鎘脅迫對(duì)水培桑苗生長(zhǎng)的影響

曾燕蓉 朱方容 等

摘要：【目的】了解鎘脅迫對(duì)水培桑苗生長(zhǎng)發(fā)育的影響規(guī)律，篩選適宜鎘污染土壤的桑樹(shù)材料，為高耐鎘和鎘低積累桑樹(shù)品種的篩選提供參考依據(jù)。【方法】以桂桑優(yōu)12和桂桑優(yōu)62為試驗(yàn)材料，設(shè)不同鎘濃度的水培試驗(yàn)，測(cè)定桑苗的成活率和死亡率，運(yùn)用線性回歸法建立鎘脅迫濃度與桑樹(shù)死亡率的回歸直線方程，計(jì)算不同桑樹(shù)品種對(duì)水培液中鎘的耐受性;調(diào)查桑苗在鎘脅迫下生長(zhǎng)30 d的單株葉和莖鮮重及解除鎘脅迫后培養(yǎng)30 d的生長(zhǎng)指標(biāo)和葉片葉綠素?zé)晒鈪?shù)，分析鎘對(duì)桑苗的毒害作用?！窘Y(jié)果】據(jù)回歸直線方程計(jì)算得知，水培30 d后，水培液中鎘對(duì)桂桑優(yōu)62和桂桑優(yōu)12的半致死濃度分別為1.20和1.46 mg/kg，致死濃度分別為2.07和2.54 mg/kg。水培液中鎘濃度高于0.10 mg/kg時(shí)，兩個(gè)桑品種植株的葉片、莖鮮重均小于在無(wú)鎘培養(yǎng)液中生長(zhǎng)的桑苗（對(duì)照，CK）。解除鎘脅迫后，0.05 mg/kg處理桑苗的生長(zhǎng)狀況優(yōu)于CK，實(shí)際光能轉(zhuǎn)換效率[Y（II）值]低于CK，葉片光系統(tǒng)已受到鎘的毒害;0.10～0.50 mg/kg處理的桑苗生長(zhǎng)狀況明顯不及CK，葉片最大光能轉(zhuǎn)化效率（Fv/Fm）和Y（II）值均明顯下降，光系統(tǒng)受到鎘的嚴(yán)重毒害?！窘Y(jié)論】桑苗受到鎘的毒害作用外在表現(xiàn)為植株生長(zhǎng)受抑制，其中根系受到的影響最明顯;內(nèi)在表現(xiàn)為葉片光合作用被抑制，且該影響較難恢復(fù)。利用水培法進(jìn)行桂桑優(yōu)12和桂桑優(yōu)62栽培時(shí)水培液中的鎘濃度應(yīng)不高于1.0 mg/kg，以低于0.5 mg/kg為宜，且桂桑優(yōu)12對(duì)鎘的水培耐受性高于桂桑優(yōu)62。

關(guān)鍵詞： 鎘脅迫;桑苗;水培;生長(zhǎng)狀況;葉綠素?zé)晒馓匦?桂桑優(yōu)12;桂桑優(yōu)62

中圖分類號(hào)： S888.2? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：2095-1191（2019）02-0247-10

Abstract：【Objective】The present study was conducted to understand influence rules of the growth of hydroponic mulberry seedlings under cadmium stress and screen mulberry materials suitable for cadmium contaminated soil and provide reference for high tolerance cadmium varieties and low accumulation cadmium varieties of mulberry screening.【Method】In this research，Guisangyou 12 and Guisangyou 62 were used as experimental material，hydroponic experiments with different cadmium concentrations were designed. Through determination of survival rate and mortality of mulberry seedlings，linear regression equation of cadmium stress concentration and mulberry mortality was established by linear regression method. According to the equation，the tolerance of mulberry varieties to cadmium in hydroponics were calculated. The toxic effect of cadmium on mulberry was analyzed by investigating leaf weight per mulberry plant and fresh weight of stem growing under cadmium stress for 30 d，and the growth indicators and chlorophyll fluorescence parameters of leaves for 30 d after cadmium stress was relieved. 【Result】Calculated by regression linear equation， the semi-lethal concentration of cadmium of Guisangyou 62 and Guisangyou 12 were 1.20 and 1.46 mg/kg respectively，and the lethal concentration were 2.07 and 2.54 mg/kg respectively after 30 d of hydroponic culture. When the cadmium concentration was more than 0.10 mg/kg in the hydroponic solution，the fresh weight of leaves and young stems of the two mulberry varie-ties were smaller than that grew in cadmium-free medium（control，CK）. After the stress was removed，the growth of mulberry seedlings in 0.05 mg/kg were better than that of CK，and the actual photoenergy conversion efficiency[Y（II） value] was lower than that of CK，and the photosystem of leaves had been poisoned by cadmium.The growth of mulberry seedlings treated by 0.10-0.50 mg/kg treatments were largely lower than that of the control group，the maximum photoenergy conversion efficiency（Fv/Fm） and Y（II） value of leaves were greatly reduced，and the photosystem was seriously poisoned by cadmium. 【Conclusion】The external performance of mulberry is that plant growth is inhibited if mulberry is poisoned by cadmium. Simultaneously the root system is affected the most seriously. And the internal performance of mulberry is that the leaf photosynthesis is inhibited which is more difficult to recover. The concentration of cadmium in the hydroponic liquid should be no more than 1.0 mg/kg when cultivating Guisangyou 12 and Guisangyou 62 by hydroponic method. It is better not to exceed 0.5 mg/kg. In this study， the hydroponic tolerance of Guisangyou 12 to cadmium is higher than that of Guisangyou 62.

Key words： cadmium stress; mulberry; hydroponics; growth status; chlorophyll fluorescence characteristics; Guisangyou 12; Guisangyou 62

0 引言

【研究意義】目前，我國(guó)耕地受重金屬污染面積大（孫建幫等，2015），且呈現(xiàn)出加劇態(tài)勢(shì)，對(duì)人們的身體健康、食品安全及生態(tài)環(huán)境均造成嚴(yán)重威脅。鎘非植物生長(zhǎng)的必需微量元素，而是重金屬污染源之一，對(duì)植物體（鄭春榮等，2004;劉曉慶等，2017;陳寧美等，2018）和人類（李銀保等，2009）均具有毒害作用，但目前我國(guó)耕地的鎘污染情況十分嚴(yán)重（國(guó)土資源部，2014;鄧琴等，2017;楊國(guó)濤等，2018）。已有研究表明多種方法可修復(fù)鎘污染土壤或水體（曹勝等，2017;王曉美等，2018），其中桑樹(shù)在鎘污染土地的生態(tài)利用中相對(duì)于其他植物具有明顯優(yōu)勢(shì)（譚勇壁，2008;徐寧等，2015）。當(dāng)前，耐重金屬脅迫桑樹(shù)品種的篩選主要采用盆栽法，但該方法存在基質(zhì)、灌溉和添加試驗(yàn)難達(dá)一致性的問(wèn)題，進(jìn)而影響試驗(yàn)的重復(fù)性;且桑樹(shù)是木本植物，生長(zhǎng)發(fā)育受時(shí)間和自然環(huán)境的影響，生長(zhǎng)周期較長(zhǎng)，品種資源眾多，篩選和培育對(duì)鎘具有高耐性和低積累性的應(yīng)用品種時(shí)工作量大、周期長(zhǎng)，且易對(duì)環(huán)境造成二次污染，不利于實(shí)現(xiàn)栽桑養(yǎng)蠶高效無(wú)毒利用和修復(fù)重金屬污染土壤等生態(tài)效應(yīng)。水培法是一種重要的無(wú)土栽培方法，日常管理較簡(jiǎn)單，栽培的作物生長(zhǎng)速度較快。因此，與桑樹(shù)的品種篩選及選育研究結(jié)合，建立桑樹(shù)品種對(duì)鎘耐受性的水培快速篩選方法，了解桑樹(shù)在鎘脅迫下的生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律，不僅有利于加快高效篩選桑樹(shù)高耐鎘品種和鎘低積累品種的研究進(jìn)程，還也對(duì)今后開(kāi)展鎘污染土壤治理和生態(tài)利用具有重要意義。【前人研究進(jìn)展】至今，已有較多利用水培法進(jìn)行植物耐鎘或其他金屬元素品種篩選的研究。代成成（2010）結(jié)合田間和室內(nèi)水培試驗(yàn)，分別篩選得到不同鎘積累量的小白菜品種;郭利雙等（2015）利用水培方法進(jìn)行鎘高積累棉花品種的篩選，發(fā)現(xiàn)棉花苗期能大量吸收培養(yǎng)溶液中的鎘，不同品種間吸鎘能力差異明顯;孫凱等（2016）通過(guò)水培試驗(yàn)研究了6個(gè)苧麻品種在鎘脅迫下的耐受能力和吸附能力，認(rèn)為水培是篩選苧麻耐鎘品種的一種快速、便捷、可靠的方法;張騫（2017）對(duì)不同品種的生菜和莧菜進(jìn)行全生育期、旺盛生長(zhǎng)期及短期含砷營(yíng)養(yǎng)液水培試驗(yàn)，并與土培試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行比較，認(rèn)為短期吸收法具有用時(shí)短、污染少等優(yōu)點(diǎn)，可作為砷低吸收作物篩選優(yōu)先選用的方法，旺盛生長(zhǎng)期水培法次之。目前有關(guān)桑樹(shù)品種對(duì)鎘耐受性的水培法研究?jī)H是探討鎘脅迫對(duì)某個(gè)具體品種生長(zhǎng)及生理的影響，如劉旭輝等（2012）在水培液中添加不同濃度的鋅和鎘，研究不同培養(yǎng)時(shí)間和桑苗不同部位吸收、積累、轉(zhuǎn)運(yùn)鋅和鎘的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律;覃勇榮等（2012）以桑特優(yōu)二號(hào)為材料，采用水培法研究了不同濃度鎘脅迫下是否添加EDTA處理桑苗葉片丙二醛含量的動(dòng)態(tài)變化。【本研究切入點(diǎn)】目前，國(guó)內(nèi)現(xiàn)有的桑樹(shù)與重金屬脅迫相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道大多采用土壤栽培方式，研究?jī)?nèi)容基本集中于桑樹(shù)在不同重金屬含量土壤中的生長(zhǎng)發(fā)育及桑樹(shù)各部位對(duì)重金屬的富集效果方面（黃仁志等，2018），而針對(duì)桑樹(shù)品種對(duì)鎘耐受性的水培篩選研究尚無(wú)相關(guān)報(bào)道?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】以廣西主栽桑樹(shù)品種桂桑優(yōu)12和桂桑優(yōu)62為材料，通過(guò)不同鎘濃度的水培試驗(yàn)，測(cè)定桑苗的成活率和死亡率，運(yùn)用線性回歸法建立鎘脅迫濃度與桑樹(shù)死亡率的回歸直線方程，計(jì)算不同品種對(duì)水培液中鎘的耐受性，建立一種操作簡(jiǎn)單、成本低、篩選周期短、環(huán)境污染低的桑樹(shù)對(duì)鎘耐受性的水培快速篩選方法;同時(shí)調(diào)查桑苗在鎘脅迫和解除鎘脅迫后的單株莖葉鮮重，分析鎘對(duì)桑樹(shù)生長(zhǎng)的影響，為高耐鎘和鎘低積累桑樹(shù)品種的篩選提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 試驗(yàn)材料

供試桑樹(shù)品種為桂桑優(yōu)12和桂桑優(yōu)62，試驗(yàn)苗木均為廣西蠶業(yè)科學(xué)研究院自育桑苗。供試鎘源為水合氯化鎘（CdCl2·2?H2O），分析純，含量≥99.0%，成都市科龍化工試劑廠生產(chǎn)。水培設(shè)施為可移動(dòng)植物L(fēng)ED光照循環(huán)水培裝置，為廣西蠶業(yè)科學(xué)研究院自主發(fā)明專利（專利號(hào)：ZL201420403636.6）。無(wú)土栽培生長(zhǎng)期使用肥料為專用型水溶性肥料（20-10-20型），武漢瑞萊肥料有限公司生產(chǎn)。

1. 2 試驗(yàn)方法

1. 2. 1 苗木準(zhǔn)備 2014年6月，取桂桑優(yōu)62種子在廣西蠶業(yè)科學(xué)研究院苗圃旱地播種育苗;2015年7月，帶土挖取苗莖6 mm、無(wú)病蟲(chóng)的一年生實(shí)生苗，清水輕輕洗掉根部土壤，修剪枝葉后保留主莖25～30 cm，移植于可移動(dòng)植物L(fēng)ED光照循環(huán)水培裝置中，作為桑苗對(duì)鎘的耐受性試驗(yàn)I的材料。

2016年9月，分別取桂桑優(yōu)12和桂桑優(yōu)62種子，在廣西蠶業(yè)科學(xué)研究院大棚苗床中直接播種育苗，基質(zhì)為泥炭土和珍珠巖為1∶1的混合基質(zhì)，待幼苗長(zhǎng)至高10～15 cm，經(jīng)控水煉苗10 d后，輕輕起苗并抖掉大部分基質(zhì)，用清水洗去少量粘根基質(zhì)，根系盡量保持完整，移植于水培裝置中，作為桑苗對(duì)鎘的耐受性試驗(yàn)II的材料。

2017年3月，采用2016年相同方法再次播種育苗，作為鎘對(duì)水培桑苗生長(zhǎng)影響的試驗(yàn)材料。

1. 2. 2 桑樹(shù)室內(nèi)水培條件 桑樹(shù)室內(nèi)水培的溫度條件為自然溫度25～31 ℃，采用無(wú)土栽培專用型水溶性肥料對(duì)水2000倍作為基礎(chǔ)水培液，桑苗生長(zhǎng)所需光照以LED植物燈（紅、藍(lán)光配比8∶1）為光源，光照周期設(shè)為光照14 h（6：00—20：00）、黑暗10 h（20：01—次日05：59）。水培槽內(nèi)用水泵運(yùn)行供氧，每小時(shí)運(yùn)行15 min。

水溶液中添加的鎘來(lái)自水合氯化鎘，先將適量水合氯化鎘溶解于少量水中，再將氯化鎘水溶液加入準(zhǔn)備好的水培液中，混勻保證水培液中鎘的分布均勻一致。

1. 2. 3 水培桑苗對(duì)鎘的耐受性試驗(yàn)I 2015年7—9月，將桂桑優(yōu)62一年生苗統(tǒng)一栽植至水培槽內(nèi)，根部浸沒(méi)于水培液中，修剪去除枝葉，主莖用海綿固定于定植板定植孔中，并于板面上2 cm處剪去莖梢，莖干高度8～10 cm，水培液共設(shè)6個(gè)鎘脅迫處理，鎘濃度分別為0.1、1.0、10.0、25.0、50.0和100.0 mg/kg，以未添加鎘的水培液為對(duì)照（CK），每處理3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)28株，測(cè)試桑樹(shù)葉片和根的萌發(fā)、生長(zhǎng)對(duì)鎘的最大耐受性。

1. 2. 4 水培桑苗對(duì)鎘的耐受性試驗(yàn)II 2016年10—11月，以桂桑優(yōu)12和桂桑優(yōu)62當(dāng)年生苗為材料，以水培液鎘濃度1.0 mg/kg為中心設(shè)5個(gè)鎘脅迫處理，鎘濃度分別為0.1、0.5、1.0、1.5和2.0 mg/kg，以未添加鎘的水培液為CK，每處理3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)28株，測(cè)試桑樹(shù)葉片和根系正常生長(zhǎng)過(guò)程中對(duì)鎘脅迫的最大耐受性。

1. 2. 5 鎘脅迫對(duì)水培桑苗生長(zhǎng)的影響測(cè)試 2017年5—7月，為保證桑苗較高的成活率和良好的生長(zhǎng)，以0.50 mg/kg為鎘脅迫濃度上限，設(shè)4個(gè)鎘脅迫處理，鎘濃度分別為0.05、0.10、0.25和0.50 mg/kg，以未添加鎘的水培液為CK，每處理3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)21株。添鎘水培30 d后，桑苗在定植板以上2 cm處剪去枝葉，排去含鎘水培液，換成無(wú)鎘的基礎(chǔ)水培液，解除鎘脅迫繼續(xù)水培。無(wú)鎘水培30 d后，觀察各處理桑苗的生長(zhǎng)情況。

1. 3 測(cè)定項(xiàng)目及方法

水培桑苗對(duì)鎘的耐受性試驗(yàn)：水培液中添加鎘后，按正常水培條件水培生長(zhǎng)30 d，每10 d觀察并統(tǒng)計(jì)桑樹(shù)的成活率和死亡率，有新芽萌發(fā)視為成活，不發(fā)芽不發(fā)根為桑樹(shù)死亡判斷標(biāo)準(zhǔn)。

鎘脅迫對(duì)水培桑苗生長(zhǎng)的影響試驗(yàn)：水培液添加鎘后，按正常水培條件水培生長(zhǎng)30 d，每3～5 d觀察并記錄桑苗根、莖、葉的生長(zhǎng)發(fā)育情況，30 d后將桑樹(shù)定植板上部保留2 cm左右統(tǒng)一剪下調(diào)查統(tǒng)計(jì)各處理桑樹(shù)的單株葉、莖鮮重。解除鎘脅迫后，正常水培條件下生長(zhǎng)30 d后，測(cè)量記錄桑苗的株高、葉長(zhǎng)、葉寬、葉片大小與數(shù)量、各部位鮮重;每處理選擇生長(zhǎng)最均勻的3株桑苗，每株桑苗選擇中部葉面積最大的功能葉片（其中CK和0.05 mg/kg處理為第4葉位，0.10與0.25 mg/kg處理為第3葉位，0.50 mg/kg處理為第2葉位），每葉取葉柄兩側(cè)的中央?yún)^(qū)域，用葉綠素?zé)晒鈨x（型號(hào)Mini-PAM-Ⅱ，德國(guó)WALZ 公司）測(cè)定桑苗的葉綠素?zé)晒庵怠?/p>

1. 4 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用 Excel 2007進(jìn)行初步統(tǒng)計(jì)，采用SPSS 16.0進(jìn)行處理間差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2. 1 水培桑苗對(duì)鎘的最大耐受性試驗(yàn)結(jié)果

2. 1. 1 水培桑苗對(duì)鎘的耐受性試驗(yàn)I結(jié)果 由表1可知，除50.0 mg/kg處理培養(yǎng)20 d外，桂桑優(yōu)62一年生桑苗添鎘培養(yǎng)10～20 d的成活率與CK均無(wú)顯著差異（P>0.05，下同）;培養(yǎng)30 d后鎘脅迫處理的成活率均極顯著低于CK（P<0.01，下同），而死亡率極顯著高于CK。水培前期，桑苗新根未長(zhǎng)出或剛長(zhǎng)出，植株主要依靠自身營(yíng)養(yǎng)萌生新芽，鎘未到達(dá)莖葉產(chǎn)生毒害，因此各處理成活率相差不明顯;水培30 d后，CK和低濃度（0.1～1.0 mg/kg）鎘脅迫處理的桑苗已有新根長(zhǎng)出，高濃度（≥10.0 mg/kg）鎘脅迫處理的桑苗新根難萌發(fā)、舊根出現(xiàn)腐爛，鎘對(duì)桑苗根、葉萌發(fā)及生長(zhǎng)的毒害作用已體現(xiàn)，此時(shí)鎘脅迫處理桑苗的成活率和死亡率與對(duì)照的差異均達(dá)極顯著水平。

試驗(yàn)中觀察發(fā)現(xiàn)，0.1 mg/kg鎘脅迫處理已對(duì)桑苗根、葉的萌發(fā)及生長(zhǎng)產(chǎn)生一定程度的毒害，其中根系直接接觸水培液受到的毒害更直接、明顯，但在此濃度下植株還能基本維持生長(zhǎng);鎘濃度在1.0 mg/kg以上時(shí)，鎘對(duì)桑苗根、葉的萌發(fā)及生長(zhǎng)產(chǎn)生較大毒害作用，葉片典型癥狀表現(xiàn)為變小、數(shù)量減少，葉脈黃化直至蔓延整張葉片，最后黃化枯萎，CK桑苗的正常黃化葉片則表現(xiàn)為脈間失綠、全葉均勻黃化但葉脈仍保持綠色（圖1），根系典型癥狀表現(xiàn)為新根數(shù)量變少、長(zhǎng)度變短、根尖稍膨大、難發(fā)新根（圖2），最明顯表現(xiàn)為水培液面下難發(fā)新根，但液面與定植板中間孔隙層仍可見(jiàn)部分新根長(zhǎng)出（圖2-B）。此外，1.0～100.0 mg/kg鎘濃度處理桑苗在水培30 d后的成活率雖保持在52.38%～88.10%，但隨著水培時(shí)間的推移，這些鎘中毒桑苗即使前期萌發(fā)新葉，由于缺乏新根導(dǎo)致無(wú)法吸收水培液的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，不能維持植株正常生長(zhǎng)需要，待植株在苗圃生長(zhǎng)積累的主莖營(yíng)養(yǎng)耗盡后葉片即開(kāi)始枯萎、掉落，直至植株死亡。鎘濃度越高，植株受到的不良影響越嚴(yán)重，成活株后期死亡越快且越多，鎘的毒害性越明顯。綜上所述，要保證桑樹(shù)葉片和根系較好的萌發(fā)、生長(zhǎng)，水培溶液中鎘的最大脅迫濃度應(yīng)小于1.0 mg/kg。

2. 1. 2 水培桑苗對(duì)鎘的耐受性試驗(yàn)II結(jié)果 由試驗(yàn)I結(jié)果可知，鎘濃度大于1.0 mg/kg時(shí)即對(duì)水培桑苗葉片、根系的萌發(fā)和生長(zhǎng)產(chǎn)生不利影響，因此試驗(yàn)II改用桂桑優(yōu)12和桂桑優(yōu)62當(dāng)年生實(shí)生苗為材料，以1.0 mg/kg為中心，將鎘濃度設(shè)為0～2.0 mg/kg。由表2可知，水培30 d后，鎘濃度≤0.5 mg/kg時(shí)桂桑優(yōu)12和桂桑優(yōu)62的幼苗仍能基本保持枝葉正常生長(zhǎng)，死亡率為0;但當(dāng)鎘濃度為0.1 mg/kg時(shí)，桂桑優(yōu)62根系已難發(fā)新根，桂桑優(yōu)12新根數(shù)量變少、變短，鎘已對(duì)桑苗產(chǎn)生毒害;鎘濃度≥1.0 mg/kg時(shí)，桑苗開(kāi)始出現(xiàn)葉片黃化枯萎、無(wú)新根、生長(zhǎng)停止甚至死亡的現(xiàn)象，死亡率上升至7.14%～91.67%，鎘脅迫濃度越高，桑苗死亡率越高。

根據(jù)試驗(yàn)II結(jié)果，借鑒動(dòng)物半致死濃度的線性回歸計(jì)算方法（李翠萍等，2012），初步建立鎘脅迫濃度（y）與桑苗水培死亡率（x）的回歸直線方程，得到桂桑優(yōu)62的回歸方程為y=0.0173x+0.3395，回歸系數(shù)R2=0.8505;桂桑優(yōu)12的回歸方程為y=0.0216x+0.3785，回歸系數(shù)為R2=0.8342。依此計(jì)算桑苗死亡率分別為5%、50%、95%和100%時(shí)的鎘脅迫濃度，桂桑優(yōu)62為0.43、1.20、1.98和2.07 mg/kg，桂桑優(yōu)12為0.49、1.46、2.43和2.54 mg/kg。因此，水培液中鎘對(duì)桂桑優(yōu)62和桂桑優(yōu)12的半致死濃度分別為1.20和1.46 mg/kg，致死濃度分別為2.07和2.54 mg/kg（此結(jié)果依據(jù)水培30 d的統(tǒng)計(jì)結(jié)果計(jì)算獲得）。

由于缺乏新根導(dǎo)致桑苗無(wú)法吸收水培液的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，不能維持桑樹(shù)正常生長(zhǎng)需要，隨水培時(shí)間的延長(zhǎng)，鎘脅迫濃度越高，桑苗葉枯苗死的情況愈加嚴(yán)重，水培至50 d左右時(shí)2.0 mg/kg處理的桑苗基本全部死亡。根據(jù)試驗(yàn)II結(jié)果并結(jié)合桑樹(shù)根系及植株后期生長(zhǎng)狀況，要保證桂桑優(yōu)62、桂桑優(yōu)12較高的水培成活率及良好的生長(zhǎng)，須嚴(yán)格控制水培液中鎘的濃度。若水培成活率要達(dá)95%，即桑苗死亡率小于5%時(shí)，水培液中鎘的濃度應(yīng)不高于0.5 mg/kg。

2. 2 鎘脅迫下桑苗的生長(zhǎng)情況

將桂桑優(yōu)12、桂桑優(yōu)62當(dāng)年生實(shí)生苗在0～0.50 mg/kg鎘濃度處理下水培30 d后，測(cè)定其單株葉、莖鮮重。由圖3可看出，桂桑優(yōu)12在0.05～0.10 mg/kg鎘濃度處理下，單株葉、莖鮮重與CK差異不顯著，鎘脅迫對(duì)地上部枝葉生長(zhǎng)的影響不明顯，但觀察發(fā)現(xiàn)其根系生長(zhǎng)已受到一定程度的抑制，雖依然能萌發(fā)新根，但根數(shù)有所減少;在0.25～0.50 mg/kg鎘濃度處理下，桑苗枝葉生長(zhǎng)開(kāi)始受到較明顯的抑制，植株變矮小，根數(shù)明顯減少，根系變褐、難發(fā)新根，基部葉片黃化、掉落，頂端嫩葉較黃甚至發(fā)生輕微皺縮，此時(shí)單株葉、莖鮮重均顯著低于CK及0.05～0.10 mg/kg處理（P<0.05，下同）。與CK相比，其單株葉、莖鮮重除在0.05 mg/kg處理下略有增加外，0.10～0.50 mg/kg處理分別減少18.9%～54.6%和19.6%～49.7%。

由圖3還可看出，桂桑優(yōu)62在鎘脅迫處理下的單株葉、莖鮮重與較CK相比有不同程度的減少，其中單株葉鮮重減少均達(dá)顯著水平，但單株莖鮮重在各處理間差異不顯著。試驗(yàn)中觀察發(fā)現(xiàn)，在0.05 mg/kg處理下，桑苗根系生長(zhǎng)受到抑制，根數(shù)有所減少，但能萌發(fā)新根;在0.10～0.50 mg/kg處理下，桑苗枝葉生長(zhǎng)受到明顯抑制，植株高度下降，根數(shù)顯著減少，主根變褐、須根變短、極難萌發(fā)新根。

對(duì)比分析發(fā)現(xiàn)，0.05 mg/kg微量鎘脅迫處理可略促進(jìn)桂桑優(yōu)12桑苗的生長(zhǎng)，葉片、嫩莖鮮重大致相當(dāng)或有少量增加，鎘未對(duì)其桑苗產(chǎn)生毒害;但桂桑優(yōu)62桑苗在同一水培液中，根系、枝葉生長(zhǎng)均受抑制，單株葉片、嫩莖鮮重均降低，鎘對(duì)其桑苗已產(chǎn)生毒害作用。水培液中鎘濃度大于0.10 mg/kg，兩個(gè)桑品種植株的葉片、嫩莖鮮重均低于對(duì)照。

2. 3 解除脅迫后桑苗的生長(zhǎng)情況

桑苗經(jīng)鎘脅迫培養(yǎng)后，植株生長(zhǎng)發(fā)育均受到不同程度的影響，為研究鎘對(duì)桑苗生長(zhǎng)的影響是否具有可恢復(fù)性或不可逆性，對(duì)桑苗進(jìn)行剪伐，解除鎘脅迫后繼續(xù)培養(yǎng)30 d，觀察植株的生長(zhǎng)狀況。

由表3可知，解除脅迫培養(yǎng)30 d后，0.05 mg/kg處理桑苗的生長(zhǎng)勢(shì)最好，株高、葉片大小和數(shù)量、葉莖鮮重等數(shù)值均最高，其次為CK，0.10、0.25和0.50 mg/kg處理桑苗的生長(zhǎng)勢(shì)均較CK差，且隨鎘脅迫濃度的增加，各指標(biāo)數(shù)值愈低。

解除脅迫后，0.05 mg/kg處理的兩個(gè)桑品種的株高和單株葉片鮮重均極顯著高于CK，葉長(zhǎng)、葉寬、葉長(zhǎng)寬乘積和單株莖鮮重均顯著或極顯著高于CK，葉長(zhǎng)寬比、單株葉片數(shù)和根系鮮重與CK差異不顯著。這是因?yàn)?.05 mg/kg濃度較低，在脅迫培養(yǎng)時(shí)已對(duì)葉、莖生長(zhǎng)表現(xiàn)出促進(jìn)作用，解除脅迫后，桑苗體內(nèi)微量的鎘元素對(duì)其生長(zhǎng)仍可能繼續(xù)產(chǎn)生一定的促進(jìn)作用，因此該處理的桑苗在解除脅迫后生長(zhǎng)狀況最佳。0.10～0.50 mg/kg處理解除脅迫后，其桑苗的各項(xiàng)生長(zhǎng)指標(biāo)均較CK降低，且大部分指標(biāo)與CK的差異達(dá)顯著或極顯著水平。桑苗生長(zhǎng)的外界鎘脅迫環(huán)境雖已消除，但過(guò)量的鎘元素對(duì)桑苗生長(zhǎng)造成的毒害作用太嚴(yán)重，難以恢復(fù)。

2. 4 解除脅迫后桑葉的葉綠素?zé)晒馓匦宰兓?/p>

植物葉片葉綠素?zé)晒鈪?shù)Fv/Fm是指光系統(tǒng)Ⅱ的原初光能轉(zhuǎn)換效率，即光系統(tǒng)II反應(yīng)中心捕獲激發(fā)光能的效率，反映植物的潛在最大光能轉(zhuǎn)化效率（汪洪等，2008）。Fv/Fm是研究光抑制或各種環(huán)境脅迫對(duì)光合作用影響的重要指標(biāo)，在健康生理狀態(tài)下絕大多數(shù)高等植物的Fv/Fm在0.80～0.85，當(dāng)Fv/Fm下降時(shí)，代表植物受到脅迫。葉綠素?zé)晒鈪?shù)Y（II）值則是指光系統(tǒng)Ⅱ的實(shí)際光合效率，反映光合機(jī)構(gòu)當(dāng)前的實(shí)際光能轉(zhuǎn)換效率。為更深入研究鎘對(duì)桑樹(shù)生長(zhǎng)的影響，在桑苗剪伐、解除脅迫培養(yǎng)30 d后，測(cè)定植株中部葉片的葉綠素?zé)晒鈪?shù)Fv/Fm和Y（II）值，分析鎘對(duì)桑葉葉綠素?zé)晒馓匦宰兓挠绊憽?/p>

由圖4可看出，桂桑優(yōu)12和桂桑優(yōu)62 CK的Fv/Fm分別為0.791和0.801，基本接近或符合正常范圍;解除脅迫后，兩個(gè)桑品種在0.05 mg/kg處理下的植株長(zhǎng)勢(shì)與CK相當(dāng)甚至略好，其Fv/Fm均較CK有所升高，達(dá)0.813和0.807，但差異未達(dá)顯著水平;兩個(gè)桑品種在0.10、0.25和0.50 mg/kg處理下的Fv/Fm均低于CK，除桂桑優(yōu)12 0.10 mg/kg處理的Fv/Fm維持在中等水平（0.609）外，其他處理的Fv/Fm基本降至0.300～0.350的較低水平，最大光合效率顯著下降。

由圖4還可看出，0.05 mg/kg處理的Fv/Fm雖略有升高，但其Y（II）值稍低于CK，說(shuō)明其桑樹(shù)生長(zhǎng)量雖有所增加，但葉片光系統(tǒng)已受到一定程度的鎘毒害，即使解除鎘脅迫因素，該毒害仍不能完全消除，鎘對(duì)桑樹(shù)的毒害具有不可逆性和隱蔽性。鎘濃度大于0.25 mg/kg時(shí)，兩個(gè)桑品種葉片的Y（II）值均顯著低于CK，說(shuō)明鎘濃度過(guò)高使光系統(tǒng)受到嚴(yán)重毒害，實(shí)際光合效率顯著下降。

綜合分析可知，兩個(gè)桑品種CK的Fv/Fm和 Y（II）值基本相同，品種間差異不明顯;解除脅迫后，相同鎘濃度處理的桂桑優(yōu)12桑葉Fv/Fm和Y（II）值整體上略高于桂桑優(yōu)62，說(shuō)明其最大光能轉(zhuǎn)化效率和實(shí)際光合效率稍高于桂桑優(yōu)62，表明桂桑優(yōu)62在鎘脅迫下其光系統(tǒng)受到的毒害作用較大，可能與不同品種對(duì)鎘的耐受性存在差異有關(guān)。

3 討論

3. 1 桑苗對(duì)水培液中鎘的耐受性

本研究利用水培法的高效、快速、簡(jiǎn)單優(yōu)勢(shì)，通過(guò)向水培液中添加不同濃度鎘進(jìn)行脅迫處理，借鑒動(dòng)物的半致死濃度計(jì)算方法——線性回歸法（李翠萍等，2012），建立鎘脅迫濃度與桑樹(shù)水培苗死亡率的回歸直線方程，依據(jù)方程計(jì)算水培半致死濃度（桑樹(shù)死亡率為50%）和致死濃度（桑樹(shù)死亡率為100%），據(jù)此對(duì)供試品種進(jìn)行比較篩選。結(jié)果表明，水培30 d后，水培液中鎘對(duì)桂桑優(yōu)62和桂桑優(yōu)12的半致死濃度分別為1.20和1.46 mg/kg，致死濃度分別為2.07和2.54 mg/kg，鎘濃度低于1.0 mg/kg時(shí)桑樹(shù)能正常生長(zhǎng)，高于1.0 mg/kg時(shí)桑樹(shù)生長(zhǎng)受到明顯抑制。劉旭輝等（2012）、覃勇榮等（2012）研究認(rèn)為，水培液中鎘濃度小于50 mg/kg時(shí)桑樹(shù)可正常生長(zhǎng)，大于50 mg/kg時(shí)桑樹(shù)生長(zhǎng)受明顯抑制。本研究結(jié)果與之差異明顯，其原因可能與試驗(yàn)桑樹(shù)品種、桑苗苗齡、營(yíng)養(yǎng)狀況、鎘源、水培裝置、培養(yǎng)液種類及培養(yǎng)時(shí)間等多方面因素有關(guān)。本研究采用桂桑優(yōu)12和桂桑優(yōu)62為試驗(yàn)材料，直接播種苗床育苗獲得植株，鎘源為氯化鎘，采用室內(nèi)可移動(dòng)植物L(fēng)ED光照循環(huán)水培裝置，以無(wú)土栽培專用型水溶性肥料對(duì)水配制水培液，在添鎘水培30 d后進(jìn)行調(diào)查分析，且鎘脅迫期間未添加其他物質(zhì)，植株持續(xù)不斷地受到鎘的脅迫作用。而劉旭輝等（2012）、覃勇榮等（2012）研究中的試驗(yàn)材料與本研究不同，且其鎘源為硝酸鎘，水培液為霍格蘭氏營(yíng)養(yǎng)液，于水培3～45 d或8～23 d后采樣，同時(shí)添加EDTA或鋅。以上多方面的差異造成了試驗(yàn)結(jié)果的不同。

此外，與桐花樹(shù)（楊盛昌和吳琦，2003）、菜豆（周青等，2003）、玉米（汪洪等，2008）和水稻（何俊瑜等，2010）等有關(guān)的水培研究表明，水培液中鎘濃度分別為0.0005、3.36、2.24和0.112 mg/kg時(shí)，各種作物幼苗的生長(zhǎng)已受到抑制，且隨鎘處理時(shí)間的延長(zhǎng)，植株受到的傷害加重，由此可知水培液中鎘濃度很低即可對(duì)作物生長(zhǎng)產(chǎn)生較強(qiáng)的毒害作用，與本研究結(jié)果較接近。但不同品種、不同苗齡、不同試驗(yàn)時(shí)間等具體條件下桑樹(shù)對(duì)水培液中鎘的耐受性仍需深入研究。

3. 2 桑樹(shù)品種對(duì)鎘耐受性水培快速篩選的探索

借鑒作為衡量某種因素（藥物、毒物、細(xì)菌、理化刺激等）對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物毒力或效力的指標(biāo)，本研究首次初步建立鎘脅迫濃度與桑苗水培死亡率的回歸直線方程，據(jù)方程計(jì)算桑樹(shù)對(duì)水培液中鎘的耐受性，水培30 d后，水培液中鎘對(duì)桂桑優(yōu)62和桂桑優(yōu)12的半致死濃度分別為1.20和1.46 mg/kg，致死濃度分別為2.07和2.54 mg/kg。桂桑優(yōu)12對(duì)鎘的水培耐受性高于桂桑優(yōu)62，與于輝等（2008）研究得出的不同植物品種及同一植物不同器官對(duì)鎘的吸收和積累能力存在差異的結(jié)論一致。此外，土壤栽培試驗(yàn)結(jié)果表明，桂桑優(yōu)12對(duì)鎘的耐受性表現(xiàn)優(yōu)于桂桑優(yōu)62，與本研究建立的桑樹(shù)品種對(duì)鎘耐受性的水培快速篩選方法結(jié)果一致。由于試驗(yàn)材料和時(shí)間限制，試驗(yàn)中僅研究桂桑優(yōu)62和桂桑優(yōu)12兩個(gè)桑品種，今后可應(yīng)用此水培快速篩選方法，擴(kuò)大現(xiàn)行桑樹(shù)栽培品種的材料，開(kāi)展更多桑樹(shù)品種資源的鎘耐受性品種篩選研究，以豐富、完善試驗(yàn)結(jié)果，使其具有更高的社會(huì)應(yīng)用價(jià)值。

應(yīng)用探索建立的水培快速篩選方法，桑苗生長(zhǎng)快，移栽修剪后水培2～3 d即恢復(fù)生長(zhǎng)，萌出新根，萌發(fā)新芽;水培10～15 d后，桑苗生長(zhǎng)至4～5片葉，即可在水培液中添加鎘，添鎘后10～20 d桑苗中毒癥狀開(kāi)始出現(xiàn)，30 d后品種間差異較明顯，達(dá)到理想試驗(yàn)效果;同時(shí)，桑樹(shù)生長(zhǎng)發(fā)育不受外界自然溫度、濕度、光照的影響，桑苗移植后45 d左右即可完成一次篩選試驗(yàn)，極大縮短了桑樹(shù)品種對(duì)鎘耐受性的篩選周期，省時(shí)省工、節(jié)約成本，且能達(dá)到試驗(yàn)所需的均一性和可重復(fù)性，實(shí)現(xiàn)了桑樹(shù)品種對(duì)鎘耐受性的水培快速、高效篩選，為桑樹(shù)強(qiáng)耐鎘品種和低積累品種的選育和生態(tài)應(yīng)用開(kāi)發(fā)打下了基礎(chǔ)，具有較高的科研和實(shí)用價(jià)值。

3. 3 鎘對(duì)桑苗生長(zhǎng)發(fā)育的影響及毒害作用

水培液中鎘濃度為0.05 mg/kg時(shí)，桑苗的生長(zhǎng)狀況接近或略優(yōu)于CK，說(shuō)明微量的鎘有利于植株生長(zhǎng)，超過(guò)此濃度后鎘對(duì)桑苗生長(zhǎng)的毒害作用明顯，桑苗出現(xiàn)葉黃枯萎、生長(zhǎng)停止甚至死亡現(xiàn)象。此規(guī)律與陳朝明等（1999）、萬(wàn)飛（2004）采用土壤栽培法對(duì)桑樹(shù)鎘耐受性的研究結(jié)果相似，但與二者對(duì)應(yīng)的鎘濃度不一致，水培液中0.05 mg/kg的鎘濃度分別對(duì)應(yīng)土壤中的鎘濃度為22.3 mg/kg（陳朝明等，1999）和8.48 mg/kg（萬(wàn)飛，2004），1.0 mg/kg的鎘濃度分別對(duì)應(yīng)土壤中的鎘濃度為145 mg/kg（陳朝明等，1999）和140 mg/kg（萬(wàn)飛，2004）。其原因可能與供試桑品種、栽培基質(zhì)（水、土壤）的不同有關(guān)，采用水培法可減少其他因素影響，目標(biāo)影響因子易控，而土壤中影響因素眾多，土壤微生物、pH、土壤類型等均會(huì)對(duì)桑樹(shù)的耐鎘性產(chǎn)生一定影響;由于土壤具有緩沖能力，水培液中桑樹(shù)對(duì)鎘更敏感，濃度極低即可表現(xiàn)出相應(yīng)的中毒癥狀，因此低于土壤中對(duì)應(yīng)的鎘濃度，但應(yīng)用水培法和土壤盆栽法在桑樹(shù)對(duì)鎘耐受性的品種篩選試驗(yàn)中的區(qū)別和聯(lián)系還需進(jìn)一步探索。

鎘對(duì)桑苗的毒害作用表現(xiàn)為使桑苗根系生長(zhǎng)受到抑制、枝葉生長(zhǎng)變緩慢，其中根系的表現(xiàn)最明顯，同一鎘濃度下比枝葉等地上部明顯。桂桑優(yōu)62在0.05 mg/kg處理下，其植株莖葉生長(zhǎng)受到的影響不明顯，但根系生長(zhǎng)已受到一定程度的抑制，能萌發(fā)新根但根數(shù)有所減少、長(zhǎng)度變小。分析認(rèn)為，桑苗根系浸泡于水培液中，最先接觸到鎘，然后經(jīng)輸導(dǎo)組織傳送至地上部，根系受到鎘的作用較快、較強(qiáng)，與何俊瑜等（2010）的研究結(jié)果一致。

桑樹(shù)在鎘脅迫下生長(zhǎng)發(fā)育受到不同程度的影響，解除脅迫后，植株的株高、葉片數(shù)、葉鮮重、嫩莖鮮重及葉長(zhǎng)、葉寬、葉長(zhǎng)寬乘積等指標(biāo)與CK比較，大部分存在顯著差異;解除脅迫后桑樹(shù)葉片最大光能轉(zhuǎn)化效率Fv/Fm、實(shí)際光能轉(zhuǎn)換效率Y（II）整體上低于CK，桑葉光合作用受到破壞，與陳朝明等（1999）、谷巍等（2002）、杜偉和姚麗萍（2012）的研究結(jié)果一致。但由于試驗(yàn)條件有限，關(guān)于鎘對(duì)桑樹(shù)生長(zhǎng)的毒害機(jī)理及解除脅迫后桑樹(shù)的內(nèi)部反應(yīng)機(jī)制未得到拓展研究，今后應(yīng)加強(qiáng)此方面的相關(guān)研究。

4 結(jié)論

桑樹(shù)受到鎘的毒害作用外在表現(xiàn)為植株生長(zhǎng)受抑制，其中根系受到的影響最明顯;內(nèi)在表現(xiàn)為葉片光合作用被抑制，且該影響較難恢復(fù)。為保證桑樹(shù)較高的成活率和良好的生長(zhǎng)發(fā)育，利用水培法進(jìn)行桂桑優(yōu)12和桂桑優(yōu)62栽培時(shí)水培液中的的鎘濃度應(yīng)不高于1.0 mg/kg，以低于0.5 mg/kg為宜。桑樹(shù)不同品種對(duì)鎘的耐受性不同，桂桑優(yōu)12對(duì)鎘的水培耐受性高于桂桑優(yōu)62。

參考文獻(xiàn)：

曹勝，周衛(wèi)軍，周雨舟，羅思穎. 2017. 硅鈣鎂土壤調(diào)理劑對(duì)酸性鎘污染土壤及稻米的降鎘效果[J]. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，46（12）：54-58. [Cao S，Zhou W J，Zhou Y Z，Luo S Y. 2017. The cadmium reduction effect of silicon calcium magnesium soil conditioner on acid cadmium polluted soil and rice[J]. Journal of Henan Agricultural Sciences，46（12）：54-58.]

陳朝明，龔惠群，王凱榮，唐菁，萬(wàn)繼武. 1999. 桑—蠶系統(tǒng)中鎘的吸收、累積與遷移[J]. 生態(tài)學(xué)報(bào)，19（5）：664-669. [Chen C M，Gong H Q，Wang K R，Tang J，Wan J W. 1999. The absorption，accumulation and migration of cadmium in the system of soil mulberry and silkworm[J]. Acta Ecologica Sinica，19（5）：664-669.]

陳寧美，歐陽(yáng)舒毓，徐維烈，唐帥，韋善君，馮金朝，徐小靜. 2018. 鎘脅迫對(duì)鹽芥根木栓質(zhì)代謝的影響[J]. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，47（10）：105-110. [Chen N M，Ouyang S Y，Xu W L，Tang S，Wei S J，F(xiàn)eng J C，Xu X J. 2018. Effect of cadmium stress on metabolism of root suberin in Thellungie-lla salsuginea[J]. Journal of Henan Agricultural Sciences，47（10）：105-110.]

代成成. 2010. 鎘低積累小白菜品種的篩選[D]. 武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué). [Dai C C. 2010. Screening of Brassica with low cadmium accumulation[D]. Wuhan：Huazhong Agricultural University.]

鄧琴，吳迪，秦樊鑫，楊珍，賈亞琪，程志飛，劉品禎. 2017. 巖溶鉛鋅礦區(qū)土壤重金屬污染特征[J]. 中國(guó)巖溶，36（2）：248-254. [Deng Q，Wu D，Qin F X，Yang Z，Jia Y Q，Cheng Z F，Liu P Z. 2017. Pollution characteristics of heavy metals in soil of lead-zinc mining in karst areas[J]. Carsologica Sinica，36（2）：248-254.]

杜偉，姚麗萍. 2012. 重金屬污染與蠶桑生產(chǎn)關(guān)系研究進(jìn)展[J]. 北方蠶業(yè)，33（3）：1-4. [Du W，Yao L P. 2012. Research progress on relationship between heavy metal pollution and sericultural production[J]. North Sericulture，33（3）：1-4.]

谷巍，施國(guó)新，張超英，王文，徐勤松，徐楠，曾曉敏，張小蘭，周紅衛(wèi). 2002. Hg2+、Cd2+和Cu2+對(duì)菹草光合系統(tǒng)及保護(hù)酶系統(tǒng)的毒害作用[J]. 植物生理與分子生物學(xué)學(xué)報(bào)，28（1）：69-74. [Gu W，Shi G X，Zhang C Y，Wang W，Xu Q S，Xu N，Zeng X M，Zhang X L，Zhou H W. 2002. Toxic effects of Hg2+，Cd2+and Cu2+ on photosynthetic systems and protective enzyme systems of Potamogeton crispus[J]. Journal of Plant Physiology and Molecular Biology，28（1）：69-74.]

郭利雙，陳浩東，賀云新，何叔軍，李飛，張志剛，李毅. 2015. 鎘高積累棉花品種水培篩選結(jié)果初報(bào)[J]. 中國(guó)棉花，42（10）：14-16. [Guo L S，Chen H D，He Y X，He S J，Li F，Zhang Z G，Li Y. 2015. Preliminary results on cotton cultivars screening for high accumulation of cadmium[J]. China Cotton，42（10）：14-16.]

國(guó)土資源部. 2014. 環(huán)境保護(hù)部和國(guó)土資源部發(fā)布全國(guó)土壤污染狀況調(diào)查公報(bào)[EB/OL]//中華人民共和國(guó)自然資源部網(wǎng). [2014-04-17]. http：//www.mlr.gov.cn/xwdt/jrxw/201404/t20140417_1312998.htm. [Ministry of Land and Resources. 2014. Ministry of Environmental Protection and Ministry of Land and Resources published a communiqué of national soil pollution survey[EB/OL]//Ministry of National Resources of the People’s Republic of China Network. [2014-04-17]. http：//www.mlr.gov.cn/xwdt/jrxw/201404/t20140417_1312998.htm.]

何俊瑜，任艷芳，嚴(yán)玉萍，朱誠(chéng)，蔣德安. 2010. 鎘脅迫對(duì)水稻幼苗生長(zhǎng)和根尖細(xì)胞分裂的影響[J]. 土壤學(xué)報(bào)，47（1）：138-144. [He J Y，Ren Y F，Yan Y P，Zhu C，Jiang D A. 2010. Impacts of cadmium stress on the growth of rice seedlings and division of their root tip cells[J]. Acta Pedologica Sinica，47（1）：138-144.]

黃仁志，李一平，蔣勇兵，賈超華，蔣詩(shī)夢(mèng)，顏新培，秦志雄，羅軍. 2018. 鎘鉛復(fù)合脅迫對(duì)桑苗生長(zhǎng)與桑葉重金屬含量的影響[J]. 蠶業(yè)科學(xué)，44（5）：665-671. [Huang R Z，Li Y P，Jiang Y B，Jia C H，Jiang S M，Yan X P，Qin Z X，Luo J. 2018. Effect of cadmium and lead combined stress on growth of mulberry saplings and contents of heavy metal in mulberry leaf[J]. Science of Sericulture，44（5）：665-671.]

李翠萍，吳民耀，王宏元. 2012. 3種半數(shù)致死濃度計(jì)算方法之比較[J]. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，33（9）：89-92. [Li C P，Wu M Y，Wang H Y. 2012. LC50 caculated by Kochi，probit analy-sis and linear regression methods[J]. Progress in Veterinary Medicine，33（9）：89-92.]

李銀保，彭湘君，張道英，程庚金生，劉霞，余磊，李青松. 2009. 沉淀富集—火焰原子吸收光譜法測(cè)定水中的鉛和鎘[J]. 光譜實(shí)驗(yàn)室，26（3）：599-601. [Li Y B，Peng X J，Zhang D Y，Cheng G J S，Liu X，Yu L，Li Q S. 2009. Determination of lead and cadmium in water by FAAS after enriching with sediment[J]. Chinese Journal of Spectroscopy Laboratory，26（3）：599-601.]

劉曉慶，陳華濤，張紅梅，張智民，陳新. 2017. 不同品種大豆幼苗對(duì)鎘脅迫的響應(yīng)[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，29（3）：14-17.[Liu X Q，Chen H T，Zhang H M，Zhang Z M，Chen X. 2017. Response of seedlings of different soybean varieties to cadmium stress[J]. Acta Agriculturae Jiangxi，29（3）：14-17.]

劉旭輝，李月蘭，李秋明，馮濟(jì)梅，覃勇榮. 2012. 鋅和鎘脅迫下的桑樹(shù)幼苗盆栽試驗(yàn)[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，40（4）：335-339. [Liu X H，Li Y L，Li Q M，F(xiàn)eng J M，Qin Y R. 2012. Pot experiment of mulberry seedling under zinc and cadmium stress[J]. Jiangsu Agricultural Sciences，40（4）：335-339.]

孫建幫，朱吉，楊仕柳，樊志堅(jiān)，羅柏林，羅璇，喻國(guó)軍，劉伯承，印遇龍. 2015. 概論利用重金屬污染耕地開(kāi)發(fā)飼料桑產(chǎn)業(yè)[J]. 養(yǎng)豬，（4）：14-16. [Sun J B，Zhu J，Yang S L，F(xiàn)an Z J，Luo B L，Luo X，Yu G J，Liu B C，Yin Y L. 2015. Introduction to development of feed mulberry industry by using heavy metal contaminated farmland[J]. Swine Production，（4）：14-16.]

孫凱，朱濤濤，朱愛(ài)國(guó). 2016. 苧麻耐鎘品種的水培篩選[J]. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，（7）：21-23. [Sun K，Zhu T T，Zhu A G. 2016. Screening of Ramie（Boehmerianivea L.） Cd-tole-rant variety by hydroponics[J]. Hunan Agricultural Scien-ces，（7）：21-23.]

覃勇榮，馮濟(jì)梅，梁文忠，李秋明，劉旭輝. 2012. 鎘脅迫下的桑樹(shù)幼苗葉片丙二醛含量動(dòng)態(tài)分析[J]. 河池學(xué)院學(xué)報(bào)，32（2）：17-21. [Qin Y R，F(xiàn)eng J M，Liang W Z，Li Q M，Liu X H. 2012. Dynamic analysis of malondialdehyde content in Morus alba seedling leaves under Cd2+ stress[J]. Journal of Hechi University，32（2）：17-21.]

譚勇壁. 2008. 礦區(qū)周邊重金屬污染農(nóng)田發(fā)展桑樹(shù)種植產(chǎn)業(yè)的可行性研究[D]. 南寧：廣西大學(xué). [Tan Y B. 2008. Possibility of planting mulberry in mining polluted farmland[D]. Nanning：Guangxi University.]

萬(wàn)飛. 2004. 鎘對(duì)桑蠶生長(zhǎng)發(fā)育及繭質(zhì)影響的試驗(yàn)初報(bào)[J]. 中國(guó)蠶業(yè)，25（4）：23-24. [Wan F. 2004. Effects of cad-mium on silkworm growth and development and cocoon quality[J]. China Sericulture，25（4）：23-24.]

汪洪，趙士誠(chéng)，夏文建，王秀斌，范洪黎，周衛(wèi). 2008. 不同濃度鎘脅迫對(duì)玉米幼苗光合作用、脂質(zhì)過(guò)氧化和抗氧化酶活性的影響[J]. 植物營(yíng)養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào)，14（1）：36-42. [Wang H，Zhao S C，Xia W J，Wang X B，F(xiàn)an H L，Zhou W. 2008. Effect of cadmium stress on photosynthesis，lipid peroxidation and antioxidant enzyme activities in maize（Zea mays L.） seedlings[J]. Plant Nutrition and Fertilizer Science，14（1）：36-42.]

王曉美，高培培，孫旭淏，孫迪，劉文菊，廖文華，薛培英. 2018. 修復(fù)白洋淀鎘污染水體的沉水植物篩選試驗(yàn)[J]. 廣西植物，38（10）：1382-1390. [Wang X M，Gao P P，Sun X H，Sun D，Liu W J，Liao W H，Xue P Y. 2018. Scree-ning of submerged macrophytes for phytoremediation of cadmium-contaminated water in Baiyangdian Lake[J]. Guihaia，38（10）：1382-1390.]

徐寧，俞燕芳，毛平生，杜賢明，彭曉虹，石旭平. 2015. 修復(fù)土壤重金屬污染的研究進(jìn)展[J]. 農(nóng)學(xué)學(xué)報(bào)，5（1）：37-40. [Xu N，Yu Y F，Mao P S，Du X M，Peng X H，Shi X P. 2015. Research progress of remedying the heavy metal contaminated soils with mulberry[J]. Journal of Agriculture，5（1）：37-40.]

楊國(guó)濤，李青常，張家韜，范黎，陳超，馬明. 2018. 陜西環(huán)秦嶺煙區(qū)土壤質(zhì)量評(píng)價(jià)與潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)分析[J]. 河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，52（1）：133-138. [Yang G T，Li Q C，Zhang J T，F(xiàn)an L，Chen C，Ma M. 2018. Soil quality evaluation and potential ecological risk assessment of tobacco production area around Qinling mountains in Shaanxi Pro-vince[J]. Journal of Henan Agricultural University，52（1）：133-138.]

楊盛昌，吳琦. 2003. Cd對(duì)桐花樹(shù)幼苗生長(zhǎng)及某些生理特性的影響[J]. 海洋環(huán)境科學(xué)，22（1）：38-42. [Yang S C，Wu Q. 2003. Effect of Cd on growth and physiological characteristics of Aegiceras conrniculatum seedlings[J]. Marine Environmental Science，22（1）：38-42.]

于輝，楊中藝，楊知建，向佐湘. 2008. 不同類型鎘積累水稻細(xì)胞鎘化學(xué)形態(tài)及亞細(xì)胞和分子分布[J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，19（10）：2221-2226. [Yu H，Yang Z Y，Yang Z J，Xiang Z X. 2008. Chemical forms and subcellular and molecular distribution of Cd in two Cd-accumulation rice genotypes[J]. Chinese Journal of Applied Ecology，19（10）：2221-2226.]

張騫. 2017. 幾類蔬菜對(duì)砷吸收能力比較的方法研究[D]. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院. [Zhang Q. 2017. Comparative methods of arsenic uptake ability of several vegetable species[D]. Beijing：Chinese Academy of Agricultural Scien-ces.]

鄭春榮，孫兆海，周東美，劉鳳枝，陳懷滿. 2004. 土壤Pb Cd污染的植物效應(yīng)Ⅱ——Cd污染對(duì)水稻生長(zhǎng)和Cd含量的影響[J]. 農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，23（5）：872-876. [Zheng C R，Sun Z H，Zhou D M，Liu F Z，Chen H M. 2004. Plant responses to soil lead and cadmium pollution II. Effects of soil cadmium pollution on wetland rice growth and its uptake of cadmium[J]. Journal of Agro-Environment Scien-ce，23（5）：872-876.]

周青，張輝，黃曉華，陸敢超，梁嬋娟，陸天虹. 2003. 鑭對(duì)鎘脅迫下菜豆（Phaseolus vulgaris）幼苗生長(zhǎng)的影響[J]. 環(huán)境科學(xué)，24（4）：50-55. [Zhou Q，Zhang H，Huang X H，Lu G C，Liang C J，Lu T H. 2003. Effects of La on the growth of kidney bean seedling under Cd stress[J]. Environmental Science，24（4）：50-55.]

（責(zé)任編輯 王 暉）