韋鈺 曾慶倫 蒙文娟 劉佳佳 謝艷林 蔣才淼 覃超林 陳息振 王敏

摘要：為研究重組禽流感病毒（ H5+H7）二價滅活疫苗（H5NI Re-8株+H7N9 H7-Rel株）的不同免疫劑量對融水香鴨免疫的效果。選取120只14日齡的商品融水香鴨，按照隨機原則將其劃分為試驗一組、試驗二組以及對照組，試驗一組和試驗二組融水香鴨分別在14日齡進行首次免疫，試驗一組首次免疫接種0.5 mL，頸部皮下注射，試驗二組首次免疫接種1mL頸部皮下注射，分別在免疫接種后的第21、28、60和90天采集試驗組和對照組融水香鴨新鮮血液進行H5NI Re-8株和H7N9 H7-Rel株抗體水平檢測。檢測結果顯示，不同疫苗注射劑量抗體水平存在一定差異，其中試驗二組的抗體水平比試驗一組要好，但兩者之間對比差異性不大。試驗二組的融水香鴨在進行第1次免疫接種后所產生的副反應相對較高，因此，建議在進行首次免疫接種時，免疫注射劑量控制在0.5 mL。同時，試驗二組的融水香鴨在免疫接種90 d后，抗體水平下降較為嚴重，要保證總體免疫效果需要對融水香鴨進行第2次強化免疫接種。

關鍵詞：重組禽流感病毒二價滅活疫苗;不同免疫劑量;免疫效果

中圖分類號：S858.31

文獻標識碼：B

doi： 10.3969/j.issn.2096-3637.201 9.10.005

0 引言

為進一步研究重組禽流感病毒二價滅活疫苗對鴨子產生的免疫效果，選取了14日齡的商品融水香鴨，對其進行了不同劑量的疫苗免疫接種，現將具體研究內容介紹如下。

1 材料與方法

1.1 材料選取

采集鴨子的新鮮血液，進行禽流感病毒檢測，不存在患病情況，母源抗體水平符合免疫接種標準[1]。疫苗為重組禽流感病毒（ H5+H7）二價滅活疫苗（H5NI Re-8株+H7N9 H7-Rel株），批準文號為獸藥臨字080012297，批號為2017028，生產企業(yè)為哈爾濱維科生物技術開發(fā)公司。試驗于2017年4月13日進行。本次所選用的疫苗主要為預防H5亞型和H7亞型禽流感病毒引發(fā)的禽流感。疫苗需要在2-8℃環(huán)境下保存，有效期為12個月。

1.2 方法

按照隨機原則將120只14日齡的商品融水香鴨劃分為3個組別，分別為試驗一組、試驗二組以及對照組，試驗一組和試驗二組融水香鴨分別在14日齡進行首次免疫，試驗一組首次免疫接種0.5 mL，頸部皮下注射，試驗二組首次免疫接種1 mL，頸部皮下注射，27日齡后試驗一組和試驗二組融水香鴨分別頸部皮下注射重組禽流感病毒二價滅活疫苗1.5 mL，對照組不免疫接種重組禽流感病毒二價滅活疫苗。分別在免疫接種后的21、28、60和90 d采集試驗組和對照組融水香鴨新鮮血液各20份進行H5NI Re-8株和H7N9 H7-Rel株抗體水平檢測[2]。本次研究過程中H5亞型和H7亞型禽流感病毒抗體水平監(jiān)測主要按照國家相關標準，采用血凝抑制試驗開展檢測。在檢測中需要H5NI Re-8株抗原和陽性血清、H7N9 H7-Rel株抗原和陽性血清。檢測中主要使用到的設備為900微型血凝板、微量移液器、微量振蕩器、離心機。使用到的試劑主要包括O.OI moL/L的PBS緩沖稀釋液、阿氏液1%的雞紅血細胞懸液。H5亞型和H7亞型禽流感病毒抗體水平HI>4 log2表示免疫合格[3]。

1.3 數據統(tǒng)計

選擇使用SPSS17.0統(tǒng)計學軟件進行數據分析，對免疫一組、免疫二組進行t檢驗差異分析。

2 結果

2.1 H5N1 Re-8株抗體水平檢測

結合表1可知，對照組融水香鴨在21、28、60和90 dH5NI Re-8株抗體水平呈現下降趨勢。試驗一組融水香鴨在免疫接種21、28、60、90 d，平均抗體滴度呈現下降趨勢，但均能維持在合格水平以上。由此可得，加大疫苗免疫劑量21 - 28 d能提高免疫效果，但隨著免疫時間的增長，免疫效果逐步下降到90 d后低于合格水平。不同劑量重組禽流感二價滅活疫苗接種融水香鴨后，隨著免疫時間的增加，抗體效價呈現下降趨勢，第1次免疫接種90 d后試驗一組和試驗二組免疫效果普遍較差，需要引導養(yǎng)殖戶重點做好第2次強化免疫接種。見表1。

2.2 H7N9 H7-Rel株抗體水平檢測

結合表2數據可知，對照組融水香鴨在第21、28、60、90天H7N9 H7-Rel株抗體水平呈現下降趨勢。試驗一組融水香鴨在免疫接種21 - 28 d，抗體水平逐步提升，60 - 90d，抗體水平呈現下降趨勢。試驗二組融水香鴨同樣存在上述發(fā)展趨勢，免疫接種21 - 28 d，抗體水平呈現上升趨勢，到第90天逐步下降到合格范圍以內。試驗一組和試驗二組抗體水平合格率之間差異性不顯著。由此可知，不同免疫劑量免疫接種融水香鴨后，不會對提高鴨子抗體水平產生多大影響，都會隨著免疫時間的增長，抗體水平呈現下降趨勢。而試驗二組的融水香鴨在免疫接種大劑量的二價滅活疫苗后，會出現較多的不良反應。因此，為降低經濟損失，減少不良反應發(fā)生率，建議第1次免疫接種量控制在0.5 mL。見表2。

3 討論與結論

試驗一組和試驗二組分別免疫接種0.5、1mL，經過抗體水平檢測，兩者之間存在一定的差異，但差異性不大。試驗二組融水香鴨免疫接種1 mL，所表現卅來的應激反應較為嚴重，不利于實現持續(xù)化生產，會對鴨子的健康生長造成一定影響，建議在進行第1次疫苗免疫接種時，將免疫劑量控制為0.5 mL。另外，通過抗體水平監(jiān)測可以發(fā)現隨著免疫時間的增長，試驗一組和試驗二組的融水香鴨抗體水平均呈現明顯下降趨勢，到90 d抗體水平已經達到合格范圍警戒線。由此可知，只進行一次免疫接種免疫效果較差，建議在免疫接種21 d后進行第2次強化免疫接種，每只鴨子頸部皮下接種1.5 mL。

參考文獻

[l]張秀環(huán)，林杰，劉彬.重組禽流感病毒（H5+H7）二價滅活 疫苗H7免疫效果實驗[J].獸醫(yī)導刊，2018（ ll）：70-71.

[2]李志賢，虞與理，禹婷婷.三黃雞免疫重組禽流感病毒（ H5+H7）二價滅活疫苗血清抗體檢測試驗報告[J]獸醫(yī)導刊，2018（ 19）：69-71.

[3]周柱輝，陳松春，潘杰，等雞免疫重組禽流感（H5+H7）二價滅活疫苗效果評價[J].養(yǎng)禽與禽病防治，2018 （6）：13-15

作者簡介：韋鈺（1977-），女，壯族，廣西融水人，大專，畢業(yè)于廣西職業(yè)技術學院，研究方向：動物疫病預防和控制。909CD6B6-A185-48A6-A449-2EF3316EB799