 18(1): 58-60.

Hypoglycemic Effects of Black Tea and Fungus Fermented Black Brick Tea on Hyperglycemic Model Mice

ZHOU Yang1, XIAO Wenjun1,3, LIN Ling1, YUAN Dongyin1, PENG Yingqi1, TAN Chunbo2, ZHANG Qiang2, GONG Zhihua1,3*

1. Key Laboratory of Tea Science of Educational Ministration, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China; 2. Hunan Wuling Xiufeng Tea Co. Ltd., Changde 415000, China; 3. National Research Center of Engineering & Technology for Utilization of Functional Ingredients from Botanicals, Changsha 410128, China

Based on the successfully establishment of hyperglycemia model by intraperitoneal injection of streptozotocin, 90 KM male mice were randomly divided into the normal, model, black tea treated (high, medium, low doses), fungus fermented black brick tea treated (high, medium, low doses) and metformin hydrochloride (n=10/each group) groups, and were continuously administrated for 28 days to study the hypoglycemic effects of black tea and fungus fermented black brick tea processed from the same batch of fresh leaves. The results show that compared with the normal group, the weight, water, diet and blood glucose levels of the model group were significantly different (0.01). The blood glucose level of the model group reached the standard of hyperglycemic index and indicates that the model was successful. Compared with the model group, the high dose ofblack tea treated group and fungus fermented black brick tea treated groups’ liver index were significantly decreased (0.05) and the pancreas index were significantly enhanced(0.05). The total cholesterols of the middle and high doses of black tea treated groups and fungus fermented black brick tea treated groups were significantly decreased (0.05), whiletheactivities of superoxide dismutase and catalase were significantly increased (0.05).The blood sugar, triglyceride and malondialdehyde levelsof black tea treated groups and fungus fermented black brick tea treated groups were significantly decreased in a dose-dependent manner (0.05). Besides, glucose tolerance, activity of glutathione peroxidase, insulin levels were increased significantly in a dose-dependent manner (0.05). The damaged structure of pancreas were repaired in black tea treated and fungus fermented black brick tea treated groups. Except for the low-dose black tea treated group, the hepatic glycogen level were enhanced in other black tea treated groups (0.05). Compared with the black tea groups, the high-dose fungus fermented black brick tea was significantly superior to the high-dose black tea in improving insulin level, blood sugar level, oral glucose tolerance, malondialdehyde level and liver glycogen level (0.05). The middle and high dose groups of fungus fermented black brick tea were also significantly superior to the middle and high dose groups of black tea in increasing the activities of catalase, superoxide dismutase and glutathione peroxidase. The results prompt that both the black tea and fungus fermented black brick tea could reduce the blood glucose of hyperglycemic mice, and fungus fermented black brick tea had better effects than black tea. The underlying mechanism needs further investigation.

black tea, fungus fermented black brick tea, hyperglycemia, model mice, hypoglycemic effect

S571.1；TS272.5+2

A

1000-369X(2019)04-415-10

2018-10-17

2019-01-06

國家重點研發(fā)計劃（2017YFD0400803）、湖南省科技重大專項（2017NK1020）、長沙市科技重大專項（kq1703003）

周陽，男，碩士研究生，主要從事茶樹生理與品質(zhì)化學(xué)研究方面的研究，87007183@qq.com。*通信作者：gzh041211@163.com